Стр. 1
 

8 страниц

244.00 ₽

Купить официальный бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Официально распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль".

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Распространяется на комбикорма и комбикормовое сырье и устанавливает метод определения в них остаточных количеств хлорорганических пестицидов: ДДТ и его метаболитов, альфа-ГХЦГ и гамма-ГХЦГ

Данные о замене опубликованы в ИУС 5-2015

Действие завершено 01.01.2016

Оглавление

1 Метод отбора проб

2 Определение остаточных количеств ДДТ, ГХЦГ

Приложение (справочное) Приготовление стеклянных пластин

Показать даты введения Admin

Страница 1

ГОСТ 13496.20-87

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

КОМБИКОРМА, КОМБИКОРМОВОЕ СЫРЬЕ

МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ

Издание официальное

Москва

Стандартинформ

2011

Страница 3

УДК 636.085.3:006.354    Группа    С19

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

КОМБИКОРМА, КОМБИКОРМОВОЕ СЫРЬЕ

ГОСТ

Метод определения остаточных количеств пестицидов    13496    20    87

Mixed fodders, raw stuff for mixed fodders.

Method for determining residual quantities of pesticides

M КС 65.120 ОКСТУ 2409

Дата введения 01.01.88

Настоящий стандарт распространяется на комбикорма и комбикормовое сырье и устанавливает метод определения в них остаточных количеств хлорорганических пестицидов: ДДТ и его метаболитов. альфа-ГХЦГ и гамма-ГХЦГ.

Стандарт предназначается для научно-исследовательских учреждений, республиканских и зональных производственных лабораторий комбикормовой промышленности, республиканских и областных (краевых) ветеринарных лабораторий, а также для лабораторий агрохимической службы.

I. МЕТОД ОТБОРА ПРОБ

1.1.    Отбор проб - по ГОСТ 13496.0. ГОСТ 13586.3, ГОСТ 13979.0.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ДДТ, ГХЦГ

2.1.    Сущность метода заключается в экстракции пестицидов из навески исследуемого продукта ацетоном, очистке экстракта на хроматографической колонке с силикагелем АСКГ. очистке концентрированной серной кислотой и последующем хроматографировании на пластинках «Силуфол» с использованием гексана в качестве подвижного растворителя.

2.2.    Аппаратура, материалы, реактивы

2.2.1. Для проведения испытания применяют: аппарат для встряхивания жидкости в сосудах типа АВУ-1; мельницу лабораторную ЛЗМ или кофемолку; сито с отверстиями диаметром I и 0,15 мм;

весы лабораторные по ГОСТ 24104*. 2-го класса точности, с наибольшим пределом взвешивания 200 г;

весы лабораторные по ГОСТ 24104, 3-го класса точности, с наибольшим пределом взвешивания 500 г;

шкаф сушильный лабораторный; баню водяную лабораторную БВ-6;

камеру для хроматографирования: стеклянный сосуд с внутренним диаметром 190 мм с притертой крышкой или эксикатор по ГОСТ 25336; испаритель вакуумный ротационный ИР-1; прибор для УФ-облучения типа ВИО-1;

пластинки хроматографические марки «Силуфол* размером 150 х 150 мм или стеклянные (см. приложение);

штатив лабораторный ШЛ;

чашки выпарительные вместимостью 50 и 100 см3 по ГОСТ 9147; бумагу масштабно-координатную по ГОСТ 334; бумагу универсальную индикаторную;

♦ С 1 июля 2002 г. ввелен в действие ГОСТ 24104-2001. На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 53228-2008.

И мание официальное    Перепечатка    воспрещена

© Издательство стандартов. 19X7 ® СТАНДАРТИНФОРМ, 2011

161

Страница 4

С. 2 ГОСТ 13496.20-87

фильтры обеззоленмые по ГОСТ 12026 «синяя лента*;

кальку бумажную натуральную по ГОСТ 892 или бумагу чертежную прозрачную по ГОСТ 20363; цилиндры исполнений 1—4, вместимостью 100 см' по ГОСТ 1770; воронки стеклянные типа В. диаметром 56 и 100 мм по ГОСТ 25336; воронки делительные типа ВД. исполнений 1—3, вместимостью 250 см5 по ГОСТ 25336; палочки стеклянные с оплавленными концами;

колбы конические типа Кн, исполнения 1, вместимостью 250 см3 по ГОСТ 25336; колонки хроматографические стеклянные (черт. 1); пульверизатор стеклянный (черт. 2) или аналогичный;

колбы мерные исполнения 2, вместимостью 25 и 100 см3. 1-го класса точности по ГОСТ 1770;

15

пробирки мерные исполнения 2, вместимостью Юсм* по ГОСТ 1770;

пипетки исполнений I. 4. 5, 6, 7, вместимостью I и 10 cms, l-ro класса точности по ГОСТ 29227;

пипетки исполнения 8. вместимостью 0,1 см5. 2-го класса точности по ГОСТ 29227 (для стандартных растворов);

пипетки Пастера или микрошприцы (для экстрактов);

вату гигроскопическую;

грушу резиновую;

ацетон по ГОСТ 2603. ч. д. а.;

гексан, ч.;

кислоту серную по ГОСТ 4204, х. ч.; силикагель технический АСКГ по ГОСТ 3956; натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166. х. ч.;

162

Страница 5

ГОСТ 13496.20-87 С. 3

воду дистиллированную по ГОСТ 6709, не содержащую хлоридов;

аммиак водный по ГОСТ 3760. ч. д. а.;

ссребро азотнокислое по ГОСТ 1277, х. ч.;

эталоны хлорорганических пестицидов: ДДТ. ДДЕ. ДДД, альфа-ГХЦГ и гамма-ГХШ.

Примечание. Допускается применять мерную посуду и другие средства измерения с такими же или лучшими метрологическими характеристиками.

2.3. Подготовка к испытанию

2.3.1.    Приготовление основного раствора пестицидов с массовой концентрацией 200 мкг/см3

Для приготовления основного раствора 10 мг ДДТ растворяют гексаном в мерной колбе вместимостью 50 см1 и доводят гексаном до метки. Таким же способом готовят основные растворы ДДЕ, ДДД, альфа-ГХЦГ и гамма-ГХЦГ. Хранят основные растворы в плотно закрытой склянке в холодильнике в течение года.

2.3.2.    Приготовление рабочего раствора пестицидов с массовой концентрацией 20 мкг/см5

1 см5 основного раствора растворяют гексаном в мерной пробирке вместимостью 10 см* и доводят гексаном до метки. В 0,1 см' раствора содержится 2 мкг препарата. Хранят в холодильнике 2 месяца.

2.3.3.    Приготовление проявляющего реактива

0,5 г азотнокислого серебра растворяют в 5 см3 дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 100 см3, прибавляют 7 см3 аммиака и доводят объем ацетоном до метки. Реактив хранят в темном месте в течение 3 дней. На пластинку расходуется 8—10 см3 реактива.

2.3.4.    Подготовка пластинок «С и л у ф о л» д л я хроматографии

Пластинки «Силуфол» перед употреблением промывают дистиллированной водой. Для этого в

хроматографическую камеру наливают воду на высоту 5—7 мм и помещают туда пластинки в вертикальном положении. После того как линия фронта подвижного растворителя, в данном случае воды, поднимется не доходя 10 мм до верха пластинки, ее вынимают и высушивают на воздухе.

Перед использованием пластинку активируют в сушильном шкафу при 65 *С в течение 4—5 мин, а затем с вертикальных сторон удаляют слой в 3 мм. что способствует выравниванию фронта растворителя и улучшает разделение веществ.

2.3.5.    Очистка силикагеля АСКГ

В склянку насыпают силикагель, заливают гексаном и перемешивают стеклянной палочкой, гексан сливают. Промывку повторяют 2—3 раза. Промытый силикагель сушат на воздухе под тягой. Хранят в плотно закрытой склянке.

2.3.6.    Очистка ваты

В склянку помещают вату, заливают гексаном. выдерживают 5—10 мин и гексан сливают. Опе-рацию повторяют 2—3 раза. Очищенную вату помещают в стеклянную воронку и сушат на воздухе под тягой. Хранят в закрытой склянке.

2.3.7.    Подготовка хроматографической колонки

В нижнюю часть колонки помещают кусочек очищенной ваты, насыпают силикагель АСКГ на высоту 70 мм (100 мм — для комбикормов, содержащих травяную муку), уплотняют постукиванием по колонке деревянной палочкой, затем насыпают безводный сернокислый натрий слоем в 10 мм.

Через колонку пропускают 20 см3 гексана и отжимают силикагель с помощью резиновой груши.

2.3.8.    Подготовка исследуемой пробы

Пробу испытуемого продукта массой около 50 г измельчают на лабораторной мельнице до получения полного прохода через сито с отверстиями диаметром 1 мм. При невозможности получения полного прохода в случае измельчения пленчатых культур пленки, оставшиеся на сите, измельчают ножницами и прибавляют к просеянной части продукта. Пробу тщательно перемешивают.

2.4. Проведение испытания

2.4.1. Экстракция и очистка экстракта

Навеску исследуемой пробы массой 20 г, взвешенную с погрешностью не более 0.01 г, помешают в коническую колбу с притертой пробкой вместимостью 250 см3, заливают 50 см3 ацетона и встряхивают на аппарате I ч.

163

Страница 6

С. 4 ГОСТ 13496.20-87

Экстракт фильтруют через воронку с бумажным фильтром в выпарительную чашку или колбу для отгонки. Затем повторяют экстракцию таким же количеством ацетона и фильтруют экстракт. Экстракты объединяют. Фильтр промывают два раза ацетоном по 5—10 см3.

Допускается экстракцию проводить следующим способом: залитую ацетоном навеску оставля-ют на 12—15 ч (как правило, на ночь) и экстрагируют, встряхивая на аппарате I ч.

Ацетон из объединенного экстракта испаряют на вакуумном ротационном испарителе. Испарять ацетон допускается также под тягой вытяжного шкафа при комнатной температуре или для ускорения испарения на водяной бане при температуре не выше 50 "С.

Маслянистый остаток растворяют в 5 см3 гексана и переносят содержимое в хроматографическую колонку, смывают чашку еще 3 раза гексапом по 3—5 см3, тоже переносят в колонку и отжимают резиновой грушей. Прошедший через колонку гексан отбрасывают.

Затем пестициды извлекают (элюируют) 100 см3 гексана. пропуская его через колонку порциями по 10—20 см3. Элюат концентрируют до объема 0,1 см3 на вакуумном ротационном испарителе или под тягой вытяжного шкафа.

Если концентрированный элюат маслянистый или темный, то его очищают серной кислотой. Для этого переносят его в делительную воронку, смывают чашку (колбу) 2—3 раза гексаном по 2—3 см3, прибавляют концентрированную серную кислоту порииями по 20 см3, каждый раз интенсивно встряхивая воронку в течение 1 мин.

После отстаивания нижний (кислотный) слой отбрасывают.

Очистку повторяют до прекращения окрашивания серной кислоты (нижнего слоя) в желтый цвет — 2—6 раз.

Удалив кислоту, элюат промывают дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод (проверка по индикаторной бумаге) и фильтруют через воронку с сернокислым натрием в чашку (или колбу), промывая делительную воронку и сернокислый натрий гексаном по 5 см3 два раза.

Элюат концентрируют до объема нескольких капель.

2.4.2. Хроматографическая идентификация пестицидов

Сконцентрированный элюат наносят пипеткой Пастера на хроматографическую пластинку на расстоянии 15 мм (линия старта) от ее нижнего края. Диаметр пятна не должен превышать 5 мм. Чашку (колбу) смывают тремя порииями гексана по 0,2 см3, которые наносят в центр этого же пятна периодическими прикосновениями пипеткой. Справа и слева на расстоянии 20 мм от пробы наносят в три точки рабочие растворы, содержащие 4,0; 1,0; 0,5 мкг пестицида. Допускается при необходимости наносить рабочие растворы, содержащие другое число микрограммов пестицида.

Пластинку с нанесенными растворами помещают в камеру для хроматографирования, на дно которой за 30 мин до этого наливают гексан на высоту 5—7 мм. После того как линия фронта подвижного растворителя (гексана) поднимется на 100 мм от линии старта, пластинку вынимают из камеры и дают испариться растворителю в течение 1—2 мин. Затем пластинку снова помещают в эту же камеру и дают опять подняться растворителю на высоту 100 мм от линии старта. Пластинку вынимают. высушивают на воздухе, опрыскивают проявляющим реактивом, высушивают и помешают под УФ-лучи ртутно-кварцевой лампы на 10—15 мин.

При наличии хлорорганических пестицидов на пластинке появляются пягна серо-черного цвета на белом фоне, которые располагаются в следующем порядке (снизу вверх): гамма-ГХЦГ {Rf= 0.11). ДДТ (R/ = 0,20), альфа-ГХЦГ (/?/= 0,22). ДДТ (Я/= 0,45), ДДЕ (Rf= 0.74).

Для количественного определения пестицидов проводят измерение площадей пятен пробы и пестицида, учитывая визуально интенсивность их окрасок.

Окрашенные пятна копируют на кальку и их площадь вычисляют с помощью масштабно-ко-ординатной бумаги.

2.5. Обработка результатов

2.5.1. Количество пестицидов (А) в миллиграммах на килограмм испытуемого продукта вычисляют по формуле

У _ A S2 0.75 • т • 5, ’

где Л — количество препарата, содержащееся в нанесенном на пластинку рабочем растворе, мкг;

Si — площадь пятна исследуемой пробы, мм2; т — масса навески, г;

5| — площадь пятна рабочего раствора, мм2;

0,75 — коэффициент потерь препарата в процессе обработки пробы.

164