ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ
НАЦИОНАЛЬНЫЙ
СТАНДАРТ
РОССИЙСКОЙ
ФЕДЕРАЦИИ
СПИРТ ЭТИЛОВЫЙ РЕКТИФИКОВАННЫЙ ИЗ ПИЩЕВОГО СЫРЬЯ
Определение массовой концентрации азотистых летучих оснований методом капиллярного электрофореза
Москва
Стандартинформ
2007
ГОСТ Р 52756-2007
Предисловие
Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 года № 184-ФЗ «О техническом регулировании», а правила применения национальных стандартов Российской Федерации — ГОСТ Р 1.0-2004 «Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения»
Сведения о стандарте
1 РАЗРАБОТАН Государственным научным учреждением «Всероссийский научно-исследовательский институт пищевой биотехнологии» Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ «ВНИИПБТ» Россельхозакадемии)
2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 176 «Спиртовая, дрожжевая и ликероводочная продукция»
3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 16 октября 2007 г. № 262-ст
4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». а текст изменений и поправок — в ежемесячно издаваемых информационных указателях «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация. уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования— на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет
© Стандартинформ. 2007
Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии
ГОСТ Р 52756-2007
Содержание
1 Область применения............................................1
2 Нормативные ссылки............................................1
3 Отбор проб и подготовка образцов....................................2
4 Метод измерений..............................................2
4.1 Сущность метода...........................................2
4.2 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы и материалы.........2
4.3 Подготовка к выполнению измерений................................3
4.4 Приготовление градуировочных растворов.............................3
4.5 Выполнение измерений........................................3
4.6 Градуировка прибора.........................................4
4.7 Анализ образца............................................4
4.8 Обработка результатов измерений..................................4
4.9 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости 6
5 Контроль стабильности результатов измерений в лаборатории....................6
6 Требования безопасности.........................................6
Приложение А (обязательное) Приготовление рабочего электролита для определения содержания
азотистых летучих оснований для анализа спирта....................7
Приложение Б (обязательное) Приготовление градуировочных растворов смеси азотистых летучих оснований для анализа спирта...............................8
III
Поправка к ГОСТ Р 52756-2007 Спирт этиловый ректификованный из пищевою сырья. Определение массовой концентрации азотистых летучих оснований методом капиллярною электрофореза
|
В каком месте |
Должно быть |
|
П>пк1 4.8.1.Таблица 1 |
Определяемые вещества |
Диапазон измеряемых массовых концентраций, мг/дм3 |
Показатель повторяемое! и (ОСКО* повторяемое! и) Ог,% |
П редел повторяемое» и /> %. при Я = 0,95 я-2 |
Показатель повт оря-емост и (ОСКО* повт прием ост и)
«V* |
Границы от носи-гельной not реш-ности +S. %, при Р= 0,95, п = 2 |
|
|
Азот истые
летучие
основания:
аммиак,
iiyipecmiH,
мет ил амин,
кадаверин,
димегила-
мин,
этила мин, этанола-мин, пирроли-Днн,
пропила-
мин,
изоирона-
ноламин,
изобутила-
мин,
изоамила-
мин,
фенилэт и-ламил |
От 0,10 до 0,50 в ключ. |
7 |
19 |
12 |
25 |
|
|
Св.0,50 до 1,50 в ключ. |
4 |
11 |
7 |
15 |
|
|
* ОСКО — относительное среднеквадратическое отклонение. |
(МУС№ 5 2008 г.)
НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
СПИРТ ЭТИЛОВЫЙ РЕКТИФИКОВАННЫЙ ИЗ ПИЩЕВОГО СЫРЬЯ
Определение массовой концентрации азотистых летучих оснований методом капиллярного
электрофореза
Rectified ethanol from food raw material. Determination of volatile nitrogen bases content by metgod of capillary
electrophoresis
Дата введения — 2009—01—01
1 Область применения
Настоящий стандарт распространяется на этиловый ректификованный спирт из пищевого сырья и устанавливает метод определения массовой концентрации азотистых летучих оснований (далее — амины): аммиака, путресцина. метиламина, кадаверина, диметиламина, этиламина. этанола-мина. пирролидина. лропиламина. изопропаноламина, изобутиламина. изоамиламина. фенилэтилами-на.
Диапазон измеряемых массовых концентраций токсичных азотистых летучих оснований составляет от 0.10 до 1.50 мг/дм3 включительно.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ Р 8.563-96 Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений
ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения
ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике
ГОСТ Р ИСО/МЭК 17025—2006 Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий
ГОСТ Р 51652-2000 Спирт этиловый ректификованный из пищевого сырья . Технические условия ГОСТ Р 51698-2000 Водка и спирт этиловый из пищевого сырья. Газохроматографический экспресс-метод определения содержания токсичных микропримесей
ГОСТ Р 52473-2005 Спирт этиловый из пищевого сырья. Правила приемки и методы анализа ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования
ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности
ГОСТ 12.1.010-76 Система стандартов безопасности труда. Взрывобезопасность Общиетребо-вания
ГОСТ 12.1.018-93 Система стандартов безопасности труда. Пожаровзрывобезопасность статического электричества Общие требования
ГОСТ 12.1.019-79 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты
Издание официальное
ГОСТ 1770-74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
ГОСТ 3773-72 Реактивы. Аммоний хлористый. Технические условия
ГОСТ 4328-77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия
ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия
ГОСТ 20301-74 Смолы ионообменные. Аниониты. Технические условия
ГОСТ 24104-2001 Весы лабораторные. Общие технические требования
ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего тода. и по соответствующим ежегодно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.
3 Отбор проб и подготовка образцов
3.1 Отбор проб для анализа спирта — по ГОСТ Р 52473 (подразделы 5.6 и 5.7).
3.2 Готовят образец спирта. Для этого из одной бутылки спирта, направленной в лабораторию для проведения измерений, в виа лу вместимостью 2 см3, предварительно ополоснутую содержимым бутылки. микродозатором вместимостью от 1 до 5 см3 включительно вносят 1 см3 продукта.
3.3 Для проведения проверки приемлемости результатов в условиях воспроизводимости объем отобранной пробы, направленной в лабораторию для проведения измерений, делят на две части и из каждой части готовят образец спирта по 3.2.
3.4 Анализ образца спирта проводят по 4.7.
4 Метод измерений
4.1 Сущность метода
Метод основан на разделении ионов азотистых летучих оснований вследствие их различной электрофоретической подвижности в процессе миграции по кварцевому капилляру в электролите под воздействием электрического поля с последующей регистрацией кондуктометрическим детектором.
4.2 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы и материалы
Система капиллярного электрофореза с диапазоном измерения рабочего напряжения от -30 до 30 кВ включительно, обеспечивающая поддержание рабочей температуры капилляра, оснащенная кварцевым капилляром длиной не более 150 см и внутренним диаметром 50 мкм. кондуктометрическим детектором и электронно-вычислительной машиной (компьютером) со специальным программным обеспечением для обработки фореграмм (далее — прибор).
Весы лабораторные по ГОСТ 24104. с наибольшим пределом взвешивания 210 г и ценой деления 0.1 мг.
Электролит, приготовленный по приложению А.
Микродозатор одноканальный «САРР» с переменным объемом от 1 до 5 см3 включительно (1).
Микродозатор одноканальный «САРР» с переменным объемом от 0.1 до 1 см3 включительно [1).
Микродозатор одноканальный «САРР» с переменным объемом от 0.005 до 0.05 см3 включительно (1).
Фильтры бумажные обеззоленные типа «синяя лента» или фильтры Шотта, размером пор 0.45 мкм.
Бутыли из полиэтилена с плотно завинчивающейся крышкой вместимостью 20,50.100 и 1000 см3.
Виалы из полимерного материала вместимостью 2 см3.
Колбы мерные 1(2)-25 (50. 100. 1000)—2 по ГОСТ 1770.
2
ГОСТ Р 52756-2007
Вода деионизованная (вода дистиллированная по ГОСТ 6709, пропущенная через колонку с ионообменной смолой по ГОСТ 20301) электрическим сопротивлением не менее 18,2 мОм.
Натрия гидроокись по ГОСТ 4328.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Спирт этиловый ректификованный из пищевого сырья по ГОСТ Р 51652.
Смолы ионообменные, аниониты по ГОСТ 20301.
Весы лабораторные по ГОСТ 24104.
Посуда и оборудование лабораторные стеклянные по ГОСТ 25336.
Допускается применение других средств измерений, оборудования, вспомогательных устройств, материалов и реактивов с метрологическими и техническими характеристиками и по качеству не ниже указанных.
4.3 Подготовка к выполнению измерений
4.3.1 Монтаж, наладку и вывод прибора на рабочий режим проводят в соответствии с инструкцией по его эксплуатации.
4.3.2 Приготовление раствора гидроокиси натрия молярной концентрации c(NaOH) = = 1,0 моль/дм1 для промывки капилляра
Навеску гидроокиси натрия массой 4.0 г помещают в мерную колбу вместимостью 100 см1, растворяют в 50 — 60 см1 деионизованной воды и доводят объем раствора в колбе до метки деионизованной водой. Раствор хранят в емкости из полиэтилена с плотно завинчивающейся крышкой не более 2 мес.
4.3.3 Подготовка капилляра к работе
Подготовку нового капилляра к работе проводят в соответствии с руководством по эксплуатации системы капиллярного электрофореза.
Уровни жидкости в виалах с электролитом на входе и выходе капилляра должны быть одинаковыми. необходимо через каждые 10 анализов пробирки на входе и выходе наполнять одинаковыми объемами свежего электролита.
4.3.4 Ежедневная подготовка капилляра к работе
Перед началом работы капилляр промывают электролитом, приготовленным по приложению А, в течение 30 мин, после чего контролируют стабильность градуировочной характеристики.
Если времена миграции определяемых аминов отличаются более чем на 5 % от градуировочных характеристик, капилляр промывают раствором гидроокиси натрия, приготовленным по 4.3.2, затем электролитом, приготовленным по приложению А, и снова проверяют стабильность градуировочных характеристик.
По окончании работы капилляр промывают раствором гидроокиси натрия, приготовленным по 4.3.2, в течение 15 мин. После промывки концы капилляра опускают в виалы с деионизованной водой.
4.4 Приготовление градуировочных растворов
4.4.1 Приготовление градуировочных растворов смеси азотистых летучих оснований проводят в соответствии с приложением Б.
4.5 Выполнение измерений
28—30 кВ
гидродинамический кондуктометрическое 20 X — 40 °С 35 — 50 мБар 6 —24 с 8 — 16 мин см.приложение А.
Измерения выполняют при следующих режимных параметрах прибора:
напряжение ......
ввод пробы.......
детектирование .... температура капилляра давление ввода пробы время ввода пробы . .
время анализа.....
электролит.......
Допускается проведение анализа в других условиях выполнения измерений, обеспечивающих разделение и последовательность выхода ионов, аналогичное приведенному на электрофореграмме на рисунке 1.
4.6 Градуировка прибора
Прибор градуируют по искусственным смесям методом абсолютной градуировки.
Градуировку прибора проводят после промывки капилляра электролитом, приготовленным по приложению А. в течение 20 мин.
Г радуировку прибора выполняют, используя не менее двух градуировочных смесей, приготовленных по приложению Б. Записывают электрофореграммы анализа каждой градуировочной смеси. Регистрируют время удерживания и площади пиков определяемых аминов. Измерения выполняют не менее двух раз. Типовая электрофореграмма анализа градуировочной смеси для определения содержания летучих азотистых оснований в спирте этиловом ректификованном из пищевого сырья приведена на рисунке 1.
Г радуировочную характеристику получают, обрабатывая полученные экспериментальные данные методом наименьших квадратов при помощи программного обеспечения.
Прибор градуируют при смене капилляра, при использовании новой партии электролита, изменении рабочих параметров прибора.
Градуировку прибора выполняют не реже одного раза в неделю.
4.7 Анализ образца
Подготовленный образец (см. 3.2) помещают в устройство для ввода проб в прибор и проводят измерения в соответствии с инструкцией по эксплуатации прибора при рабочих параметрах, установленных по 4.5.
Регистрируют лики в области времени миграции, соответствующего каждому компоненту градуировочной смеси. Образец анализируют два раза в условиях повторяемости в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725-1 (подраздел 3.14). Для количественного расчета данных составляют калибровочный массив по методу абсолютной градуировки с учетом количества микропримесей, содержащихся в ректификованном спирте, на котором готовят градуировочные смеси.
4.8 Обработка результатов измерений
4.8.1 Обработку результатов измерений выполняют, используя программное обеспечение входящего в комплект системы капиллярного электрофореза персонального компьютера в соответствии с инструкцией по его эксплуатации.
' Эта информация дана для сведения пользователей настоящего стандарта и не означает, что стандарт устанавливает обязательное применение данного прибора.
4
Диапазоны измеряемых массовых концентраций азотистых летучих оснований, показатели повторяемости и воспроизводимости, предел повторяемости и границы относительной погрешности метода указаны в таблице 1.
Диапазон измеряемых массовых концентраций. мг/дм5
Показатель
повторяемости
(ОСКО*
повторяемости)
«V*
Предел повторяемости г,*, при Р « 0.95. л = 2
Показатель воспроизводимости (ОСКО* воспроизводимости) пЯ(. %
Границы
относительной
погрешности
±6. %. при Р* 0.95. л-2
Азотистые летучие основании: аммиак, путресции. метиламин, кадаверин. диметиламин, этиламин. этанола-мин. пирролидин. пропиламин. изопропаноламин. изобутиламин, изоамиламин. фенилэтиламин
От 0,10 до 0.50 включ. Св. 0.50 до 1,50 включ.
* ОСКО — относительное среднеквадратическое отклонение.
4.8.2 За результат измерений принимают среднеарифметическое значение двух параллельных определений массовой концентрации /-го вещества, полученного в условиях повторяемости, если выполняется условие приемлемости по формуле
2 Од - С/2 ЮО (1)
(С/1 * с|2) г
где 2 — число параллельных определений:
С,1, С,2 — результаты двух параллельных определений массовой концентрации/'-го вещества в анализируемой пробе, мг/дм3;
100 — множитель для пересчета в проценты: г, — значение предела повторяемости (см. таблицу 1) /'-го вещества, %.
Если условие приемлемости не выполняется, то выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и повторяют выполнение измерений в соответствии с 4.7.
4.8.3 Результаты измерений содержания азотистых летучих оснований представляют как сумму измеренных массовых концентраций, мг/дм3, в пересчете на безводный спирт.
При пересчете на безводный спирт результаты умножают на коэффициент пересчета П, определяемый по формуле
П = 100 \0& (2)
где 100 — объемная доля безводного спирта, %;
Од— объемная доля этилового спирта в анализируемом образце. %.
4.8.4 Результат анализа в документах, предусматривающих его использование, представляют в
виде:
С,-ср, мг/дм3: Р = 0,95: =6%. (3)
где С/ср— среднеарифметическое значение двух результатов измерений массовой концентрации /-го вещества, признанных приемлемыми, мг/дм3:
-6— границы относительной погрешности. % (см. таблицу 1).
Результаты определения массовых концентраций указывают с округлением до двух значащих цифр.
В случае, если содержание аминов ниже или выше границ диапазона измерений массовых концентраций, указанных в таблице 1, результаты представляют в виде С/ср<0,10 мг/дм3 или С/ср > 1,50 мг/дм3 для массовой концентрации /'-го вещества.
4.9 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости
4.9.1 Для проведения проверки приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости каждая лаборатория использует пробы по 3.1. оставленные на хранение.
4.9.2 Приемлемость результатов измерений, полученных в двух лабораториях в соответствии с 4.7 и 4.8. оценивают сравнением разности этих результатов с критической разностью СО, 0 95 по формуле
I С/ cpi — Cj ср2 I £ СО, о 95. (4)
где С(ср1. С/ср2 — среднеарифметические значения массовой концентрации /-го вещества , полученные в первой и второй лабораториях в соответствии с 4.8. мг/дм3;
СО, о 95 — значение критической разности для массовой концентрации /-го вещества, мг/дм3, вычисляемое по формуле
СО,0.95 = 2.77 0.01Ci4), 2 J о’ - о* / 2 . <5>
где 2.77 — коэффициент критического диапазона для двух параллельных определений по ГОСТ Р ИСО 5725-6 (пункт 4.1.2);
0.01 — множитель для перехода от процентов к абсолютным значениям; or, — показатель воспроизводимости (см. таблицу 1) /-го вещества,%; аг. — показатель повторяемости (см. таблицу 1) /-го вещества,%;
С, cpi 2 — среднеарифметическое значение результатов определения массовой концентрации /'-го вещества, полученных в первой и второй лабораториях, мг/дм3:
r _ C/cpi ♦ с/ср2 (6)
С/ср1.2--j-’
Если критическая разность не превышена, то приемлемы оба результата измерений, проводимых двумя лабораториями, и в качестве окончательного результата используют их среднеарифметическое значение. Если критическая разность превышена, то выполняют процедуры, изложенные в ГОСТ Р ИСО 5725-6 (пункт 5.3.3). При разногласиях руководствуются ГОСТ Р ИСО 5725-6 (пункт 5.3.4).
5 Контроль стабильности результатов измерений в лаборатории
Контроль стабильности результатов измерений в лаборатории осуществляют в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725-6, используя метод контроля стабильности стандартного отклонения промежуточной прецизионности по ГОСТ Р ИСО 5725-6 (пункт 6.2.3) с применением контрольных карт Шухарта (примеры их построения приведены в ГОСТ Р 51698 (приложение В)].
При неудовлетворительных результатах контроля, например при превышении предела действия или регулярном превышении предела предупреждения, выясняют и устраняют причины этих отклонений.
Периодичность контроля и процедуры контроля стабильности результатов измерений должны быть установлены в Руководстве по качеству лаборатории в соответствии с ГОСТ Р ИСО/МЭК 17025 (подраздел 4.2) и ГОСТ Р 8.563 (пункт 7.1.1).
6 Требования безопасности
При работе на системе капиллярного электрофореза следует соблюдать;
- требования электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.018, ГОСТ 12.1.019 и инструкцией по эксплуатации прибора;
- требования взрывобезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.010:
- требования к пожаробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.004.
При работе с чистыми веществами следует соблюдать требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами, по ГОСТ 12.1.007.
К работе на системе капиллярного электрофореза допускаются лица, имеющие квалификацию не ниже техника, владеющие навыками проведения анализа методом капиллярного электрофореза и изучившие инструкцию по эксплуатации используемой аппаратуры.
1
