Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1
 

13 страниц

304.00 ₽

Купить ГОСТ 20909.4-75 — официальный бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Официально распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль".

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Распространяется на неразбавленную свежеполученную сперму быков и устанавливает методы испытаний биологических свойств спермы - подвижности спермиев, абсолютной выживаемости и выживаемости спермиев в часах, осмотической (физиологической) резистентности, активности дегидрогеназ и резистентности спермиев к холодному шоку.

  Скачать PDF

Ограничение срока действия снято: Постановление Госстандарта № 1129 от 27.06.91

Действие завершено 01.07.2015

Оглавление

1 Метод отбора проб

2 Определение подвижности спермиев

3 Определение абсолютной выживаемости и времени выживаемости спермиев

4 Определение осмотической (физиологической) резистентности спермиев

5 Определение дегидрогеназной активности спермы

6 Определение резистентности спермиев к холодовому шоку

Приложение 1 (рекомедуемое) ГОСТ 20909.4-75 Форма журнала для записи результатов испытаний

Приложение 2 (справочное) ГОСТ 20909.4-75 Пример вычислений интервала времени, выживаемости спермиев в часах и абсолютной выживаемости спермиев

Показать даты введения Admin

УДК 619:611-013.11:620.193.8(063.74)    Группа    Р39

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

ГОСТ

20909.4-75

СПЕРМА БЫКОВ НЕРАЗБАВЛЕННАЯ Методы биологических исследований

Non-diluted sperm of bulls Methods of biological tests

Постановлением Государственного комитета стандартов Совета Министров СССР от 19 сентября 1975 г. № 2440 срок действия установлен

с 01.07.76 до 01.07.81

Несоблюдение стандарта преследуется по закону

Настоящий стандарт распространяется на неразбавленную све-жеполученную сперму быков и устанавливает методы испытаний биологических свойств спермы — подвижности спермиез, абсолютной выживаемости и выживаемости спермиев в часах, осмотической (физиологической) резистентности, активности дегидрогеназ и резистентности спермиев к холодовому шоку.

1. МЕТОД ОТБОРА ПРОБ

1.1.    Отбор проб — по ГОСТ 20909.1-75.

1.2.    Для проведения испытаний используют сперму, хранившуюся при температуре 30—35°С не более 30 мин с момента ее получения.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОДВИЖНОСТИ СПЕРМИЕВ

Сущность метода заключается в определении количества спермиев с прямолинейным поступательным движением.

2.1.    О бо р удов а ние и реактивы

2.1.1.    Для проведения испытания применяют:

микроскоп биологический марки МБИ или МБР по ГОСТ 8284-67;

термостат ТМ-1 или другой конструкции, снабженный стандартным контактным или нестандартным однотемпературным термометром;

Издание официальное


Перепечатка воспрещена


ГОСТ 20909,4—75 Стр. 2

стекла покровные по ГОСТ 6572-59;

стекла предметные по ГОСТ 9284-59;

стекла предметные с углублением;

палочки стеклянные или пипетки пастеровские;

натрий лимоннокислый трехзамещенный по ГОСТ 5.1314-72, 3%-ный раствор;

натрий хлористый по ГОСТ4233—66, 1%-ный раствор.

2.2. Подготовка к испытанию

2.2.1.    Подготовка и стерилизация лабораторной посуды — по ГОСТ 20909.2-75.

2.2.2.    Термостат включают за 20—30 мин до начала работы. Температура в термостате должна быть 40—42°С.

2.2.3.    Предметные и покровные стекла, стеклянные палочки, пипетки и растворы подогревают до 35—40°С.

2.3.    Проведение испытания

2.3Л. Подвижность спермиев определяют в раздавленной капле спермы под микроскопом в проходящем свете при увеличении 100—180х. Более точно количество живых и мертвых спермиев определяют в счетной камере по ГОСТ 20909.3-75.

2.3.2. При определении подвижности спермиев под микроскопом наносят на предметное стекло теплой стерильной стеклянной палочкой или пастеровской пипеткой небольшую каплю спермы, к которой добавляют двух-четырехкратное количество 3%-иого раствора лимоннокислого натрия. Сперму с раствором лимоннокислого натрия тщательно перемешивают и накрывают покровным стеклом. Просматривают под микроскопом весь препарат. Подсчет спермиев пре изводят не менее чем в трех полях зрения микроскопа с наибольшей подвижностью спермиев. Подсчитывают количество спермиев с прямолинейным поступательным движением и отдельно — количество спермиев с неправильным движением — манежным (перемещение по кругу), колебательным (спермин не перемещаются, но производят движение головкой или хвостиком) и мертвых спермиев.

2.4.    Обработка результатов

2.4.1. Подвижность спермиев (#с ) в баллах вычисляют по

формуле

Пe=2ii!i.

с п 9

где п — общее число подсчитанных спермиев;

«1 —- число подсчитанных спермиев с прямолинейным поступательным движением;

10— постоянный к оэффициент.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Минимальной подвижностью спермиев принято считать подвижность, равную 0,6 балла.

13

Стр. 11


ПРИЛОЖЕНИЕ 2 к ГОСТ 20909.4-75 Справочное


ПРИМЕР ВЫЧИСЛЕНИЯ ИНТЕРВАЛА ВРЕМЕНИ, ВЫЖИВАЕМОСТИ СПЕРМИЕВ В ЧАСАХ И АБСОЛЮТНОЙ ВЫЖИВАЕМОСТИ

СПЕРМИЕВ

(данные для расчетов взяты из журнала для записи результатов испытаний, приведенном в приложении 1)


1. Интервал времени на четвертый день испытания

74—7*3    120-48

*4—    9    9    —00    Ч,


выживаемость спермиев за этот интервал времени

7*36=252.

2. Выживаемость спермиев в часах


264-240


2


f240-252 ч.


3.    Интервал времени на девятый день испытания, когда установлена минимальная подвижность спермиев в баллах

7нс“Тп-\ 252—216

U==-2-=-2—=18 Ч-

4.    Абсолютная выживаемость спермиев в трех повторностях составляет

51==2я*==108+-216+288+252+216 + 180+72+-48+18-:1398; S2=2:a/=108+216+216-f216+2164-120 f 48+18=1410; ^2<*=108+216+-288+288+288+216+180+56 +48-+-18—1458. Расхождение между минимальным (1398) и максимальным (1458) показателями абсолютной вживаемости спермиев составляет 60 или 4,3%. Следовательно, абсолютная выживаемость спермиев St+St+S* 1398+1410+1458    ,

бср—    з    —    3    —14-^.


22


Изменение № 1 ГОСТ 20909.4-75 Сперма быков неразбавленная. Методы биологических исследований

Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 08.06.81 № 2857 срок введения установлен

с 01.07.81

Пункты 2.1.1, 4.1.1. Заменить ссылки: ГОСТ 8284-67 на ГОСТ    8284—78,

ГОСТ 6672-59 на ГОСТ 6672-75, ГОСТ 9284-59 на ГОСТ 9284-75, ГОСТ 4233-66 на ГОСТ 4233-77.

Пункты 2.1.1, 5:2.1. Заменить ссылку: ГОСТ 5.1314-72 на ГОСТ 22280

76.

Пункт 4.1.1. Заменить слова:    «микропипетки    стеклянные по ГОСТ

12487—67» на «микропипетки стеклянные».

Пункты 5.1.1, 5.2.1. Заменить ссылки: ГОСТ 5072-72 на ГОСТ    5072—79,

ГОСТ 9284-50 на ГОСТ 9284-75, ГОСТ 4233-66 на ГОСТ 4233-77.

Раздел 5 дополнить новым пунктом — 5.1.4.3:

«5.1.4.3. Коэффициент дегидрогеназной активности (/(Да) вычисляют

по формуле

(Продолжение см. стр. 236) (Продолжение изменения к ГОСТ 20909.4—75)

где Д а — дегидрогеназная активность».

Пункт 5.2.1. Заменить слова и ссылки: «пипетки стеклянные вместимостью 1 мл по ГОСТ 12487-67» на «пипетки стеклянные вместимостью 1 мл по ГОСТ 20292-74», ГОСТ 12487-67 на ГОСТ 1770-74, ГОСТ 3164-52 на ГОСТ 3164-78.

Пункт 5.2.4. Исключить слова: «и 5.1.5».

Пункт 6.1.1. Заменить ссылки: ГОСТ 8284-67 на ГОСТ 8284-78, ГОСТ 9284-59 на ГОСТ 9284-75, ГОСТ 6672-59 на ГОСТ 6672-75, ГОСТ 6038--74 на ГОСТ 6038-79.

Приложение 1. Графа «Последовательные интервалы времени, t, ч». Заменить значение: 26 на 36;

графа а. Для 12-го дня проведения испытаний заменить знак:—на ЕП (3 раза).

(ИУС № 8 1981 г.)

3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АБСОЛЮТНОЙ ВЫЖИВАЕМОСТИ И ВРЕМЕНИ ВЫЖИВАЕМОСТИ СПЕРМИЕВ

Сущность метода заключается в установлении подвижности спермиев за каждый последовательный интервал времени в процессе хранения спермы после ее разбавления.

Выживаемость спермиев в часах определяют по количеству времени, прошедшего от начала хранения спермы до ее гибели.

3.1.    Оборудование и реактивы

3.1.1.    Оборудование и реактивы — по п. 2.1;

глюкозо-иитратно-желточиая среда — по ГОСТ 14746-69.

3.2.    Проведение испытания

3.2.1.Отбирают из одного эякулята или серии спермы не менее двух проб для анализа, которые разбавляют глюкозо-цитратнэ-желточной средой, приготавливая одно из разведений от 1:8 до 1:32, и сохраняют при 2—5СС.

Подвижность спермиев определяют через каждые 24 ч (в начале хранения можно через 48 ч) по п. 2.3. Последним днем испытания считают день, когда наблюдается единичная подвижность спермиев и нельзя установить минимальную подвижность спермиев в баллах.

3.3.    Обработка результатов

3.3.1.    Абсолютную выживаемость спермиев (5) вычисляют по

формуле

S = &itx +    Н" #3^3    • • • Н” &n tfl *

где а2, а3 . . . ап —подвижность спермиев за интервалы времени, баллы;

tu t2, f3.. - tn — последовательные интервалы времени, в течение которых подвижность спермиев соответственно равна аи а а3...ап , ч, вычисляемые по п- 3.3.2; a\tu ct2t2i a3t3.. ,ап tn—выживаемость спермиев за последовательные интервалы времени.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух или более параллельных определений. Допускаемые расхождения между двумя параллельными определениями не должны превышать ±10%. Если из трех или четырех определений одно имеет расхождение более чем на ±10%, то среднее арифметическое вычисляют соответственно по двум или трем определениям. Если из трех или четырех определений два имеют расхождение более чем на ±10%, то испытание повторяют.

При проведении пяти определений среднее арифметическое вычисляют потрем определениям, при шести или семи определениях — по четырем, при восьми и девяти определениях — по пяти определениям, имеющим расхождение не более ±10%.

14

ГОСТ 20909.4—7S Стр. 4

3 3.2. Интервалы времени (/ь t%,    в    часах    вычис    шюг    по

формуле

где Т — время, прошедшее от начала испытания до дня следующего испытания, ч; п — порядковый номер дня испытания.

При определении выживаемости спермиев в день испытания, когда нельзя установить минимальную подвижность спермиев, интервал времени (tn) в часах вычисляют по формуле

А _

1п~    2    *

где Тнс — время выживаемости спермиев, ч, вычисляемое по п 3.3 3,

Tn i — время, прошедшее от начала испытания до предпоследнего дня испытания, когда была установлена минимальная подвижность спермиев в баллах, ч.

3.3.3. Время выживаемости спермиев (Т IiC ) в часах вычисляют по формуле

'Г _ ТП-ТП-1 , гг

1 нс~~ >    Г * гг—Ь

где Т „ — время, прошедшее от начала испытания до последнего дня испытания, ч.

Результаты испытаний по определению подвижности спермиев при вычислении абсолютной выживаемости и выживаемости спермиев в часах записывают в журнале испытаний. Форма журнала для записи результатов испытаний, а также примеры вычислений абсолютной выживаемости спермиев, интервала времени и выживаемости спермиев в часах приведены в приложениях 1 и 2.

4. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСМОТИЧЕСКОЙ (ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ! РЕЗИСТЕНТНОСТИ СПЕРМИЕВ

Сущность метода заключается в определении устойчивости спермиев к действию гипотонического раствора хлористого натрия.

4.1.    О б о р у до в а н ие и реактивы

4.1.1.    Для проведения испытания применяют:

микроскоп биологический марки МБИ или МБР по ГОСТ 8284-67;

термостат ТМ-1 для микроскопа; флаконы вместимостью 10—15 мл или пробирки; микропипетки стеклянные по ГОСТ 12487-67; колбы стеклянные вместимостью 100—500 мл по ГОСТ 12487—67;

стекла предметные по ГОСТ 9281-59; стекла покровные по ГОСТ 6672-59;

15

Стр. 5 ГОСТ 20909.4-75

натрий хлористый по ГОСТ 4233-66, 0,1—0,6%-ный раствор;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

4.2. Подготовка к испытанию

4.2.1.    При определении осмотической резистентности неразбавленной спермы должны строго соблюдаться правила, предупреждающие холодовый шок слермиев. Растворы и лабораторная посуда, применяемые для проведения испытания, должны быть стерильными и подогретыми до температуры 30—35°С.

4.2.2.    Перед испытанием готовят пробирки с концентрацией раствора хлористого натрия от 0,6 до 0,1%. Для этого вначале готовят на дистиллированной воде 1%-ный раствор хлористого натрия, который разливают в девять пробирок в объеме от 0,5 до 3,0 мл в соответствии с таблицей и добавляют дистиллированную воду до объема 5 мл.

Номера

проби

рок

Количество 1%-но-го раствора хлористого натрия, мл

Количество дистиллированной воды, мл

Концент- | рация раст-| вора хлористого I натрия, %

Номера

пробирок

Количество 1%-ного раствора хлористого натрия, мл

Количество дистиллированной воды, мл

Концентрация раствора хлористого натрия, %

1

3,00

2,00

0,60

6

1,25

3,75

0,25

2

2,50

2,50

0,50

7

1,00

4,00

0,20

3

2,00

3,00

0,40

8

0,75

4,25

0,15

4

1,75

3,25

0,35

9

0,50

4,50

0,10

5

1,50

3,50

0,30 1

При исследовании большого количества проб спермы раствор хлористого натрия в концентрациях от 0 6 до 0,1% готовят в девяти колбах, затем из каждой колбы переносят мерной стеклянной пипеткой по 5 мл раствора в заранее приготовленные флаконы или пробирки.

4.2.3.    Приготавливают по две пробирки с раствором хлористого натрия каждой из указанных в таблице концентраций. Пробирки закрывают резиновыми пробками, обернутым-г пергаментной бумагой, и ставят в термостат при температуре 3D—-35“С на 10—15 мин.

4.3.    Проведение испытания

4.3.1.    В каждую пробирку с раствором хлористого натрия теплой микропипеткой вносят по 0,025 или 0,05 мл испытуемой спермы. Получают разбавление от 1:100 до 1:200.

Пробирки с разбавленной спермой выдерживают 3 чпрн температуре 18—22"С.

Подвижность спермиев в раздавленной капле определяют по п. 2.3 без добавления раствора лимоннокислого натрия.

4.4.    Обработка результатов

4.4.1.    Осмотическую резистентность спермы (R0) выражают

ГОСТ 20909.4-7$ Стр. 6

значением концентрации раствора хлористого натрия, при которой подвижность спермиев составляет не менее 0,5 балла. Чем ниже концентрация раствора хлористого натрия, в котором спермин остаются живыми, тем выше осмотическая резистентность спермы.

Пример. В пробирке № 8 (0,15%-ный раствор хлористого натрия) определена единичная подвижность спермиев, а в пробирке № 7 (0,2%-ный раствор хлористого натрия) подвижность спермиев 0,5 балла. Следовательно, значение осмотической резистент-нссти спермы равно 0,2. Или, если в пробирке № 8 мертвые спермин, в пробирках № 7 и 6 единичная подвижность спермиев, а в пробирке № 5 (0,3%-ный раствор хлористого натрия) подвижность — 0,5 балла. Следовательно, осмотическая резистентность спермы равна 0,3.

4.4.2. Коэффициент резистентности (Як) вычисляют по формуле

где 0,1 — постоянный коэффициент;

R о— осмотическая резистентно сть (концентрация раствора хлористого натрия, %).

5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДЕГИДРОГЕНАЗ НОЙ АКТИВНОСТИ СПЕРМЫ

Сущность метода заключается в определении скорости обесцвечивания метиленовой сини, добавленной к сперме.

Скорость обесцвечивания метиленовой сини зависит от активности дегидрогеназ-ферментов дыхания спермиев.

Дегидрогеназную активнсегь спермы определяют в капиллярах или в пробирках.

5.1.    Метод определения д егидр ог е н а з н о й активности спермы в капиллярах

5.1.1.    Оборудование и реактивы

Для проведения испытания применяют: термостат ТМ-1 для микроскопа; термометр по ГОСТ 2Я5—73;

термостат или ультратермостат, или баню водяную; секундомер по ГОСТ 5072-72; стекла предметные по ГОСТ 9284—5Э; пн пет* и глазные и пастеровские;

трубочки стеклянные длиной 5—S см с внутренним диаметром 0,8—1,0 мм или катетеры от шприцов для искусственного осеменения коров;

натрий хлористый по ГОСТ 4233-66; синь метиленовую 0,01%-ный раствор; воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

5.1.2.    Подготовка к испытанию

17

Стр. 7 ГОСТ 20909.4-75

5.1.2.1.    Концентрацию спер мне» в сперме определяют и ГОСТ 20909.5—75.

5.1.2.2.    Подвижность спермиев определяют по п. 2.3.

Раствор метиленовой сини готовят, растворяя 0,01 г метил ел о-вон сини и 0,9 г хлористого натрия в 190 мл дистиллированной воды.

5.1.3.    Проведение испытания

На чистое предметное стекло, подогретое до 30—37°С, наносят 0,05 мл (каплю) спермы и добавляют теплой пипеткой такое же количество (каплю) 0,01%-ного раствора метиленовой сини, подогретой до 30°С. Смесь спермы с краской тщательно смешивают и набирают ее в теплую (30—37°С) стеклянную трубку, рассчитывая, чтобы высота столбика смеси составляла 2—3 см. Столбик смеси, не содержащий пузырьков воздуха, располагают в центре трубки.

Трубочку, заполненную смесью опер мы с метиленовой синью, помещают в термостат при температуре 37*0,54] на лист белой бумаги в горизонтальном положении. Записывают время начала испытания и окончания обесцвечивания метиленовой сини. При этом учитывают, что концы столбика (1—2 мм) обычно не обесцвечиваются.

5.1.4.    Обработка результатов

5.1.4.1.    Дегидрогеназную активность спермы выражают в условных единицах.

За единицу активности принимают такую активность, когда 1 млрд, спермиев обесцвечивает за 1 мин 0,05 мл 0,01%-ного раствора метиленовой сини (0,000005 г порошка метиленовой сини).

5.1.4.2.    Дегидрогеназную активность спермы (Да) в условных единицах вычисляют по формуле

лг _ nc    t    -C

Мл— 10    ,

где П с —подвижность спермиев, баллы;

t — время обесцвечивания метиленовой сини в опыте,мин;: С — концентрация спермы, млрд/мл;

10 — постоянный коэффициент.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений.

Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных определений не должны превышать ±10%.

5.2.    Метод определения д егид р оге н а зной активности спермы в пробирках

5.2.1. Оборудование и реактивы

Для проведения испытания применяют:

термостат ТМ-1 для микроскопа;

термометр по ГОСТ 215-73;

термостат или ультратермостат, или баню водяную;

18

ГОСТ 20909.4-75 Стр. 8

секундомер по ГОСТ 5072-72; стекла предметные по ГОСТ 9284-59;

пипетки стеклянные вместимостью 1 мл по ГОСТ 12487-67; колбы стеклянные по ГОСТ 12487— 67;

пробирки стеклянные вместимостью 5 мл и диаметром 1 см;

синь метиленовую, 0,05%-ный раствор;

натрий лимоннокислый по ГОСТ 5.1314-72;

масло вазелиновое по ГОСТ 3164-52, хл.;

глюкозу по ГОСТ 4233-66;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

5.2.2. Подготовка к испытанию

5.2.2.1.    Приготовляют глюкозо-цитратный раствор на прокипяченной дистиллированной воде, для чего растворяют в колбе вместимостью 100 мл 3 г глюкозы и 1,4 г лимоннокислого натрия.

Раствор доводят до -метай водой.

5.2.2.2.    Раствор мэтиленоной сини готовят на прокипяченной дистиллированной воде, растворяя в мерной колбе вместимостью 100 мл 3 г глюкозы, 1,4 г цитрата натрия и 0,05 г метиленовой сини. Объем раствора доводят до метки.

5.2.2.3.    Концентрацию спермиев определяют по ГОСТ 20909.5—75.

5.2.3.    Проведение испытания

В чистую, подогретую до 30—37°С стеклянную пробирку вносят 0,8 мл теплого (37—45°С) глюкозо-цитратного раствора, добавляют 0,1 мл 0,05%-ного раствора метиленовой сини и 0,2 мл спермы. Содержимое тщательно перемешивают и наслаивают очищенное вазелиновое масло в таком количестве, чтобы получился столбик масла высотой 0,5—1,0 см.

Пробирки со смесью ставят в термостат или в водяную баню при температуре 45°С и учитывают время обесцвечивания метиленовой сини.

Допускается одновременно определять показатель выживаемости спермиев при температуре 45*С. Для этого через каждые 10— 15 мин из пробирок берут пробу стеклянной палочкой и оценивают подвижность спермиев по п. 2.3.

5.2.4.    Обработка результатов

Депидрогеназную активность спермы и коэффициент дегидро-геназной активнссги вычисляют по пп. 5.1.4 и 5.1.5.

6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗИСТЕНТНОСТИ СПЕРМИЕВ К ХОЛОДОВОМУ ШОКУ

Сущность метода заключается в определении выживаемости спермиев после быстрого их охлаждения до температуры 1—3°С.

6.1.    Оборудование и реактивы

6.1.1.    Для проведения испытания применяют:

микроскоп биологический марки МБИ или МБР по ГОСТ 8284-67;

19

Стр. 9 ГОСТ 20909.4—<7$

термостат ТМ-1 для микроскэпа;

стекла предметные по ГОСТ 9284-59;

стекла покровные размером 18x18 или 24 x 24 мм го ГОСТ 6672-59;

палочки стеклянные или пипетки пастеровские;

флаконы вместимостью 2 мл;

глюкозу по ГОСТ 6038-74, 6%-ный раствор.

6.2.    Подготовка к испытанию

6.2.1.    Перед началом работы готовят на прокипяченной дистиллированной воде 6%-ный раствор глюкозы, растворяя 6 г глюкозы в мерной колбе вместимостью 100 мл. Объем раствора доводят водой до метки. Приготовленный раствор разливают по 1—2 мл в пробирки или флаконы из расчета на каждую пробу спермы не менее трех пробирок.

Готовят ванну со льдом с температурой 2±ГС, в которую не менее чем за 5 мин до начала исследования ставят для охлаждения по две из трех пробирок. Третью пробу с 6%-ным раствором глюкозы ставят в термостат при температуре 37—40°С.

Подвижность слермиев определяют по п. 2.3.

6.3.    Проведение испытания

6.3.1.    Одну-две капли неразбавленной спермы, выдержанной при комнатной температуре не менее 10 и не более 30 мин, вносят стеклянной пипеткой в пробирки или флаконы с 6%-ным раствором глюкозы, охлажденной до 2±ГС, и в пробирку с раствором, подогретым до 37—40°С. Выдерживают 5 мин. Подвижность спер-миев определяют под микроскопом по п. 2.3.

6.4.    О б р а б отк а результатов


6.4.1.    Резистентность сиермиев к холодовому шоку (Rx) вычисляют по формуле

где а\ — подвижность сиермиев через 5 мин после внесения спермы в 6%-ный раствор глюкозы при температуре 2±ГС, баллы;

а2 — подвижность сиермиев через 5 мин после внесения спермы в 6%-ный раствор глюкозы при температуре 37— 40°С, баллы.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать ±10%,

Пример. Подвижность сиермиев в 6%-ном растворе глюкозы при температуре 37—40°С — 8,0 баллов, а в растворе С температурой 2±1°С — 1,5 балла.

Следовательно, резистентность к холодовому шоку

20

м


Сперма


ПРИЛОЖЕНИЕ 1 к ГОСТ 20909 4-75 Рекомендуемое


Форма журнала для записи результатов испытаний

«3

3

Дни

проведения испытаний

я

1

2

1

3

1

4

I

5

6

1

7

1

8

1

9

i

10

i

11

1

12

*

Л

Я

я

X

а.

Время, прошедшее от

начала

испытания до дня

следующего испытания, Т, ч

я

4>

е

и

0 1

| 24

1

48

1

-

1

96

1

1

120

1

-

1

168

1

192

i

216

i

240

1

264

as

W з

я

н

U

Последовательные интервалы времени, t.

ч

« ex

X <Ц £ с

X

V

«

12

1

24

1

26

1

-

l

36

1

36

1

-

1

36

1

24

i

24

i

18

1

-

2 и 5 д

8 h

я

я

*

* 1

1а<

а

at

а

а

at

1

а

И

Iя

at

1 at

а

j at

Iе

\at

а

И

\а

at

« о < X

3

ffl tr

9,0

108

9.0

216

8,0

288

7,0

252

6,0

216

_

__

5,0

180

3,0

72

2,0

48

1,0

18

1398

252

9,0

108

9,0

216

7,0

252

6,0

216

6,0

216

6,0

216

5,0

216

2,0

48

1,0

18

1410

252

9,0

108

9,0

216

8,0

288

8,0

288

6,0

216

5,0

180

4,0

96

2,0

48

1,0

18

1458

252

Среднее

1422

252