Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1
 

16 страниц

304.00 ₽

Купить ГОСТ 20909.5-75 — бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль".

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Распространяется на неразбавленную свежеполученную сперму быков и устанавливает методы испытаний физических свойств спермы — цвета, вязкости, объема и массы эякулята, концентрацию водородных ионов (рН), осмотического давления, удельной электрической проводимости и концентрации спермиев.

  Скачать PDF

Заменен на ГОСТ 32277-2013

Ограничение срока действия снято: Постановление Госстандарта № 1129 от 27.06.91

Действие завершено 01.07.2015

Оглавление

1 Метод отбора проб

2 Определение цвета спермы

3 Определение вязкости спермы

4 Определение объема и массы эякулята

5 Определение концентрации водородных ионов (рН) спермы

6 Определение осмотического давления спермы

7 Определение удельной электрической проводимости спермы

8 Определение концентрации спермиев в сперме

Показать даты введения Admin

Нормативные ссылки

Стр. 1
стр. 1
Стр. 2
стр. 2
Стр. 3
стр. 3
Стр. 4
стр. 4
Стр. 5
стр. 5
Стр. 6
стр. 6
Стр. 7
стр. 7
Стр. 8
стр. 8
Стр. 9
стр. 9
Стр. 10
стр. 10
Стр. 11
стр. 11
Стр. 12
стр. 12
Стр. 13
стр. 13
Стр. 14
стр. 14
Стр. 15
стр. 15
Стр. 16
стр. 16

УДК 619:611 -013.11.001.4(083.74)    Группа    Р39

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

гост

20909.5—75

СПЕРМА БЫКОВ НЕРАЗБАВЛЕННАЯ Методы испытаний физических свойств

Non-diluted sperm of bulls. Methods for tests of mechanical properties

Постановлением Государственного комитета стандартов Совета Министров СССР от 19 сентября 1975 г. № 2440 срои действия установлен

с 01.07.76 до 01.07.81

Несоблюдение стандарта преследуется по закону

Настоящий стандарт распространяется на неразбавленаую свежен слученную сперму быков и устанавливает методы испытаний физических свойств спермы — цвета, вязкости, объема и массы эякулята, концентрацию водсродных ионов (pH), осмотического давления, удельной электрической проводимости и концентрации спермиев.

1. МЕТОД ОТБОРА ПРОБ

1.1.    Отбор проб — по ГОСТ 20909.1-75.

1.2.    Для проведен 1я и:пытаний используют сперму, хранившуюся пря температуре 30—35°С не бэлее 30 мин с момента ее получения.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦВЕТА СПЕРМЫ

2.1. Цвет спермы определяют визуально в спермоприемнике при хорошем естественном или искусственном освещении.

3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВЯЗКОСТИ СПЕРМЫ

Сущность метода заключается в определении и сравнении скорости прохождения спермы и дистиллирсванной ьэды по капиллярной трубке.

3.1.Оборудование и реактивы

Издание официальное


Перепечатка воспрещена


Стр. 2 ТОСТ 20909.5—75

3.1.1.    Для проведения испытания применяют:

вискозиметр капиллярный стеклянный Оствальда ВГ1Ж-2 по ГОСТ 10028-67;

баню водяною или термостат с циркуляцией жидкости; шкаф сушильный лабораторный по ГОСТ 7365-55; насос вакуумный; грушу резиновую;

пипетки стеклянные вместимостью 1 и 5 мл по ГОСТ 12487-67;

термометр лабораторный по ГОСТ 215-73;

секундомер по ГОСТ 5072-72;

натрий двууглекислый по ГОСТ 4201-66;

спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962-67;

эфир этиловый по ГОСТ 6265— 52;

калий хромовокислый по ГОСТ 4459-75;

кислоту серную по ГОСТ 4204-65;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

3.2.    Подготовка к испытанию

3.2.1.    Вискозиметр должен быть чистым, сухим и обезжиренным. Для этого его промывают 2—3%-ным раствором двууглекислого натрия или мыльным раствором, выдерживают в хромовой смеси, затем восемь—десять раз промывают водопроводной водой, шесть—восемь раз дистиллированной водой и высушивают в сушильном шкафу. После каждого определения вискозиметр промывают дистиллированной водой, смесью этилового спирта с эфиром в равных объемах, эфиром и затем высушивают, продувая воздух вакуумным насоссм или рез-шовой грушей.

3.3.    Проведение испытания

3.3.1.    Испытание проводят при строго определенной температуре, которая должна быть 20, 30 или 38*ГС.

Пропускают по капилляру вискозиметра Оствальда дистиллированную воду. Для этого через трубку правого колена 2 вискозиметра (см. черт. 1) пипеткой наливают около 1 мл дистиллированной воды, подогретой до температуры, при которой будет проводиться испытание. Вискозиметр помещают на 15—20 мин в водяную баню или в термостат с циркулирующей жидкостью, чтобы верхняя метка а на капилляре 3 была под водой. Насосом или ре-эиновзй грушей воду нагнетают в левое колено вискозиметра так, чтсбы уениск жидкости был несколько выше верхней метки на капилляре, и затем дают ей сЕсбодно опускаться по капилляру, засекая время прохождения воды от верхней а до нижней б метки.

Вискозиметр промывают смесью ели рта с эфиром, высушивают и пропускают по капилляру сперму, засекая время ее прохождения. Испытание проводят при той же температуре.

3.4.    Об р а бот ка результатов

3.4.1.    Относительную еязкссть ( tjoth ) вычисляют по формуле

ГОСТ 20909 5—75 Стр 11

яости спермы, величина которой пропорциональна концентрации спермиев.

8.2.1.    Оборудование, материалы и реактивы Для проведения испытания применяют: фотоэлектроколориметр ФЭК-М; воронку стеклянную по ГОСТ 8613-64; флаконы из-под антибиотиков;

пипетку градуированную вместимостью 10 мл по ГОСТ 12487-57;

микрэпипетку вместимостью 0,1 мл по ГОСТ 12487— 67; салфетки марлевые по ГОСТ 9412-67; фильтр из фильтровальной бумаги по ГОСТ 12026-66; натрий лимоннокислый трехзамещенный по ГОСТ 5.1314-72, 3%-ный раствор.

8.2.2.    Подготовка к испытанию

Номера пробирок

Количество спермы, мл

Количество лимоннокислого натрия, мл

Концентрация спермиев в раствоое, млрд/мл

Номера

прооирок

Количество спермы, мл

Количество лимон-нокис юго натрия, мл

Концентрация спермиев в растворе, млрд/мл

1

1

5,0

0,2

6

0,5

5,5

0,1

2

0,9

5,1

0,18

7

0,4

5,6

0,08

3

0,8

5,2

0,16

8

0,3

5,7

0,06

4

0,7

5,3

0,14

9

0,2

5,8

0,04

5

0,6

5,4

0,12

10

0,1

5,9

0,02

8.2.2.1. Построение градуировочного графика Для построения градуировочного графика используют сперму с высокой концентрацией спермиев, из которой готовят разведения с различной концентрацией. Например, берут сперму с концентрацией спермиев, равной 1,2 млрд./мл. Сперму разводят 3,5%'Ным раствором лимоннокислого натрия в соответствии с табл. 2 из расчета приготовления разведений с интервалом концентрации спермиев в растворе от 0,02 до 0,2 млрд/мл. _Таблица    2

Концентрацию спермиев в каждом разведении уточняют, подсчитывая их количество в камере Горяева по п. 8.1.2. Величину оптической плотности приготовленных разведений определяют на фотоэлектроколориметре при красном светофильтре в кювете с рабочей длиной 10 мм.

Для построения градуировочного графика откладывают по оси абсцисс значения концентрации спермиев, а по оси ординат соответствующие им величины оптической плотности.

Градуировочный график строят для каждого прибора. Проверку градуировочного графика проводят ежемесячно.

8.2.3. Проведение испытания

В чистый флакон наливают 5Д мл профильтрованного 3,5 %-

33

Стр, 12 ГОСТ 20909.5-75

ного раствора лимоннокислого натрия и микропипеткой вносят точно 0,5 мл спермы, не допуская попадания пены или вазелина. Перед внесением спермы в раствор лимоннокислого натрия микропипетку вытирают снаружи чистой марлевой салфеткой для удаления излишка спермы. После внесения спермы микропипетку промывают в этом же растворе, набирая раствор в пипетку и выдувая его не менее трех раз. Суспензию тщательно перемешивают, осторожно переворачивая закрытый флакончик, не допуская при этом образования пены.

Оптическую плотность разбавленной спермы определяют коло-риметрированием при красном светофильтре в кювете с рабочей длиной 10 мм. В две кюветы наливают до метки 3,5%-ныи раствор лимоннокислого натрия, в третью — разбавленную сперму. В левый кюветодержатель на пути прохождения пучка света помещают кювету, наполненную 3,5%-ным раствором лимоннокислого натрия, а в правый кюветодержатель — две кюветы: одну с разбавленной спермой, другую — с 3,5%-ным раствором лимоннокислого натрия. При этом кювету с разбавленной спермой устанавливают на пути прохождения пучка света.

Закрыв крышку прибора, включают гальванометр, поворачивая рукоятку чувствительности в положение «1». Рукояткой нейтральных клиньев подводят стрелку гальванометра к нулю. Затем переключают гальванометр на высокую чувствительность (рукоятка в положении «2») и отклонившуюся стрелку гальванометра введением нейтральных клиньев устанавливают на нуль. Поворачивая рукоятку в исходное положение, отключают гальванометр.

В правом кюветодержателе меняют кюветы местами, устанавливая на пути прохождения пучка света кювету с 3,5%-ным раствором лимоннокислого натрия. Включают гальванометр сначала на грубую чувствительность и, не трогая рукоятку нейтральных клиньев, с помощью счетных барабанов подводят отклонившуюся стрелку гальванометра к нулю. Затем включают гальванометр на высокую чувствительность и вращением счетных барабанов устанавливают стрелку гальванометра точно на нуль. После этого гальванометр отключают.

Отсчет значений оптической плотности производят на красной шкале левого барабана фотоэлектроколориметра.

8.2.4. Обработка результатов

Концентрацию спермиев в млрд/мл спермы определяют умножением на 6 величины концентрации спермиев в лимоннокислом растворе, найденной при помощи градуировочного графика по соответствующему значению оптической плотности раствора.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами параллельных определений не должны превышать ±10%.

34

Изменение № 1 ГОСТ 20909.5-75 Сперма быков неразбавленная. Методы испытаний физических свойств

Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 08.06.81 № 2857 срок введения установлен

с 01.07.81

Пункт 3.1.1. Заменить слова и ссылки: «эфир этиловый по ГОСТ 6265-52» на «эфир петролейный по ГОСТ 11992-66», ГОСТ 12487-67 на ГОСТ 20292— 74, ГОСТ 5072-72 на ГОСТ 5072-79, ГОСТ 4201-66 на ГОСТ 4201-79ГОСТ 4204-66 на ГОСТ 4204-77; исключить слова: «по ГОСТ 10028-67», «по ГОСТ 7365-55»;

Пункт 5.1.1. Исключить слова: «или ЛПУ-01 с датчиком ДЛ-01»; заменить ссылки: ГОСТ 12026-66 на ГОСТ 12026-76, ГОСТ 4234-69 на ГОСТ 4234— 77.

Пункт 6.1.1. Заменить ссылки: ГОСТ 4233-66 на ГОСТ 4233-77, ГОСТ 17299-71 на ГОСТ 17299-78.

Пункт 6.2.2. Первый абзац со слов «Затем термометр» и второй абзац до слов «Во вторую пробирку» изложить в новой редакции: «Затем термометр осторожно наклоняют в горизонтальное положение и под углом 5—10° медленно погружают нижний конец резервуара в мелкораздробленный тающий лед и наблюдают за перемещением ртути из верхнего резервуара. При достижении ртути (через 7—10 мин) отметки «0» на шкале термометр осторожно переводят в вертикальное положение резервуара со шкалой вверх. Придерживая термометр левой рукой за верхнюю его треть, коротким, но сравнительно резким ударом пальца правой руки по верхней части термометра добиваются отрыва ртути капилляра от ртути резервуара верхней части термометра. Затем термометр вновь помещают в мелкораздробленный лед и определяют уровень ртутного столбика в капилляре. Если уровень столбика ртути окажется выше цифры 5, то часть ртути, нагревая рукой нижний резервуар, перемещают в верхний резервуар и разрывают столбик также ударом пальца по верхней части термометра; если уровень столбика ртути будет ниже цифры 3, то ртуть перемещают из верхнего резервуара в капилляр способом, указанным выше. Добиваются того, чтобы мениск ртутного столбика в капилляре находился между цифрами 5 и 3. Затем устанавливают нулевую точку на термометре по замерзанию бидистиллированной воды, определяя ее следующим образом».

(Продолжение см. стр. 236) 235

(Продолжение изменения к ГОСТ 20909.5-75

Пункт 6.4.1. Первый абзац, формулу и экспликацию изложить в новой редакции:

«Осмотическое давление спермы при 0°С (Ро) в Па (кгс/см2) вычисляют по формуле

Р0= 1,204 (или 12,04)-Д*.

где At — разность между нулевой точкой на термометре и истинной температурой замерзания спермы, °С;

1,204 — постоянный коэффициент при расчете осмотического давления, Па; 12,04 — постоянный коэффициент при расчете осмотического давления, кгс/см2». Пример. Последний абзац изложить в новой редакции:

«Следовательно, осмотическое давление при 0°С

Р0=1,204(или 12,04).0,66=0,794 МПа (или 7,94 кгс/см2) .

Пункт 6.4.2 изложить в новой редакции:

T0+tn

Т0

«6.4.2. Осмотическое давление спермы при заданной температуре (Рп) в Па (кгс/см2) вычисляют по формуле

Рп

где Т0— температура, соответствующая абсолютному нулю, Г0=273°С;

tп—температура, при которой требуется определить осмотическое давление спермы, °С;

Р0 — осмотическое давление при 0°С, Па (кгс/см2).

273+39

273

Рз9=

Пример. Осмотическое давление спермы при температуре 39°С (Рзэ) составляет

•0,79(или 7,94) =0,91 МПа (или 9,1 кгс/см2)».

Пункт 7.1.1. Заменить ссылку: ГОСТ 4234-69 на ГОСТ 4234-77.

Пункт 7.4.1. Последний абзац изложить в новой редакции:

«За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов трех параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 3 Ом».

(Продолжение см. стр. 237


Пункт 8.1.1. Заменить слова и ссылки: «эфир этиловый по ГОСТ 6265-52» на «эфир петролейный по ГОСТ 11992-66», ГОСТ 8284-67 на ГОСТ 8284—78, ГОСТ 6672-59 на ГОСТ 6672-77, ГОСТ 9412-67 на ГОСТ 9412-77, ГОСТ 4233—66 на ГОСТ 4233-77.

{Продолжение изменения к ГОСТ 20909.5-75)

Пункт 8.2.1. Заменить слова и ссылки: «пипетку градуированную вместимостью 10 мл по ГОСТ 12487-67* на «пипетку градуированную вместимостью 10 мл по ГОСТ 20292-74», после слов «микропипетку вместимостью 0,1 мл*

(Продолжение см. стр. 238)

(Продолжение изменения к ГОСТ 20909.5-75)

исключить слова: «по ГОСТ 12487-67»; ГОСТ 8613-64 на ГОСТ 8613-75, ГОСТ 9412-67 на ГОСТ 9412-77, ГОСТ 12026-66 на ГОСТ 12026-76, ГОСТ 5.1314—72 на ГОСТ 22280-76.

(ИУС № 8 1981 г.)

ГОСТ 20909.5-75 Стр. 3

где U — время прохождения пэ капилляру, спермы, с;

to — время прохождения по капилляру дистиллированной воды, с.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов четырех определений. Допускаемые расхождения между результатами определений не должны превышать ±5%.

Вискозиметр Оствальда

/, 2 — изогнутые трубки; 3 — капиллярная трубка; а — верхняя метка; б — нижняя метка

Черт. 1.

3.4.2. Абсолютную вязкость (Лабе ) в сантипуазах вычисляют по формуле

7)абс^=71итн' "^абс. Н,0,

где Яабс. н,о— абсолютная вязкость воды при температуре проведения испытания, сП.

Пример- Время прохождения дистиллированной воды по капилляру равно 73 с, время прохождения спермы — 120 с.

Следовательно, относительная вязкость спермы =-75= 1.7.

25

Стр. 4 ГОСТ 20909.5-75

Испытание пре води ли при температуре 30°С.

Абсолютная вязкость воды при 30°С равна 0,007 сП.

Следовательно, абсолютная вяз<ость спермы

^=1,7-0,8007=1,3612 сП.

4. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЪЕМА И МАССЫ ЭЯКУЛЯТА

4.1.    Объем эякулята в миллилитрах определяют в градуированных спермэприемниках или мерной стеклянной пипеткой.

4.2.    Массу эякулята в граммах определяют взвешиванием на лабораторных весах марки ВЛТ-500 (ВТК-500) с погрешностью не более ±0,08 г.

5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ВОДОРОДНЫХ ИОНОВ (pH) СПЕРМЫ

Сущность метода заключается в измерении электродного потенциала, возникающего при погружении электрода в сперму.

5.1.    О борудювание, материалы и реактивы

5.1.1.    Для проведения испытания применяют:

потенциометр pH-340 или ЛПУ-01 с датчиком ДЛ-01 или другой

марки того же класса точности;

бумагу фильтровальную по ГОСТ 12026-66;

калий хлористый по ГОСТ 4234-69;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

5.2.    П од гот о в к а к испытанию

5.2.1.    Перед проведением испытания производят подготовку, проверку н настройку потенциометра в соответствии с правилами по его эксплуатации. Показания шкалы прибора проверяют по стандартным буферным растворам и корректируют шкалу прибора.

5.3.    Проведение испытания

5.3.1.    Внутреннюю поверхность полиэтиленового ссс>ца и стеклянный электрод тщательно промывают струей дисгиллированной воды и осушают кусочком фильтровальной бумаги. В полиэтиленовый сосуд вносят 0,35—0,5 мл спермы, присоединяют его к стеклянному электроду и отсчитывают показания шкалы прибора.

5.4.    Обработка результатов

5.4.1.    За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух определений. Допускаемые расхождения между результатами двух определений не должны превышать ±0,1 ед. pH.

6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСМОТИЧЕСКОГО ДАВЛЕНИЯ СПЕРМЫ

Сущность метода заключается в установлении разности температур в точке таяния льда и в точке истинной кристаллизации спермы.

26

ГОСТ 20909.5-75 Стр. 5

6.1.    Оборудование и реактивы

6.1.1.    Для проведения испытания применяют: термометр Бекмана;

проволочную мешалку с петлей, входящей в пробирку диаметром 1,4—1,7 см;

штатив лабораторный; кольца резиновые толщиной 2—3 мм; лупу с увеличением 8—10 х; термос пищевой; лед или снег;

углекислоту твердую (сухой лед) или азот жидкий по ГОСТ 9293-74 или натрий хлористый по ГОСТ 4233-66; спирт этиловый технический по ГОСТ 17299-71; воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

6.2. Подготовка к испытанию

6.2.1.    Готовят термос (ванну) с одной из следующих охлаждающих смесей:

а)    лед с поваренной солью в соотношении 3:1;

б)    смесь спирта с сухим льдом;

в)    спирт, охлажденный пропусканием через змеевик паров жидкого азота.

Температура в термосе (ванне) должна постоянно поддерживаться минус 38—40ЬС.

6.2.2.    Перед началом испытания проводят градуировку термометра, устанавливая на нем нулевую точку. Для этого термометр Бекмана вначале помещают в мелкораздробленный тающий лед или снег и наблюдают уровень ртути в капилляре. Если уровень ртути окажется в нижней части шкалы или ниже делений шкалы термометра, добавляют ртуть из верхнего резервуара. С этой целью термометр переворачивают и нагревают рукой нижний резервуар с ртутью до тех пор, пока ртуть капилляра не соединится с ртутным столбиком верхнего резервуара. Затем термометр медленно охлаждают до 2—3°С, погрузив его на 7—10 мин в воду со льдом.

Придерживая тоэмометр правой рукой за верхнюю его треть, коротким, но сравнительно сильным ударом верхней части термометра по большому или указательному пальцу левой руки отрывают излишнюю ртуть от ртутного столбика верхнего резервуара, стараясь разорвать столбик ртути в месте соединения капилляра с верхним резервуаром. Затем термометр вновь помещают в мелкораздробленный лед и определяют уровень ртутного столбика. Повторяют это до тех пор, пока верхний мениск ртутного столбика в капилляре при температуре таяния льда не будет находиться в верхней части шкалы между 3—5°С. Затем нулевую точку на термометре устанавливают по точке замерзания бидисталированной воды, которую определяют следующим образом. Закрепляют на штативе пробирку диаметром 2,2—2,5 см. Во вторую пробирку

27

Стр. 6 ГОСТ 2WW.5—75

меньшего диаметра наливают бидистиллирсванную воду в таком объеме, чтобы после введения в пробирку термометра Бекмана с надетой на него проволочной мешалкой его ртутный резервуар был полностью погружен в воду. На пробирку с термометром и бидистиллирозанной водой надевают два резиновых кольца и подготовленную таким образом пробирку с термометром вставляют в пробирку, закрепленную в штативе. Прпбирки с термометром опускают в термос (ванну) с охлаждающей смесью. В процессе охлаждения воду беспрерывно помешивают вертикальными движениями мешалки, постоянно наблюдая за понижением уровня ртути в капилляре. При переохлажден ги воды начинает выделяться теплота кристаллизации и столбик ртути быстро поднимается до истинной температуры замерзания веды, оставаясь некоторое время на этом уровне. Температуру замерзания воды отмечают и записывают с погрешностью не более 0,01°С. Определение повторяют. Для этого пробирку с водой отогревают в руке и вновь устанавливают точку замерзания воды.

За окончательный результат принимают ореднее арифметическое результатов трех определений. Допускаемые расхождения между результатами определений не должны превышать 0,01°С.

6.3.    Проведение испытания

6.3.1.    В промытую и тщательно подсушенную фильтровальной бумагой пробирку наливают сперму в таком количестве, чтобы ртутный резервуар термометра Бекмана был полностью погружен в нее. Пробирку с термостатом помещают во вторую пробирку, закрепленную в штативе. Температуру замерзания спермы устанавливают по п. 6.2.2.

При определении осмотического давления разных эякулятов пробирку и термометр после каждого испытания тщательно ополаскивают дистиллированной водой и просушивают.

6.4.    О б р а б отк а результатов

6.4.1.    Осмотическое давление спермы при 0°С (Ро) в гаскалях вычисляют по формуле

Я0 = 1,204-А/,

где A t — разность между нулевой точкой на термометре и истинной температурой замерзания спермы, °С;

1,204 — постоянный коэффициент.

Пример. Нулевая точка на термометре Бекмана установлена 4,46°С.

После трехкратного измерения истинная температура замерзания спермы составляла 3,80; 3,81; 3,80°С;

Среднее арифметическое — 3,80°С.

Разность температур А /=4,46—3,80=0,66°С.

Следовательно, осмотическое давление спермы при 0вС Ро~ = 1,204 • 0,66=0,794 МПа.

28

ГОСТ 20909.5-75 Стр. 7

6.4.2. Осмотическое давление спермы при заданной температуре (Рп ) в паскалях вычисляют по формуле

D _ ^0 + п

г П—    '    ^о»

где Т0 — температура, соответствующая абсолютному нулю, 7о= = 237°С;

t п — температура, при котсрой требуется определить осмотическое давление спермы, °С;

Ро — осмотическое давление при 0°С, Па.

Пример. Осмотическое давление спермы при температуре 39°С (Р39) составляет

Рзв= 27^39" 0,794= 0,91 МПа

7 ОПРЕДЕЛЕНИЕ УДЕЛЬНОЙ ЭЛЕКТРИЧЕСКОЙ ПРОВОДИМОСТИ СПЕРМЫ

Сущность метода заключается в определении отношения константы электродного сосуда к сопротивлению спермы.

7.1.    Оборудование и реактивы

7.1.1.    Для проведения испытания применяют:

установку для определения электропроводности (см. черт. 2);

баню водяную или термостат;

калий хлористый по ГОСТ 4234-69, 0,02 н. раствор;

воду дистиллированную по ГОСТ 6709-72.

7.2. Подготовка к испытанию

7.2.1.    Определение сопротивления 0,02 н. раствора хлористого калия

В электродный сосуд, промытый несколько раз дистиллированной водой, наливают 0,02 н. раствор хлористого калия до полного погружения электродов. Электродный сосуд помещают ъ термостат или в водяную баню с температурой от 20 до 25*0,1°С. Через 10—15 мин приступают к определению. Для этого подключают провод от штепселя звукового !енератора к зажимам на концах реохорда, замыкая первую цепь. Вторая цепь состоит из сопротивления раствора хлористого калия в электродном сосуде и сопротивления, набранного в магазине сопротивления. Передвигая подвижной контакт по проволоке реохорда, находят такое положение контакта, когда нуль-индикатор покажет отсутствие тока в мостике, перекинутом между первой и второй цепью.

По миллиметровой линейке устанавливают длину отрезка проволоки от начала реохорда до подвижного контакта.

7.3 Проведение испытания

7.3.1.    Электродный сосуд тщательно промывают дистиллированной водой и затем наливают в него сперму до полного погружения в нее электродов. Сопротивление спермы определяют по п. 7.2.1.

29

Стр. 8 ГОСТ 20909J—75

7.4. О б р а б от ка результатов

7.4.1.    Электрическое сопротивление 0,02 н. раствора хлористого калия (Rк ) и спермы (Rc) в омах вычисляют по формуле

*.(Яс)=Я- looo—i ’

где R — сопротивление магазина, подключенного в схему установки, Ом;

I — длина отрезка проволоки от начала реохорда до подвижного контакта, мм.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов трех определений .Допускаемые расхождения между результатами определений не должны превышать ±5%.

7.4.2.    Удельную электрическую проводимость 0,02 н. раствора хлористого калия (к) в сименсах на метр определяют по табл. 1.

Таблица 1

Температура раствора хло

к

ристого калия, °С

20

0,002501

21

0,002553

22

0,002606

23

0,002659

24

0,002712

25

0,002765

Установка для определения электропроводности

ГОСТ 20909.5-75 Стр. 9

7.4.3.    Константу электродного сосуда (К) вычисляют по формуле

K~Rk‘ *к,

где R к— электрическое сопротивление 0,02 и. раствора хлористого калия, Ом;

ик — удельная эле ктри че ская провод а месть 0,02 н. раствора хлористого калия. См/м.

Вычисление производят до третьего знака.

7.4.4.    Удельную электрическую проводимость спермы ( хс) а сименсах на метр вычисляют по фермуле

Дс *

где К — константа электр однотс сссуда;

Rc —сопротивление спермы, Ом.

Вычисление производят до третьего знака.

Допускаемые расхождения между результатами контрольных испытаний не должны превышать ±5%.

8. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ СПЕРМИЕВ В СПЕРМЕ

Концентрацию спермиев в сперме определяют в счетных камерах или при помощи фотоэлектроколсриметра.

8.1.    Метод определения концентрации слерми-ев в счетной камере

Сущность метода заключается в подсчете спермиев в счетной камере для ферменных элементов крови.

8.1.1.    Оборудование, материалы и реактивы Для грсведения испытания применяют:

микроскоп биологический марки МБИ или МБР по ГОСТ 8284-67;

камеру счетную Горяева для определения количества форменных элементов крови;

баллон резиновый или шары от пульверизатора;

эритроцитный смеситель (меланжер);

стекла шлифованные покровные по ГОСТ 6672-69;

салфетки марлевые по ГОСТ 9412— S7;

натрий хлористый по ГОСТ 4233-66, 3%-ный раствор;

спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5S62—67;

эфир этиловый по ГОСТ 6265-52.

8.1.2.    Проведение испытания

Сперму тщательно перемешивают и набирают до метки «1» в предварительно обработанной смесью спирта и зфира в соотношении 1:1 и высушенный меланжер.

Для разбавления спермы и умертвления спермиев в меланжер вводят до метки «101» 3%-ный раствор хлористого натрия (разбавление спермы в 100 раз). К 3%-нсму раствору хлористого натрия можно добавить краску и проводить свдовременно подсчет

31

Стр. 10 ГОСТ 20909.5-75

патологических форм по ГОСТ 20909.3-75.

Зажав большим и указательным пальцами оба конца наполненного меланжера, тщательно перемешивают содержимое, переворачивая меланжер вверх и вниз не менее 60 раз.

Удалив из меланжера первые три-четыре капли, кончик меланжера обтирают марлевой салфеткой и осторожно наносят одну каплю смеси на край притертого к счетной камере шлифованного покровного стекла. Капля, затекая под стекло, заполняет камеру Горяева.

Подсчет спермиев производят при таком увеличении микроскопа, чтобы в поле зрения помещалось 16 малых (один большой) квадратов (окуляр 7х, объектив 40х или окуляр 15х, объектив 20х). Спермин подсчитывают в 80 малых (5 больших) квадратах, расположенных по диагонали.

Для подсчета спермиев, расположенных в глубине камеры, постоянно вращают микро винт. Положение спермиев внутри или вне квадрата определяют по месту нахождения головки. Головки, расположенные на левой и верхней линиях, относят к тому квадрату, в котором производят подсчет. Головки можно также учитывать на правой и нижней линиях.

8.1.3. Обработка результатов

Концентрацию спермиев (С) в млрд/мл спермы вычисляют по формуле

р п-Д-F ~N р 1000000 *

где N — количество малых квадратов, в которых производился подсчет спермиев; п — количество подсчитанных спермиев;

Д — разведение спермы в меланжере;

F — площадь одного малого квадрата, м,м2; р — глубина камеры, мм;

1000000 — коэффициент пересчета количества спермиев в млрд/мл.

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух определений. Допускаемые расхождения между результатами определений не должны превышать ± 10% •

Пример. В пяти больших квадратах насчитали 17+28+22+16+ + 17= 1С0 спермиев.

Следовательно, концентрация спермиев в одном миллилитре

п 100-100-400 Л -    ,

^ “80-0,1-юооооо -0,5 млрд/мл.

8.2. Метод определения концентрации спермиев при помощи фотоэлектроколориметра

Сущность метода заключается в определении оптической плот-

32