Федеральная сдужба по напору к сфере защиты нрав но ■ребнгедей и бдагонодучия чедовека

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды

Методические указания МУК 4Л .2668—10,4.1.2675—4Л .2679—10,

4.1.2683—4.1.2684— 10,4.1.2687—10, 4.1.2690— 10, 4.1.2706—4.1.2709—10,4.1.2768—10

МУК 4.1.2675—10

8.1.3. Очистка этилацетата

Приготовление раствора натрия углекислого с массовой долей 5 %

Навеску (5 ±0.1) г натрия углекислого растворяют в конической колбе в 40—60 см³ дистиллированной воды. Полученный раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³ и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой.

Срок хранения раствора 1 неделя.

Эгилацетат промывают последовательно раствором натрия углекислого с массовой долей 5 %. насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют.

8.1.4. Очистка силикагеля

Силикагель 60 (0.063—0.2 мм) для колоночной хроматографии встряхивают с двойным объемом очищенного ацетона и затем фильтруют на воронке Бюхнера через бумажный фильтр. Силикагель на фильтре промывают 1.5 объемом ацетона и затем высушивают при температуре 130 °С в течение 5 часов.

8.2. Подготовка колонки с силикагелем для очистки жстракта

Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 8—10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 5 г силикагеля в 20 см³ гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку. предназначенную для анализа трифлоксистробина. промывают 30 см³ смеси гексан-этилацетат (1:1, по объему) со скоростью 1—2 капли в секу нду , затем 30 см³ смеси гексан-этилацетат (9 : 1. по объему). а колонку. использу емую при анализе метаболита, последовательно промывают 25 см³ смеси этилацстат-мстанол (1 : 1. по объему) и 30 см³ этилацетат-метанол (9 : 1. по объему).

8.3. Определение объема злюента, необходимого для полного

вымывания трш/кюксистробина и метаболита ЦГА 321113 из колонки с силикагелем

При отработке методики или поступлении новой партии силикагеля проводят определение объёма элюента. необходимого для полного вымывания трифлоксистробина и метаболита ЦГА 321113 из колонки с силикагелем.

В круглодонну ю колбу вместимостью 10 см³ помещают 0.1 см³ градуировочного раствора трифлоксистробина с массовой концентрацией 10 мкг/см³ в ацетонитриле (8.6.2) и отдувают растворитель током азота.

Остаток растворяют в 0.3 см³ этилацетата, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин. добавляют 2.7 см³ гексана, перемешивают и вновь помешают в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку с силикагелем, подготовленн\ю по 8.2. для анализа трифлоксистробина. Промывают колонку 50 см³ смеси гексан-этилацетат (9 : 1. по объему) со скоростью 1—2 капли в секунду. Затем колонку промывают 50 см³ смеси гекса н-этилацетат (8 : 2. по объему), отбирая последовательно по 10 см³ элюата. Каждую фракцию упаривают, остатки растворяют в 1 см³ ацетонитрила, помещая в ультразвуковую ванн> на 1 мин. вносят 1 см³ подвижной фазы, подготовленной по 8.4. для анализа трифлоксистробина. перемешивают, а затем хроматографируют. Условия хромтографн-рования - в соответствии с 7.2.

В круглодонную колбу вместимостью 10 см³ помещают 0.1 см³ градуировочного раствора метаболита ЦГА 321113 с массовой концентрацией К) мкг/см³ в ацетонитриле (8.6.2) и отдувают растворитель током азота. Остаток растворяют в 2.7 см³ этилацетата. помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин, добавляют 0.3 см³ метанола, перемешивают и вновь помещают в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку с силикагелем, подготовленную по 8.2 для анализа метаболита. Промывают колонку 40 см³ смеси этилацетат-метанол (9 : 1. по объему) со скоростью 1—2 капли в секунду. Затем колонку промывают 50 см³ смеси этилацетат-метанол (7:3, по объему), отбирая последовательно по 10 см³ элюата. Каждую фракцию упаривают, остатки растворяют в 1 см³ ацетонитрила, помещая в ультразвуковую ванн> на 1 мин. вносят 1 см³ подвижной фазы, подготовленной по 8.4 для анализа метаболита, перемешивают, а затем хроматографируют. Условия хромтографирова-ння - в соответствии с 7.2.

По результатам обнаружения трифлоксистробина и метаболита ЦГА 321113 в каждой из фракций определяют объем элюентов. необходимых для полного вымывания трифлоксистробина и метаболита ЦТ А 321113 из колонки.

8.4. Подготовка подвижной фат дли ВЭЖХ

В мерную колбу вместимостью 1 ()()() см³ помещают 750 см³ ацетонитрила. 250 см³ деионизованной воды, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр. Эту подвижную фазу используют при анализе трифло кс истроб и на.

В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 600 см³ ацетонитрила. 399 см³ деионизованной воды и 1 см³ орто-фосфорной кислоты. перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр. Эт> подвижную фазу используют при анализе метаболита ЦГА 321113.

МУК 4.1.2675—10

8.5. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку соответствующей подвижной фазой для ВЭЖХ. приготовленной по 8.4. при скорости подачи растворителя 0.5 см³/мин не менее 2-х часов до установления стабильной базовой линии (дрейф базовой линии в течение 1 часа нс более 5 %. а уровень шумов не более 2 % диапазона выходного сигнала на шкале измерений).

8.6. Приготов.1ение градуировочных растворов

8.6.1. Исходный градуировочный раствор трифлоксистробина (метаболита ЦГЛ 321113) с массовой концентрацией 100 мкг/см³

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0.010 ±0.0001 г трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113). растворяют в 40—50 см³ ацетонитрила, доводят объем раствора ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.

Раствор трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113) хранят в морозильной камере при температуре (-18) °С в течение одного месяца (трех месяцев).

8.6.2. Градуировочный раствор трифлоксистробина (метаболита ЦГЛ 321113) с массовой концентрацией 10 мкг/см³ (раствор № 1)

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного градуировочного раствора трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113) с массовой концентрацией 100 мкг/см³ (8.6.1). разбавляют ацетонитрилом. доводят объем раствора до метки. Эти растворы используют для приготовления градуировочных растворов № 2—5.

Градуировочный раствор № 1 хранят в морозильной камере при температуре нс выше (-18) °С в течение недели (месяца).

8.6.3. Градуировочные растворы трифлоксистробина (метаболита ЦГЛ 321113) с массовой концентрацией 0,05 -0,5 мкг/см³ (растворы № 2—5)

В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают 0.5; 1.0; 2.5 и 5.0 см³ градуировочного раствора трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113) с массовой концентрацией 10 мкг/см³ (8.6.2). доводят объем раствора до метки соответствующей подвижной фазой, приготовленной по 8.4. тщательно перемешивают, получают растворы № 2—5 с массовой концентрацией трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113) 0.05; 0.1; 0,25 и 0.5 мкг/см , соответственно.

Растворы готовят непосредственно перед использованием.

29

8.7. Градуировка хроматографа

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мВ) от массовой концентрации трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113) в растворе (мкг/см³). устанавливают методом абсолютной градуировки по 4 градуировочным растворам.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют при условиях 7.2. Каждый раствор хроматографируют дважды. Расхождение между параллельными определениями нс должно превышать предел повторяемости г.

По полученным данным строят градуировочную характеристику.

8.8 Контроль стабильности градуировочной характеристики

Контроль стабильности градуировки проводят не реже 1 раза в три месяца, а также при смене реактивов или изменении условий анализа.

Для контроля стабильности используют вновь приготовленные градуировочные растворы с массовой концентрацией исследуемого вещества в начале, середине и в конце диапазонов измерений, которые анализируют в точном соответствии с методикой.

Градуировочную характеристик) считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие (1)

IS_M -.S'J

■— -- • 100 < Е_м, где    (1)

Sow Sgp - значение площади пика трифлоксистробина (метаболита ЦГА 321113) в образце для контроля, измеренное и найденное по градуировочной характеристике соответственно, уел. ед.;

Кгр - норматив контроля. Кгр - 0.5 • б. где

± S- границы относительной погрешности. %. (табл. 1).

Если условие стабильности нс выполняется только для одного образца. то повторно анализируют этот образец для исключения результата. содержащего грубую ошибку.

Если градуировка нестабильна, выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов для градуировки, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировки прибор градуируют заново.

9. Отбор, подготовка и хранение проб

Отбор проб производят в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов пита-

МУК 4.1.2675—10

ния и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов (№ 2051-79 от 21.08.79) и правилами, определенными ГОСТ 25896—83 «Виноград свежий столовый» и ГОСТ 25892—83Е «Сок виноградный. ТУ». Пробы ягод хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике нс более 1 дня; для длительного хранения пробы замораживают и хранят в морозильной камере при температуре (-18) °С. Сок пол> чают из ягод непосредственно перед проведением анализа. Перед анализом ягоды измельчают.

9.1. Экстракции трифлоксчстробипа (метаболита ЦГЛ 321113)

9.1.1.    Ягоды винограда

Приготовление водного раствора ацетона с объемной долей 80 %.

В мерную колбу вместимостью 500 см³ вносят 100 см³ дистиллированной воды и доводят объем раствора до метки ацетоном.

Срок хранения - 1 неделя.

Навеску измельченного растительного материала массой 20 г помещают в стакан гомогенизатора вместимостью 500 см³. приливают 100 см³ водного раствора ацетона с объемной долей 80 % и гомогенизируют 3 минуты при 10 000 об./мин. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу Бунзена вместимостью 250 см³. Осадок переносят в коническую колбу вместимостью 250 см³, приливают 70 см^т водного раствора ацетона с объемной долей 80%, перемешивают и колбу помещают в ультразвуковую ванну на 5 минут. Суспензию фильтруют и остаток на фильтре промывают 50 см³ водного раствора ацетона с объемной долей 80 %. Экстракты и промывную жидкость переносят в химический стакан вместимостью 500 см³, перемешивают, измеряют объем раствора. 1/4 его часть (эквивалентную 5 г образца) переносят в круглодонную колбу вместимостью 100 см³ и упаривают на роторном вакуумном испарителе при температуре 30 °С до водного остатка (7—10 см³). К водному остатку добавляют 20 см³ деионизованной воды и раствор переносят в химический стакан вместимостью 100 см³. Далее проводят очистку экстракта по 9.2.

9.1.2.    Виноградный сок

Навеску (10 г) свежевыжатого сока помещают в химический стакан вместимостью 100 см³, приливают 80 см³ деионизованной воды, перемешивают. измеряют объем растворе!. 1/2 его часть (эквивалентную 5 г образца) переносят в химический стакан вместимостью 100 см³. Дальнейшую очистку экстракте! проводят по 9.2.

31

9.2. Очистка экстрактов перераспределением в системе неачешивающихся растворителей

Приготовление раствора гидроксида натрия с молярной концентрацией 1 мольдм³.

Растворяют (4 ± 0,1) г гидроксида натрия в 50—70 см³ дистиллированной воды, затем раствор переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³ и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой.

Срок хранения раствора - 1 неделя.

Приготовление раствора орто-фосфорной кислоты с молярной концентрацией 5 моль дм³

Растворяют (16.4 ± 0.1) г орто-фосфорной кислоты в 50—70 см³ дистиллированной воды, затем переносят раствор в мерную колбу вместимостью 100 см³ и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой.

Срок хранения раствора - 1 неделя.

9.2.1.    Водную фракцию, полученную по 9.1.1 и 9.1.2 и помещенную в химический стакан, подщелачивают раствором гидроксида натрия с молярной концентрацией 1 моль/дм³ до pH 6. контролируя кислотность раствора с помощью иономера. Раствор переносят в делительную вороню вместимостью 100 см³. приливают 30 см³ гексана и смесь интенсивно встряхивают в течение 1 минуты. После разделения фаз органический слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу вместимостью 100 см³. Экстракцию водной фазы повторяют еще два раза, используя 30 и 20 см³ гексана. Объединенную гексановую фракцию, содержащую трифлоксистробин. упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температу ре 30 °С.

9.2.2.    Оставшуюся после экстракции гексаном водную фазу переносят в химический стакан и подкисляют раствором орто-фосфорной кислоты с молярной концентрацией 5 моль/дм³ до pH 2. контролируя кислотность раствора с помощью иономера. Раствор переносят в делительную вороню вместимостью 100 см³, приливают 30 см³ дихлормста-на и смесь интенсивно встряхивают в течение 1 минуты. После разделения фаз органический слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу вместимостью 100 см³. Экстракцию водной фазы повторяют еще два раза, используя 30 и 20 см³ дихлормстана. Объединенную дихлорметановую фракцию, содержащую метаболит ЦГА 321113. упаривают досуха на ротационном ваку умном испарителе при температу ре 30 °С. Дальнейшую очистку экстрактов проводят по 9.3.

МУК 4.1.2668—10,4.1.2675—4.1.2679—10, 4.1.2683—10, 4.1.2684—10, 4.1.2687—10, 4.1.2690—10, 4.1.2706—4.1.2709—10,4.1.2768—10 Содержание

Определение остаточных кол и мест кж>1ианилина в воде, почве, зеленой массе, семенах и масле рапса, ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2668    10.....................4

Методика выполнения измерений остаточного содержания грифлоксистро-бина и его метаболита в ягодах и соке винограда методом высокоэффективной

жидкостной хромаю! рафии: МУК 4.1.2675—10......................................................20

Методика выполнения измерений остаточного содержания тиаклоприда в зеленой массе, семенах и масле рапса, ягодах и соке винограда методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2676—10...................37

Методика выполнения измерений остаточного содержания протиоконазола по метаболиту протиоконазол-дестио в семенах, масле и зеленой массе рапса

методом капиллярной газожидкостной хромаю! рафии: МУК 4.1.2677—10.........53

Определение остаточных количеств Псноксулама в воде, почве, зерне и соломе риса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2678—10.......................................................................................................70

Определение остаточных количеств гидразида малеиновой кислоты

(малеинового гидразида) в почве методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии: МУК4.1.2679—10 ........................................................................... 89

Методика выполнения измерений остаточного содержания гриадимснола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2683—10.........................................................................103

Методика выполнения измерений остаточного содержания тебуконазола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2684    10.........................................................................117

Методика выполнения измерений остаточного содержания мезосульфурон-метила в воде, почве, зеленой массе, зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хрома юг рафии:

МУК'4.1.2687—10.....................................................................................................131

Методика выполнения измерений остаточного содержания спироксамина в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2690—10.........................................................................149

Определение остаточных количеств эмамектина (эмамектина бензоата) в воде, почве, капусте, томатах, ягодах винограда и виноградном соке методом

высоко эф<|)ек1 и иной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2706— 10.................163

Измерение концентраций пикокеистробина в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК4.1.2707—10.........................................................................180

Определение остаточных количеств шрама в растительном масле методом

газохроматографического парофазного анализа: МУК 4.1.2708- 10....................192

Измерение концентраций квинмерака в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операюров методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2709—10.................204

Определение остаточных количеств имидаклоприда в соке яблок и черной смородины, в масле кукурузы высокоэффективной жидкостной хромаю! рафии: МУК 4.1.2768—10.........................................................................216

3

МУК 4.1.2675—10

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в с(|)срс защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

2 авгу ста 2010 г.

Дата введения: 1 октября 2010 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Методика выполнения измерении остаточного содержания трифлоксистро-бина и его метаболита в ягодах и соке винограда методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2675—10

1. Назначение и область применения

Настоящий документ устанавливает процедуру измерений массовой доли трифлоксистробина и его метаболита в ягодах и соке винограда в диапазоне (0.02—0.2) млн ¹ (мг/кг) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Название вещества по ИСО: Трифлоксистробин

Название вещества но ИЮПАК: мстил (Е)-мстоксиимино-{(Е)-а-11 -(ссаа-трифтор-т-толнл)этилиденаминооксн)-о-толил} ацетат

C_»H₁₉F3N_:0₄ Мол. масса: 408.4

Белый порошок без запаха. Температура плавления: 72.9 °С. Давление паров при 25 °С: 3.4 х 10 ⁶ Па. Коэффициент распределения н-октанол-вода: К^. log Р = 4,5 (25 °С). Растворимость (г/дм³) при 25 °С:

МУК 4.1.2675—10

ацетон, толуол, дихлорметан, этилацетат - 500. метанол - 76. гексан -11. вода - 0,0006.

Вещество стабильно на воздухе и на свету, быстро гидролизуется в водном растворе при pH 9 (DT5o= 1.1 дня).

В биологически активных почвах в анаэробных условиях трифлок-ситстробин быстро разрушается: DT5o= 0.3—1 день. DT9o= 4—8 дней.

Трнфлоксистробин при попадании в воду, почву и растительные объекты быстро гидролизуется с образованием довольно устойчивого метаболита - (Е.Е)-.метоксиимино-{2-| 1-(3-трнфтормстилфснил)-этили-дснамино-оксимстил|фенил}-уксусной кислоты (ЦГА 321113).

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность (LD$o) язя крыс и мышей - более 5 000 млн ¹ (мг/кг): острая дермальная токсичность (LD*,) язя крыс -более 2 000 млн ¹ (мг/кг): острая ингаляционная токсичность (LC») язя крыс - более 4 646 мг/м³ воздуха. Трифлоксистробин не оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку глаз кролика. Фунгицид токсичен для дафний, рыб и водорослей в лабораторном эксперименте.

В России установлены следующие гигиенические нормативы:

ДСД - 0.03 млн ¹ (мг/кг) массы тела человека; МДУ в ягоязх и соке винограда - 0.05 млн ¹ (мг/кг).

Основной метаболит трифлоксистробина: ЦГА 321113.

Название вещества по ИЮПАК: (Е)-мстокснимино-{(Е)-а-| 1-(ааа-трн(|)тор-т-толил)этнлндснамнноокси | -о-толил }ацстат

C₁₉H₁₇F₃N₂04

Мол. масса: 394.4

Белый порошок без запаха. Другие физико-химические и токсикологические характеристики основного метаболита трифлоксистробина отсутствуют.

В биологически активных почвах в аэробных условиях метаболит ЦГА 321113 весьма стабилен: DT^= 1 К) дней, DT9o= 279 дней.

Область применения

Трифлоксистробин - синтетический фунгицид из класса стробилу-ринов. являющихся проду центам и гриба Strobilunis tenaccllus. Вещество

21

эффективно против широкого круга грибных патогенов хлебных злаков, овощных, кормовых, технических и плодовых культур. Обладает защитным. лечебным и профилактическим действием.

Применяется в России в яблоневых и грушевых садах в качестве средства борьбы с возбудителями мучнистой росы, парши, альтернариоза. пятнистостей и болезней при хранении с нормой расхода до 75 г д.в./га и двукратной обработкой за сезон с 10—14-дневным интервалом.

2. Метрологические характеристики

При соблюдении всех регламентированных условий и проведении анализа в точном соответствии с данной методикой значение погрешности (и ее составляющих) результатов измерений нс превышает значений, приведенных в табл. 1.

Таблица 1

Веще- ство/анализ ируемый объект Диапазон измерений массовой доли, млн'1 (мг/кг) I1оказа-тель точноеш (1 раницм относительной погрешности), ± б, % при Р = 0,95 11оказа-тель повторяемости (относительное средне-квадрати-ческое огклоне-ние иовто-ряемости). I Указатель воспроизводимости (относительное среднеквад-ратическое отклонение воспроиз-1ЮДИМОС1И), oR, % 11редел повторяемости, г,%, Р = 0,95, н = 2 Критическая разнос п» для результатов анализа, полученных в дву\ лабораториях. С1)о 95, % (///=//;= 2) Р = 0,95 Три- флоксислро бин в ягодах В1Ш01 рада От 0,020 до 0,10 вкл. 47 10 15 28 37 Св. 0,10 до 0,20 вкл. 25 5 8 14 20 Три- флоксиаро бин в соке витмрада От 0,020 до 0,10 вкл. 38 8 12 22 29 Св. 0,10 до 0,20 вкл. 28 5 8 14 20 Метаболит ЦТА 321113 в ягодах винофада Or 0,02 до 0,10 вкл. 50 10 15 28 37 Св. 0,10 до 0,20 вкл. 36 7 11 19 27 Метаболит ЦГЛ 321113 в соке винограда От 0,02 до 0,10 вкл. 51 12 18 33 44 Св. 0,10 до 0,20 вкл. 36 9 14 25 34,5

МУК 4.1.2675—10

3. Метод измерений

Метод основан на экстракции трифлоксистробина и его метаболита из ягод винограда раствором водного ацетона, а из сока водой, очистке экстрактов, содержащих трифлоксистробина и его метаболита, от коэкс-трактивных компонентов перераспределением их в системе нссмсшива-ющихся растворителей, а также на колонке с силикагелем, с последующим измерением содержания трифлоксистробина и его метаболита в очищенных экстрактах на жидкостном хроматографе с ультрафиолетовым детектированием и обработкой хроматограмм методом абсолютной градуировки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен.

4. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

4.1. Средства измерений Жидкостный хроматограф «Breeze» с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны (Waters. США), либо жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором (фирма «Кпаиег». Германия)

Весы лабораторные общего назначения модели ВЛА-2(Х) с наибольшим пределом взвешивания 200 г

Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания 500 г Набор гирь

Колбы мерные, вместимостью 2-100-2. 2-1(ХХ)-2 Пипетки градуироваиные 1-1-2-1; 1-1-2-2; 1-2-2-5; 1-2-2-10

Пробирки градуированные с пришлифованной пробкой П-2-5-0.1; П-2-10-0.2 Цилиндры мерные 1-25:1-50; 1-100; 1-500;

1-1000

Мономер универсальный ЭВ-74 или аналогичный Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа, вместимостью (20—100) мм³, модель Microlitcr# 1710 («НатШоп».США)

23

МУК 4.1.2675—10

4.2. Реактивы

Аналитический стандарт трнфлоксистробина с содержанием основного вещества 99,7 % (Байер. Германия)

Аналитический стандарт метаболита ЦГА 321113 с содержанием основного вещества 99,0 % (Байер. Германия)

Ацетон, квалификации чда Ацетонитрил для хроматографии, квалификации хч

Вода дистиллированная или деионизованная н-Г сксан

Метиловый спирт (метанол), квалификации хч Метилен хлористый (дихлормстан), квалификации хч

Натрия сульфат безводный, квалификации хч Натрия гидроксид, квалификации хч Этиловый эфир уксусной кислоты (этилацетат). квалификации ч

Кислота орто-фосфорная, квалификации хч.

85.6 %

4.3 Вспомогательные устройства, материалы Гомогенизатор Omni-mixer («Sorvall»,CLUA) или аналогичный.

Ванна ультразвуковая, модель D-50. фирма «Branson Instr. Со.» (США)

Вата медицинская    ТУ 9393-001-00302238

Воронка Бюхнера    ГОСТ 9147-80

Воронки делительные, вместимостью 100 и 250 см³ ГОСТ 25336-82 Воронки конусные диаметром 30—37 мм    ГОСТ 25336-82

Колба Бунзена    ГОСТ 25336-82

Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 50 и 100 см³    ГОСТ 25336-82

Колбы плоскодонные, вместимостью 250 см³ ГОСТ 25336-82 Колонка хроматографическая стеклянная, длиной 25 см и внутренним диаметром 8—10 мм Колонка хроматографическая, стальная, длиной 15 см. внутренним диаметром 4.0 мм. содержащая Днасфср 110-С 18 (5 мкм)

МУК 4.1.2675—10

Насос водоструйный вакуумный    ГОСТ 10696-75

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М    ТУ 25-11-917—74

или ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы «ВисЫ» (Швейцария)

Силикагель 60 (0.063—0.2 мм) для колоночной хроматографии («Мерк». Германия)

Стаканы химические, вместимостью НК) и 5(Х) ал ГОСТ 25336 -82. Стекловата

Установка для перегонки растворителей с    ГОСТ 9737-93

дефлегматором    (ИСО 641-75)

Фильтры бумажные «красная лента».

обеззоленные    ТУ 64)9-2678—77

или фильтры из хроматографической бумаги Ватман ЗММ

Примечание. Допускается применение других средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками не хуже приведенных в разделе 4.

5. Требования безопасности

5.1.    При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легко воспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.007-76. ГОСТ 12.1.005-88.

5.2.    При проведении анализов горючих и вредных веществ соблюдают требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и должны быть в наличии средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-90.

5.3.    При выполнении измерений с использованием хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019—79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

5.4.    Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточновытяжной вентиляцией. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны нс должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГЫ 2.2.5131.3—03 и ГН 2.2.5.2308—07.

6. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию нс ниже лаборанта-нсслсдоватсля с опытом работы на жидкостном хроматографе.

К проведению пробоподготовкн допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

25

7. Условия измерений

7.1.    При выполнении измерений соблюдают следующие условия. Приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят в

следующих условиях:

-    температура воздуха (20 ± 5) °С:

-    атмосферное давление (84—106) кПа;

-    относительная влажность воздуха нс более 80 %.

7.2.    Условия хроматографического анализа.

Температу ра колонки: комнатная Скорость потока элюента: 0,7 см³/мин Рабочая длина волны: 251 нм

Чувствительность детектора: 0.005 ед. абсорбции на шкалу Объем вводимой пробы: 20 мм³ Линейный диапазон детектирования: (1—10) иг Подвижная фаза для трифлоксистробина:    ацетонитрил-вода

(75 : 25. по объему)

Время удерживания трифлоксистробина: 7 мин 20 с ± 0.2 мин Подвижная фаза для метаболита:    а    цсто    и    нтр    ил- вода-Н 3РО4

(60 : 39,9 : 0.1. по объему)

Время удерживания метаболита ЦТ А 321113:9 мин 20 с ± 0.2 мин.

8. Подготовка к выполнению измерений

Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей, приготовление растворов, подвижной фазы для ВЭЖХ. кондиционирование хроматографической колонки, градуировка хроматографа, подготовка колонки с силикагелем.

8.1. Очистка органических растворителей и приготовлен ие растворов

8.1.1. Очистка ацетонитрила Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пснтоксидом фосфора нс менее 1 часа, после чего перегоняют. Перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом натрия.

8.1.2. Очистка и-гексана Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до прекращения окрашивания се в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод. перегоняют над поташом.

26