Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1 

22 страницы

258.00 ₽

Купить РД 39-23-749-82 — бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль"

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Руководящий документ устанавливает правила и последовательность определения биоразлагаемости немоногенных поверхностно-активных веществ под действием пластовой микрофлоры.

 Скачать PDF

Оглавление

1 Общие положения

2 Цель и последовательность определения

3 Приборы, оборудование и реактивы

4 Определение степени разрушения

5 Основные правила техники безопасности при работе с микроорганизмами, неионогенными ПАВ

Приложение 1 6 Методика определения общего количества микроорганизмов в пластовой воде

Приложение 2 7 Составы питательных сред

Приложение 3 8 Определение концентрации ПАВ

Список литературы

Нормативные ссылки:
Стр. 1
стр. 1
Стр. 2
стр. 2
Стр. 3
стр. 3
Стр. 4
стр. 4
Стр. 5
стр. 5
Стр. 6
стр. 6
Стр. 7
стр. 7
Стр. 8
стр. 8
Стр. 9
стр. 9
Стр. 10
стр. 10
Стр. 11
стр. 11
Стр. 12
стр. 12
Стр. 13
стр. 13
Стр. 14
стр. 14
Стр. 15
стр. 15
Стр. 16
стр. 16
Стр. 17
стр. 17
Стр. 18
стр. 18
Стр. 19
стр. 19
Стр. 20
стр. 20
Стр. 21
стр. 21
Стр. 22
стр. 22

Ишшстерзхяо нефтяной промышленности

Проязтюлстпопное ордена Ленина я ордена трудового Красного Знаыояя объединение Башнефть

Башкирский гооударотвеиккй н&упно-иссладозательсклй я проектный институт нефтяной поошлплеаности


..ЛЙ8§

■лт


Г'Г./Ш


чЖ'Л

V 0Щ

* ' -V у,^ л.<^


- %ш*


/йФ


МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОРАЗЛАГАЕМОСТИ НЕИ0Н0ГЕННЫ1 ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ПОД ДЕЙСТВИЕМ ПЛАСТОВОЙ МИКРОФЛОРЫ

РД 39-25-749-82


F/jgm


■ -'4‘VvLi


'Г-'f




1Q&2


ШКСТёРСТВО НЕФТЯНОЙ ПРОШШШКНОСТИ


Утверждаю:

Закестьтел^Г Монстра нефтяной промышленности

' '"""В.КЛЗдии

U\\- "//-«    1932    г.


РУКОВОДЯЩИЙ ДОКУмЕИТ


Методика с пределен ия бкора зл&га е кости неионогениых повар я-ностно-активных веществ под действием пластовой микрофлоры

РД 39" 23-7^*9-82


Настоящий документ разработан:

Башкирским государственным научно-исследездтспскич а про ектним институтом н ewmofl. пр о мишл енн ост и ( Б &шк ипиие^&гь)

Директор* ю.нд .техи *иаук,'/ч&Ух*''* т + Н Л'.Кагпрмгно»

•    •    .    Л    V,    *    ч    .

Ответственные испслпит^ли:^/^^

7р.х.:

Ст. инженер    ........

Инженер


.Ха эи нов Н.ЗЛ(даноЕа 3«Н«Кравчук


Согласовано:


■:хлЯи.,>:

Ч A*v 44;\?V\*



Замдиректора Всесоюзного нео.тега^ового научио-исо-


ледов ателье кого института (&ШЬ) » Д-Р те хн «наук    *

Замдиректора Кнститу^а//■'*    *    о//

бИОХИМИИ И ФИЗИОЛОГИИ ':^w‘ '    ’ М,?////

микроорганизмов АН СССР/ ••    r/rfrr

чяс/икЪрр. All СССР у*. Л Ql4{i.f М.В.Ив — »• ,


Л «Сургуче-


анов


Начальник Технического Управления М1\


оим.начальника Управления по повышению нефтеотдачи пластов


К •Н.юайдихов

В«Д«ЦОСКЬИН


8

В исследуемой пробе через каждые 10 оутох определяются поверхностное натяжение, концентрация ПАВ, концентрация водородных ионов (pH) и окиолительно~восотановителы1ый потенциал. (0ЕП)..

Стер» гиэаиия контроля проводится путем введения в пробы формалина в количестве 0*05»0,10 %» Вышеуказанная концентрация в лабораторных условиях полностью подавляет жизнедеятельность бактерий и в настоящей методике проверяется путем контрольных посевов на вышеуказанные три физиологические группы до начала и по истечении 30 суток.

Выбор формалина для сторилкзации обусловлен также тем, что он в концентрациях 0,005-0,10 % не изменяет поверхностной активности й едзороцин ПАЗ типа СП-10.

4,4. Подученные результаты записывают в виде, таблицы и сравнивают о данными контрольных опытов.

Накмено-[Поверхностное натяжение! Койцеитрация ПАВ, !Ст*пень *а«ие !    ^/*2    wn/в    !биораз-

оооазиа -1- - — - ^ - — ----—!----—    --— — — ! рушения

ЛАВ ! В^емя^ сутки ! Время, сутки    ! %

& ыЫ 10 1    Гго    Y_30~ I

4.5.    Степень бт> разрушения (х), в %ь за истекший период определяет по формуле:

„ . ССх2>тоо

х --- .

С1

1де (> X - степень био разрушения,

Cj и С*2 - концентрация ПАВ соответственно до начала к после опыта, «?/д.

4.6.    Данные Пс бактериальной зараженности ^деторождения, литеры активности и концентрации химачеокогб продукта учитываются при применении или выборе того иди иного типа ПАВ для увеличения нефтеотдачи пластов конкретного ноотороадепия, При обком высоком содержании бактерий в закачиваемых пластовых водах лосиедько использовать реа:ект с низкой степенью биораэруве-нъа. При наличии высокоэффективных ПАВ, не удовлетворяющих

9

ото му требование, необходимо применять их о учетов микробиологических факторов,

5. ОСНОВНЫЕ ПРАВИЛА ТЕХНИКИ БЕЗОПАСНОСТИ ПРИ РАБОТЕ С МИКРООРГАНИЗМАМ НЕИОНОГЕННШИ ПАВ

5*1, Правила работы в микробиологической лаборатории:

-    работа с любыми микроорганизмам требует обязательного наличия Халатов н колпаков или кооынок, а также сизиной обуви;

-    необходимо следить за тем, чтобы бактериальная масса не вагрязняла руки, стол, окружающие предметы;

• ватные пробки, закрывающие оооуды с микроорганизмами, не должны своей внутренней поверхностью соприкасаться со столом или руками;

-    если пролилась микробная взвеоь, необходимо обезвредить её, используя дезинфицирующие о ре детва, напримзр, карболовую кислоту;

-    вою лабораторную посуду, содержавшую живые микроорганизмы, после работы необходимо подвергнуть термической обработке в автоклаве;

-    выносить микробные культуры за пределы лаборатории soilрешаете я;

-    при работе о любыми микро рсаниэмами необходимо о трог о Соблюдать личную гигиену, соблюдать чистоту на рабочем месте,

5.2, Мзры безопасности при работе с едкими веществами (минеральными кислотами и их твердыми и жидкими ангидридами, едким кали и натром, раствором аммиака и т,д,):

-    для предотвращения ожогов вое работы о едкими г^щеотда-IM необходимо проводить в защитной спецодежде и пользоваться очками и перчатками;

-    при приготовлении растворов оерной кислоты необходимо использовать тонкостенную отеклякную иди фарфоровую посуду, поливать кислоту к воде следует тонкой струей при непрерывном помешивании, чтобы не было иеотнохо’перегрзва, растрескивания отекл и выброса кислоты.

10

-    запрещается совместное хранение концентрированных кио-

лот v легхсвосплпменяшщихоя жидкостей;

-    переливать кислоту и щелочи из бутылей в мелку*» тару следует при помощи сифона или ручных насосов различной конструкции;

-    разлитые кислоты или щелочи необходимо немедленно засыпать песком, нейтрализовать и лишь после этого проводить убор-

ку.

5.3* При работе с неионогенными ПАВ типа ОП-Ю необходимо выполнять олсдумпие правила:

-    при работе с концентрированными препаратами ПАВ необходим? пользоваться защитными очками или прозрачными щиткам! для защиты глаз и Йояи лица;

-    при попадании ПАВ на коку или глаза омыть обильным количеством воды;

-    зггрязченкуо ПАВ одевду тщательно прополоохать теплой водой, до исчезновения пены;

•- запрещается применять ПАВ в качестве моющего средства для мытья рук, лица иди стирки одежды»

II

приложент I

обязательное

6. №ТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИИ ОБЩЕГО КШЧКТВА МИКРООЕГАНИЗМЭВ В ПЛАСТОВА ВОДЕ

Ход работы:

Сущность метода заключается в концентрировании бактерий из определенною объеме анализируемой боды на мембранный фильтр, окраске и просмотра под микроскопом.

Подготовка к работе мембранных фильтров производится еле* дующим образом: мембранные фильтры #2. Ю, проверенные на отсутствие трещин, отверстий и т.п., помещают по одному на поверхность дистиллированной воды, нагретой до 60°С в стакане, и медленно доводят до кипения на слабом огне и выдерживают в течение КЫГ* мил. Смену воды и последующее кипячение повторяют до полною удаления остатков растворителей из фильтров (>5 раз), после че!о они готовы к работе. Подготовленные фильтры сохранялся оухими или в широкогорлой банке с дистиллированной водой. Переда употреблением фильтры стерилизуются кипячением в дистиллированной воде.

Подготовка фильтровальное аппарата к анализу: фильтровальный аппарат стерилизуют фламбироманием после обтирания ватным тампоном, смоченным спиртом. После охлаждения на нижнюю часть аппарата (столик) кладут флаыбированным пинцетом стсрил>"ий мембранный фильтр, прижимают его верхней частью прибора и закрепляют устройством, предусмотренным конструкцией прибора.

Фильтрование воды: перед анализом проба в пробирке тщательно взбалтывается и о тс таивиетоя в течение 5-10 мин. для отделения нефти от плаотовой воды. Затем, не взбалтывая, стерильной пипеткой из н ид ней части пробирки отбирается 3-10 мл Пластовой воды в зависимости от содержания мцкроорхакизмоа. Затем, пробы фильтруются.

Фильтр о осевшими на ном микроорганизмам выоуоивавтоя на фильтровальной бумаге при комнаткой тежературе или в термоота-

12

те. Для удаления ооадка фильтры обрабатывают O.I процентным ре-

отвсроч соляной кислоты.

^кроорганизмы на фильтре фиксируются формалином и после прооуики окрасиваютоя эритрозином в течение 20-30 мин. (время подбирается экспериментально)* после чего фильтр промывают в дистиллированной воде до прекращения окраски новых порций воды.

Окропенные фильтры высушивается, помещается На предметное отекло в каплю иммерсионного масла* покрывается покровным стендом и просчитываются под микроскопом с окулярным сетчатым микрометром. Просчитывается 20~Ю квадратов сетки с площадью не менее 300 «к*?*

В каждом ноле зрения просчитывал тс я бактерии в Ц маленьких квадратах* расположенных по диагонали. Содержание бактерий не должно превышать 30 в каждом квадрате» но не менее 2-5.

Окончательный подсчет бактерий в I мд пластовой воды производится по формуле:

у . 31R* 10*6

асе

Где X - количество бактерий в I кд;

R - радиус фильтрующей поверхности мембранного фильтра, ом;

I03- переводной коэффициент;

в - чиоло бактерий в полях зрения;

а- число полей зрения;

С - плозтдь поля зрения, мк)?;

О - количество профильтрованной воды* мд;

С-ибхп определения может заключаться в субьективном учете микроорганизмов исследователем. Крок того, необходимо учесть* что частицы отличаются от микроорганизмов тем* что они или не воспринимают окраску, или бесформенны, Бактерии в основном имеют фор;<у палочек или кокков и окрашены в красный цвет. Средняя ошибка прямого счета зависит от числа просчитываемых полей зрения и колеблется в пределах 2*8 - Ю£*

13


ПРИЛОЖЕНИЕ 2 обязательное


7. СОСТАВУ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД

Для качественною выявления о.дельна физиологичеоких групп бактерий использует жидкие питательные средых Поотгейта -для оу-

дьфатвооотанавливающмх, Норенкодой -для угдеводородокиодявщих, Баркера -для метано о бразуеших.

.'41кроорханиэмы 1 Питательные ! Признаки роста на оредах

| О роди |

Сульфатвосс такав-    л лл _вИ_

ливаьщие бактерии Пооттейта

Уг леводо родо кио-    Коронковой

лдощие бактерии

Мзтанообразусцие Баркера бактерии


Почеонение ореды о образованием сульфида железа

По толщине бактериальной пленки, помутнение ореды и *#«кро-окопированием

По наличию пленки, осадка, помутнение ореды* По образовании метана в количестве не менее

ПО'2* об.


7.1. Соотав орвди Поотгейта ( pH -7,0 -7,5 )

Соединение

j Химическая формула

| Фличеотво, r

Фоофо рно кислый кадий одно замещенный

КНгРО<

0.5

Хлористый аммоний

NH<C1

1.0

Сбрнокиолый кальций

CaS04

1.0

Серкокиолый магний

Mg SO*

1.0

Лдочкокиодый натрий

CHjCHQHCOONa

3.5

Хлористый натрий

NaCl

9.5

Вола водопроводная

I 000,0

1%


Добавки:

5-процентный раствор дрожжевого ввтолизата - 1,0 г/л; 5-проиентный раствор FcS0<b однопроцентной HCI - 0,5 х/л; 5-процентный раствор аскорбиновой кислоты - 1,0 г/л I-процентный paCTBopN.v$B однопроцентномNtyCO*- вносить по 1-2 капли до образования серохо цвета.

Для корректировки pH среды используют 5-процентный раствор HCI и МлНСО/.


7,2. Состав среды Норенковой.

Соединение j

Химическая формула

] Количество,

Фосфорнокислый аммоний двухзамевенный

М2нроа

1.0

Хлористый аммоний

nh4c<

0.2

фосфорнокислый калий дВу*х?аиешенный

КгНР0„

0,25

Фосфорнокислый калий однозомгщенный

КН2Р0А

0,25

Сернокислый магний

MgSO*

0,02

Соль М п

0,01

.4>либдат аммония Нефть

.(NH^Mo04

0,0052

5,0

Хлористый кальций

CaCl:

0,01

Вода водопроводная

I 000,0

7,3. Состав среды Баркера ( pH *7,0 )


Соединение


j Химическая формула [ Количество, г


Хлористый аммоний

фосфорю кислый калий двухэаысаенный

Хлористый нагний Органическое вещество

Бода дистиллированная


NH^Gi

К2НР0А


МдС^


ОД

0,СН 0,01 1-2 I 000,0


15

Перед посевом о роду кипятят для удаления растворенных га* вов и, охлади», дрбавляот 3 процента по объо^ раствора» содержащего 1% NctjS » 5 процентном NaHCO*, стерилизованного в автоклавов Добавлением отарильного раствора ооляиой кислоты устанавливают p!i -7.0» В качество субстрата нопользуат ацетат или маолдаь иур кислоту или «этанол. Выделение чнотыд культур проводят на агаризоваккой ореде указанного состава. Пробирки о заотьвэвй средой заливает омерьи равных частей парафина и вазелинового масла, чтобы предохранить от вьюыхания и проникновения воздуха.

16


ПРИШВИНЕ 3 обязательное

6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ПАВ

Для определения концентрации ПАВ рекомендуется колориметрии чеокий метод о фоофорноводьфроиовой кислотой.

8.1* Колориметрический метод о фосфорновольфраювой кислоте й-гндрохиноновая модификация. Этот метод применим для определения ПАЗ в пределах концентрации от I до 25 мг/л при объеме используемой для исследования исходной пробц равном 10 мл.

Определение основано на осаждении ПАВ в виде комплексного соединения с фосфор»^вольфрамовой кислотой и хлористым бпеием, который в концентрированной оерной кислоте дает с гидрохиноном крлоио-коричневую окраску. Интенсивность окраски определяется визуально или при помощи фотоколориметра ( Д *500 «М, кювета -0,5 чти 1,0 о К). Определению мешают сульфаты при концентрации их более 200 mi/л» их влияние устраняется путем разбавления пробы»

8.2. Аппаратура н стеклянная посуда: фотокодориметр ( Д * •500 нМ), кюветы 0,5-1,0 оМ, центрифуга, пробирки центрифуги

емкое тьв 20мд.

б.З*. ^Активы:

U соляная кислота ч.д.а. раствор 1:1;

2. хлористый барий, 10-проиентиый раотвор;

Р

%    ^вольфрамовая    кислота    ч.д.а.» 2-лроцентный

А. серная кнолота ч.д.а.» уд.воо 1,6^ ;

5» гидрохинон, 5-процентный раствор в оерной кислоте;

6.    основной эталонный раотвор ПАВ: растворить £ г ПАВ в мерной колбе на I л и долить до метки дистиллированной 1чздой ( I мл раствора*содержит £ кг ПАВ);

7.    рабочий раствор ПАВ; дополнить £0 мл ооновкого раствора ПАЗ, содержащего я в мерной холбе, дистиллированной кодой до объема 100 мл ( I мк раствора содержит ОД мг 1Ш). Приготавливать раствор в день проведения анализа.

17

8.4.    Шкала стандартов. В семь пробирок центрифуги последовательно отмеривает следующие количества рабочего стандартного раствора ПАВ: 0; 0,2; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5 мл, что соответствует веоивым количествам от 0 до 0,25 мт ПАВ в пробе. Дополнить содержимое пробирок дистиллированной водой до 10 мд, а затем поступать так, как указано в описании хода определения, начиная о добавления 2 капель соляной кислоты.

Шкала стандартов является нестойкой и стандарты для визуального определения следует приготавливать одновременно о после* дуемой пробой. При фото колориметрическом определении использовать приготовленные стандарты для вычерчивания калибровочного графика, откладывая по оси абсцисс концентрацию ПАВ, а по оои ординат -оптическую плотность.

8.5.    Ход определения* Отмерить в пробирку центрифуги 10 мж или иное количество исследуемой пробы, соответственно концентрированной или разбавленной с таким расчетом, чтобы содеркание не* ионогенного ПАВ в пробе находилось в пределах от 0 до 0,25 иг. Добавить 2 кгпли соляной кислоты ( 1:1 ), I мл растворе хлористого бария и I мд раствора фосфо pro вольфрамовой кислоты, перемещать тонкой стеклянной палочкой (пользуясь ею в дальнейшем для проведения опыта).

Поместить пробирку с иооледуемой пробой и стандарты в химический отакан о кипящей водой и нагревать в течение 15 мин., поддерживал воду в стакане в состаянии кипения. Затем, вынуть пробирки и отцентрифугировать осадок в течение 5 мин. при скорости Вращения 2500 -3000 rtnf*. Образовавшийся над ооадком одой жидкооти осторожно слить, добавить в пробирки по 2 мд горячей дистиллированной воды, перемешать палочкой и снова центрифугировать, «:ак указано вше.

Жидкость слить, как в предыдущем случае, еще раз добавить по 2 мл горячей воды, перемешать, отцаитрифугировать и еще раз слить, Ооадок высушить в сушильном шкафу при 105*110 °С. Добавить в пробирки о осадком по 3 мл концентрированной серной кио-

ржоводйиИ докшнт

«ШИКА ШРЕДЕДЕНИгТ БГОРЛЗДЛГJEМОСТИ НЕИОНОГЕННЫК ПОВЕРХНОСТНО-ДХГИВНИС ВЕЩЕСТВ ПОД ДЕЙСТВИЕМ П1ЛСТОВОЯ ШКРЮДОРЫ

И 39-23-749-82

Вводите* впервые

Приказом Нснистеротва нефтяной проышденнооти от 01*10.82

» 3X5

Срок введения установлен о 01*11.82

Настояний руководящий документ устанавливает правила N последовательное ть определения биораэдагаемсоти иеионогенных поверхностно-активных веществ под действием пластовой микрофлоры.

Существующие методики оценки отепени биохитчеокого распада ПЛЗ Cl] разработки для условия аэротенков, для оиоте^ очно-тки с точи их вод* Данная методика составлена о цель» изучения биораэруяения, применяемых в настоящее время и новых непокорен-кмх ПАВ, под действием плаотовой микрофлоры и разработки мероприятий по их бактерицидной иди иной защите от бноповреддошй»

18

доты, перемешать и после полного растворения осадка добавить по 1 К1 раствора гидрохинона и перемешать. Содержимое пробирок дополнить концентрированно!) оеркой кислотой до объема 10 юг и перемешать.

Опус?# 15 мая* визуально определить ннтононвноотъ окраокм пробы путем сравнения оо шкалой о тан да ртов или определить значение окотинкцик и отсчитать содержание ПАВ по калибровочному графику, учитывая пол разку на контрольно пробу. Результаты пересчитать на I л исследуемой пробы.

АННОТАЦИЯ

Наатолчея методика предназначена для определения степени биораэруиения неионогенных поверхноотао-аггмвных веществ (ПАВ) под действием Пластовой микрофлоры о целы) оценки перспективности их применения для увеличения нефтеотдачи* разработки мероприятия по предотвращения биопов рождения я расхода реагента и повышения эффективности процесса добичи нефти путей закачки и пласт водных растворов ПАВ.

Мзтодика предназначена для использования научно-иоолодо-Ватедъскими и производственными организациями* зачимавщимкоя вопросами разработки нефтяных месторождений о применением водных растворов ПАВ.

Данная методика разработана во исполнение протокола § I заседания секции научно-технических проблем внедрения хида-

чеокнх продуктов и нефтяной и газовой проиывлешюстн Научного совета по проблемам нефти и Газа ГКНТ СМ СССР от 07.12.77г., рекомендации ГКНТ СМ СССР В 6-7/04 от 07.02.7Б г. и решения Центральной ко миссии Й 605 от 21.02.79 г.* обсуждена на заседании Хчеиого совета института БаиШЛИнефть и рекомендована к утверждены» в качестве руководящего документа. Проблема

0.Ц.015* подпрограмма 0.П.05.Ц зтап М2б. (постановление ГКНТ й 492 от 8.12.82).

г

1.    ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

1*1* Одних из требований к КЛАВ* применяема* для увеличения нефтеотдачи, о точки зрения охраны окружающей среды, является повысеиная био разлагаемость.

1.2.    При выэоксй бактериальной зароаеннссти {[21 пластовых вод бюдогичеокн *мягкие" ШАВ могут подвергаться биопоз-реждеким, в результате которого снижается к* поверхностная активность и концентрация. Псзтому» одним из новых требований предъявляемых к КЛАВ является опоеобкость сохранять длительное время технологически* свойства к заданную концентрацию в условиях применения на промыслах.

1.3.    Лабораторные исодедования(виполненные при разработке данной методики в Бавжшииефти показали, что под действием микрофлоры содержащейся в пробех,отобранных из призабойных зон нагнетательных скважин^ онкжазтз я концентрация и поверхностная активность ШЛВ^Э ) типа ОД-10, 2BI3I7-I2, АФ-14 С31.

2.    ЦЕЛЬ И ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ОПРЕДЕЛЕНИЯ

2.1. Целью проводимых испытаний является определение величины йэмегмыя поверхностной ахтивностк и концентрации неио-ног*'нных ПАВ под действием микроорганизмов нефтяных месторождений*

2.2* Испытаниям могут быть подвергнуты практически все основные типы иеконогеннкх ПАВ £*] * Технология применения не-ионогаиныч ПАВ для увеличения нефтеотдачи пластов и фиэико-хи-мкчес/йе свойства некоторых из них представлены в РД 39-I-I99--75 [5].

2.3* До начала испытаний проводится определение бактериальной зараженности меотороддеиия, для чего осущеотвлязт отбор проб для анализов из водоводов на кустовой насосной станции (KiO), из уотьев нагнетательных н эксплуатационных скважин.

3

Из нагнетательной скважины отбор проб пластовой воды к :ег про-наводится методом оамоиэлиаа иди с использование и глубинных насосов.

2*4. Для относительной оценки бактериальной зараженности добываемых вод и дальнейшего испытания но настоящей методике ре попаду его я определить общее количество микроорганизмов и наличие трех физиологически,, групп бактерий ( СЙБ, игтаиообразу-вщих и углеиодородокиедямих). Краткая характерно гика 3 групп бактерий» рекомендуемых для экспериментального определения с цедьа оценки и контроля бактериальной зараженности» описала в литературе £3 6. 7] . При возможности для контроля наличия ккэпбопособник клеток югут быть определены и другие группы микроорганизмов»

2*5. Общее количество бактерий в I к» жидкоотн определяет» о я микроокопированием (приложение I).

2.6» Для количественного учета бактерий используют и*тод предельных разведений [в } • Для этого готовят пообиркн о 9 ил стерильной водоправедгой воды* Пробирки нумеруют. Сторидыой пипеткой берут I ил наследуемой воды и вносят в пробирку ft I о 9 мл стерильной воды» обжигая при этом гордого пробирки рад пламенем спиртовки (разведешь будет 1:10 )• Затаи» после перемешивания в течение.! мин» свежей эторилмюН пипеткой берут £ мл из пробирки ft X и вносят в пробирку ft 2 (ра^аеленна будет. 1:100 )* Таким же образом готовят разведения 1:1 ООО» 1 s 10 ООО И т.д* Каждое разведение пкоовеют в трек ьовтлрноетжх в пробирках о питательной оредой о юр ильной пипеткой и термостаты-руст при 20°0.

Для определения и подсчота наиболее ворэетного гчюда микроорганизмов в I мл используют таблиц Мав-Кредн *

2.7. Подготовку шпагальзих сред желательно прэподняо в спецнолмэировоиннк организации?*. Готовят «завес дм шпатодмт сред# растворит их в водопроводной вода к доводят pH раствори до к^ебходи'юго значения. Кутили оо средой стерч*гау»т в автоклаве а точение 30 мин* прно,Ог МПа, Ояжнхдепну» среду реэдивв»? » бокса в 10 миденмграые napgrovimoat* фльдсаа для делгх*№гого колитео таены© ос учотл бя*т?рйй по *егс*> предка-

4

и«х разведений, Флаконы закрывает стерильными резиновыми про* бх»ш, закрепляя их далее алюминиевыми колпачкам. Составы пи*

тотальных оред приведены в приложении 2,

2,6, В случае обнаружения микроорганизмов опыты по опре«* делении степени био разруления проводятся о использованием ода* «товой воды месторождения» рекомендованного к разработке о 0(п^снен..см водных растворов ЛАВ,

2.9,    Поверхностная активность оценивается по величине мекфаэного натяжения на границе раздела раствор ПАВ в плаото-вой воде - очнпенный керосин, Для измерения межфазного натяжения рекомбгд>отся использовать сталагмометр по ютодике [5]*

2.10,    Определение концентрации ПАВ проводится колоримет* рижским методом о использование фосфорновольфрамовой кислоты [10] (приложение 3 )♦ Кроме этого, в качестве вспомогательного метода возможно определение концентрации ПАВ по графику ее зависимости от поверхностного натяжения,

2.11,    Анализы по определение концентрации водородных ионов (pH) и окислительно-восстановительного потенциала (ОВП) проводятся известными мзтодами [9] •

3, ПРИБОР**, ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАКТИВЫ

-термостат электрический для выраииваиия бактерий о автоматическим терморегулятором до 50°С,

-автоклав эл-ктричесхуй по ГОСТ 9ЭВ6-75 -рН-мстр лабораторный "рН-262"

-микроскоп биологический по ГОСТ 8284-78 -центрифуга на 6-7 тш.об./мин,

-фотоэлектрок»лорн.''етр $J&-55 М -пробирки иа £0 ил яо ГОСТ LQ5IS-75 -пипетки на I и 10 кп по ГОСТ 20292-74 -спиртовка по ГОСТ 10090-74 -склянка Вульфа на 5 ж по ГОСТ 10378-73 -конйргишые фильтры $ 1-3

предметные с тема по ГОСТ 9284-75

покровные отекла по ГОСТ 21400-75

прибор ЗЕЙТЦА по ГОСТ 9775-69

водоструйный насос по ГОСТ 10696-75

човки Петри по ГОСТ £0973-75

пинцет по ГОСТ 21241-77

стеклянные о такай ы на 50 мл по ГОСТ 10394*72

формалин по ГОСТ 1625-75

керосин по ГОСТ 4753-68

Ооляиая кислота по ГОСТ 3118-77

аритрозин ТУ 6-09-07-369-75

фенол по ГОСТ 23519-79

иммерсионное маоло по ГОСТ 13739-78

фосфорнокислый кадий однозаипяениий по ГОСТ 4198-75

хлористый аичжий по ГОСТ 3210-77

сернокислый магний по ГОСТ 4523-77

молочнокислый натрия по ТУ 6-09-3664-74

хлористый натрий по ГОСТ 4233-77

дрожжевой автолизат по ТУ 6-09-39-79-75

аокорбииовая кислота по ГОСТ 4015-76

натрий сернокислый по ГОСТ 429-76

фосфорнокислый аммоний двузамэпенныи по ГОСТ 3772-74

ооль АЬра по ГОСТ 4208-72

аммоний молибденовокислый по ГОСТ 3765-78

хлориотыя кальций по ГОСТ 4460-77

хлористый магний по ГОСТ 4209-77 масляная кислота ТУ 6-09-530-75 парафин по ГОСТ 23683-79 вазелиновое кисло по ГОСТ 3164-78 фоофорновольфрамивая кислота по ГОСТ £8290-72 агар-агар по ГОСТ 17206-71

хлористый барий ТУ 6-09-3581-74 оернал кислота по ГОСТ 4204-/7 гидрохинон по ГОЛ 19627-74

*

- опирт этиловый ректификованный по ГОСТ 9962-о/

* вода дметилированная по ГОСТ 6709-72

Вое реактивы доданы быть квалификации ч.д.а.

<*, ОПРЕДЕЛЕНИЕ СТЕПЕНИ РАЗРЕШЕН И*

4.1* Опенка величины снижения поверхностной актигнооти

ооуцеотвд^тоя путем сопоставления поверхностного натяжения на грамме раствор П/Д) - очищенный керосин о контролам. Повышение коэффициента поверхмоотного натяжения указывает на снижение OKTHlMIOOTH I.AB.

4*2. определение бноразруаекня выполняют в той среде» Где предполагается применение ПАВ. Схема лабораторной установка для определения био распада ШАВ приведена на рисунке. Вое эксперименты проводятся в боксе для микробиологических робот над пламенем спиртовки.

Испытания проводят в склянках Вульфа о нижним тубусом (2) емкостью 3 л. окрашенных в черный цвет, полностью заполненных испытуемой водой с добавкой 0.03 % ПАВ. Для предотвращения попадания в оиотему аткоофериого кислорода используют "подув-гуп инертного геза. В качестве емкости для инертного газа ре-ясмоидуотся Использование резиновой камеры или подключение к оиотегч баллоне ш:срт>хо раза через редуктор. Для пре до тара* помня за:нтосн«я микроорганизмов о инертным газом пооледний стерилизуют с помощью «ембракнаго фильтра [ IIJ .Продолжительность испытаний г^рсделдстея* ноходя из следующих положений'' более высокая интенсивность био разрушения ИАВ может протекать в призабойной зона екз&гкн; ересей скорости фильтрации жидкости в пласте 0,3-1#3 м/сут. £123 I возможная область ма^* екмалЬисхо развития микроорганизмов, равная 5-10 м от забоя окодлчк [2J . южег быть достигнута раствором ПАВ за 15-20 суток. Таким образок, предполагается* что по истечении 30 суток скорость бнореспада ПАВ в пдаотоэых условиях практически будет оставаться и&йиеиьвей в постоянной.

7

Лабораторная установка для определения био разрушения ШАВ в анаэробных условиях

1.    Ёмкость о инертным газом;

2.    Склянка Вульфа о нижним тубусом;

3» Электроды: платиновый, каломелеэый, стеклянный;

Ц9 Прибор для определения концентрации водородных ионов (pH) и окиолительно-восстановительного потенциала;

3.    Раствор ПАВ в пластовой воде;

6. Мембранный фильтр для стерилизации инертного газа*