Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1
 

6 страниц

244.00 ₽

Купить официальный бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Официально распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль".

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Распространяется на все виды кормов, комбикормов и комбикормовое сырье и устанавливает метод определения цистина и метионина

Показать даты введения Admin

Страница 1

ГОСТ 13496.22-90

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

КОРМА, КОМБИКОРМА, КОМБИКОРМОВОЕ СЫРЬЕ

МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИСТИНА И МЕТИОНИНА

Издание официальное

Москва

Стандартинформ

2011

Страница 2

УДК 636.085.3:006.354    Группа    С19

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

КОРМА, КОМБИКОРМА, КОМБИКОРМОВОЕ СЫРЬЕ

ГОСТ

Метод определенна цнстнна и метионина    13496    22_90

Fodder, mixed fodder and mixed fodder raw materials.

Method for determination of cistinum and metioninum

M КС 65.120 ОКСТУ 9209

Дата в веления 01.01.92

Настоящий стандарт распространяется на все виды кормов, комбикормов и комбикормовое сырье и устанавливает метод определения инстина и метионина.

Метод основан на окислении цистина и метионина смесью перекиси водорода с муравьиной кислотой до иистеиновой кислоты и метионинсульфона и последующем их разделении на ионообменной хроматографической колонке после гидролиза соляной кислотой концентрации с (НС1) = = 6 моль/дм3. Интенсивность окрашенного комплекса при реакции с нннгидриновым реактивом пропорциональна содержанию аминокислоты в растворе.

Стандарт применяют в научно-исследовательских учреждениях, лабораториях агрохимической службы, республиканских и зональных лабораториях комбикормовой промышленности.

1.    ОТБОР ПРОБ

Отбор проб - по ГОСТ 13496.0. ГОСТ 13586.3, ГОСТ 13979.0. ГОСТ 17681, ГОСТ 27262.

2.    АППАРАТУРА

Измельчитель проб растений ИГ1Р-2 или соломорезка марки ИСР-1.

Сушилка проб кормов СК-2 или шкаф сушильный лабораторный с погрешностью поддержания температуры не более 5 "С.

Шкаф сушильный типа СЭШ-ЗМ или аналогичный с рабочей температурой 110 "С, макси-мальным перепадом температуры 2 “С и периодическим колебанием температур в рабочей зоне не более 0.5 *С.

Мельница лабораторная МРП-2.

Сито с круглыми отверстиями диаметром 1 мм.

Весы лабораторные 2-го и 3-го классов точности с пределом взвешивания 200 и 500 г по ГОСТ 24104*.

Автоклав по ГОСТ 14106.

Термоблок многопозиционный для пиролиза кормов ТМ-1.

Автоанализатор аминокислот.

Устройство для выпаривания гидролизатов УВГ-1 или баня водяная.

pH-метр.

Дозатор стеклянный вместимостью 10 см3.

Ампулы стеклянные с перетяжкой вместимостью 20 см3 по ГОСТ 21400.

Колбы мерные вместимостью 50. 100. 1000 см3 по ГОСТ 1770.

Пробирки стеклянные вместимостью 20 см3 по ГОСТ 1770.

♦ С 1 июля 2002 г. введен в действие ГОСТ 24104-2001. На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228-2008.

Издание официальное    Перепечатка    воспрещена

£> Издательство стандартов. 1990 £> СТАНДАРТИНФОРМ, 2011

180

Страница 3

ГОСТ 13496.22-90 С. 2

Пипетки градуированные вместимостью 1. 2, 5, 10 см3 по ГОСТ 29227.

Воронки стеклянные диаметром 2—3 см по ГОСТ 25336.

Чашки фарфоровые по ГОСТ 9147.

Бюксы стеклянные диаметром не менее 5 см по ГОСТ 25336.

Палочки стеклянные оплавленные.

Набор реактивов к автоанализатору.

Стандартные растворы аминокислот.

Кислота соляная концентрированная по ГОСТ 3118, х. ч.

Раствор соляной кислоты концентрации г (НО) = 6 моль/дм3; готовят смешиванием рапных объемов концентрированной соляной кислоты и дистиллированной воды.

Натрий лимоннокислый трехзамешенный по ГОСТ 22280. х. ч. или ч. д. а.

Фенол.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328. х. ч., раствор с массовой долей 50 %.

Кислота муравьиная по ГОСТ 5848. ч. д. а.

Водорода перекись по ГОСТ 10929.

Вола дистиллированная по ГОСТ 6709 двойного перегона.

Фильтры беззольные с синей полосой по ГОСТ 12026.

Допускается использовать аппаратуру, мерную посуду и другие средства измерений, имеющие такие же или лучшие метрологические характеристики.

3. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ

3.1.    Подготовка проб

Среднюю пробу сена, сенажа, зеленой массы измельчают на отрезки длиной 1 — 3 см. Корнеплоды разрезают на пластинки (ломтики) толшнной до 0,8 см. Методом квартования выделяют часть средней пробы, масса которой после высушивания должна быть не менее 100 г. Высушивание проб проводят в сушильном шкафу при температуре 60—65 'С до воздушно-сухого состояния. Посте высушивания пробу разматывают на мелышие и просеивают через сито. Остаток на сите дополнительно измельчают, добавляют к просеянной части и тщательно перемешивают.

Средние пробы комбикормов, зерна, жмыхов, шротов, гранул травяной муки или витаминной муки из древесной зелени размалывают без предварительного подсушивания и просеивают через сито. Корма с содержанием жира более И) % предварительно обезжиривают.

Подготовленные пробы хранят в стеклянной или пластмассовой байке с крышкой в сухом темпом месте не более двух лет.

3.2.    Приготовление окислительной смеси

Окислительную смесь готовят смешиванием перекиси водорода и муравьиной кислоты в соотношении 1:9: готовят вдень проведения испытания.

3.3.    Приготовление буферного раствора (2,20i.0,02) ед. pH

19,6 г лимоннокислого трехзамещенного натрия растворяют в 200—300 см3 дистиллированной воды, приливают 16,6 см3 концентрированной соляной кислоты, I см3 фенола и доводят объем до 1 дм3 в мерной колбе дистиллированной водой. Концентрацию водородных ионов контролируют на pH-метре и при необходимости корректируют раствором гидроокиси натрия с массовой долей 50 % или концентрированной соляной кислотой.

3.4.    Приготовление стандартного раствора аминокислот

Готовят из основного раствора, содержащего 187 мг цистеиновой кислоты и 181 мг метионин-

сульфона в 100 см3 раствора соляной кислоты концентрации с (НС1) = 0,1 моль/дм3.

Стандартный раствор аминокислот готовят разведением 25 см3 основного раствора в 100 см3 раствора соляной кислоты концентрации с (НС1) = 0.1 моль/дм3. 1 см3 такого раствора содержит 0.47 мг цистеиновой кислоты и 0.45 кг метиоииисульфона. что соответствует 2,5 мкмоль каждой кислоты в стандартном растворе, прилагаемом к автоанализаторам. Стандартный раствор хранят в герметично закрытых флаконах в холодильнике в течение нескольких лет.

Рабочий раствор аминокислот готовят разведением стандартного раствора аминокислот в буфере 2.20 ед. pH до концентрации, рекомендуемой для конкретного типа аминокислотного анализатора.

181

Страница 4

С. 3 ГОСТ 13496.22-90

4. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЯ

Навеску воздушно-сухого корма массой (100.0±0,1) мг помещают в чашку устройства для выпаривания гидролизатов УВГ-1 (или фарфоровую чашку при выпаривании на водяной бане), приливают 5 см-1 свежеприготовленной окислительной смеси и выпаривают при постоянном помешивании при температуре 60 *С. Сухой остаток количественно переносят в ампулу термоблока ТМ-1 или в пробирку с перетяжкой, используя 10 см3 раствора соляной кислоты концентрации с (НС1) = = 6 моль/дм3. Ампулу термоблока герметично закрывают тефлоновой крышкой и устанавливают в термоблок для пиролизата при температуре 110 С. На блоке управления включают тумблер •Перемешивание» и устанавливают время гидролиза 4 ч.

При гидролизе в термостате ампулу запаивают в пламени газовой горелки в месте перетяжки и помещают в предварительно нагретый до температуры 110 *С сушильный шкаф на 16 ч.

При гидролизе в автоклаве содержимое количественно переносят в пробирки вместимостью 20 см3, закрывают стеклянными колпачками или воронками для предотвращения разбрызгивания кислоты во время гидролиза и устанавливают в автоклав. Г ид рол из проводят при температуре 137 ‘С и давлении 0,25 МПа в течение 3 ч.

После завершения гидролиза гидролизаты охлаждают до комнатной температуры, перемешивают и содержимое фильтруют через беззольный фильтр (первую порцию фильтрата для анализа не используют). 1—2 см3 фильтрата выпаривают досуха на УВГ-1 или водяной бане и осадок растворяют в 10 см3 буферного раствора 2,20 ед. pH. Раствор пиролизата хранят в течение месяца в холодильнике в герметично закрытых пробирках.

Испытуемый гидролизат пробы вводят автоматически или при помощи шприца в верхнюю часть колонки анализатора аминокислот. Для идентификации аминокислот и их количественного определения на колонку наносят стандартный раствор аминокислот. Порядок работы на аминоана-л и заторах регламентируется прилагаемой инструкцией.

5. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ

Содержание аминокислот рассчитывают по соотношению площадей пиков на хроматограмме соответствующих кислот в стандартном растворе и гидролизатах испытуемых проб.

5.1. Массу аминокислоты (Л) в граммах на 1 кг воздушно-сухого вещества корма вычисляют по формуле

X-e-S, V 1000 5, -т

где с — концентрация стандартного рабочего раствора, мг/см3;

Л'| — интегрируемая величина площади пика аминокислоты испытуемой пробы:

V — объем гидролиза та, см3;

S: — интегрируемая величина площади пика аминокислоты стандартного рабочего раствора; т — масса навески пробы, мг.

Полученный результат корректируют с учетом разведения гидролизата и потери массы навески корма после обезжиривания.

Для пересчета цистеиновой кислоты и метнонинсульфона в цистин и метионин используют переводные коэффициенты 0.710 и 0,023 соответственно.

За окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое результатов двух параллельных определений. Результаты вычисляют до третьего десятичного знака и округляют до второго десятичного знака. Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных определений (д,) при доверительной вероятности Р = 0.95 не должны превышать значений:

для цистеина = 0.132 + 0,058 А;

для метионина Д5 = 0,06 + 0.088 X, где ~Х — среднеарифметическое результатов двух параллельных определений.

Допускается проведение анализа без параллельных определений при наличии в партии испытуемых проб стандартных образцов (СО). В этом случае за результат испытания принимают резуль-

182