Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав ногребш с. icii и бдагоподучни человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств химических веществ в объектах окружающей среды, атмосферном воздухе, воздухе рабочей зоны и сельскохозяйственной продукции

Сборник методических указаний МУК 4.1.1960,4.1.1961,4.1.1963—4.1.1980—05

ББК 51.21 060

060 Определение остаточных количеств химических веществ в объектах окружающей среды, атмосферном воздухе, воздухе рабочей зоны и сельскохозяйственной продукции: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2007.—196 с.

1.    Разработаны Московской сельскохозяйственной академией им. К.

А. Тимирязева. Учебно-научным консультационным центром «Токсикология пестицидов и агрохимикатов» (Калинин В. А.. Калинина Т. С., Рыбакова О. И.. Калинин А. В.).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по санигарно гигиеническому нормированию Минздрава России (протокол № I от 31 Mapia 2005 г.).

3.    Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г. Г. Онищенко 21 апреля 2005 г.

4.    Введены в действие с 1 июля 2005 г.

5.    Введены впервые.

Ы>К 51.21

<    Роспотребнадзор, 2007

<    Федеральный центр ттппены и мшдемносют пн Роспотребнадзора, 2007

МУК 4.1.1967—05

2.5.6. Проверка хроматографического поведения крезоксим-метила на колонке с силикагелем

В круглодонную колбу емкостью 10 мл отбирают 1 мл стандартного раствора крезоксим-метила с концентрацией 1 мкг/мл. Отдувают растворитель током теплого воздуха, остаток растворяют в 3 мл смеси гек-сан-этилацстат (95 : 5. по объему) и наносят на колонку. Промывают колонку 40 мл смеси гексан-этилацетат (9 : 1. по объему) и затем 50 мл смеси гексан-этилацетат (8 : 2. по объему) со скоростью 1—2 капли в секунду. Отбирают фракции по 10 мл каждая, упаривают досуха, остаток растворяют в 2 мл этилацетата и анализируют на содержание крс-зоксим-мстила по п. 2.7.1.

Фракции, содержащие крезоксим-мстил. объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 4 мл этилацетата и вновь анализируют по п. 2.7.1. Рассчитывают содержание крезоксим-метила в элюатс. определяют полноту вымывания вещества из колонки и необходимый для очистки экстракта объем элюента.

Примечание: Профиль вымывания крезоксим-метила может меняться при использовании новой партии сорбента и растворителей.

2.6. Описание определении

2.6.1.    Экстракция крезоксим-метила и очистка экстракта

2.6.1.1.    Огу рцы, томаты, виноград. К навеске (25 г) измельченного материала добавляют 100 мл смеси ацетон-вода (2 : 1. по объему), гомогенизируют 3 минуты при 10 000 об/мин. Добавляют 2 г цслита и фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу емкостью 250 мл. Осадок на фильтре промывают 50 мл смеси ацетон-вода (2 : 1. по объему). Из объединенного экстракта отбирают аликвоту раствора (около 30 мл), эквивалентную 5 г растительного материала. и упаривают ее до водной фазы на роторном вакуумном испарителе при температуре 40 °С. Водный остаток переносят в делительную воронку емкостью 100 мл, приливают 10 мл насыщенного раствора хлорида натрия и 20 мл гексана. Смесь встряхивают в течение 1 мин и после се расслоения отделяют гексановый слой, который протекают через стеклянный фильтр, заполненный безводным сульфатом натрия, в грушевидную колбу вместимостью 100 мл. Экстракцию водной фракции гексаном повторяют еще два раза (по 20 мл). Объединенный гексановый экстракт, содержащий крезоксим-мстил. выпаривают на ротор-

МУК 4.1.1967—05

ном испарителе досуха при температу ре 30 °С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по п. 2.6.3.

2.6.1.2. Виноградный сок. К 10 мл свежевыжатого сока добавляют 20 мл насыщенного раствора хлорида натрия и содержимое переносят в делительную воронку емкостью 100 мл. В воронку добавляют 20 мл гексана и смесь встряхивают в течение 1 мин. После разделения слоев собирают органическую фракцию, а водную фазу обрабатывают гексаном еще два раза (по 20 мл). Объединенный гексановый экстракт протекают через слой безводного сульфата натрия и упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С. Дальнейшую очистку экстракта проводят по п. 2.6.3.

2.6.3. Очистка на колонке с силикагелем

Остаток в колбе, полученный при упаривании экстрактов растительного материала (из 2.6.1.1 и 2.6.1.2). количественно переносят тремя 1-мл порциями смеси гсксан-этилацстат (95:5. по объему) в подготовленную хроматографическую колонку (п. 2.5.5). Промывают колонку 30 мл смеси гсксан-этилацстат (9 : 1). которые отбрасывают. Крсзоксим-мстил элюируют 35 мл смеси гсксан-этилацстат (8 : 2). собирая элюат в грушевидную колбу емкостью 100 мл. Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30 °С. Сухой остаток экстракта сока растворяют в 10 мл, а экстрактов огу рцов, томатов и винограда в 5 мл этилацетата и анализируют на содержание крезоксим-метила по п. 2.7.1.

2.7. Условия хроматографирования

2.7.1. Метод ГЖХ с насадочными колонками

Хроматограф газовый «Кристалл - 2000 М» с элсктронозахватным детектором (Ni⁶³) с пределом детектирования по линдану нс выше 3,18 • 10¹⁴ г/см³.

Колонка хроматографическая, набивная, стеклянная. 1 500 х 3 мм; неподвижная фаза - 3 %OV-17 на Хромосорбе W/HP (0.12—0.15 мм).

Температура детектора 300 °С. инжектора 270 °С. термостата колонки 240 °С.

Скорость потока газа-носителя (азота) - 30 мл/мин; поддув -25 мл/мин.

Объем вводимой пробы - 2 мкл.

Время удерживания крсзоксим-метила - 3 мин 10 с.

Предел детектирования - 0.1 нг.

64

МУК 4.1.1967—05

Линейный диапазон детектирования - 0.1— 1.0 нг.

Альтернативная неподвижная фаза: 5 % SE-30 на Инертонс N-AW DMCS (0.16—0.20 мм); колонка стеклянная 2 000x2 мм; условия хроматографирования тс же.

Каждую анализируемую пробу вводят в хроматограф 3 раза и вычисляют среднюю площадь хроматографического пика крсзоксим-метила.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 1.0 мкг/мл. разбавляют этилацетатом.

2.7.2. Метод ГЖХ с капиллярными колонками

Хроматограф газовый «Кристалл 2000 М» с электронозахватным детектором.

Колонка капиллярная кварцевая ZB-1. 30 м • 0.32 мм • 0.5 мкм (SE-30)

Температура термостата испарителя - 250 °С. детектора - 300 °С. термостата колонки в программном режиме: 120 °С - 1 мин; 20 °/мин до 250 °С: выдержка - 5 мин.

Газовый режим: газ-носитель - азот, общий расход - 33 мл/мин; газ для поддува в детектор - азот, расход - 30 мл/мин.

Деление потока: 1 : 5.

Абсолютное время удерживания крезоксим-метила: 9 мин 34 с.

Объем вводимой пробы - 2 мкл.

Линейный диапазон детектирования: 0.02—0,5 нг.

Каждую анализируемую пробу вводят 3 раза и вычисляют среднюю площадь хроматографического пика крезоксим-метила.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0.2 мкг/мл. разбавляют этилацетатом.

2.S. Обработка результатов анализа Содержание крезоксим-метила рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

//, А \

//₀П1

X- содержание крезоксим-метила в пробе, мг/кг или мг/дм³; Hi - площадь пика образца. мВ • с:

Н₀ - площадь пика стандарта. мВ • с;

65

МУК 4.1.1967—05

А - концентрация стандартного раствора крезоксим-метила. мкг/мл;

V-объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;

т - объем (мл) или масса (г) анализируемой части образца (ятя сока 10 мл; ятя плодов и ягод - 5 г).

3.    Требования техники безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.

4.    Контроль погрешности измерении

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335—95. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.

5. Разработчики

Дубовая Л. В.. Талалакнна Т. Н.. Макеев А. М.

ВНИИ фитопатологии. 143050. Московская обл.. п/о Большие Вя земы. тел. 592-92-20

66

МУК 4.1.1960—1.1.1961. 4.1.63—4.1.1980—05

Содержание

Измерение конценграций Пропетамфоса методом газожидкостной

хроматографии в воздухе рабочей зоны: МУК 4.1.1960—05 .............................5

Определение остаточных количеств дифеноконазола в воде методом

высокозффегстивной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1961—05...........11

Определение остаточных ко.гичеств лямбда-Цит алотргша

в корнеплодах моркови и луке-репке методом газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.1963-^)5....................................................................20

Определите остаточных количеств 3-гидроксикарбофурана (основног о метабо.тита карбофурана) в корггегподах и зелёной массе сахарной свёгсгы, в семенах и масле рапса (г орчицы) методом г азожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.1964—05....................................................................29

Определение остаточных количеств флутриафола в гигодах яблони, яг одах и соке винограда методом г азожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.1965—05................................................................................................39

Определение остаточных ко.гичеств ггротиоконазола по его основному мегабо.титу иротиокоггазол-дестио в зерне и соломе зерновых колосовых к\льт\р методом гозожи;гкостной хроматографии:

МУК 4.1.1966—05................................................................................................47

Определегше остаточггых количеств крезоксим-мстила в огурцах, томатах, ягодах и соке виног рада методом г азожи;гкостной

хроматографии: МУК 4.1.1967—05....................................................................57

Определение остаточггых количеств имазетаиира в гзоде, почве, семенах и масле сои методом газожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.1968—05................................................................................................67

Оггределеггие остаточггых количеств ацетохлора в ботве, корнегподах сахарной свеклы и корнеплодах моркови методом газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.1969—05....................................................................77

Оггределеггие остаточггых количеств фиггронила и его мегаболитов (МВ 46513, МВ 45950, МВ 46136) в зеленой массе пастбищных трав методом капиллярной г азожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.1970—05................................................................................................84

Оггределеггие остаточггых количеств хлорпрофама в картофельных

чипсах методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1971—05...........93

Определение ос таточных количеств метрибузина в воде, почве, томатах и картофеле методом г азожидаоспгой хроматографии:

МУК 4.1.1972—05..............................................................................................103

Определение остаточных количеств зиоксиконазола в бо тве и корнегподах сахарной свегсгы методом газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.1973—05..................................................................113

Оггределеггие остаточггых количеств иираклоегробина в зерне, соломе, зеленой массе и зерновых колосовых культур методом

высоко->ф(|>е1СШВНой жидаоспгой хроматографии: МУК 4.1.1974—05.........122

3

МУК 4.1.1960—05

Определение остаточных количеств метсульфурон-метила в семенах, масле и соломке льна методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии: МУК 4.1.1975—05..................................................................135

Определение остаточных количеств клопиралида в семенах, масле и соломке льна, в семенах и масле рапса методом газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.1976—05..................................................................146

Определение остаточных количеств имидаклоприда в яблоках, кат ете, ботве и корнеплодах свеклы, семенах кукурузы, семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии: МУК 4.1.1977—05..................................................................158

Определение остаточных количеств глифосата в зерне и масле сои, семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной

жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1978—05............................................169

Измерение концентраций про гиокона зола в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.1979—05..............................................................................................181

Определение остаточных количеств про токола зола и его основного метаболита протиоконазола-дестио в воде, протиоконазола и протиоконазола-дестио но метаболиту протиоконазолу-дестио в почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1980—05............................................190

4

МУК 4.1.1967—05

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в с(|>срс защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

21 апреля 2005 г.

Дата введения: 1 июля 2005 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств крезоксим-метила в огу рцах, томатах, ягодах и соке винограда методом газожидкостной хроматографии

Методические указания _МУК    4.1.1967—05_

1. Вводная часть

Действующее вещество: крс юксим-метил (ВAS 490 F).

(Е)-мстил-2-.мстокснимино-2-/2-(о-толилокси-мстил)фснил/ацстат

(ИЮПАК).

Эмпирическая формула: Ci₈Hi₉NO.i.

Молекулярная масса: 313,4.

Белое кристаллическое вещество со слабым запахом. Температу ра плавления: 97.2 - 101.7 °С Давление паров при 20 °С: 2.3 • 10*³ мПа

57

МУК 4.1.1967—05

Растворимость (г/л) при 20 °С: вода - 0.002. гептан - 1.7. толуол -111. дихлормстан - 939, метанол - 14,9, ацетон - 217. этилацетат - 123.

Стабильность к гидролизу при 20 °С: DT50 = 34 дня (pH 7). 7 часов (pH 9)

В биологически активных почвах в аэробных условиях крсзоксим-метил быстро разрушается: DT90 = менее 3 дней.

Краткая токсикологическая характеристика:

Острая пероральная токсичность (LD₅₀) хтя крыс - более 5 000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD50) хтя крыс - более 2 000 мг/кг. Крсзоксим-метил нс оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку глаз кролика, нс обладает мутагенными и сенсибилизирующими свойствами.

Крсзоксим-метил нетоксичен хтя пчел, дождевых червей, полезных насекомых и птиц.

Гигиенические нормативы: ВМДУ. огурцах, томатах и винограде -0.5 мг/кг.

Область применения препарата

Крсзоксим-метил - синтетический фунгицид из класса стробилу-ринов. являющихся продуцентами гриба Strobilums tenacellus. Вещество эффективно против широкого круга грибных патогенов хлебных злаков, овощных, кормовых, технических и плодовых культур. Обладает защитным. лечебным и искореняющим действием.

2. Методика определения остаточных количеств крезокенм-метнла в огурцах, томатах, ягодах н соке винограда методом газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на газохроматографическом определении крезок-сим-мстила на неподвижной фазе OV-17 с использованием электроно-захватного детектора (ЭЗД) после экстракции препарата из сока гексаном. из растительного материала водным ацетоном, предварительной очистки экстрактов перераспределением в системе нссмсшивающихся растворителей и окончательной очистки экстрактов на колонке с силикагелем.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

МУК 4.1.1967—05

2.1.2. Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов. применяемых при возделывании огурцов, томатов и винограда.

21.3. Метрологическая характеристика метода

Крс зоксим-мстил. аналитический стандарт с содержанием д.в.99.9 % (БАСФ. Германия) Ацетон, чда

Вода дистиллированная Гексан. ч Дихлормстан Калий углекислый, хч Калия перманганат, хч Кальция хлорид, хч Натрия гидроксид, хч Натрия сульфат безводный, хч Натрий двууглекислый, хч Натрия хлорид, хч Этила цстат

Элюент № 1 для колоночной хроматографии: смесь гексан - этилацетат (9 : 1. по объему) Элюент № 2 для колоночной хроматографии: смесь гексан - этилацетат (8 : 2. по объему) Азот газообразный, осч

59

МУК 4.1.1967—05

Силикагель (0.063—0.2 мм) для адсорбционной хроматографии (Вельм. Германия) I степени активности или силикагель КСК (60—100 меш)

Стекловата

Целит 535 (2—15 мкм) /Ссрва. Германия/ или аналогичный

Фильтры бумажные, синяя лента    ТУ    6-09-1678

2.3 Приборы, аппаратура, посуда

Хроматограф газовый «Кристалл 2000 М» с электронозахватным детектором с пределом детектирования по линдану не выше 3,18 • К)'¹ ’ г/с или аналогичный Колонка хроматографическая, набивная, стеклянная. 1500 • 2 мм, неподвижная фаза - 3 %

OV-17 на Хромосорбс W/HP (0.12—0.15 мм)

Колонка хроматографическая, набивная, стеклянная. 2000 • 2 мм. неподвижная фаза - 5 %

SE-30 на Инсртонс N-AW-DMCS (0.16—0.20 мм)

Колонка капиллярная для ГЖХ ZB-1. длина 30 м. внутренний диаметр 0,32 мм. толщина пленки 0.5 мкм. неподвижная фаза SE-30. фирма Phcnoincncx. США или аналогичная Мнкрошпрнц емкостью 10 мкл МШ-10Ф Весы аналитические типа ВЛР-200 Водоструйный насос Г омогенизатор или аналогичный

Прибор для перегонки при атмосферном давлении

Ротационный испаритель тип ИР-1М Баня водяная Воронка Бюхнера

Воронки делительные, вместимостью 100 мл Воронки для фильтрования, стеклянные Колба Бунзена

Колбы круглодонные на шлифе, вместимостью 10 и 100 мл

60

МУК 4.1.1967—05

2.5.2.    Подготовка и кондиционирование колонки

Готовую насадку (3% OV-17 на Хромосорбс W/HP) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостат хроматографа, нс подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 270 °С в течение 8—10 ч.

2.5.3.    Приготовление стандартных растворов

Основной стандартный раствор крезоксим-метила с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0.010 г препарата, содержащего 99,9 % д.в.. в этилацстатс в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике нс более месяца.

Рабочие растворы с концентрациями 0.1: 0.2: 0.5 и 1.0 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора крезоксим-метила соответствующим последовательным разбавлением этилацетатом. Рабочие растворы хранят в холодильнике нс более трех дней.

При изу чении полноты открывания крезоксим-метила в модельных матрицах используются ацетоновые растворы вещества.

2.5.4. Построение калибровочного графика

Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 2 мкл рабочего стандартного раствора крезоксим-метила с концентрацией 0.1: 0.2: 0.5 и 1.0 мкг/мл. Осу ществляют нс менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение площади хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости площади хроматографического пика в мВ*с от концентрации крезоксим-метила в растворе в мкг/мл.

2.5.5. Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстракта

В нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и вну тренним диаметром 1.2 см вставляют тампон из стекловаты, закрывают кран и вносят су спензию 5 г силикагеля в К) мл гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку последовательно промывают 25 мл смеси гексан-этила цетат (9 : 1. по объему) и 20 мл гексана со скоростью 1—2 капли в секунду, после чего она готова к работе.

62