МУК 4.1.2690-10
Методика выполнения измерений остаточного содержания спироксамина в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Федеральная сдужба по напору к сфере защиты нрав но ■ребнгедей и бдагонодучия чедовека

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды

Методические указания МУК 4Л .2668—10,4.1.2675—4Л .2679—10,

4.1.2683—4.1.2684— 10,4.1.2687—10, 4.1.2690— 10, 4.1.2706—4.1.2709—10,4.1.2768—10

В круглодонную колбу вместимостью 10 см³ помещают 0,1см³ градуировочного раствора № 1 спироксамина с массовой концентрацией 10 мкг/см в гексане (8.6.2). Отдувают растворитель током теплого вол-духа. остаток растворяют в 3 см³ гексана, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку с оксидом алюминия, подготовленную по 8.3. Промывают колонку 50 см³ гексана, затем 60 см³ смеси гексан-этилацетат (8 : 2. по объему) со скоростью 1—2 капли в секунду, отбирая последовательно по 10 см³ элюента. Каждую фракцию упаривают, остатки растворяют в 2 см³ гексана, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин. а затем хроматографируют. Условия хроматографирования - в соответствии с 7.2.

По результатам обнаружения спироксамина в каждой из фракций определяют объем элюента. необходимый для полного вымывания спироксамина из колонки.

8.5. Подготовка и кондиционирование хроматографической колонки

Капиллярную кварцевую колонку VF-5ms (типа SE-52) устанавливают в термостат хроматографа и. не подсоединяя к детектору, кондиционируют при температу ре 280 °С и скорости газа-носителя 2 см³/мин в течение 8—10 часов.

8.6. Приготовление градуировочных растворов

8.6.1. Исходный градуировочный раствор спироксамина с массовой концентрацией 100 мкг/см³

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают (0.010 ±0.0001) г спироксамина. растворяют в 40—50 см³ гексана, доводят объем раствора гексаном до метки, тщательно перемешивают.

Раствор хранят в морозильной камере при температу ре не выше -18 °С в течение 3-х месяцев.

8.6.2. Градуировочный раствор спироксамина с массовой концентрацией 10 мкг/см³ (раствор № 1)

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного градуировочного раствора спироксамина с массовой концентрацией 100 мкг/см³ (8.6.1). разбавляют гексаном, доводят объем раствора до метки. Этот раствор используют для приготовления градуировочных растворов № 2—5.

Раствор спироксамина хранят в морозильной камере при температуре не выше -18 °С в течение месяца.

156

МУК 4.1.2690—10

8.6.3. Градуировочные растворы спироксамина с массовой концентрацией 0,1—/, 0 мкг/см³ (растворы Л& 2—5)

В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают 1.0. 2.0. 5.0 и

10.0    см³ градуировочного раствора № 1 спироксамина с массовой концентрацией 10 мкг/см³ (8.6.2). доводят объем раствора до метки гексаном. тщательно перемешивают, получают градуировочные растворы №2—5 с массовой концентрацией спироксамина 0.1. 0,2, 0.5 и

1.0    мкг/см³. соответственно.

Растворы готовят непосредственно перед использованием.

8.7. Градуировка хроматографа Градуировочную характеристику, выражающую зависимость суммарной площади пиков изомеров (мкВ • мин) от массовой концентрации спироксамина в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной градуировки по 4 градуировочным растворам.

В инжектор хроматографа вводят по 1 мм³ каждого градуировочного раствора (8.6.3) и анализируют при условиях хроматографирования по 7.2. Осуществляют нс менее 3-х параллельных измерений. Расхождение между параллельными определениями не должно превышать предел повторяемости г.

По полученным данным строят градуировочную характеристику.

8.8. Контроль стабильности градуировочной характеристики Контроль стабильности градуировки проводят не реже 1 раза в три месяца, а также при смене реактивов или изменении условий анализа.

Для контроля стабильности используют вновь приготовленные градуировочные растворы с массовой концентрацией исследуемого вещества в начале, середине и в конце диапазона измерений, которые анализируют в точном соответствии с методикой.

Градуировочную характеристик) считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие (1)

Ц—— • 100 < Ё_Л . где    (1)

S_UiU. S._p - сумма площадей пиков изомеров спироксамина в образце для контроля, измеренная и найденная по градуировочной характеристике соответственно, уел. ед.:

К_гр - норматив контроля. К_гр = 0.5 • 8. где ± 6 - границы относительной погрешности. %. (табл. 1).

157

Если условие стабильности нс выполняется только для одного образца. то повторно анализируют этот образец для исключения результата. содержащего грубую ошибку.

Если градуировка нестабильна, выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов для градуировки, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировки прибор градуируют заново.

9. Отбор, подготовка и хранение проб

Отбор проб производят в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения мнкроколичсств пестицидов» (№2051-79 от 21.08.79) и правилами, определенными ГОСТ 17421-82 «Свекла сахарная для промышленной переработки. Требования при заготовках».

Пробы ботвы и корнеплодов сахарной свеклы хранят в холодильнике при температуре (0—4) °С нс более суток: для длительного хранения пробы замораживают и хранят в полиэтиленовой таре в морозильнике при температуре -18 °С до анализа. Перед проведением анализа ботву и корнеплоды измельчают.

9.1. Экстракции спироксамина

Приготовление водного раствора ацетона с объемной долей 70 %. В мерную колбу вместимостью 500 см³ помещают 350 см³ ацетона и доводят объем раствора в колбе до метки дистиллированной водой.

Срок хранения раствора 1 неделя.

Навеску измельченного растительного материала массой 20 г помещают в стакан гомогенизатора вместимостью 500 см³, приливают 100 см³ водного раствора ацетона с объемной долей 70 % и гомогенизируют 3 мин при 8 000 об./мин. Гомогенат фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу Бунзена вместимостью 250 см³. Осадок на фильтре промывают 50 см³ водного раствора ацетона с объемной долей 70 %. Экстракт и промывную жидкость переносят в химический стакан, перемешивают, измеряют объем раствора и ^ХЛ его часть (эквивалентную 5 г образца) переносят в кругло донную колбу вместимостью 100 см. Далее проводят очистку экстракта по 9.2.

9.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихси растворителей

Приготовление насыщенного раствора хлорида натрия. В коническую колбу вместимостью 200 см³ вносят навеску (50 ± 2) г хлорида

158

МУК 4.1.2690—10

натрия, приливают (100 ± 2) см³ дистиллированной воды, перемешивают в течение 5 мин. полученный раствор фильтруют. Фильтрат является насыщенным раствором хлорида натрия. Срок годности раствора - 1 неделя.

Экстракт, полученный по 9.1 и помещенный в круглодонную колбу. упаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка (5—7 см³) при температуре не выше 40 °С. Водный остаток переносят в химический стакан вместимостью 100 см³. приливают 20 см³ насыщенного раствора хлорида натрия, перемешивают и доводят pH раствора до 8.5 раствором гидроксида натрия с молярной концентрацией 0.1 моль/дм³. контролируя щелочность раствора с помощью иономера.. Раствор переносят в делительную вороню вместимостью 100 см³. приливают 30 см³ гексана и смесь встряхивают в течение 1 мин. После разделения фаз верхний органический слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу вместимостью 100 см³. Операцию экстракции водной фазы повторяют еще дважды, используя 30 и 20 см³ гексана. Объединенную органическую фазу, пропущенную через слой сульфата натрия, упаривают досуха на ротационном ваку умном испарителе при температу ре 30 °С. Дальнейшую очистку проводят по 9.3.

9.3. Очистка жстракта на колонке с оксидом алюминия

Сухой остаток в круглодонной колбе, полученный по 9.2. растворяют в 3 см³ гексана, помещая в ультразвуковую ванну на 1 минуту . Раствор наносят на колонку, подготовленную по 8.3. Колбу обмывают 3 см³ гексана, которые также наносят на колонку. Промывают колонку 30 см³ гексана со скоростью 1—2 капли в секунду, элюат отбрасывают. Спироксамин элюируют с колонки 50 см³ смеси гсксан-этилацетат (8 : 2. по объему), собирая элюат непосредственно в круглодонну ю колбу вместимостью 100 см³. Раствор упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 °С. Сухие остатки экстрактов корнеплодов и ботвы растворяют соответственно в 2.5 и 5 см³ гексана, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин. и анализируют на содержание спироксамина по 10.

Полнота извлечения спироксамина при проведении всех операций подготовки пробы нс менее 86 %.

10. Выполнение измерений

10.1. В испаритель хроматографа вводят 1 мм³ очищенного экстракта анализируемой пробы (9.1—9.3), анализируют при условиях 7.2 и регистрируют хроматограмм). Каждый экстракт хроматографируют дважды. Каждый раз вычисляют сумму площадей пиков изомеров, затем рассчитывают их среднее значение.

159

МУК 4.1.2690—10

X - среднее арифметическое значение результатов п определений, признанных приемлемыми по 11.2. млн ’.

±6- границы относительной погрешности измерений. % (табл. 1).

В случае, если полученный результат измерений ниже нижней (выше верхней) границы диапазона измерений, то производят следующую запись в журнале:

<смассовая доля спироксамина в ботве менее 0,1 млн¹ (более 1,0 млн¹)»',

«.массовая доля спироксамина в корнеплодах менее 0,05 млн¹ (более 0,5 млн¹)»;

Экстракты, при хроматографировании которых получают аналитический сигнал спироксамина (сумма площадей пиков изомеров), превышающий аналитический сигнал, получаемый при хроматографировании градуиовочного раствора с массовой концентрацией 1.0 мкг/см³. разбавляют гексаном, но нс более чем в 10 раз. и анализируют в соответствии с данной методикой. При расчёте содержания спироксамина учитывают разбавление.

12. Проверка приемлемости результатов измерении, полученных в условиях воспроизводимости

12.1.    Проверку приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости проводят:

а)    при возникновении спорных ситу аций между двумя лабораториями:

б)    при проверке совместимости результатов измерений, полученных при сличительных испытаниях (при проведении аккредитации лабораторий и инспекционного контроля).

12.2.    Для проведения проверки приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости каждая лаборатория использует пробы, оставленные на хранение.

12.3.    Приемлемость результатов измерений, полученных в двух лабораториях оценивают сравнением разности этих результатов с критической разностью CD₀,95 по формуле (4)

— CD o^s, где

X_cpi, Хср2 - средние значения массовой доли спироксамина. полученные в первой и второй лабораториях, млн

CDo.95 - значение критической разности. % (табл. 1).

161

МУК 4.1.2668—10,4.1.2675—4.1.2679—10, 4.1.2683—10, 4.1.2684—10, 4.1.2687—10, 4.1.2690—10, 4.1.2706—4.1.2709—10,4.1.2768—10 Содержание

Определение остаточных кол и мест кж>1ианилина в воде, почве, зеленой массе, семенах и масле рапса, ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2668    10.....................4

Методика выполнения измерений остаточного содержания грифлоксистро-бина и его метаболита в ягодах и соке винограда методом высокоэффективной

жидкостной хромаю! рафии: МУК 4.1.2675—10......................................................20

Методика выполнения измерений остаточного содержания тиаклоприда в зеленой массе, семенах и масле рапса, ягодах и соке винограда методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2676—10...................37

Методика выполнения измерений остаточного содержания протиоконазола по метаболиту протиоконазол-дестио в семенах, масле и зеленой массе рапса

методом капиллярной газожидкостной хромаю! рафии: МУК 4.1.2677—10.........53

Определение остаточных количеств Псноксулама в воде, почве, зерне и соломе риса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2678—10.......................................................................................................70

Определение остаточных количеств гидразида малеиновой кислоты

(малеинового гидразида) в почве методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии: МУК4.1.2679—10 ........................................................................... 89

Методика выполнения измерений остаточного содержания гриадимснола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2683—10.........................................................................103

Методика выполнения измерений остаточного содержания тебуконазола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2684    10.........................................................................117

Методика выполнения измерений остаточного содержания мезосульфурон-метила в воде, почве, зеленой массе, зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хрома юг рафии:

МУК'4.1.2687—10.....................................................................................................131

Методика выполнения измерений остаточного содержания спироксамина в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2690—10.........................................................................149

Определение остаточных количеств эмамектина (эмамектина бензоата) в воде, почве, капусте, томатах, ягодах винограда и виноградном соке методом

высоко эф<|)ек1 и иной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2706— 10.................163

Измерение концентраций пикокеистробина в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК4.1.2707—10.........................................................................180

Определение остаточных количеств шрама в растительном масле методом

газохроматографического парофазного анализа: МУК 4.1.2708- 10....................192

Измерение концентраций квинмерака в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операюров методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2709—10.................204

Определение остаточных количеств имидаклоприда в соке яблок и черной смородины, в масле кукурузы высокоэффективной жидкостной хромаю! рафии: МУК 4.1.2768—10.........................................................................216

3

МУК 4.1.2690—10

Руководитель Федеральной службы по надзору в с(|юрс защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

2 авгу ста 2010 г.

Дата введения: 1 октября 2010 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Методика выполнения измерений остаточного содержания спироксамина в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2690—10

Kow log P - 2.79 для I и 2.92 для II. Растворимость (г/дм³) при 20 °С: в ацетоне, гексане, дихлормстане. пропаноле, толуоле и ацетонитриле -более 200; в воде - более 200 при pH 3, 0,34—0.47 при pH 7. 0,01 при pH 9.

Вещество устойчиво к гидролизу при pH 5—9 и относительно стабильно на свету (DT₄> = 50,5 дня).

Спироксамин достаточно быстро разрушается в почве (DT₅₀ = 35— 64 дня).

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс - 560 млн ¹ (мг/кг); острая дермальная токсичность (LD50) для крыс - более

1    600 млн ¹ (мг/кг); острая ингаляционная токсичность (LC50) для крыс -

2    772 мг/м³ воздуха. Спироксамин вызывает сильное раздражение кожи у кроликов. LC50 для рыб 18.5 мг/дм³ (96 ч).

Фунгицид практически нетоксичен для птиц, пчел, дождевых червей и водорослей.

В России установлены следующие гигиенические нормативы:

ДСД - 0.02 млн ¹ (мг/кг) массы тела человека; МДУ в корнеплодах сахарной свеклы - 0,1 млн ¹ (мг/кг).

Область применения препарата

Спироксамин - системный фунгицид, обладающий защитным, лечебным и искореняющим эффектом. Эффективен против возбудителей мучнистой росы, ржавчины, сспторноза и пятнистостей на зерновых злаках и оидиума на винограде. Используется главным образом в комбинациях с другими фунгицидами, особенно триазолами. для обработки вегетирующих растений зерновых злаков и сахарной свеклы, а также виноградников в дозах до 150 гд.в. на 1 га.

2. Метрологические характеристики

При соблюдении всех регламентированных условий и проведении анализа в точном соответствии с данной методикой значение погрешности (и се составляющих) результатов измерений нс превышает значений, приведенных в табл. 1.

150

МУК 4.1.2690—10

Таблица 1

Анали зируе мый объект Диапазон измерений массовой доли спироксамина, млн'1 (мг/кг) Показатель точности (границы относи тельной погреш ности), ± <$, % при Р = 0,95 I Указатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемое ш), % I кжазатель воспроизводимости (относительное средне-квадрати-ческое отклонение воспроизводимое П1). (Tr, % 11редел повторяемости, Р = 0,95, п = 2 Критическая разность для 1>с $у.1ыаюв анализа, полученных в двух лабораториях, С1)о.95,% (//;=//,= 2) Р = 0,95 Ьотва сахарной свеклы От 0,10 до 0,5 вкл. 40 9 14 25 35 Св. 0,5 до 1,0 вкл. 25 6 9 17 22 Корне- 11.ЮДЫ сахарной свеклы Or 0,05 до 0,10 вкл. 42 9 14 25 35 Св. 0,10 до 0,5 вкл. 35 7 11 19 27

3. Метод измерений

Метод основан на экстракции спироксамина из ботвы и корнеплодов водным раствором ацетона, очистке экстрактов, содержащих спи-роксамин, от коэкстрактивных компонентов перераспределением в системе нссмсшивающихся растворителей, а также на колонке с оксидом алюминия с последующим измерением содержания спироксамина в очищенных экстрактах методом капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) при программировании температу ры с термоионным детектором (ТИД) и обработкой хроматограмм по сумме площадей двух пиков изомеров спироксамина методом абсолютной градуировки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен.

4. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

-/. 1. Средства илмерении Газовый хроматограф Varian 3800 (США) с ТИД Весы лабораторные общего назначения модели ВЛА-2(Х) с наибольшим пределом

взвешивания 200 г    ГОСТ 24104-2001

151

Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания 500 г по Набор гирь

Колбы мерные, вместимостью 2-100-2. 2-1000-2 Пипетки градуированные 1-1-2-1; 1-1-2-2;

1-2-2-5; 1-2-2-10

Пробирки градуированные с пришлифованной пробкой П-2-5-0.1; П-2-104).2 Цилиндры мерные 1-25:1-50; 1-100; 1-500; 1-1000 Иономер универсальный ЭВ-74 или аналогичный Шприц для ввода образцов для газового хроматографа, вместимостью 1—10 мм³ (Hamilton. США)

4.2. Реактивы

Аналитический стандарт спироксамина с содержанием основного вещества 97.4 % (Байер. Германия)

Ацетон, квалификации чда

Вода дистиллированная или деионизованная

н-Гсксан

Натрия гидроксид, квалификации хч Натрия хлорид, квалификации хч Натрия сульфат безводный, квалификации хч Этиловый эфир уксусной кислоты (этилацетат). квалификации ч

4.3. Вспомогательные устройства, матершны Гслий очищенный марки «А»    ТУ 51 -940—80

Гомогенизатор Omni-inixcr (Sorvall. США) или гомоген изатор    МРТУ 42-1505

Ванна ультразвуковая, модель D-50. фирма «Branson Instr. Со.» (США)

Воронки делительные, вместимостью НЮ и 250 см³ ГОСТ 25336-82 Воронки конусные диаметром 30—37 мм    ГОСТ 25336-82

Воронка Бюхнера    ГОСТ 9147-80

Колбы кругло донные на шлш|)с. вместимостью 50. 100 см³    ГОСТ 25336-82

Колба Бунзена, вместимостью 250 см³    ГОСТ 25336-82

Колонка кварцевая капиллярная VF-5ms. длиной 30 м. внутренним диаметром 0.32 мм.

152

МУК 4.1.2690—10

толщина пленки 0.5 мкм, неподвижная фаза SE-52. фирма «Varian» (США)

Колонка хроматографическая стеклянная, длиной 25 см и внутренним диаметром 8—10 мм Компрессор (СКВ «Хроматэк». Россия)

Насос водоструйный вакуумный    ГОСТ    10696—75

Ротационный ваку умный испаритель ИР-1М ТУ 25-11-917—74 или ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы «ВисЫ» (Швейцария)

Гснератор водорода, модель SPE. фирма «General Electric» (США)

Оксид алюминия 90 (0.063—0,2 мм) для колоночной хроматографии, нейтральный («Мерк». Германия) I степени активности Стаканы химические, вместимостью 100 и 5<Х) см³ ГОСТ 25336-82 Стекловата

Установка для перегонки растворителей с дефлегматором

Фильтры бумажные «красная лента»,

обеззоленные

или фильтры из хроматографической бумаги Ватман ЗММ

Примечание. Допускается применение других средств измерений, вспомогательных устройств, реакгивов и материалов с техническими и метрологическими характеристиками не хуже приведенных в разделе 4.

5. Требования безопасности, охраны окружающей среды

5.1.    При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.007-76. ГОСТ 12.1.005-88.

5.2.    При проведении анализов горючих и вредных веществ соблюдают требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и должны быть в наличии средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-90.

5.3.    При выполнении измерений с использованием хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019—79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

5.4.    Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточновытяжной вентиляцией. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны нс должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГЫ 2.2.51313—03 и ГН 2.2.5.2308—07.

153

6. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию нс ниже лаборанта-исслсдоватсля с опытом работы на газовом хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

7. Условия выполнения измерений

7.1.    При выполнении измерений соблюдают следующие условия. Условия приготовления растворов и подготовки проб к анализу

-    температура воздуха (20 ± 5) °С.

-    атмосферное давление (84—106) кПа.

-    относительная влажность воздуха не более 80 %.

7.2.    Условия хроматографического анализа Температура термостата испарителя 250 °С:

Температу ра детектора 300 °С.

Режим программирования температуры колонки:

Начальная температура 150 °С (2 мин);

скорость подъёма температу ры до 230 °С (6 мин) 25 °С/мин;

от 230 до 280 °С (5 мин) скорость подъёма температуры 20 °С/мин.

Расход газов:

газа-носителя (гелий) - 2.0 см /мин: водорода к ТИД - 4.3 см7мин; воздуха к ТИД: 175 см³/мин.

Деление потока: 1 : 2.

Объем вводимой пробы: 1 мм³.

Время удерживания спироксамина: 7.54 мин ± 0.2 мин (изомер 1) и 8.07 мин ± 0.2 мин (изомер II);

Линейный диапазон детектирования: 0.1—1.0 нг.

8. Подготовка к выполнению измерений

Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей, приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, градуировка хроматографа, подготовка колонки с оксидом алюминия.

8. 1. Очистка органических раствори та ей 8.1.1. Очистка н-гексана Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до прекращения окрашивания последней в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод. перегоняют над поташом.

МУК 4.1.2690—10

8.1.2. Очистка этилацетата

Приготовление раствора натрия углекислого с массовой болей 5 %. Навеску (5 ± 0.1) г натрия углекислого в конической колбе растворяют в 40—60 см³ дистиллированной воды. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³ и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой.

Срок хранения раствора 1 неделя.

Этилацетат промывают последовательно раствором натрия углекислого с массовой долей 5 %. насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют.

8.1.3. Очистка ацетона

Ацетон перегоняют н«и перманганатом калия и поташом (на 1 дм³ ацетона 10 г КМпО , и 2 г К₂СОз).

8.2. Приготовление раствори гидроксида натрии с молярной концентрацией 0,1 моль/дм³

4 г NaOH помещают в мерную колбу вместимостью 1 000 см³, добавляют 500—600 см³ деионизованной воды, перемешивают до полного растворения вещества, охлаждают раствор до комнатной температу ры, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.

Срок хранения - 1 месяц.

8.3. Подготовка колонки с оксидом алюминия для очистки экстракта

Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 8—10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 10 г оксида алюминия нейтрального III степени активности в 15 см³ гексана (оксид алюминия III степени активности по Брокману получают добавлением 6 % воды к навеске оксида алюминия фирмы «Мерк» (Германия) I степени активности). Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помешают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку последовательно промывают 20 см смеси гексан-этилацетат (8 : 2. по объему) и 20 см³ гексана со скоростью 1—2 капли в секунду, после чего она готова к работе.

8.4. Определение объема элюента, необходимого для полного вымывания спироксамина из колонки с оксидом (июминия

При отработке методики или поступлении новой партии оксида алюминия проводят определение объёма элюента. необходимого для полного вымывания спироксамина из колонки с оксидом «июминия.