Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств абамектина в зеленой массе, семенах и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3050—13

Издание официальное

Москва • 2013

Федеральна» служба по наддеру в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств абамектина в зеленой массе, семенах и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3050—13

При изучении полноты извлечения абамектина в зеленой массе, семенах и масле сои используют ацетонитрильные растворы вещества, приготовленные из основного раствора методом последовательного разбавления по объему ацетонитрилом.

7.4. Построение градуировочного графика

Для построения 1радуировочного графика (площадь пика - концентрация абамектина в растворе) в хроматограф вводят по 10 мм³ градуировочных растворов (не менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4 точек по диапазону измеряемых концентраций). Затем измеряют площади ников и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации абамектина в градуировочном растворе.

Методом наименьших квадратов рассчитывают градуировочный коэффициент (.К) в уравнении линейной регрессии:

С = KS_t где

S- площадь пика градуировочной) раствора.

Градуировку признают удовлетворительной, если значение коэффициента линейной корреляции оказывается не ниже 0,99.

Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля ipa-дуировочного коэффициента.

Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:

Ic-cJ

--^-100 < Л , где

контр *

С - аттестованное значение массовой концентрации абамектина в градуировочном растворе,

С_к - результат контрольного измерения массовой концентрации абамектина в градуировочном растворе,

Лконтр

норматив контроля градуировочного коэффициента, %. «***-10% при /> = 0,95).

7.5. Подготовка патронов .Уе 1 и №2 для очистки экстрактов

7.5.]. Подготовка патрона для твердофазной экстракции Ms 1

Патрон № 1 с привитыми гексадецильными группами промывают последовательно 2 см³ смеси № 2 и 3 см³ смеси № 1, после чего патрон готов к работе.

7.5.2. Подготовка патрона для твердофазной экстракции № 2

Патрон № 2 с привитыми аминогруппами промывают последовательно 2 см³ смеси № 4 и 3 см³ смеси № 3, после чего патрон готов к работе.

7.6. Проверка хроматографического поведения абамектина на патронах Лр 1 и Аз 2

7.6.1.    Проверка хроматографического поведения абамектина на патроне № 1. В круглодонную колбу емкостью 10 см³ отбирают 1 см³ стандартного раствора абамектина с концентрацией 1 mkt/cm^j. Отдувают растворитель током воздуха. Остаток растворяют в 2 см³ смеси № 1 и переносят на подготовленный патрон. Колбу обмывают 2 см³ смеси № 1 и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 5cm^j смеси № 1, элюат отбрасывают. Затем элюируют абамектин смесью № 2 со скоростью 1—2 капли в секунд}'. Отбирают фракции по 2 см³, упаривают досуха, растворяют в 1 см³ подвижной фазы (ацетонитрил-0.005М Н₃РО<, 58 :42) и анализируют по п. 9.4.

Фракции, содержащие абамектин, объединяют и вновь анализируют.

Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюата.

7.6.2.    Проверка хроматографического поведения абамектина на патроне №2. В круглодонную колбу емкостью 10 см³ отбирают 1 см³ стандартного раствора абамектина с концентрацией 1 мкг/см³. Отдувают растворитель током воздуха. Остаток растворяют в 1 см³ смеси № 3 и переносят на подготовленный патрон. Колбу обмывают 1 см³ смеси № 3 и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 8 см³ смеси № 3, элюат отбрасывают. Затем элюируют абамектин смесью № 4 со скоростью I—2 капли в секунду. Отбирают фракции по 2 см', упаривают досуха, растворяют в 1 см³ подвижной фазы (ацетонитрнл-0,005М Н₃Р0₄, 58 : 42) и анализируют по п. 9.4.

Фракции, содержащие абамектин, объединяют и вновь анализируют.

Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюата.

Примечание: Проверку хрома!©графического поведения абамектина следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии патронов и растворителей.

8. Отбор проб и храпение

Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пшцевых

продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (№2051—79 от 21.08.79), а также в соответствии с ГОСТ 10852-86 «Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб».

Для длительного хранения зерно сои подсушивают при комнатной температуре в отсутствие света. Сухие образцы могут храниться в течение года. Перед анализом пробы зерна доводят до стандартной влажности и измельчают. Пробы масла хранят в холодильнике при 0—4 °С в закрытой стеклянной таре не более 2 месяцев.

9. Проведение определения

9.1. Экстракция абамектина

9.1.1.    Экстракция абамектина из семян сои

Навеску измельченных семян (20 г) помещают в полипропиленовую центрифужную пробирку вместимостью 50 см³ и последовательно добавляют 20 см³ ацетонитрила, 4 г магния сернокислого, 1 г натрия уксуснокислого и 0,1 см³ ледяной уксусной кислоты. Пробирку плотно закрывают, встряхивают на аппарате для встряхивания в течение 10 мин и центрифугируют при скорости 4 000 об./мин в течение 10 мин. Верхний ацетонитрильный слой декантируют, фильтруют через бумажный фильтр. К остатку в пробирке добавляют 15 см³ ацетонитрила и проводят повторную экстракцию. Объединенные ацетонитрильные экстракты очищают по п. 9.2.

9.1.2.    Экстракция абамектина из масла сои

Навеску масла (20 г) помещают в плоскодонную коническую колбу вместимостью 100 см³, добавляют 20 см³ ацетонитрила и колбу помещают в ультразвуковую ванну на 10 мин. Затем ацетонитрильный слой осторожно декантируют, к остатку добавляют 15 см³ ацетонитрила и экстракцию повторяют. Объединенные ацетонитрильные экстракты очищают но п. 9.2.

9.1.3. Экстракция абамектина из зеленой массы сои

Навеску измельченной зеленой массы (Юг) помещают в плоскодонную коническую колбу вместимостью 100 см³, добавляют 50 см³ ацетонитрила и колбу помещают в ультразвуковую ванну на 10 мин. Затем ацетонитрильный слой осторожно декантируют, пропускают через слой сернокислого натрия, к остатку' в колбе добавляют 30 см³ ацетонитрила и экстракцию повторяют. Объединенные ацетонитрильные экстракты очищают по п. 9.2.

9.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешиеающихся растворителей

К ацетонитрильному экстракту, полученному по п. 9.1 и помещенному в делительную воронку на 250 см³, добавляют 15 см³ гексана и интенсивно встряхивают в течение 2—3 мин. После полного разделения слоев верхний гексановый слой отбрасывают. Ацетонитрильный экстракт возвращают в делительную воронку и повторяют операцию очистки с новой порцией гексана объемом 15 см³.

Затем ацетонитрильный экстракт переносят в колбу для упаривания на 100 см³, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С. Дальнейшую очистку⁷ сухого остатка проводят последовательно на патронах №1 и 2 по п. 9.3.1 и п. 9.3.2, соответственно.

9.3. Очистка экстракта на концентрирующих патронах для твердофазной экстракции

9.3.1.    Очистка на патроне № 1

Остаток в колбе, полученный при упаривании экстрактов по п. 9.2, растворяют в 2 см³ смеси № 1 (ацетошприл-вода, 1 : 1) и переносят на подготовленный патрон. Колбу обмывают еще 2 см³ смеси № 1 и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 5 см³ той же смеси № 1, элюат отбрасывают. Абамектин элюируют 5 см³ смеси № 2 (метанол-ацетонитрил, 1 :4). Элюат количественно переносят в круглодониую колбу вместимостью 10 см³ и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С. Дальнейшую очистку сухого остатка проводят на патроне № 2 по н. 9.3.2.

9.3.2.    Очистка на патроне № 2

Остаток в колбе, полученный по п. 9.3.1 растворяют в 1 см³ смеси № 3 (гексан-этилацетат, 4 : 1) и переносят на подготовленный патрон. Колбу обмывают еще 1 см³ смеси № 3 и смыв тоже переносят на патрон. Промывают патрон 8 см³ той же смеси № 3, элюат отбрасывают. Абамектин элюируют 3 см³ смеси №4 (этилацетат-метанол, 9:1). Элюат количественно переносят в круглодонную колбу вместимостью 10 см³ и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С. Сухой остаток растворяют в 1 см³ подвижной фазы (смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 58 :42) и анализируют на содержание абамсктина по п. 9.4.

9.4. Условия хроматографирования Ультраэффекгивный жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки. Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С18. (100 х 2,1) мм, 1,7 мкм. Температура колонки (30 ± 1) °С. Подвижная фаза: смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 58 : 42. Скорость потока элюенга 0,2 см7мин. Рабочая длина волны ультрафиолетового детектора 245 нм. Объем дозируемой в хроматограф пробы 10 мм³.

10. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание абамсктина в пробе (ДГ, мг/кг) вычисляют по формуле:

S_K‘K-V 100

Г 'Г

S_x - площадь пика абамсктина на хроматограмме испытуемого образца, мм² (AU);

К- градуировочный коэффициент, найденный на стадии построения соответствующей градуировочной зависимости;

V- объём пробы, подготовленной для хроматографического анализа, см³;

Р - навеска анализируемого образца, г;

/- полнота извлечения абамектина, приведенная в табл. 2, %.

Содержание остаточных количеств абамектина в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор абамектина с концентрацией 1,0 мкг/см³. разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1).

Г, где

X], Х₂ - результаты параллельных определений, мг/кг; г -- значение предела повторяемости (г - 2,8о_г).

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

( X ± Д) мг/кг при вероятности Р = 0,95, где

X -• среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг,

А - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

S-X ~ 100

3 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.

В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание вещества в пробе «менее нижней границы определения» (например: менее 0,005 мг/кг*, где * - 0,005 мг/кг - предел обнаружения абамектина в сое).

13. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

13.1.    Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из 1радуировочных растворов.

13.2.    Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.

Величина добавки Q должна удовлетворять условию:

Q = ^A,.X +^А.л-'.га^е

± А_яХ (± А_лЛ.,)- характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой, соответственно), мг/кг; при этом:

А_д = ± 0,84 А, где

А - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

6-Х 100 *

<5 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.

Результат контроля процедуры К_к рассчитывают по формуле:

К_к-X!-X-Ct* где Х\ X. Со - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно. мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

Проводят сопоставление результата кошроля процедуры (К_х) с нормативом контроля (А).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

\К\<К    (2)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (К):

2 \Х_} -Х₇\ 100 (Х>+Х₂)

Л/, Х₂ - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг:

R — предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций), %.

ББК 51.23 060

060 Определение остаточных количеств абамсктина в зеленой массе, семенах и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2013.—16 с.

ISBN 978—5—7508—1177—9

1.    Разработаны сотрудниками ГНУ Всероссийский НИИ защиты растений Росссльхозакадемии (В. И. Долженко, И. А. Цибульская, Т. Д. Чер-менская, А. С. Комарова, В. В. Человечкова).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по госу дарственному -санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 30 мая 2013 г. № 1).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав нотрсбигелей и благополучия человека. Главным государственным сшштариым врачом Российской Федерации Г. Г. Онищенко 5 июля 2013 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.23

Редактор Н. В. Кожока Технический редактор Е. В. Ломанова

Подписано в печать 16.09.13 Формат 60x88/16    Печ.    л.    1,0

Т нраж 200 экз.    Заказ    39

«Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., я 18, стр. 5, 7

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован отделом издательского обеспечения Федерального центра гитиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, телефакс (495)952-50-89

О Роспотребнадзор, 2013 €> Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2013

УТВЕРЖДАЮ Ру ководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

5 июля 2013 г.

Дата введения: с момента утверждения

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств абамектина в зеленой массе, семенах и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4Л .3050—13

Свидетельство о метрологической аттестации №01.5.04.125/ 01.00043/2013.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации абамектина в зеленой массе, семенах и масле сои в диапазоне конценграций 0,005—0,05 мг/кг.

Методические указания посят рекомендательный характер.

Абамектин.

Смесь 5-О-демстилавсрмектина Ai_a (авермектин В_]а) и 5-О-деметил-25-де(1-метилнропил)-25-(1-метилэтил)авермектина А_]л (авермектин В_1Ь) в соотношении 4 : 1 (С.А.).

Авермектин B|_aC_4gH₇2C>i₄, мол. масса 873,1

Авермектин BibC₄₇H₇oOi₄, мол. масса 859,1

Струюурная формула:

Белый кристаллический порошок без запаха.

Температура плавления: 161,2—169.4 °С (с разложением).

Давление пара при 25 °С: <3,7 * 10'³ мТТа.

Коэффициент распределения н-октанол~вода: К** logP - 4.4 (pH 7.2, комнатная (°С).

Растворимость (в г/дм³ при 20 °С): вода - 0,00121, гексан - 0,11, метанол - 13, толуол - 23, октанол - 83, ацетон - 72, этилацетат - 160, дихлорметаи - 470.

Вещество стабильно при нормальных условиях, не гидролизуется в водных растворах при pH 5—9.

В биологически активных почвах абамектин прочно связывается и затем быстро разлагается почвенными микроорганизмами.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность LDjo для крыс и мышей 10,0 и 13,6 мг/кг, острая дермальная токсичность LD₅₀ для кроликов > 2 000 мг/кг. Абамектин слабо раздражает слизистую оболочку глаз и нс оказывает раздражающего действия на кожу кролика. LD50 для рыб 3—10 мкг/л (96 ч). Инсектицид нетоксичен для диких животных, земляных червей и водорослей, токсичен для пчел при прямом контакте (LD_5<I 0,017—0,54 мкг/особь), но становится практически не опасным для них через несколько часов после применения.

Область применения препарата. Абамектин — инсекто-акарицид широкого спектра действия, эффективно уничтожает членистоногих.

включая клещей и насекомых, на хлопчатнике, сое, овощных и декоративных культурах, семечковых плодовых, картофеле и табаке в течение вегетационного периода.

Гигиенические нормативы для абамектина в России: ОДУ в воде водоемов 0.001 мг/дм³, ОБУВ в воздухе рабочей зоны 0,05 мг/м³, ОДК в почве 0,01 мг/кг, МДУ в огурцах - 0,01 мг/кг; плодовых (семечковых), томатах, перцах, баклажанах, винограде - 0,003 мг/кг.

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р ~ 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1

Метрологические параметры

Объект анализа Диапазон определяемых концентраций, мг/кгг Показатель повторяемости (относительное средне-квадрагкчсское отклонение повторяемости). Показатель внутрила- бораторной прецизион ности, <Ъл.% I Указатель воспроизводимости, Or , % Показатель точности** Оран иды относительной погрешности), ±6, % Зеленая масса 0,005—0,05 8 9 13 25 Семена 0,005—0,05 8 9 13 25 Масло 0,005—0,05 8 9 13 25 ^соответствует расширенной неопределенности U^n при коэффициенте охвата А =2

Таблица 2

Полнота извлечения абамектина, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для п = 20, Р = 0,95

Анализируемый объект, мг/кг Предел обнару жения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций. мг/кг Среднее значение полноты извлечения, % Стандартное отклонение, S, % Доверительный интервал среднего результата, ±% Зеленая масса 0,005 0,005—0,05 84,4 4,66 2,33 Семена 0,005 0.005—0,05 87,5 3,85 1,93 Масло 0,005 0,005—0,05 86,1 7,76 3,88

2. Метод измерений

Методика основана на определении абамектина методом высоко-эффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его извлечения из образцов ацетонитрилом» очистке экстракта промывкой гексаном и последовательной очистке твердофазной экстракцией.

Идентификация абамектина проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.

Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.

Э. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства измерении

Жидкостный хроматограф с быстроскани-рующим ультрафиолетовым детектором, снабженным дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки Весы аналитические с пределом взвешивания до 210 г и пределом допустимой погрешности 0,2 мг

Весы технические с пределом взвешивания до 400 г и допустимой погрешностью 0,1 г Колбы мерные на 10, 100 и 1 000 см³ Микродозаторы одноканальные переменного объема от 200 до 1 000 мм³ и от 1 до 5 см³ Цилиндры мерные на 50 и 100 см³

Примечание: Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Абамектин, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 95,0 % Ацетонитрил, хч

Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная, деионизованная) н-Гсксан, хч

Кислота ортофосфорная, хч Кислота уксусная, ледяная

Магний серно-кислый безводный, хч Метанол, хч

Натрий уксусно-кислый, ч Натрий серно-кислый безводный, хч Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрила и 0,005 М Н₃Р0₄ в соотношении 58 : 42 Смесь № 1: ацетонитрил-вода в соотношении 1 : 1 по объему

Смесь № 2: метанол-ацетонитрил в соотношении 1 : 4 по объему

Смесь № 3: гексан-этилацетат в соотношении 4 : 1 по объему

Смесь № 4: этилацетат-метанол в соотношении 9 : 1 по объему Этилацетат, хч

Примечание: Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С18, (100 х 2,1) мм, 1,7 мкм Аппарат для встряхивания проб Воронки делительные вместимостью 250 см³ Воронки химические конусные Колбы плоскодонные конические вместимостью 100 см³

Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 10 и 100 см³

Патроны концентрирующие для твердофазной экстракции, 0,4 г гидрофобного сорбента с привитыми гексадецилъными группами (патрон № 1)

Патроны концентрирующие для твердофазной экстракции, 0,4 г слабооснбвного анионообмен-ннка с привитыми аминогруппами (патрон № 2) ТУ 4215-002-05451931—94 Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками объемом 50 см³ Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающим вакуум до 10 мбар

Ультразвуковая ванна с рабочей частотой 35 кГц Фильтры бумажные средней плотности    ТУ 6.091678—86

Центрифуга с максимальной рабочей частотой вращения 4 ООО об./мин.

Примечание: Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-2009, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2.    Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточновытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и Ш 2.2.5.2308—07.

Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.

5. Требования к квалификации операторов

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

6. Условия измерений

При выполнении измерений выполняют следующие условия:

•    процессы приготовления растооров и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к определению

7.7. Кондиционирование колонки

Перед началом анализа колонку кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1—0,2 см³/мин) до стабилизации нулевой линии.

7.2. Приготовление растворов

7.2.1.    0,005 М раапвор орто^юсфорной кислоты: (0,5 ±0,01) г 98% ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм³, растворяют в бидистилдированной воде и доводят объем до метки.

7.2.2.    Для приготовления подвижной фазы смешивают ацетонитрил с 0,005 М раствором ортофосфорной кислоты в соотношении 58 : 42 по объёму, используя мерные цилиндры.

7.5. Приготовление основного и градуировочных растворов

7.3.1.    Основной раствор с концентрацией 0,5 мг/сж: точную навеску абамектина (50 ± 0,5) мг помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом.

Градуировочные растворы с концентрациями абамектина 0,04. 0,08, 0,2, 0.5, 1,0мкг/см³ готовят методом последовательного разбавления по объему, используя раствор подвижной фазы (смесь ацетошлрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 58 : 42).

7.3.2.    Раствор № 1 с концентрацией 1,0 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят 0,2 см³ основного раствора и доводят до метки подвижной фазой.

7.3.3.    Раствор № 2 с концентрацией 0,5 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 5,0 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

7.3.4.    Раствор N° 3 с концентрацией 0,2 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 2 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

7.3.5.    Раствор Ns 4 с концентрацией 0,08 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 0,8 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

7.3.6.    Раствор Ns 5 с концентрацией 0,04 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 0,4 см³ раствора №1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

Основной раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0—4 °С в течение 3 месяцев, градуировочные растворы в течение недели.