МУК 4.1.3516-17
Определение остаточных количеств цигалофоп-бутила в воде и цигалофопа в воде, почве, зерне и соломе риса методом капиллярной газожидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием

Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование __Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств цигалофон-бутила в воде и цигалофопа в воде, почве, зерне и соломе риса методом капиллярной газожидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием

Методические указания МУК 4.1.3516—17

Издание официальное

Москва • 2018

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств цигалофоп-бутила в воде и цигалофопа в воде, почве, зерне и соломе риса методом капиллярной газожидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием

Методические указания МУК 4Л.3516—17

Фильтры обеззоленные нейтральные, быстро фильтрующие диаметром 11 см, зольность одного фильтра 0,00072 г    ТУ-6-09-1678—86

Центрифуга лабораторная настольная с максимальным рабочим числом оборотов 4 ООО об./мин, с рабочим объемом ротора 200 см³ х 4 ячейки, выбираемый временной диапазон работы от 0 до 100 мин и с набором полипропиленовых банок емкостью 200 см³

Примечание. Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф и масс-спектрометр.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-90 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313—03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004—90

5. Требования к квалификации операторов

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на газожидкостном хроматографе с масс-спектрометром, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С, относительной влажности не более 80 % и нормальном атмосферном давлении;

- выполнение измерений на газовом хроматографе с масс-спектрометром проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка колонок с флоризилом для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонках с флоризилом, установление градуировочной характеристики.

7.1. Подготовка органических растворителей

7. /. /. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм³. Выдерживают его над осушителем в течение 5—6 часов. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 ООО см³ аппарата для перегонки растворителей.

Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °С, отбрасывают.

7.1.2.    Очистка ацетона

Ацетон помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 ООО см³ аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцовокислый калий из расчета 1 г/дм³. Ацетон перегоняют при температуре 56,2 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 56,2 °С, отбрасывают.

7.1.3.    Очистка метш-тргт-бутипового эфира (МТБЭ)

Метил-трет-бутиловый эфир, предварительно осушают, добавляя в

него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм . Выдерживают его над осушителем в течение 5—6 часов. Затем МТБЭ сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 ООО см³ аппарата для перегонки растворителей.

МТБЭ перегоняют при температуре 55,2 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 55,2 °С, отбрасывают.

7.1.4.    Очистка гексана

Гексан, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм³. Выдерживают его над осушителем в течение 5—6 часов. Затем гексан сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 000 см³ аппарата для перегонки растворителей.

Гексан перегоняют при температуре 68,7 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 68,7 °С, отбрасывают.

7.1.5. Приготовление бидистиллированной воды

Дистиллят помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 ООО см³ аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцовокислый калий из расчета 1 г/дм* и кипятят в течение 6 часов.

Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °С, отбрасывают.

7.2. Приготовление растворов для проведения анализа

7.2.1. Приготовление рабочих растворов

7.2.1.1.    Приготовление раствора 1,2 М соляной кислоты

Мерным цилиндром отбирают 100 см³ концентрированной соляной кислоты и осторожно переносят в мерную колбу на 1 000 см³, куда предварительно наливают около 400 см³ дистиллированной воды. Затем раствор перемешивают и после охлаждения доводят водой объем в колбе до метки (при приготовлении раствора соблюдать осторожность и работать под тягой).

7.2.1.2.    Приготовление подкисленного ацетона

Ацетон подкисляется 1,2 М соляной кислотой в соотношении 80/20 (об./об.) соответственно.

7.2.1.3.    Приготовление смеси для экстракции ацетонитрил-вода-соляная кислота

Смесь ацетонитрил-вода-соляная кислота готовят в соотношении 80/20/1 (об./об./об.) соответственно.

7.2.1.4.    Приготовление смеси для экстракции этилацетат-гексан

Смесь этилацетат-гексан готовят в соотношении 50/50 (об./об.) соответственно.

7.2.1.5.    Приготовление раствора 4 н серной кислоты

Мерным цилиндром отбирают 112 см³ концентрированной серной кислоты и осторожно переносят в мерную колбу объемом 1 000 см³, куда предварительно наливают около 300 см³ дистиллированной воды. Затем раствор перемешивают и после охлаждения доводят водой объем в колбе до метки. Раствор готовят под тягой, строго соблюдая технику безопасности.

7.2.1.6.    Приготовление 4%-го раствора серной кислоты в бутаноле (бутилирующая смесь)

Мерной пипеткой отбирают 4 см³ концентрированной серной кислоты и осторожно переносят в мерную колбу объемом 100 см³, куда предварительно наливают около 60 см³ бутанола. Затем раствор пере-

мешивают и доводят бутанолом объем в колбе до метки. Раствор готовят под тягой, строго соблюдая технику безопасности.

7.2.1.7. Приготовление 5%-го раствора гидрокарбоната натрия

Переносят 50 г гидрокарбоната натрия в мерную колбу на 1 ООО см³, добавляют 200—300 см³ дистиллированной воды, перемешивают содержимое до полного растворения и доводят водой объем в колбе до метки.

7.2.2. Приготовление градуировочных растворов цигалофопа

7.2.2.1. Стандартный раствор    / с концентрацией цигалофопа

1.0    мг/см³

Взвешивают 50 мг цигалофопа в мерной колбе объемом 50 см³. Навеску растворяют в ацетоне и доводят объем до метки ацетоном. Полученный стандартный раствор № 1 используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 1 хранится в холодильнике в течение 4 месяцев.

7.2.2.2.    Стандартный раствор N9 2 с концентрацией цигалофопа

10.0    мкг/см³

Из стандартного раствора № 1 отбирают пипеткой 1 см³, помещают в мерную колбу объемом 100 см³ и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор № 2 используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 2 хранится в холодильнике в течение 1 месяца.

1.2.23. Стандартные растворы с концентрацией цигалофопа 2,5; 1,0; 0,5; 0,25; 0,2 и 0,1 мкг/см³ для внесения в контрольные образцы

Методом последовательного разведения стандартного раствора №2 ацетоном готовят растворы, содержащие 2,5; 1,0; 0,5; 0,25; 0,2 и 0,1 мкг/см³ цигалофопа, и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы матриц. Стандартные растворы для внесения в контрольные образцы хранятся в холодильнике не более 1 месяца.

1.2.2А. Приготовление стандартных растворов бутилового эфира цигалофопа для установления градуировочной характеристики

1.2.2 А. 1. Стандартный раствор Л^г9 3 бутилового эфира цигалофопа с концентрацией 1,0 мкг/см³

Из стандартного раствора № 2 с концентрацией цигалофопа

10.0    мкг/см³ отбирают пипеткой 1 см³, помещают в виалу объемом 40 см³, удаляют растворитель током теплого воздуха и проводят бути-лирование, как указано в п. 7.4. После бутилирования получают стандартный раствор № 3 бутилового эфира цигалофопа с концентрацией по цигалофопу 1,0 мкг/см³. Стандартный раствор бутилового эфира № 3

используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике в течение 1 месяца.

7.2.2А2. Стандартный раствор N° 4 бутилового эфира цигало-фопа с концентрацией 0,5 мкг/см³

Из стандартного раствора № 3 отбирают пипеткой 5 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 см³ и доводят объем до метки гексаном. Получают стандартный раствор №4 бутилового эфира цигалофопа с концентрацией по цигалофопу 0,5 мкг/см³. Стандартный раствор бутилового эфира № 4 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике в течение 1 месяца.

7.2.2.4.3. Стандартный раствор N° 5 бутилового эфира цигалофопа с концентрацией 0,2 мкг/см³

Из стандартного раствора № 3 отбирают пипеткой 2 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 см³ и доводят объем до метки гексаном. Получают стандартный раствор № 5 бутилового эфира цигалофопа с концентрацией по цигалофопу 0,2 мкг/см³. Стандартный раствор бутилового эфира № 5 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике в течение 1 месяца.

7.2.2 А4. Стандартный раствор N° 6 бутилового эфира цигалофопа с концентрацией 0,1 мкг/см³

Из стандартного раствора № 3 отбирают пипеткой 1 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 см³ и доводят объем до метки гексаном. Получают стандартный раствор № 6 бутилового эфира цигалофопа с концентрацией по цигалофопу 0,1 мкг/см³. Стандартный раствор бутилового эфира № 6 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике в течение 1 месяца.

7.2.2А5. Стандартный раствор № 7 бутилового эфира цигалофопа с концентрацией 0,05 мкг/см³

Из стандартного раствора № 4 отбирают пипеткой 1 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 см³ и доводят объем до метки гексаном. Получают стандартный раствор № 7 бутилового эфира цигалофопа с концентрацией по цигалофопу 0,05 мкг/см³. Стандартный раствор бутилового эфира № 7 используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике в течение 1 месяца.

7.2.3. Приготовление градуировочных растворов цигалофоп-бутила

7.2.3.1. Стандартный раствор № 1А с концентрацией цигалофоп-бутила 1,0 мг/см³

Взвешивают 50 мг цигалофоп-бутила в мерной колбе объемом 50 см³. Навеску растворяют в ацетоне и доводят объем до метки ацето-

ном. Полученный стандартный раствор № 1А используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики. Стандартный раствор № 1А хранится в холодильнике в течение 4 месяцев.

7.2.3.2.    Стандартный раствор № 2А с концентрацией цигалофоп-бутила 10,0 мкг/см³

Из стандартного раствора № 1А отбирают пипеткой 1 см³, помещают в мерную колбу объемом 100 см³ и доводят объем до метки ацетоном. Стандартный раствор № 2А используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике в течение 1 месяца.

7.2.3.3.    Стандартный раствор № ЗА с концентрацией цигалофоп-бутила 1,0 мкг/см³

Из стандартного раствора № 2А отбирают пипеткой 1 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 см³ и доводят объем до метки гексаном. Стандартный раствор № ЗА используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике в течение 1 месяца.

7.2.3.4.    Стандартный раствор № 4А с концентрацией цигапофоп-бутила 0,5 мкг/см³

Из стандартного раствора № ЗА отбирают пинеткой 5 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 см³ и доводят объем до метки гексаном. Стандартный раствор № 4А используется для приготовления стандартных растворов для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике в течение 1 месяца.

7.2.3.5.    Стандартный раствор № 5А с концентрацией цигалофоп-бутила 0,2 мкг/см³

Из стандартного раствора № ЗА отбирают пипеткой 2 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 см³ и доводят объем до метки гексаном. Стандартный раствор № 5А используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике в течение 1 месяца.

7.2.3.6.    Стандартный раствор № 6А с концентрацией цигалофоп-бутила 0,1 мкг/см³

Из стандартного раствора № ЗА отбирают пипеткой 1 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 см³ и доводят объем до метки гексаном. Стандартный раствор № 6А используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике в течение 1 месяца.

7.2.3.7.    Стандартный раствор Ns 7А с концентрацией цигалофоп-бутила 0,05 мкг/см³

Из стандартного раствора № 4А отбирают пипеткой 1 см³, помещают в мерную колбу объемом 10 см³ и доводят объем до метки гексаном. Стандартный раствор № 7А используется для установления градуировочной характеристики и хранится в холодильнике в течение 1 месяца.

7.2.3.8.    Стандартные растворы с концентрацией цигалофоп-бу-тила 5,0; 2,0; 1,0 и 0,5 мкг/см³ для внесения в контрольные образцы

Методом последовательного разведения стандартного раствора № 2А ацетоном готовят растворы, содержащие 5,0; 2,0; 1,0 и 0,5 мкг/см³ цигалофоп-бутила, и используют эти растворы для внесения в контрольные образцы воды. Стандартные растворы для внесения в контрольные образцы хранятся в холодильнике не более 1 месяца.

7.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика квалифицирующих ионов от концентрации цщ-алофопа в виде бутилового эфира или цигалофоп-бутила в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки бутилового эфира цигалофопа или цшалофоп-бутила с концентрацией 0,5; 0,2; 0,1 и 0,05 мкг/см³.

В испаритель хроматографа водят по 1 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.5. Осуществляют нс менее 5 параллельных измерений.

По полученным данным строят градуировочный график зависимости площади пика квалифицирующих ионов (Responce) от концентрации цигалофопа в виде бутилового эфира или цигалофоп-бутила в растворе в мкг/см³.

7.4. Бутилирование

К сухому остатку в виале прибавляют 1 см³ 4%-го раствора концентрированной серной кислоты в бутаноле (бутилирующей смеси). Виалу плотно закрывают крышкой, помещают в нагревательный блок для виал и оставляют на 5 минут при температуре 100 °С. По истечении времени виалу вынимают из блока, охлаждают до комнатной температуры, добавляют 10 см³ гексана и 20—25 см³ бидистиллированной воды. Смесь интенсивно встряхивают и выдерживают до полного разделения фаз в виале. Верхний гексановый слой содержит бутиловый эфир цигалофопа.

7.5. Подготовка колонки с флоризилом для очистки экстракта и

проверка хроматографического поведения бутилового эфира цигалофопа на ней

7.5.1.    Подготовка колонки с флоризилом для очистки экстракта

В пластиковую или стеклянную колонку диаметром 15 мм помещают 4 г флоризила с зернением 60/100 меш и, аккуратно постукивая по стенкам колонки, формируют слой адсорбента. На слой флоризила наносят слой безводного сернокислого натрия толщиной 1 см.

В день использования колонку промывают 10 см³ ацетона, высушивают и вновь промывают 10 см³ гексана, смывы отбрасывают.

7.5.2.    Проверка хроматографического поведения бутилового эфира цигалофопа на колонке с флоризилом

В стакан объемом 100 см³ вносят 1 см³ стандартного раствора бутилового эфира цигалофопа в гексане с концентрацией по цигалофопу 0,5 мкг/см³, добавляют 4 см³ гексана, перемешивают и наносят на подготовленную колонку. Элюат собирают в концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 35 °С. Исходный стакан обмывают 10 см³ гексана и наносят на колонку. Элюат собирают в концентратор и выпаривают досуха при температуре не выше 35 °С. Затем колонку последовательно промывают двумя порциями по 5 см³ смеси гексана с ацетоном в соотношении 10 : 1 и тремя порциями по 5 см³ смеси гексана с ацетоном в соотношении 4:1. Каждую порцию собирают отдельно в концентраторы и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше }5 °С.

Сухой остаток каждой фракции растворяют в 1 см³ гексана и 1 мм³ пробы вводят в хроматограф.

Определяют фракции, содержащие бутиловый эфир цигалофопа, полноту смывания с колонки и необходимый объём элюата.

Изучение поведения бутилового эфира цигалофопа на колонке проводят каждый раз при отработке методики или поступлении новой партии флоризила.

8. Отбор и хранение проб

Отбор проб проводится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» №2051—79 от 21.08.79, а также в соответствии с ГОСТ 31861-12 «Вода. Общие требования к отбору проб», ГОСТ 17.4.3.01—83 «Почвы. Общие требования к отбору проб», ГОСТ 28168—89 «Почвы. Отбор проб», ГОСТ 13586.3-83 «Зерно. Правила

приемки и методы отбора проб», ГОСТ Р ИСО 6497-11 «Корма для животных. Отбор проб».

Пробы воды хранят в стеклянной герметично закрытой таре в холодильнике при температуре 4 °С не более 10 суток.

Для длительного хранения проб почвы, почву подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы MOiyr храниться в темной таре в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм.

Отобранные пробы зерна и соломы подсушивают до стандартной влажности и хранят в бумажных или тканевых мешочках в сухом, хорошо проветриваемом шкафу, недоступном для грызунов.

9. Выполнение определения

9.1. Вода

9. 1. /. Экстракция цигалофоп-бутила

Пробу воды объемом 100 см³ помещают в делительную воронку объемом 250 см³.

Цигалофоп-бутил экстрагируют тремя порциями гексана объемом по 20 см³, встряхивая каждый раз делительную воронку 2 мин. После полного разделения фаз в делительной воронке верхний гексановый слой в концентраторе объемом 250 см³ собирают через слой безводного сульфата натрия, а нижний водный слой сливают в стакан объемом 250 см³.

После третьей экстракции водную фазу, содержащую цигалофоп, возвращают в делительную воронку, а объединенный гексановый экстракт, содержащий цигалофоп-бутил, выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °С. Сухой остаток в концентраторе растворяют в 10 см³ гексана и вводят в хроматограф 1 мм³ раствора.

9.1.2. Экстракция цигалофопа

К оставшейся водной фазе в делительной воронке в п. 9.1.1 добавляют 15 г хлорида натрия и растворяют его путем встряхивания. Подкисляют водную фазу 1 см³ концентрированной серной кислотой.

Цигалофоп экстрагируют тремя порциями по 20 см³ каждая смеси этилацетата с гексаном в соотношении 50 : 50, встряхивая делительную воронку каждый раз по 2 мин. После полного разделения фаз нижний водный слой сливают в стакан объемом 250 см , а верхний слой объединяют в концентраторе объемом 250 см³, собирая его через слой безводного сульфата натрия. Объединенный экстракт выпаривают на рога-

ционном вакуумном испарителе досуха при температуре водяной бани не выше 35 °С.

9.1.3. Бутилирование экстракта

Сухой остаток, полученный по п. 9.1.2, последовательно переносят тремя порциями МТБЭ по 3 см³ каждая в виалу объемом 40 см³ и высушивают током теплого воздуха. Проводят бутилирование, как указано в п. 7.4.

После бутилирования из верхнего гексанового слоя 1 мм³ раствора вводят в хроматограф.

9.2. Почва

9.2.1.    Экстракция

Образец почвы массой 10 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 см³, добавляют 50 см³ смеси для экстракции ацетонитрил-вода-соляная кислота в соотношении 80 : 20 : 1 и помещают на аппарат для встряхивания проб на 60 мин. Затем пробу центрифугируют в течение 5 мин при скорости 4 000 оборотов в минуту. Супернатант фильтруют через бумажный фильтр низкой плотности в концентратор объемом 250 см³ и выпаривают до водного остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °С.

9.2.2.    Очистка полученного экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

К водному остатку, полученному по п. 9.2.1, добавляют 100 см³ дистиллированной воды, обмывают стенки концентратора и переносят в делительную воронку объемом 250 см³. Добавляют в делительную воронку 15 г хлорида натрия, растворяя его путем встряхивания.

Цигалофоп экстрагируют тремя порциями МТБЭ по 20 см³ каждая, встряхивая делительную воронку каждый раз по 2 мин. После полного разделения фаз нижний водный слой отбрасывают, а верхний эфирный слой объединяют в плоскодонной колбе объемом 250 см³.

Переэкстрагируют цигалофоп из объединенного эфирного экстракта двумя порциями 5%-го раствора гидрокарбоната натрия по 20 см³ каждая, встряхивая делительную воронку каждый раз по 2 мин. После полного разделения фаз нижний водный слой собирают в плоскодонную колбу объемом 250 см³. После второй экстракции эфир отбрасывают, а объединенную содовую фракцию переносят в чистую делительную воронку и подкисляют 4 н раствором серной кислоты до значения pH = 1 (~ 7 см³). Смесь дегазируют. (Осторожно! Возможно разбрызгивание раствора!). Добавляют в воронку 15 см³ смеси этил-

ББК 51.21 0-60

0-60 Определение остаточных количеств цигалофоп-бутила в воде и цигалофопа в воде, почве, зерне и соломе риса методом капиллярной газожидкостной хроматографии с масс-спектро-метричсским детектированием: Методические указания.—М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2018.—26 с.

ISBN 978-5-7508-1646-0

1.    Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К. А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России (Л. В. Довгилевич, О. И. Рыбакова, П. В. Рязанцев, Е. Н. Тестова).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 24 ноября 2017 г. № 1).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Л. Ю. Поповой 29 декабря 2017 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.21

ISBN 978-5-7508-1646-0

О Роспотребнадзор, 2018

ацетата с гексаном в соотношении 50 : 50 и встряхивают смесь в течение 1—2 мин. После полного разделения фаз нижний водный слой сливают в стакан объемом 250 см³, а верхний слой - в концентратор объемом 250 см³, пропуская через слой безводного сульфата натрия. Водную фазу возвращают в делительную воронку и повторяют процедуру еще два раза с тем же объемом смеси этилацетата с гексаном. Экстракты объединяют в концентраторе объемом 250 см³ и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре водяной бани не выше 35 °С.

9.2.3. Бутилирование экстракта

Сухой остаток, полученный по п. 9.2.2, последовательно переносят тремя порциями МТБЭ по 3 см³ каждая в виалу объемом 40 см³ и высушивают током теплого воздуха. Проводят бутилирование, как указано в п. 7.4. После охлаждения виалы до комнатной температуры добавляют 2 см³ гексана и 20—25 см³ бидистиллированной воды. Смесь интенсивно встряхивают и выдерживают до полного разделения фаз в виале. Из верхнего гексанового слоя 1 мм³ раствора вводят в хроматограф.

9.3. Зерно риса

9.3.1.    Экстракция

Образец измельченного зерна риса массой 10 г помещают в полипропиленовую банку для экстракции и центрифугирования объемом 200 см³, добавляют 100 см³ подкисленного ацетона и помещают на аппарат для встряхивания проб на 60 мин. Затем пробу центрифугируют в течение 5 мин при скорости 4 000 оборотов в минуту. Экстракт фильтруют в концентратор объемом 250 см* через бумажный фильтр низкой плотности и выпаривают до водного остатка на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °С.

9.3.2.    Очистка полученного экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

К водному остатку, полученному по п. 9.3.1, добавляют 100 см³ воды и проводят очистку экстракта по схеме, указанной в п. 9.2.2.

9.3.3.    Бутилирование экстракта

Сухой остаток, полученный по п. 9.3.2 последовательно переносят тремя порциями МТБЭ по 3 см³ каждая в виалу объемом 40 см³ и высушивают током теплого воздуха. Проводят бутилирование, как указано в п. 7.4.

9.3.4.    Очистка экстракта на колонке с флоризилом

Из верхнего (гексанового) слоя в виале, полученного в п. 9.3.3, отбирают 5 см³ и наносят на заранее подготовленную колонку с флоризилом.

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А. Ю. Попова

29 декабря 2017 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств цигалофоп-бутила в воде и цигалофопа в воде, почве, зерне и соломе риса методом капиллярной газожидкостной хроматографии с масс-спсктрометрическим детектированием

Методические указания _МУК    4.1.3516—17_

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода капиллярной газожидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием для определения массовых концентраций цигалофопа-бутила и цигалофопа в воде в диапазоне 0,005— 0,05 мг/дм³ и цигалофопа в почве в диапазоне 0,01—0,1 мг/кг, а также уровня остаточных количеств цигалофопа в зерне риса в диапазоне 0,01—0,1 мг/кг и в соломе риса в диапазоне 0,05—0,5 мг/кг. Методические указания носят рекомендательный характер.

Цигалофоп-бутил

Название по ИЮПАК: бутил (К)-2-[4-(4-циано-2-фторфенокси)фе-нокси]пропионовой кислоты.

Структурная формула:

О

Эмпирическая формула: C20H20FNO4. Молекулярная масса: 357,4.

Агрегатное состояние: кристаллическое вещество.

Цвет, запах: белый, слабый миндальный запах.

Давление паров: 1,2 х 10"³ МПа при 20 °С.

Коэффициент распределения в системе октанол/вода при pH 7, 20 °С: Kow logP =■ ^e 3,32.

Растворимость в воде (мг/дм³, 20 °С): 0,44 (небуферизованная); 0,46 (pH 5); 0,44 (pH 7).

Растворимость в органических растворителях (г/дм³, при 20 °С): в ацетонитриле, хлористом метилене, метаноле, ацетоне, этилацетате > 250.

Цигалофоп-бутил стабилен при pH 4, гидролизуется медленно при pH 7. При pH 1,2 и pH 9 разложение происходит быстро. Период полураспада при pH 7 и 9 (25 °С) 96 дней и 43 часа соответственно. Цигалофоп-бутил гидролизуется с получением цигалофоп кислоты в качестве единственного продукта гидролиза.

Водный фотолиз ДТэд 28 дней (при естественном солнечном свете в стерильной забуференной воде, pH 5).

В почве цигалофоп-бутил быстро метаболизируется, ДТ₅₀: 3,2—9,8 часа, ДТ90: 16—62 часа. Основными метаболитами являются цигалофоп кислота, которая быстро разлагается до дикислоты через амид.

Краткая токсикологическая характеристика. Цигалофоп-бутил относится к мало опасным веществам по острой пероральной (ЛД50 (мыши, крысы) более 5 000 мг/кг) и дермальной (ЛД50 для крыс более 2 000 мг/кг) токсичностям, но к умеренно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК50 (4 часа) для крыс 5 630 мг/м³ воздуха). Не раздражает кожу, вызывает небольшое раздражение глаз у кроликов.

Область применения. Цигалофоп-бутил - гербицид из группы ари-локсифеноксипропионаты системного действия. Высокоселективный нослсвсходовый гербицид для борьбы со злаковыми сорняками в рисе, в том числе резистентных популяциях куриного проса. Механизм действия - ингибирование ацетил коэнзима-А карбоксилазы, фермента, отвечающего за биосинтез жирных кислот. Толерантность риса обусловлена быстрой метаболистической трансформацией в культуре цигалофоп-бутила в гербицидно неактивную цигалофоп-двухосновную кислоту.

Предлагается для применения в России в посевах риса с нормой расхода 180—ЗЮгд.в. на 1 га путем опрыскивания в фазе развития культуры от 1 листа до конца кущения, однократно.

В России гигиенические нормативы не установлены.

ВМДУ в импортируемой продукции (мг/кг): зерно риса - 0,01.

Цигалофоп - основной метаболит цигалофоп-бутила.

Название по ИЮПАК: (211)-2-[4-(4-циано-2-фторфенокси)фенок-си]пропионовая кислота.

Структурная формула:

Эмпирическая формула: C16H12FNO4.

Молекулярная масса: 301,3.

Агрегатное состояние: кристаллическое вещество.

Цвет, запах: белый, без запаха.

Давление насыщенного пара: 1,2 х 10~³ МПа при 25 °С.

Коэффициент распределения в системе октанол/вода при pH 7, 20 °С: Kow logP = 2,74.

Растворимость в воде (мг/дм³,20 °С): 0,7.

В почве ДТ50 меньше 1 дня.

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и се составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (п - 20) приведены в табл. 2.

Таблица 1

Метрологические параметры для цигалофоп-бутила и цигалофопа

Анализи руемый объект Диапазон определяемых концентраций^ мг/кг (мг/дм3) Показатель точности (граница относительной погрешности), ±5, % Р = 0,95 Стандартное отклонение повторяемости. Предел повторяемости, г» % Предел воспроиз водимо сти, Д,% Цигалофоп-бутил Вода 0,005—0,01 вкл. 40 5 15 21 0,02—0,05 вкл. 30 4 12 17 Цигалофоп Вода 0,005—0,01 вкл. 40 10 27 37 0,02—0,05 вкл. 30 7 19 27 Почва 0,01—0,1 вкл. 50 5 15 20 Зерно риса 0,01—0,1 вкл. 50 6 16 23 Солома риса 0,05—0,1 вкл. 50 5 13 19 0,2—0,5 вкл. 25 6 16 23

Таблица 2 Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для цигалофоп-бутила и цигалофопа

Анализи руемый объект Метрологические параметры, Р = 0,95, п = 20 предел обнаружения, мг/кг (мг/дм3) диапазон определяемых концентраций, мг/кг полнота извлечения вещества, % стандартное отклонение S, % доверительный интервал среднего результата, ±,% Цигапофоп-бутил Вода 0,005 0,005—0,05 97,1 4,7 2,1 Цигалофоп Вода 0,005 0,005—0,05 94,7 6,8 3,0 Почва 0,01 0,01—0,1 84,4 5,8 2,3 Зерно риса 0,01 0,01—0,1 95,4 6,1 2,7 Солома риса 0,05 0,05—0,5 90,9 4,7 2,0

2. Метод измерений

Метол основан на определении цигалофоп-бутила и цигалофопа с помощью капиллярной газожидкостной хроматографии с использованием тандемного масс-спектрометрического детектора (ГХ-МС-МС).

Определение цигалофоп-бутила в воде проводится после его экстракции гексаном, а цигалофопа - после последующего подкисления образца, экстракции смесью этилацетата с гексаном и бутилирования.

Определение цигалофопа в почве проводится после его экстракции смесью ацетонитрила с водой и соляной кислотой, из зерна и соломы риса - подкисленным ацетоном, очистки экстрактов перераспределением между двумя несмешивающимися фазами с последующим бутили-рованием и очисткой проб на колонках с флоризилом.

Идентификация бутилового эфира цигалофопа основывается на масс-спектрах характеристичных ионов, соотношении их интенсивностей и времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность метода достигается за счет использования тандемного масс-спектромстрического детектора, регистрирующего одновременно несколько специфичных ионов, характеризующих вещество.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3. /. Средства измерений

Весы аналитические класса точности - специальный (I) с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г Весы лабораторные общего назначения класса точности - средний (III) с наибольшим пределом взвешивания до 400 г и пределом допустимой погрешности ± 0,5 г Колбы мерные на 10, 50,100 и 1 000 см³ рН-метр/милливольтметр с диапазоном измерения 0—14 pH; ± 1 999 мВ Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 см³ Хромато-масс-спектрометрическая система, включающая:

-    газовый хроматофаф с испарителем для ввода проб с делением/без деления потока и капиллярной колонкой, соединенный с тандемным масс-спектрометрическим детектором типа тройная квадруполь с диапазоном масс (m/z) 1,2—1 050 а.с.м., разрешением 0,7—2,5 а.е.м., скоростью сканирования до 6 250 а.е.мУс, чувствительностью при ионизации электронным ударом в режиме полного сканирования не ниже 300 : 1 (1 фг октафтор-нафталина по массе m/z 272)

—    компьютер с программным обеспечением, которое осуществляет управление и контроль всеми физическими параметрами, требуемыми для согласованной работы всех систем прибора, обработку данных, включая калибровку, визуализацию спектров, автоматические количественные расчеты, архивирование данных, создание и использование библиотек масс-спектров

Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 см³

Примечание. Допускается использование других средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Цигалофоп-бутил, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,9 %

Цигалофоп, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,4 % Азот, осч Ацетон, осч

Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм Бутанол, ч

Вода дистиллированная и (или) бидистилли-рованная (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости)

Гелий, очищенный n-Гексан, хч

Калий марганцовокислый, чда Кальций хлористый, ч Кислота серная, хч Кислота соляная, хч Натрий сернокислый, безводный, хч Натрий хлористый, хч Натрия гидрокарбонат, хч Флоризил (магния силикат, 99 %, CAS 1343-88-0) для колоночной хроматографии, зернение 60/100 меш Этилацетат, чда

Эфир метил-трет-бутиловый (МТБЭ), чда, марка «А»

Примечание: Допускается использование других реактивов с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы Аппарат для встряхивания проб с возвратно-поступательным направлением колебаний, с максимальной загрузкой 10 кг, с амплитудой колебаний 30 мм и скоростью от 10 до 300 колебаний в минуту

Банки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см³

Блок нагревательный сухой с регулируемой температурой, пределом 150 °С Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная

Виалы объемом 2 см³, закрываемые завинчивающейся или запрессовывающейся крышкой с тефлонированной резиновой прокладкой, прокалываемой микрошприцем для автоматического дозатора проб

Виалы с тефлоновыми прокладками, стеклянные, объемом не менее 40 см³ Воронки делительные на 250 см³ Воронки лабораторные стеклянные Испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3 ООО см³, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об./мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием объемом 5 дм³ и с диапазоном температур от 20 до 100 °С

Колбы конические плоскодонные на 100 и 250 см³

Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100, 250 и 4 000 см³ ТС Колонка хроматографическая капиллярная из кварцевого стекла с внутренним диаметром 0,25 мм, длиной 30 м, с неподвижной фазой (5 % - фенил- и 95 % - метилсилоксана) и толщиной пленки 0,25 мкм Насос диафрагменный, химически стойкий на 100 % с мощностью электропривода 245 Вт, предельным вакуумом 100 мбар/абс., с избыточным давлением 1 бар и скоростью откачки 34 дм³/мин

Стаканы стеклянные термостойкие объемом 100 -2 ООО см³

Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4 000 см³ и приемной конической колбой объемом 1 000 см³