ПРОДУКТЫ МОЛОЧНЫЕ ДЛЯ ДЕТСКОГО ПИТАНИЯ

Методы измерений массовой доли витамина С (аскорбиновой кислоты)

Издание официальное

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ

Минск

Предисловие

1    РАЗРАБОТАН МТК 186 и Научно-исследовательским институтом детского питания ВНЕСЕН Госстандартом России

2    ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 12 ноября 1998 г. № 14)

За принятие проголосовали:

Наименование государства	Наименование национального органа по стандартизации
Азербайджанская Республика	Азгосстандарт
Республика Беларусь	Госстандарт Беларуси
Грузия	Грузстандарт
Киргизская Республика	Киргизстандарт
Республика Молдова	Молдова- Стандарт
Российская Федерация	Госстандарт России
Республика Таджикистан	Таджикгосстандарт
Туркменистан	Главная Государственная инспекция Туркменистана
Республика Узбекистан	Узгосстандарт
Украина	Госстандарт Украины

3    Постановлением Государственного комитета Российской Федерации по стандартизации и метрологии от 28 апреля 1999 г. № 143 межгосударственный стандарт ГОСТ 30627.2-98 введен в действие непосредственно в качестве государственного стандарта Российской Федерации с 1 мая 2000 г.

4    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

5    ПЕРЕИЗДАНИЕ. Июнь 2009 г.

© ИПК Издательство стандартов, 1999 © СТАНДАРТИНФОРМ, 2009

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания на территории Российской Федерации без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

ПРОДУКТЫ МОЛОЧНЫЕ ДЛЯ ДЕТСКОГО ПИТАНИЯ

Методы измерений массовой доли витамина С (аскорбиновой кислоты)

Infant milk products.

Methods for determination of mass part of vitamin C (Acidum ascorbinium)

Дата введения 2000—05—01

1    Область применения

Настоящий стандарт распространяется на молочные продукты для детского питания и устанавливает методы измерений массовой доли витамина С.

Методы основаны на взаимодействии витамина С (аскорбиновой кислоты) с натрием 2, 6-дихлорфенолиндофенолятом с последующим количественным определением витамина С титрованием или колориметрированием.

2    Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 61-75 Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия ГОСТ 199-78 Реактивы. Натрий уксуснокислый 3-водный. Технические условия ГОСТ 334-73 Бумага масштабно-координатная. Технические условия ГОСТ 841-76 Реактивы. Кислота метафосфорная. Технические условия ГОСТ 1770-74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 3118-77 Реактивы. Кислота соляная. Технические условия

ГОСТ 4212-76 Реактивы. Приготовление растворов для колориметрического и нефелометри-ческого анализа

ГОСТ 4919.1-77 Реактивы и особо чистые вещества. Методы приготовления растворов индикаторов

ГОСТ 4919.2-77 Реактивы и особо чистые вещества. Методы приготовления буферных растворов

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 9147-80 Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия ГОСТ 10652-73 Реактивы. Соль динатриевая этилендиамин-N, N, N', N'-тетрауксусной кислоты, 2-водная (трилон Б). Технические условия

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия ГОСТ 19908-90 Тигли, чаши, стаканы, колбы, воронки, пробирки и наконечники из прозрачного кварцевого стекла. Общие технические условия

ГОСТ 24104-88* Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

* С 1 июля 2002 г. действует ГОСТ 24104-2001.

Издание официальное

ГОСТ 26809-86 Молоко и молочные продукты. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу

ГОСТ 27752-88 Часы электронно-механические кварцевые настольные, настенные и часы-будильники. Общие технические условия

ГОСТ 28498-90 Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1—81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть I. Общие требования

ГОСТ 29251-91 (ИСО 385-1—84) Посуда лабораторная стеклянная. Бюретки. Часть I. Общие требования

3    Методы отбора проб

Отбор проб и подготовка их к измерению по ГОСТ 26809.

4    Колориметрический метод измерения массовой доли витамина С в сухих молочных продуктах детского питания

4.1 Аппаратура, материалы и реактивы

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Бумага масштабно-координатная (миллиметровая) по ГОСТ 334.

Весы лабораторные общего назначения 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104.

Весы лабораторные общего назначения 4-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 500 г по ГОСТ 24104.

Воронки стеклянные лабораторные типа В по ГОСТ 25336.

Колбы исполнения 1 2-го класса точности номинальной вместимостью 50, 100, 1000 и 2000 см³ по ГОСТ 1770.

Колбы типа Кн исполнения 2 номинальной вместимостью 250, 750 см³ по ГОСТ 25336.

Пипетки номинальной вместимостью 5, 10 и 25 см³ ценой деления шкалы 0,1 см³ по ГОСТ 29227.

Пробки стеклянные по ГОСТ 19908.

Пробирки типа П4 номинальной вместимостью 20 см³ по ГОСТ 25336.

Секундомер [1] или часы по ГОСТ 27752.

Стаканы типа В исполнения 1 номинальной вместимостью 400, 1000 см³ по ГОСТ 25336.

Ступка фарфоровая с пестиком по ГОСТ 9147.

Термометр жидкостный (нертутный) диапазоном измерения от 0 до 100 °С ценой деления шкалы 1 °С по ГОСТ 28498.

Фотометр фотоэлектрический диапазоном измерения от 220 до 1100 нм [2] или колориметр фотоэлектрический диапазоном измерения от 200 до 2000 нм диапазоном измерения коэффициента пропускания от 100 до 1 % [3].

Цилиндры исполнения 1 вместимостью 100, 250, 500 и 1000 см³ по ГОСТ 1770.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Кислота аскорбиновая (витамин С) [4].

Кислота метафосфорная ч. по ГОСТ 841.

Кислота уксусная ч.д.а. или х.ч. по ГОСТ 61.

Натрий уксуснокислый 3-водный ч.д.а. по ГОСТ 199.

Натрий 2, 6-дихлорфенолиндофенолят х.ч. [5].

Соль динатриевая этилендиамин-N, N, N', N'-тетрауксусной кислоты 2-водная (трилон Б) ч.д.а. по ГОСТ 10652.

Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками и оборудования с техническими характеристиками не хуже, а также реактивов и материалов по качеству не ниже вышеуказанных.

Хранение растворов по ГОСТ 4212.

Хранение реактивов и особо чистых веществ по ГОСТ 4919.1 и ГОСТ 4919.2.

ГОСТ 30627.2-98

4.2 Подготовка к выполнению измерения

4.2.1    Приготовление водного раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 60 г/дм³

Взвешивают (120,00+0,04) г растертой в ступке метафосфорной кислоты на весах 4-го класса

точности, растворяют в 100—300 см³ дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 2000 см³, доводят дистиллированной водой до метки, перемешивают и фильтруют.

Раствор хранят при (6+2) °С не более 7 сут.

4.2.2    Приготовление водного раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 30 г/дм³

Необходимый для измерения объем водного раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 60 г/дм³ смешивают с дистиллированной водой в соотношении 1:1.

Раствор готовят непосредственно перед применением.

4.2.3    Приготовление водного раствора трилона Б (этилендиаминтетрацетат натрия) молярной концентрации с (Na₂H₂CioHi₂0₈)= 0,05 молъ/дл/

Взвешивают (3,600+0,004) г трилона Б на весах 2-го класса точности и растворяют в 100—300 см³ дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 2000 см³, доливая дистиллированную воду до метки.

4.2.4    Приготовление смеси водного раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 60 г/дм³ и раствора трилона Б (этилендиаминтетрацетат натрия) молярной концентрации с (Na₂Н₂СjqH[₂0/ = 0,05 моль/дм³ (раствор осадителя)

Отмеряют цилиндром 300 см³ водного раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 60 г/дм³ и 300 см³ раствора трилона Б молярной концентрации с (Na2H₂C₁QH₁20g) = = 0,05 моль/дм³ в коническую колбу объемом 750 см³ и перемешивают.

Раствор готовят непосредственно перед применением.

4.2.5    Приготовление раствора 2, 6-дихлорфенолиндофенолята натрия (раствор красителя)

Взвешивают (0,100+0,001) г 2, 6-дихлорфенолиндофенолята натрия на весах 2-го класса точности, растворяют в 500 см³ свежекипяченной дистиллированной воды температурой (90+5) °С и фильтруют в мерную колбу вместимостью 1000 см³ через складчатый фильтр. Промывают фильтр водой той же температуры, охлаждают раствор до (20+5) °С, доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают. Раствор хранят при (6+2) °С не более 7 сут.

4.2.6    Приготовление водного раствора уксусной кислоты молярной концентрации с (СП^СООН) = = 0,5 моль/дм³

3 см³ уксусной кислоты растворяют в 30—50 см³ дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 100 см³, доводят той же водой до метки и перемешивают.

4.2.7    Приготовление ацетатного буферного раствора

Взвешивают (90,8 ± 0,1) г уксуснокислого натрия на весах 4-го класса точности, растворяют в 100—300 см³ дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 2000 см³, добавляют 5 см³ раствора уксусной кислоты молярной концентрации с (СН3СООН) = 0,5 моль/дм³, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.

4.2.8    Приготовление смеси растворов красителя и ацетатного буферного раствора

Отмеряют цилиндром 50 см³ раствора красителя и 50 см³ ацетатного буферного раствора в коническую колбу вместимостью 250 см³ и перемешивают.

Раствор готовят непосредственно перед применением.

4.2.9    Приготовление основного раствора витамина С (аскорбиновой кислоты) массовой концентрации 2 мг/см³

Взвешивают (0,200 ± 0,001) г витамина С на весах 2-го класса точности, растворяют в 30—50 см³ водного раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 30 г/дм³ в мерной колбе вместимостью 100 см³ и доводят до метки тем же раствором.

Раствор готовят непосредственно перед применением.

4.2.10    Приготовление рабочего раствора витамина С массовой концентрации 100 мкг/см³

5 см³ основного раствора витамина С растворяют в 30—50 см³ раствора осадителя, приготовленного в соответствии с 4.2.4 в мерной колбе вместимостью 100 см³, доводят до метки тем же раствором и перемешивают.

Раствор готовят непосредственно перед применением.

4.2.11    Построение калибровочного графика

Отмеряют в шесть мерных колб вместимостью 50 см³ пипеткой поЗ,4,5,6,7и8 см³ рабочего раствора витамина С, доводят содержимое колб до метки раствором осадителя и перемешивают.

3

Массовые концентрации витамина С будут равны соответственно 6, 8, 10, 12, 14 и 16 мкг/см³.

Берут по 5 см³ раствора каждого разведения в пробирки, добавляют в каждую пробирку по 10 см³ смеси растворов красителя и ацетатного буферного раствора, перемешивают и определяют значение оптической плотности на колориметре или фотометре при длине световой волны 515 нм против холостой пробы.

В пробирке готовят холостую пробу, состоящую из 5 см³ раствора осадителя, 10 см³ приготовленной смеси растворов красителя и ацетатного буферного раствора с добавлением нескольких гранул витамина С для обесцвечивания красителя.

Для построения калибровочного графика по оси ординат откладывают полученные значения оптической плотности, а по оси абсцисс — соответствующие им массовые концентрации витамина С.

Длины осей для построения графика должны быть не менее 160 мм.

4.3    Проведение измерения

Навеску сухого продукта берут с учетом массовой доли витамина С в продукте.

Массовая доля витамина С, млн^-1    Навеска    продукта, г

100-500    1,50+0,04

более 500    1,00+0,04

Навеску продукта помещают в мерную колбу вместимостью 25 см³ (при массовой доле витамина С в продукте от 100 до 250 млн^-1), 50 см³ (при массовой доле витамина С в продукте от 250 до 750 млн^-1) и 100 см³ (при массовой доле витамина С в продукте более 750 млн^-1), добавляют раствор осадителя до метки, перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр в коническую колбу вместимостью 100 см³.

Берут пипеткой 5 см³ фильтрата в пробирку, добавляют 10 см³ смеси растворов красителя и ацетатного буферного раствора, перемешивают и определяют значение оптической плотности на колориметре или фотометре при длине световой волны 515 нм против холостой пробы.

Определяют массовую концентрацию витамина С в фильтрате по калибровочному графику.

4.4    Обработка результатов измерения

Массовую долю витамина С (аскорбиновой кислоты) Х₉ млн^-1, вычисляют по формуле

Х=(!)

т

где р_с — массовая концентрация аскорбиновой кислоты в фильтрате, определенная по калибровочной кривой, мкг/см³;

V— общий объем разведения продукта, см³; т — масса пробы продукта, взятая для измерения, г.

За окончательный результат измерения принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных измерений. Вычисления проводят до первого десятичного знака и округляют до целого числа.

Относительная погрешность измерения массовой доли витамина С — ± 15 % при доверительной вероятности Р = 0,95.

Расхождение между результатами двух параллельных определений не должно превышать 7 % среднеарифметического значения результатов измерений.

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать 15 % среднеарифметического значения результатов измерений.

5 Метод измерения массовой доли витамина С в жидких молочных продуктах детского питания методом титрования

5.1 Аппаратура, материалы и реактивы

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Бюретки исполнения 6 2-го класса точности номинальной вместимостью 2 см³ ценой деления шкалы 0,01 см³ по ГОСТ 29251.

Весы лабораторные общего назначения 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104.

Весы лабораторные общего назначения 4-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 500 г по ГОСТ 24104.

ГОСТ 30627.2-98

Воронки стеклянные лабораторные типа В по ГОСТ 25336.

Колбы мерные исполнения 1 2-го класса точности номинальной вместимостью 50, 100, 500, 1000, 2000 см³ по ГОСТ 1770.

Колбы типа Кн исполнения 2 номинальной вместимостью 50, 100, 250 см³ по ГОСТ 25336.

Пипетки исполнений 6, 7 номинальной вместимостью 5, 10 см³ ценой деления шкалы 0,1 см³ по ГОСТ 29227.

Секундомер [1] или часы по ГОСТ 27752.

Стаканы типа В исполнения 1 номинальной вместимостью 400, 1000 см³ по ГОСТ 25336.

Ступка фарфоровая с пестиком по ГОСТ 9147.

Термометр жидкостный (нертутный) диапазоном измерения от 0 до 100 °С ценой деления шкалы 1 °С по ГОСТ 28498.

Цилиндры исполнения 1 вместимостью 100, 500 см³ по ГОСТ 1770.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Кислота аскорбиновая (витамин С) [4].

Кислота метафосфорная ч. по ГОСТ 841.

Кислота соляная х. ч. по ГОСТ 3118.

Натрий 2, 6-дихлорфенолиндофенолят х. ч. [5].

Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками и оборудования с техническими характеристиками не хуже, а также реактивов и материалов по качеству не ниже вышеуказанных.

Хранение растворов по ГОСТ 4212.

Хранение реактивов и особо чистых веществ по ГОСТ 4919.1 и ГОСТ 4919.2.

5.2 Подготовка к выполнению измерения

5.2.1    Приготовление водного раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 60 г/дм³

Согласно 4.2.1.

5.2.2    Приготовление водного раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 30 г/дм³

Согласно 4.2.2.

5.2.3    Приготовление водного раствора соляной кислоты массовой концентрации 20 г/дм³

46 см³ соляной кислоты плотностью 1,185 г/см³ растворяют в 300—500 см³ дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 1000 см³, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.

5.2.4    Приготовление основного раствора витамина С (аскорбиновой кислоты) массовой концентрации 1 мг/см³

Взвешивают (0,100+0,001) г витамина С на весах 2-го класса точности, растворяют в 30—50 см³ водного раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 30 г/дм³ в мерной колбе вместимостью 100 см³ и доводят до метки тем же раствором.

Раствор готовят непосредственно перед применением.

5.2.5    Приготовление рабочего раствора витамина С массовой концентрации 0,1 мг/см³

10 см³ основного раствора витамина С растворяют в 30—50 см³ раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 30 г/дм³ в мерной колбе вместимостью 100 см³ и доводят до метки тем же раствором.

Раствор готовят непосредственно перед применением.

5.2.6    Приготовление раствора 2, 6-дихлорфенолиндофенолята натрия (раствор красителя)

Взвешивают (0,200+0,001) г 2, 6-дихлорфенолиндофенолята натрия на весах 2-го класса точности, растворяют в 300 см³ свежекипяченной дистиллированной воды температурой (80+5) °С, фильтруют через складчатый фильтр в мерную колбу вместимостью 500 см³ и промывают фильтр водой той же температуры. Охлаждают раствор до (20+5) °С и доводят до метки охлажденной до той же температуры дистиллированной водой.

Раствор хранят при (6+2) °С не более 7 сут.

5.2.7    Определение титра раствора 2, 6-дихлорфенолиндофенолята натрия

В две конические колбы наливают по 9 см³ водных растворов метафосфорной кислоты массовой концентрации 30 г/дм³ или соляной кислоты массовой концентрации 20 г/дм³ и по 1 см³ раствора витамина С массовой концентрации 0,1 мг/см³ и быстро титруют раствором 2, 6-дихлорфено-линдофенолята натрия до светло-розовой окраски, не исчезающей в течение 15 с.

5

Таким же образом титруют 10 см³ водного раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 30 г/дм³ (холостая проба).

Титр раствора Т, мг/см³, вычисляют по формуле

Т — ОД ' 1;0    (2)

V-V*

значение объема раствора витамина С, см³;

значение массовой концентрации рабочего раствора витамина С, мг/см³; объем раствора 2, 6-дихлорфенолиндофенолята натрия, израсходованного на титрование рабочего раствора витамина С, см³;

объем раствора 2, 6-дихлорфенолиндофенолята натрия, израсходованного на титрование метафосфорной кислоты массовой концентрации 30 г/дм³ (холостая проба), см³.

5.2.8 Подготовка фильтрата

Взвешивают (10,00+0,04) г продукта и вносят в мерную колбу вместимостью 50 см³ (при расчетной массовой доле витамина С в продукте от 20 до 80 млн^-1), 100 см³ (при расчетной массовой доле витамина С в продукте свыше 80 млн^-1), добавляют 15—20 см³ раствора метафосфорной кислоты массовой концентрации 60 г/дм³, перемешивают не менее 1 мин, доводят до метки раствором метафосфорной кислоты массовой концентрации 30 г/дм³, перемешивают и фильтруют.

Вместо метафосфорной кислоты можно использовать соляную кислоту, приготовленную по

5.2.3.

5.3    Проведение измерения

10 см³ фильтрата вносят в коническую колбу вместимостью 50 см³ и титруют раствором 2, 6-дихлорфенолиндофенолята натрия до слабо-розового окрашивания, не исчезающего в течение 15 с, согласно 5.2.7.

5.4    Обработка результатов измерения

Массовую долю витамина С (аскорбиновой кислоты) Х₉ млн^-1 вычисляют по формуле

Т(У - ГоДДООО V₂m

где Т — титр раствора 2, 6-дихлорфенолиндофенолята натрия, мг/см³;

V— объем раствора 2, 6-дихлорфенолиндофенолята натрия, израсходованный на титрование анализируемого раствора, см³;

Vq — объем раствора 2, 6-дихлорфенолиндофенолята натрия, израсходованный на титрование холостой пробы, см³;

V-y — общий объем раствора, см³;

1000 — коэффициент пересчета, мкг;

V₂ — объем фильтрата, взятый на титрование, см³; m — масса пробы продукта, г.

За окончательный результат измерения принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных измерений. Вычисления проводят до первого десятичного знака и округляют до целого числа.

Относительная погрешность измерения массовой доли витамина С — ± 15 % при доверительной вероятности Р = 0,95.

Расхождение между результатами двух параллельных измерений не должно превышать 7 % среднеарифметического значения результатов измерений.

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать 15 % среднеарифметического значения результатов измерений.

6

ПРИЛОЖЕНИЕ А

(справочное)

Библиография

[1]    ТУ 25—1819.0021—90 Секундомеры механические «Слава»

[2]    ТУ 3—3.2164—89 Фотометр фотоэлектрический КФК-3

[3]    ТУ З-КРАЮ.414216.001—90 Колориметр фотоэлектрический концентрационный КФК-2Ц.

[4]    ГФ СССР—X ст. 6 Кислота аскорбиновая

[5]    ТУ 6—09—2808—77 Натрий 2, 6-дихлорфенолиндофенолят

ГОСТ 30627.2-98

УДК 637.1:543.06:006.354    МКС    67.100.10    Н19    ОКСТУ    9209

Ключевые слова: витамин С (аскорбиновая кислота), водный раствор массовой концентрации, ацетатный буферный раствор, оптическая плотность