Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение химических соединений и элементов в биологических средах

Сборник методических указаний МУК 4.1.3056—13,4.1.3057—13 МУК 4.1.3158—4.1.3161—14 МУК 4.13230—4.1.3233—14

Издание официальное

Москва • 2015

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение химических соединений и элементов в биологических средах

Сборник методических указаний МУК 4.1.3056—13,4.13057—13 МУК 4.1.3158—4.1.3161—14 МУК 4.1.3230—4.1.3233—14

ББК 28.072 062

062 Определение химических соединений и элементов в биологических средах: Сборник методических указаний.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015.—

168 с.

ISBN 978—5—7508—1415—2

1.    Сборник подготовлен творческим коллективом авторов в составе: д.б.н., проф. А. Г. Малышева (руководитель), к.б.н. А. А. Ермаков,

В. А. Шохин (Ф1ЪУ «Научно-исследовательский институт экологии человека и гигиены окружающей среды им. А. Н. Сысина» Минздрава России).

2.    Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

3.    Методические указания утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой.

4.    Введены впервые.

ББК 28.072

Ответственный за выпуск Н. В. Митрохина

Редактор Л. С. Кучурова Компьютерная верстка Е. В. Ломановой

Подписано в печать 17.12.15 Формат 60x84/16    Печ. л. 10,5

Тираж 125 экз.    Заказ 87

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., д 18, стр. 5,7

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован отделением издательского обеспечения отдела научно-методического обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а

Реализация печатных изданий, тел./факс: 8 (495) 952-50-89

© Роспотребнадзор, 2015 © Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015

МУК 4.1.3056—13,4.1.3057—13,4.1.3158—4.1.3161—14,

4.1.3230—4.1.3233—14

Содержание

Введение......................................................................................................................4

Измерение массовых концентраций винилхлорида и 1,2-дихлорэтана в пробах крови методом газохроматографического анализа

равновесного пара: МУК 4.1.3056—13.................................................................5

Измерение массовой концентрации хлорэтанола в пробах крови методом

капиллярной газовой хроматографии: МУК 4.1.3057—13................................18

Измерение массовой концентрации акролеина в крови методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.3158—14...........31

Измерение массовой концентрации акрилонитрила в крови методом

капиллярной газовой хроматографии: МУК 4.1.3159—14................................45

Измерение массовых концентраций фталатов (диметилфталата, диэтилфталата, дибутилфталата, бензилбутилфталата, ди(2-этилгексил)фталата) в молоке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.3160—14...............................................60

Измерение массовых концентраций свинца, кадмия, мышьяка в крови методом масс-спекгрометрии с индуктивно связанной плазмой:

МУК 4.1.3161—14................................................................................................76

Измерение массовых концентраций химических элементов в биосредах (кровь, моча) методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой: МУК 4.1.3230—14................................................................................96

Измерение массовых концентраций N-нитрозоаминов (N-нитрозодиметиламин, N-нитрозодиэтиламин) в моче методом

капиллярной газовой хроматографии: МУК 4.1.3231—14..............................123

Измерение массовой концентрации акролеина в моче методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.3232—14.........137

Измерение массовых концентраций 2,4-дихлорфенола и 2,4,6-трихлорфенола в крови методом капиллярной газовой хроматографии: МУК 4.1.3233—14..................................................................151

3

МУК 4.1.3056—13,4.1.3057—13, 4.1.3158- 4.1.3161—14,

4.1.3230—4.1.3233—14

Введение

Включению в сборник 10 методических указаний по определению химических соединений в биологических средах предназначены для использования в химико-аналитических исследованиях при проведении биомониторинга состояния здоровья населения, для практического использования в рамках социально-гигиенического мониторинга на территориях с высокой антропогенной нагрузкой, а также могут быть использованы для диагностических целей в рамках осуществления государственного санитарного надзора, контроля, экспертизы, расследований. Методические указания предназначены для специалистов химико-аналитических лабораторий системы Роспотребнадзора, научно-исследовательских институтов, работающих в области экологии человека, гигиены окружающей среды и защиты прав потребителей.

Методические указания, включенные в сборник, разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ Р 8.563-96 «Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений», ГОСТ Р 1.5-92 «ГСС. Общие требования к построению, изложению, оформлению и содержанию стандартов», МИ 2335—95 «Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа», МИ 2336—95 «Характеристики погрешности результатов количественного химического анализа. Алгоритм оценивания».

Все методики измерения прошли метрологическую аттестацию в соответствии с правилами ПР 50.2.002—94 «ГСИ. Порядок осуществления государственного метрологического надзора за выпуском, состоянием и применением средств измерений, аттестованными методиками выполнения измерений, эталонами и соблюдением метрологических правил и норм».

В методических указаниях, включенных в сборник, приведены методы определения 15 органических соединений и 15 тяжелых металлов и элементов в биологических средах, в том числе 9 веществ и 15 элементов - в крови, 3 вещества и 12 элементов - в моче и 5 веществ - в молоке. Определение токсичных веществ и элементов основано на использовании современных высокочувствительных методов физико-химического анализа - капиллярной газовой хроматографии и газохроматографическом анализе равновесного пара, высокоэффективной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой.

Методические указания одобрены и рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека и утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека - Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации.

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

10 июля 2013 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение массовой концентрации хлорэтанола в пробах крови методом капиллярной газовой хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3057—13

МУК 4.1.3057—13

Острая пероральная токсичность (LD₅₀) для крыс 71 мг/кг, мышей -81 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC50) для мышей 385 мг/м³, для крыс (LC50) - 290 мг/м³; острая дермальная токсичность (LD50) для крыс 293 мг/кг, для мышей - 18 мг/кг.

3. Требования к показателям точности измерений

3.1. Нормы погрешности измерений Нормы погрешности измерений массовой концентрации хлорэтано-ла в пробах крови в нормативной документации не регламентированы.

3.2. Приписанные характеристики погрешности измерений и ее составляющих Методика измерений обеспечивает получение результатов измерений с погрешностью, не превышающей значений, приведённых в табл. 1.

Таблица 1

Диапазон измерений, значения показателей повторяемости, воспроизводимости, правильности и точности

Диапазон измерений, мкг/см3 Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), сгп% Показатель воспроизводимости1 (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), о*, % Показатель правильности (границы относительной систематической погрешности при доверительной вероятности Р = 0,95), ±6с % Показатель точности2 (границы относительной погрешности при доверительной вероятности Р = 0,95), ±6,% От 0,05 до 0,5 вкл. 11 17 11 35 Св. 0,5 до 10,0 вкл. 8 12 9 25 1 Оценен но результатам межлабораторного эксперимента (L *= 2). 2 Соответствует расширенной неопределенности (в относительных единицах) при коэффициенте охвата к = 2

Значения показателя точности используют:

•    при оформлении результатов измерений, выдаваемых лабораторией;

•    при оценке деятельности лабораторий на качество проведения измерений;

•    при оценке возможности использования результатов измерений при реализации методики измерений в конкретной лаборатории.

19

МУК 4.1.3057—13

4. Метод измерений

Выполнение измерений массовой концентрации хлорэтанола в экстракте пробы крови проводят методом капиллярной газовой хромато-графии с электронно-захватным детектированием. Извлечение и концентрирование хлорэтанола из проб крови проводят методом жидкостно-жидкостной микроэкстракции диэтиловым эфиром с применением высаливания хлоридом натрия с последующим центрифугированием.

Определению не мешают диэтиловый эфир, винилхлорид, 1,2-дихлорэтан, хлороформ.

5. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы.

5.1. Средства измерений

Газовый хроматограф с микроэлектроннозахватным детектором, автоинжектором и программой сбора и обработки данных Секундомер, цена деления секундной шкалы 0,2 с Колбы мерные 2-го класса точности вместимостью 500 см³ и пробирки мерные вместимостью 5 см³

Дозаторы вместимостью 10—100 мкл с погрешностью 2 %; вместимостью 0,1—1 см³ с погрешностью ± 0,5 %; вместимостью 1—5 см³ с погрешностью ± 0,5 %.

Весы лабораторные аналитические высокого класса точности с минимальным пределом взвешивания 0,1 мг Гири

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

5.2. Реактивы

Сжатый азот, осч 99,9995 %

Вода дистиллированная Хлорэтанол с содержанием основного вещества не менее 98 %

Натрий хлористый, хч

МУК 4.1.3057—13

Эфир диэтиловый, хч или эфир для наркоза стабил изированны й Калий двухромовый кислый, чда Серная кислота, чда

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией.

5.5. Вспомогательные устройства и материалы

Капиллярная колонка длиной 50 м и внутренним диаметром 0,32 мм с толщиной фазы 0,5 мкм Виалы стеклянные с пластмассовой завинчивающейся пробкой и тефлонированной полимерной мембраной (септой) вместимостью 1,5 см³ Вакуумные пробирки для забора крови с голубой крышкой. Для in vitro диагностики Мульти-вортекс для пробирок вместимостью 2 см³

Центрифуга со скоростью 3 000 об./мин для пробирок вместимостью 2 см³ Сушильный шкаф

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

6. Требования безопасности, охраны окружающей среды

6.1.    При выполнении работ необходимо соблюдать правила техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76.

6.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83.

6.3.    При выполнении измерений с использованием газового хроматографа соблюдают правила электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09 и инструкцией по эксплуатации прибора.

6.4.    При работе с газовыми баллонами соблюдают правила устройства и безопасной эксплуатации сосудов, работающих под давлением по ПБ 03-576-03.

6.5.    Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать допустимых значений по ГОСТ 12.1.005-88.

21

МУК 4.1.3057—13

6.6. Организуют обучение работающих безопасности труда по ГОСТ 12.0.004-90.

7. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускаются лица, имеющие квалификацию не ниже инженера-химика и опыт работы на газовом хроматографе и в химической лаборатории, прошедшие соответствующий инструктаж, освоившие метод в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы оперативного контроля при выполнении процедур контроля погрешности.

8. Условия измерений

При выполнении измерений в лаборатории соблюдают следующие условия:

-    температура воздуха    (20    ±    5)    °С;

- атмосферное давление    84,0—106,7 кПа (630—800 мм рт. ст.);

-    относительная влажность воздуха не более 80 %;

-    напряжение в сети    (220    ±    10) В;

-    частота переменного тока (50 ± 10) Гц.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы:

-    подготовка хроматографа;

-    подготовка посуды;

-    приготовление 3 %-го раствора дихромата калия;

-    подготовка хроматографической колонки;

-    приготовление градуировочных растворов;

-    установление градуировочной характеристики.

9.1. Подготовка хроматографа Подготовку хроматографа к работе осуществляют в соответствии с инструкцией по эксплуатации хроматографа.

9.2. Подготовка посуды Используемую посулу необходимо замочить на 1 ч в свежеприготовленном 3 %-м растворе дихромата калия в серной кислоте, отмыть в проточной водопроводной воде, ополоснуть дистиллированной водой и просушить при температуре 120 °С.

9.3. Приготовление 3 °%~го раствора дихромата калия В термостойкий стакан вместимостью 2 дм³ помещают 50 г дихромата калия, осторожно приливают по палочке частями, тщательно пере-

22

1

Свидетельство о метрологической аттестации № 224.0516/01.00258/ 2011 от 15.12.2011.

2

Назначение и область применения

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода капиллярной газовой хроматографии для измерения массовой концентрации хлорэтанола в пробах крови в диапазоне 0,05— 10 мкг/см⁴.

Методика предназначена для применения в санитарно-гигиенических, экологических, лечебных и научных организациях, осуществляющих деятельность в области профпатологии и экологии человека.

Методические указания носят рекомендательный характер.

3

Характеристика вещества Хлорэтанол (2-хлорэтанол)

4

Хлорэтанол - бесцветная жидкость с эфирным запахом. Регистрационный номер CAS 107-07-3