Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1
 

16 страниц

304.00 ₽

Купить официальный бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Официально распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль".

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Распространяется на неразбавленную свежеполученную сперму быков и устанавливает методы испытаний морфологических свойств спермы с целью определения содержания спермиев с анормальной морфологией и включений спермы, количества мертвых спермиев, а также определения размеров спермиев

Действие завершено 30.06.2015

Показать даты введения Admin

Страница 1

s-is-

HOQ03,

ГОСУДАРСТВЕННЫЕ СТАНДАРТЫ СОЮЗА ССР

СПЕРМА БЫКОВ НЕРАЗБАВЛЕННАЯ

МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ

ГОСТ 20909.3-75-ГОСТ 20909.6-75

Издание официальное

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СТАНДАРТОВ СОВЕТА МИНИСТРОВ СССР

Москва

Страница 2

ГОСУДАРСТВЕННЫЕ СТАНДАРТЫ СОЮЗА ССР

СПЕРМА БЫКОВ НЕРАЗБАВЛЕННАЯ

МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ

ГОСТ 20909.3-75 -ГОСТ 20909.6-75

Издание официальное

МОСКВА—1975

Страница 3

РАЗРАБОТАНЫ Всесоюзным государственным научно-контрольным институтом ветеринарных препаратов

Директор Бойко А. А.

Руководитель темы Балашов Н. Г.

Исполнители ГОСТ 20909.3—75: Ожин Ф. В.. Голикова Г. А.

Исполнители ГОСТ 20909.4-75: Смирно» Я. Т„ Еасюков М. Е., Голиком Г. А. Исполнители ГОСТ 20909.5-75: Смирно» В. Т.. Чернециий Ю. П., Голикова Г. А. Исполнители ГОСТ 20909.6-75: Смирно* В. Т.. Масловский К. С., Басюков М. Е.. Силаев А. М., Голикова Г. А.

ВНЕСЕНЫ Министерством сельского хозяйства СССР

Зам. министра Морозов П. И.

ПОДГОТОВЛЕНЫ К УТВЕРЖДЕНИЮ Всесоюзным научно-исследовательским институтом стандартизации (ВНИИС)

Директор Ггичсв А. В.

УТВЕРЖДЕНЫ И ВВЕДЕНЫ В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета стандартов Совета Министров СССР от 19 сентября 1975 г. № 2439, 2440

Страница 4

УДК 619:611-013.11 001.4(083 74|    Групп*    Р39

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ С Т А Н Д А Р Т СОЮЗА ССР

СПЕРМА БЫКОВ НЕРАЗБАВЛЕННАЯ Методы морфологических исследовании    Г    UL    I

N'on-diluted sperm of bulls.    20909.3-75

Methods of morphological tests

Поста иовл«и нем Государственного комитета стандартов Совета Министров СССР от 19 сентябре 1975 г. Ms 2439 срок действие установлен

с 01.07.76 до 01.07.81

Несоблюдение стандарта преследуется по закону

Настоящий стандарт распространяется на неразбавленную све-жеполученную сперму быков и устанавливает методы испытаний морфологических свойств спермы с целью определения содержания апермиез с анормальной морфологией и включений спермы, количества мертвых спермиез, а также определения размеров спермиев.

1. МЕТОД ОТБОРА ПРОБ

1.1.    Отбор проб — -по ГОСТ 20909.1-75.

1.2.    Для проведения испытаний используют сперму, хранившуюся -при температуре 30—35°С не более 30 мин с момента ее получения.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ СПЕРМИЕВ С АНОРМАЛЬНОЙ МОРФОЛОГИЕЙ И ВКЛЮЧЕНИЙ СПЕРМЫ

Сущность метода заключается в подсчете под микроскопом патологических форм спермиев и включений спермы. При подсчете патологических форм спермиев учитывают количество спермиев с анормальной морфологией, мертвые спермин и спермин с неправильным движением.

К анормальным формам относят спермми с отклоненжпт » строении головки (микроскопическая, круглая, несимметричная,

Перепечатка воспрещена © Издательство стандартов, 1975

Издание официальное

Страница 5

Стр. 2 ГОСТ 20909.3-75

укороченная, асимметричная или •пирамидальная, заостренная, двойная, без чехлика или без хвоста), шейки (двойная или ломаная, наклоненная назад на тело), тела (изогнутое, ломаное, удвоенное, свернутое двойное, нитевидное, рудиментарное с цитоплазматической капелькой), хвоста (изогнутый, двойной, рудиментарный, с извитым и оголенным концом, скрученный).

2.1.    Оборудование, материалы и реа ктивы

2.1.1.    Для проведения испытания применяют:

микроскоп биологический марки МБИ или МБР по ГОСТ 8284 -67;

микрометр окулярный;

микрометр объективный по ГОСТ 7513-75; камеру для подсчета форменных элементов крови (камеру Горяева или другой конструкции); секундомер по ГОСТ 5072-72;

•меланжер эритроцнгоый;

стекла шлифованные покровные по ГОСТ 6672-59; стекла предметные по ГОСТ 9284-59;

стекла покровные размером 18X18 или 24X24 мм по ГОСТ 6672-59;

стеклянные банки вместимостью 300—500 мл; пипетки пастеровские, палочки стеклянные; тушь черную;

спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962-67; эфир этиловый по ГОСТ 6265-52; натрий хлористый по ГОСТ 4233-66;

нигрозин водорастворимый по ГОСТ 4014-62 или опаловый голубой; эозин; азур-эозин; фуксин;

метиленовый синий по Лёффлеру;

краску Гимза;

метилен-азур;

метилен-фиолетовый;

ксилол по ГОСТ 9949-62;

формалин технический по ГОСТ 1625-75;

бальзам;

фуксин основной;

фенол технический по ГОСТ 236-68; метанол по ГОСТ 6995-67;

гидрат окиси калия (кали едкое) по ГОСТ 4203-65, 0,01%-ный раствор;

крнсталлвиолет;

анилин сернокислый по ГОСТ 5818-69 или анилин солянокислый по ГОСТ 5822-69;

Страница 6

ГОСТ 1090».*—7S Стр. 3

•воду водопроводную по ГОСТ 2874-73;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

2.2. Подготовка к испытанию

2.2.1.    В пробе спермы определяют концентрацию спермиев по ГОСТ 20909.5-75 и затем доводят ее до 0.2—0.4 млрд/мл, добавляя 0,9%-ный раствор хлористого натрия. Приготавливают мазки спермы на сухих предметных стеклах, предварительно обезжиренных в течение 3 ч в омеси, состоящей из равных частей этилового спирта с эфиром.

Каплю подготовленной для испытания спермы пипеткой переносят на край предметного стекла и шлифованным покровным стеклом делают мазок, проводя покровное стекло вдоль предметного, наклонив его на 45е в сторону, противоположную направлению движения.

Мазок аюдсушивают в течение 1—2 мин на воздухе и фиксируют 2—5-мин метанолом или 15—20 мин смесью этилового спирта с эфиром. Допускается фиксировать препарат парами осмиевой кислоты по общепринятой микроскопической технике.

2.2.2.    Для лучшей видимости спермиев производят окрашивание мазка или затеняют его фон. Для создания темного фона вносят черную тушь -или краску — 10%-ный водный раствор нигрозина или опаловый синий. При этом спермии не окрашиваются, но их контуры на затемненном фоне ясно очерчены.

Для окрашивания спермиев применяют водные или спиртовые 1—10%-иые растворы эозина, нейтральные красители (по методу Романовского или ло методу дМаксимова) или карболовый фуксин в сочетании с метиленовым синим Лсффлсра.

2.2.2.1.    Окрашивание водными или спиртовыми растворами эозина

Окрашивание спермиев производят, добавляя к сперме в пробирке или на 'предметном стекле двойное или тройное количество краски. Смесь выдерживают 3—5 мин, делают мазок и микро-скопируют.

2.2.2.2.    Окрашивание азур-эозином по Романовскому

Используют готовую кр&ску Гимза, представляющую собой смесь и определенных пропорциях эозинатов метилен-азура, эози-натов метиленового фиолетового и метиленового синего.

Перед окрашиванием приготавливают ipacraop краски. Для этого к 10 мл дистиллированной воды с pH 6,8±0,2 добавляют 0,5— 1 мл краски. Окрашивание производят в стеклянных цилиндрах, помещая предметные стекла с мазком спермы ма 20—30 мин. Затем мазок промывают в течение 30—60 мин дистиллированной водой, высушивают и мнкроскопяруют. Для длительного хранен мазков (более 6—12 мес) предметное стекло после высушив проводят через этиловый спирт и ксилол и затем захлюча

Страница 7

Cip. 4 ГОСТ JMW.J—75

бальзам под покровным стеклом по общепринятой .микроскопической (методике.

2.2.2.3. Окрашивание азур-эозином по Максимову Препарат фиксируют л течение 5—10 мин в смеси Максимова (100 мл основной смеси Пенкера и 10 мл формалина) или в течение 3—5 мин в смеси Шаффера (2 части 80%-ного этилового спирта и I часть формалина). Окрашивают в течение 4—б ч азу-рэозином и дифференцируют в этиловом спирте. При заключении мазка в бальзам препарат проводят а течение 30—430 с через абсолютный спирт и затем три раза через ксилол.

25.2.4. Тройная окраска по Уильямсу Для окрашивания 1грименяют:

краску I — смесь .ментола — I мл, фуксина карболового Циля — 2 мл. спиртовой раствор эозина — I мл; раствор профильтровывают до исчезновения осадка.

Фуксин карболовый Циля приготавливают, добавляя х 3 г основного фуксина 10 мл этилового спирта н доливая 5%-ный раствор фенола до 100 мл;

краску 2 — смесь метиленового Лёффлера — 1 мл и дистиллированной воды 1 мл.

Л\етиленовый синий Лёффлера приготавливают, добавляя к 0,3 г метиленового синего 30 мл этилового спирта и 100 мл 0,01%-ного водного раствора едкого кали. Окрашивание производят после фиксации препарата в этиловом спирте. Препарат окрашивают в течение 5—10 мин краской 1, промывают дистиллированной водой, затем окрашивают краской 2 в течение 10—20 мин, просушивают и микроскапируют или заключают в бальзам.

2.2.2.5. Окрашивание анилиновыми красителями Для окрашивания применяют:

краску 1 — карболовый фуксин Циля готовят по пп. 2.2.2.4; краску 2 — анилиновый ген циан виолет: растворяют 2,5 г нри-сталлвиолета в 12 мл этилового спирта. Затем з отдельной колбочке растворяют 2 г анилина в 98 мл дистиллированной воды. Растворы смешизают и хранят во флаконе, закрывая его стеклянной пробкой.

Приготовленные краски элогут храниться в течение 1 года. Окрашивание производят двумя способами:

а)    мазки после фиксации спиртом окрашивают а течение 45 с ® карболовом фуксине Циля. Краску смывают водой, мазок высушивают <и дополнительно окрашивают в течекие 45 с с анилиновым генцианвэюлетом. Предметное стекло с мазком омывают водой, сушат и микроскопнруют;

б)    высушенные -мазки окрашивают анилиновым генцианвиоле-п течение 2 мин, быстро промывают проточной водопроводной-•. затем дистиллированной водой и высушивают. Дополкилю окрашивают в течение 10—30 с карболовым фуксином Ци-

2

Страница 8

ГОСТ 30909.3-75 Стр. 5

ля, промывают водопроводной, затем дистиллированной водой, высушивают и микрос копир уют или заключают в бальзам.

2.3.    П роведение испытания

2.3.1.    Подсчет нормальных и патологических форм спермиев производят в проходящем свете микроскопа с иммерсионной системой (увеличение 600—1350х). При подсчете пользуются клавишным прибором для подсчета форменных элементов крови. При отсутствии счетчика ведут ззпись на бумаге. Подсчитывают отдельно количество нормальных и патологических форм спермиев на 100—200 спермиев.

Включения спермы (форменные элементы крови, эпителиальные клетки, оболочки опермий) подсчитывают из расчета их содержания на 100—200 спермиев.

Допускается производить подсчет патологических форм спермиев в счетных камерах по ГОСТ 20909.5-75. Для этого в чистый зритроцнтный меланжер набирают сперму до метки«I»,вытирают кончик меланжера марлевой салфеткой и заполняют его раствором краски до метки «101».

Для окрашивания применяют одну из следующих красок:

а)    3—5%-ный раствор эозина, приготовленный на 2%-ном растворе хлористого натрия с добавлением 5%-ного этилового спирта >и 0.5%-ното глицерина;

б)    краску то Рубенкову, состоящую из фукцина основного — 0,1 г, азур-эозина по Гимза — 0,02 г, кислоты карболовой кристаллической — 0,2 г, глицерина — 0,1 мл, этилового спирта — 2 мл, 1%-ного раствора хлористого натрия — 100 мл.

Краски приготавливают в ступке, добавляя глицерин и спирт при помешивании. Краску из ступки смывают в склянку с раствором хлористого натрия, закрывают пробкой и ставят на 24 ч в термостат при температуре ЗГС. Затем краску фильтруют через двойной слой фильтровальной бумаги. Приготовленную краску хранят в течение 1 ч в закрытой склянке и в холодильнике.

Смесь спермы с краской в меланжере выдерживают 5—10 мин. удаляют 2—3 капли, заполняют камеру Горяева и проводят подсчет спермиев при 400х увеличении. Подсчитывают спермин в пяти— девяти больших квадратах в общем количестве 100—200 спермиев.

2.4.    Об р а бот к а результатов

2.4.1.    Подсчет спермиев и включений спермы производят не менее чем н» трех мазках, суммируя отдельно количество патологических форм, нормальных спермиев и включений спермы.

2.4.2.    Содержание паталогических форм спермиев (ЛГВ) в процентах и коэффициент (индекс) патологии (К х) вычисляют по формулам:

п

Страница 9

Стр. 6 ГОСТ 209WJ—75

где // — количество патологических форм спермиев;

И — количество нормальных форм спермиев.

2.4.3. Содержание включений спермы (Л’„ ) в процентах вычисляют по формуле

где В — количество включений спермы.

Пример I- В трех мазках спермы всего сосчитано 110 спермиев. в том числе насчитано 25 патологических и 85 нормальных форш ■спермиев. Кроме того, насчитано 7 включений.

Следовательно, содержание патологических форм

коэффициент патологии

*„=-1=0,29;

содержание включений

N’~S=Z' 100=6.3».

Пример 2. В семи больших (112 малых) квадратах камеры Горяева сосчитано 130 спермиев, в том числе оказалось 37 патологических и 93 нормальных форм спермиев. Кроме того насчитано 9 включений.

Следовательно, содержание патологических форм Лд =93^57 • 100=28,4%;

коэффициент патологии

*..=-§г“0-39;

содержание включений

100-8,9*.

У ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА МЕРТВЫХ СПЕРМИЕВ

Количество мертвых спермиев определяют додсчетом в счетных камерах для форменных элементов крови или дифференциальным окрашиванием.

3.1 Метод определения количества мертвых спермиев -подсчетов в с четно й ка мере для форменных элементов крови

6

Страница 10

ГОСТ 20WJ—7Д Стр. 7

3.1.1.    Оборудование и реактивы

3.1.1.1.    Для проведения испытания -применяют:

микроскоп биологический «арки МБ И или МБР по ГОСТ 6284-67;

термостат ТМ-1 для микроскопа;

камеру для подсчета форменных элементов крова (камеру Горяева или другой конструкции);

смеситель (меланжер) эритроцитный;

натрий хлористый по ГОСТ 4233-66, 3%-ный раст-зор;

натрий лимоннокислый трехзамещеннын по ГОСТ 5.1314-72, 3%-ный раствор;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

3.1.2.    Проведение испытания

3.1.2-1. Сперму набирают в два меланжера до метки «I» и разбавляют до метки «101», для чего в первый меланжер набирают 3%-ный раствор хлористого натрия, во второй — подогретый до 30—35°С 3%-ный раствор лимоннокислого натрия. В меланжере с 3%-ным раствором хлористого натрия спермин полностью погибают.

Количество мертвых спермиев подсчитывают в счетных камерах то ГОСТ 20909.5-75, -проводя по два определения для пробы яз каждого меланжера. В каждой камере количество мертвых спермиев подсчитывают в пяти больших (80 малых) квадратах. В пробе спермы, разбавленной 3%-иым раствором .'лимоннокислого натрия, подсчет мертвых спермиев проводят в камере, подогретой до 41±.ГС.

3.1.3.    Обработка результатов

3.1.3.!.    Количество мертвых спермиев (Нс) в процентах вычисляют по формуле

//< 100,

где п — количество мертвых спермиев при разбавлении опермы 3%-ным раствором лимоннокислого натрия;

IV— количество мертвых .спермиев при разбавлении спермы 3%-иым раствором хлористого натрия.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух определений.

Допускаемые расхождения между результатами двух определений не должны превышать ±10% для определений с введением хлористого натрия и -20% — для определений с введением лимоннокислого натрия.

Пример. В пробе спермы, разбавленной 3%-ным раствором лимоннокислого натрия, в 80 малых квадратах подсчитано: в первой камере — 21, во второй — 25 мертвых спермиев, среднее арифметическое составляет — 23; в пробе спермы, разбавленной 3%-ньгм

Страница 11

Стр. 8 ГОСТ 20909.3-75

раствором хлористого натрия, соответственно подсчитано 200 и 220 спермиев, среднее арифметическое — 210.

Следовательно, количество .мертвых спермиев в сперме 100= 10,9%.

3.2. Метод определения количества мертвых спермиев дифференциальным окрашиванием Сущность метода заключается в подсчете иод микроскопом окрашенных мертвых клеток.

3.2.1.    Оборудование, материалы и реактивы

3.2.1    Л. Для проведения испытания применяют:

■микроскоп биологический МБИ или МБР по ГОСТ 8284-67; термостат;

стекла предметные по ГОСТ 9284-59; стекла покровные по ГОСТ 6672-59; бумагу фильтровальную;

эозин водорастворимый или производные флюоресцина (эозин В, или эритрозин — йод — эозин, или розовый бенгальский, или бром феноловый голубой, или феноловый красный, или анилиновый голубой);

нигрозин или анилиновый синий, или опаловый голубой, или прочный зеленый;

натрий лимоннокислый трехзамешеиный по ГОСТ 5.1314-72; спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962-67; эфир этиловый по ГОСТ 6265-52; воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

3.2.2.    Подготовка к испытанию

З.2.2.1. Вымытые и высушенные предметные стекла обезжиривают, выдерживая в течение 3 ч в смеси равных объемов этилозо-го спирта с эфиром.

32.2.2.    Готовят 3%-ный растзор лимоннокислого натрия и 1%-ный раствор лимонной (кислоты.

Добавляют к 3%-ному раствору лимоннокислого натрия раствор лимонной кислоты и устанавливают pH 7,2*0,1.

3.2.2    3. Приготовление красок

В мерной колбе вместимостью 100 мл растворяют в 3%-ном растворе лимоннокислого натрия 1.5 г эозина и 10 г нигрозина и приливают до метки 3%-ный раствор лимоннокислого натрия. Допускается изменять количество вносимых храоок: эозина — от I до 3 г, нигрозина — до 5 г на 100 мл. Краски могут быть также заменены другими красками в соответствии с перечнем, указаниям в п. З.2.1.

Допускается применять растворы без фоновых красок — нигрозина. опалового, голутбого, прочного зеленого. При этом раствор эозина готовят от 1 до 5% на 3%-ном растворе лимоннокислого натрия.

3.2.24. Подготовка пробы

Страница 12

ГОСТ 2W*9 3—75 Стр. 9

В сперме определяют концентрацию спермиев по ГОСТ 20909.5-75. Сперму, имеющую высокую концентрацию, разбавляют до концентрации 0,2—0.4 млрд/мл 3%-«ым раствором лимон ггокис лого натрия.

3.2.3. Проведение испытания

3.2.3.1.    На чистое, обезжиренное, подогретое до температуры 35±241 предмет;юе стекло наносят небольшую каплю неразбавленной или предварительно разбавленной 3%-ным раствором лимоннокислого натрия спермы и добавляют две-три капли раствора краски, подогретой до ЗО^С. Сперму и краску омешквают 2—4 с я делают тонкие мазки на трех обезжиренных стеклах.

Маэии подсушивают фильтровальной бумагой, высушивают на воздухе и микроскоанруют с иммерсионной системой микроскопа при увеличении 600—900х при голубом или зеленом светофильтре.

В каждом препарате подсчитывают по 100—150 спермиев. Отдельно считают количество спермиев с окрашенными и неокрашенными головками. Спермин с головками, окрашенными частично, относят к мертвым.

3.24. Обработка результатов

3.2.4.1.    Количество мертвых спермиев (//с ) в процентах вычисляют по формуле

С* -100,

С“+С*

где — количество спермиев с окрашенными головами;

С~ — количество спермиев с неокрашенными головками.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов не менее чом двух определений.

Допускаемые расхождения между результатами определений не должны превышать ±20%.

4. ОПРЕДЕЛЕНИЕ РАЗМЕРОВ СПЕРМИЕВ

Сущность метода заключается в измерении спермиев под микроскопом з проходящем свете при помощи окулярного микрометра.

4.1.    Оборудование, 'материалы и реактивы

4.1.1.    Для проведения испытания применяют:

микроскоп биологический марки МБИ или МБР по ГОСТ 8284-67;

окуляр-'микрометр или винтовой окулярный 'микрометр марки АМ9-2 или другой марки;

объект-микрометр;

стекла предметные по ГОСТ 9264-59;

стекла покровные шлифованные;

натрий лимоннокислый тредзамещенный по ГОСТ 5.1314-72, 3%-ный раствор;

эозин -водорастворимый, или аритроаин, или нигрозин.

3 Злх. 21TS    9

Страница 13

Стр. 10 ГОСТ M9MJ—г*

4.2. Подготовка к испытанию

4.2.1. Масштаб линейки я окуляр-микрометра меняется в зависимости от применяемого окуляра, объектива и величины тубуса микрометра. Истинную величину деления лшкйхн определяют объект-микрометром. Для этого на предметный столик микроскопа помещают объект-микрометр, фиксируют объектив на шкале объектамикрометра и, наблюдая з 'микроскол, совмещают линейхи окуляр- и объектчмикрометра. Определяют, сколько делений объект-микрометра приходится на определенное число делений окуляр-микрометра. Истинное значение деления окуляр- микрометра (JV) в микронах вычисляют «ю формуле

где п| — число делений объект-микрометра, умноженное на величину одного деления, мпм; п2 — число делений окуляр-микрометра, совпадающих с числом де-пений объохт-микрометра.

Пример. 5 делений объект-микрометра покрывают 20 делений окуляр-микрометра. Одно деление обьект-микрометра равно 10 мкм. В этом случае одно деление линейки окуляр-микрометра будет .равно

Лг=-Д^-=2,5мкм.

4.4.2.    'Готовят раствор лимоннокислого натрия, для чего в мерной колбе вместимостью 100 мл расгво]>яют 3,0 г лимоннокислого натрия и доливают дистиллированной водой до (метки.

4.2.3.    Готовят на 3%-ном растворе лимоннокислого натрия красящую или фоновую краску: 2%-ный раствор эозина водорастворимого, или 2—5%-ный раствор эритроэина, или 5—10%-ный раствор нигрозина.

4.2.4.    В спер>ме определяют концентрацию спермиев но ГОСТ 20909.5-75. Сперму, имеющую высокую концентрацию, .разбавляют до концентрации 0,2—0,4 -млрд/мл 3%-ным раствором лимоннокислого натрия.

4.3. Проведение испытания

4.3j1. На обезжиренное предметное стекло наносят кайлю спермы. добавляют к ней одну-две капли раствора краски, смешивают и делают один-два мазка. Мазки сушат на воздухе 5—10 мин и •мм крое копиру ют.

Для намерения используют тубус длиной 152 мм. Окуляр-микрометр вкладывают в окуляр и винтовой окуляр-микрометр вставляют в тубус микооскопа. Измеряют -с-пермии ори увеличении 280-—600-х.

При измерении линейку окуляр-микрометра накладывают на спермин и подсчитывают количество делений, приходящихся на длину или ширину спермня.

Страница 14

ГОСТ JOWJ—71 Стр. 11

Длину (ширину) измеряют не менее чем у 20 спсрмиев.

4.4. Обработка результатов

4.4.1. Длину (/с) или ширину (Ьс) одного спермия в микронах аычнеляют по формуле

Ш=А'п.

где Лт — значение одного деления шкалы окуляр-микрометра, мкм;

п — число делепий шкалы окуляр-микрометра, приходящееся на длину или ширину спермия.

Результаты измерений обрабатывают методами математической •статистики.

II

Страница 15

зменеБне № 1 ГОСТ 20909.3-75 Сперма быков неразбавленная. Л\етоды .орфологических исследований

Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 08.06.81 № 2857 срок введения установлен

с 0l.07.8t

Пункт 2.1.1. Заменить слова и ссылки: «микрометр окулярный» на «микрометр окулярный винтовой по ГОСТ 7865-77», «микрометр объективный» на «объект-микгюметр», «эфир этиловый по ГОСТ 6265-52» на «эфир петро-лейный по ГОСТ 11992-66», «бальзам» на «бальзам пихтовый по ГОСТ 2290-76», «фенол технический по ГОСТ 236-68» на «фенол синтетический технический по ГОСТ 23159-79», «гидрат окиси калия (кали едкое) по ГОСТ 4203-65» на «калия гидроокись по ГОСТ 24363-80», ГОСТ 8284-67 на ГОСТ 8284-78, ГОСТ 5072-72 на ГОСТ 5072-79, ГОСТ 6672-59 на ГОСТ 6672— —75, ГОСТ 9284-59 на ГОСТ 9284-75, ГОСТ 6672-59 на ГОСТ 6672-75, ГОСТ 4233-66 на ГОСТ 4233-77, ГОСТ 4014-62 на ГОСТ 4014-75, ГОСТ 9949-62 на ГОСТ 9949-76, ГОСТ 6995-67 на ГОСТ 6995-77, ГОСТ 5818— 69 на ГОСТ 5818-78, ГОСТ 5822-69 на ГОСТ 5822-78.

Пункт 2.3.1. Седьмой абзац. После слова «склянке» исключить букву: «и».

(Продо.хжение см. стр. 234)

Страница 16

(Продолжение изменения к ГОСТ 20909.3- ^

Пункт 3.1.1.1. Заменить ссылки: ГОСТ 8284-67 на ГОСТ 8284-78, ГО^ 4233—66 на ГОСТ 4233-77, ГОСТ 5.1314-72 на ГОСТ 22280-76.

Пункт $.1.2.1. Первый абзац дополнить словами: «а с раствором цитрата натрия остаются живыми».

Пункт 3.2. Второй абзац. Заменить слово: «клеток» на «спермиез».

Пункт 3.2.1.1. Исключить слово: «термостат»;

.заменить слова и ссылки: «эфир этиловый по ГОСТ 6265-52» на «эфир петролейный по ГОСТ 11992-66»; ГОСТ 8284-67 на ГОСТ 8284-78, ГОСТ 9284-59 на ГОСТ 9284-75, ГОСТ 6672-59 на ГОСТ 6672-75, ГОСТ 5.1314-72 на ГОСТ 22280-76.

Пункт 4.1.1. Заменить слова и ссылки: «окуляр-микрометр» на «окуляр-микрометр ло ГОСТ 7865-77», «объект-микрометр» на «объект-микрометр по ГОСТ 7513-75», «стекла покровные шлифованные» на «стекла покровные по ГОСТ 6672-75», ГОСТ 8284-67 на ГОСТ 8284-75, ГОСТ 9284-59 на ГОСТ 9284-75, ГОСТ 5.1314-62 на ГОСТ 22280-76.

(ИУС № 8 1981' г.)