4.1, МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ СЫРЬЕ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Сборник методических указаний МУК 4.1.2162—4.1.2176—07

Издание официальное

7.5. Построение градуировочного iрафики.

Для построения градуировочною графики в инжектор хроматографа последовательно вводят по 1 мм¹' каждого рабочею раствора бутилового эфира 2,4-Д с концентрацией но кислоте 0.1; 0.05; 0.02; 0*01 м к г/см'¹. Проводят не менее 5 параллельных намерений н находя* среднее значение площади хроматофафического пика для каждой конисшрации,

По полученным данным строят градуировочный график зависимости площади хроматографического пика в мВ от концентрации 2.4-Д в растворе в мкг/ см³. (рисунок 1).

8. ОТБОР ПРОБ И ХРАНЕНИЕ.

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", № 2051-79 от 21.08.79 г., а также в соответствии с ГОСТ 8808-91 «Масло кукурузное, ТУ»

Пробы масла кукурузы хранят в плотно закрытой стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре 0- 4° С нс более 30 дней.

Для исследовательских целей допускается получение масла в лаборатории из проб зерна методом экстракции горячим растворителем при температуре ие выше 40° С.

9. ПРОВЕДЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ.

9.1. Масло кукурузы.

Навеску масла 10 г переносят в полипропиленовую банку объемом 250 см³ и растворяют в 30 см³ гексана, добавляют к раствору 50 см³ 5% водного раствора гидрокарбоната натрия и помещают емкость в ультразвуковую ванну на 10 минут. По истечении времени смесь переносят в делительную воронку и после полного разделения слоев нижний водный слой собирают в концентратор объемом 250 см\ а верхний гексановый сливают в ту же полипропиленовую банку. Повторяют экстракцию еще дважды, используя по 50 см³ 5% гидрокарбоната натрия, выдерживая в ультразвуковой ванне каждый раз в течение 5 минут. Водные фракции объединяют.

Объединенную водную фракцию переносят в чистую делительную воронку, добавляют 25 см³ гексана и интенсивно встряхивают смесь в течение 1-2 мин. После разделения слоёв нижний водный слой собирают в чистый концентратор, а гексан отбрасывают. Повторяют процедуру еще раза тем же объемом гексана.

&

Далее водную фракцию переносят в ту же делительную воронку подкисляю г ее 4 и раствором серной кислоты до рН~1 (примерно 30 см'¹). Воронку выдерживают до подпою прекращения выделения углекислого газа, периодически осторожно встряхивая.

После этого добавляют в воронку 30 см³ эфира и интенсивна встряхивают смесь и течение 1-2 мин. После разделения слоёв нижний водный слой собирают в сот же концентратор, а верхний эфирный переносят в чистый концентратор емкостью 250 см\ пропуская через воронку с безводным сульфатом натрия. Водную фракцию возвращают в делительную воронку. Экстракцию повторяют ещё дважды, используя для этого каждый раз 30 см³ эфира. Эфирные экстракты объединяют в концентраторе, а водную фракцию отбрасывают.

Объединенный эфирный экстракт выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35°С досуха. Сухой остаток переносят тремя порциями ш> 3 см³ диэтилового эфира в виалу и высушивают током теплого воздуха. Проводят бутилиро-ванне, как указано в пункте 7.3., и последующую очистку на колонке с Флорнзилом пункт 9.1.2.

9.1.2.    Очистка на колонке с Флориэилом

Из верхнего гексанового слоя в виале, полученного по пункту 7.3., отбирают аликвоту 2 см³ и наносят на подготовленную, как описано в разделе 7.1., колонку. Последовательно промывают колонку 10 см³ гексана и 5 см³ смеси гексана с ацетоном в соотношении 10:1, смывы отбрасывают. Элюируют бутиловый эфир 2,4-Д 10 см³ смеси гексана с ацетоном в соотношении 2:1, элюат выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани не выше 35°С.

Сухой остаток в концентраторе растворяют в 2 см³ гексана и 1 мм³ пробы вводят в хроматограф.

9.2.    Условия хроматографирования.

Высокоэффективный газовый хроматограф «Кристалл 2000м» с детектором по захвату электронов (ЭЗД) с пределом детектирования по Линдану 4х10'¹⁴ г/см³ и приспособлениями для капиллярной колонки.

Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая НР-1,100% метиленликон, длина 30 м, внутренний диаметр 0,25 мм, толщина пленки 0,25 мкм, фирмы Хьюлетт Паккард. Температура детектора - 320°С, испарителя - 260^сС, программированный нагрев колонки с 180°С (выдержка 2 минуты) по 5 град/мин до 220°С (выдержка 2 минут).

Газ 1: тип регулятора расхода газа РРГ 11, режим нормальный, скорость 25 см/с, давление 116,9 кПа.

Газ 2 (гелий) - 10 cmVmhii: расход 0_t5 cm'Vmhh, сброс 1:20.*

Газ 3 (азот, поддув детектора) - 45 см³/мин.

Абсолютное время удерживания 2,4-Д бутиловый эфир - б мин 36 сек. ± 2%. Линейность детектирования сохраняется » пределах - ОЛИ • 0,1 иг.

Каждую анализируемую пробу вводят в хроматограф 3 раза и вычисляют среднюю площадь пика.

Образцы, дающие пики больше, чем стандартный раствор с концентрацией 2.4-Д 0-1 мкг/мл, соответственно разбавляют.

Количественное определение 2,4-Д проводят по методу абсолютной калибровки посредством сравнения с хроматограммами стандартных растворов бутилового 'эфира 2,4-Д с концентрацией по кислоте 0,01 -0,1 мкг/см³.

10. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ АНАЛИЗА.

Для обработки результатов хроматографического анализа используется программа

сбора и обработки хроматографической информации «Хроматэк Аналитик», версия 1,20.

Альтернативная обработка результатов.

Содержание 2.4-Д рассчитывают по формуле:

Snp • А • V * D

X--хР

100 • Sct ■ m

где    X - содержание 2,4-Д в пробе, мг/кг.

Sct - высота (площадь) пика стандарта, мВ;

Snp - высота (площадь) пика образца, мВ;

А - концентрация стандартного раствора, мкг/см³;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

D - фактор разбавления, учитывающий взятие аликвоты (по методике ~ 2,5): m * масса анализируемого образца, г;

Р - содержание 2,4-Д в аналитическом стандарте, %.

S3

И. ПРОВЕРКА ПРИЕМЛЕМОСТИ РЕЗУЛЬТАТОВ ПАРАЛЛЕЛЬНЫХ ОПРЕДЕЛЕНИЙ.

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

2-|Х,-Х₂Н00 _<г (Х,+Х₂)

где Xj, X?- результаты параллельных определений, мг/кп

г- значение предела повторяемости (таблица 1), при этом г = 2.8 о_г. Пои невыполнении условия П1 выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь вьшолняютанализ.

12. ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

Результат анализа представляют в виде:

(Х± Д) мг/кг при вероятности Р* 0.95,

где X- среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

Д - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

Д - 5*Х/Ю0,

б - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %.

В случае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание вещества в пробе менее 0,005 мг/кг»*

* - 0.005 мг/кг - предел обнаружения.

13. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ.

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Величина добавки С_;, должна удовлетворять условию:

С_п = А *3; + Д о:'¹,

где, ± Д ,13с (±Л    -    характеристика погрешности (абсолютная погрешность) речульта-

тов анализа, соответствующая содержанию компонента а испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно) мг/кг. при этом:

Д_я= ±0.84 Л,

где Л - граница абсолютной погрешности, мг/кп Д = 6*Х/100,

5 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %.

Результат контроля процедуры К_к рассчитывают по формуле:

К_к = Х-~ Х-С_л*

где X', X, С_д среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11), содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце и хонцешрацмя добавки, соответственно, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

fC ~ л/д²я. х* + Д³л. х

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Кк) с нормативом контроля

(К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию:

|Кк|<К,    (2)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3, Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

Расхождение меэду результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R)

/г

2'|Xi-JH;3.00„ <R (3) (X, + Кг)

где ХиХз- результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг:

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концсшраций. таблица

И. РАЗРАБОТЧИКИ

Калинин В.А.. профессор, канд. с-х. наук, Калинина Т.С., ст.н.созр., канд. с-х. паук, Рыбакова О.И., науч. сотр.. Третьякова О,А., инженер.

ФГОУ ВПО Российский государственный аграрный университет -МСХА имени К.А. Тимирязева.

Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов». 127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1. Телефон: (495) 976-37-68. факс: (495) 976-

Содержание

1.    Определение остаточных количеств 2,4-Д в масле кукурузы методом капиллярной

газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2162-07..................................................4

2.    Определение остаточных количеств галоксифопа-р-метила и галохсифопа-р в воде,

галоксифопа-р в почве, зеленой массе растений, клубнях картофеля, корнеплодах сахарной, кормовой и столовой свеклы, семенах и масле льна, рапса, сои, подсолнечника методом газожидкостной хроматографии, МУК 4.1.2163-07.................17

3.    Определение остаточных количеств дифеноконазола в картофеле, моркови и томатах

методом капиллярной газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2164-07....................42

4.    Определение остаточных количеств зета-циперметрина в семенах рапса, масле рапса (горчицы) методом капиллярной газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2165-07............................................................................................56

5.    Определение остаточных количеств ипродиона в огурцах и томатах методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2166-07...........................69

6.    Определение остаточных количеств каптана и фолпета в воде, почве, каптана в

яблоках, фолпета в клубнях картофеля и винограде методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2167-07.......................................................................83

7.    Определение остаточных количеств клопиралида в капусте, семенах и масле

рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2168-07...... 99

8.    Определение остаточных количеств метамитрона в ботве и корнеплодах столовой

и кормовой свеклы методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2169-07...........113

9.    Определение остаточных количеств лрометрина в семенах кориандра методом

газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2170-07................................................125

10.    Определение остаточных количеств римсульфурона в клубнях картофеля

методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2171-07..............138

11.    Определение остаточных количеств тау-флувалината в зерне и соломе зерновых культур, в ягодах и соке винограда, зеленой массе пастбищных трав, семенах и масле рапса, сои методом капиллярной газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2172-07...........................................................................................147

12.    Определение остаточных количеств тиаметоксама в луке, ягодах и соке винограда методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2173-07...........................................................................................163

13.    Определение остаточных количеств фамоксадона в плодах томатов, ягодах

винограда, зеленой массе, семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2174-07..........................178

14.    Определение остаточных количеств цимоксанила в томатах, винограде,

зеленой массе, семенах и масле подсолнечника методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2175-07.....................................................................198

15.    Измерение концентраций 2,4 D этилгексилозого эфира в атмосферном воздухе

населенных мест методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2176-07.............212

&

УТВЕРЖДАЮ

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации,

Руководитель Федеральной службы ав

1    человека

Г.Г. Онищенко

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ, ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ 2,4-Д В МАСЛЕ КУКУРУЗЫ МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Методические указания

МУК 4,1.2/#-07

Настоящие методические указания устанавливают метод газожидкостной хроматографии для определения в масле кукурузы массовой концентрации 2,4-Д в диапазоне 0,005 -0,05 мг/кг.

Фирма производитель: ЗАО «ФМРус», ООО «Сибагрохим».

Торговое название: Аврорекс, Элант.

Название действующего вещества по ИСО: 2,4-Д.

Название по ИЮЛАК: 2,4-ддаслорфеноксиухсусная кислота.

Эмпирическая формула: С₈Нб CfcOj.

Молекулярная масса: 221,0.

Агрегатное состояние: кристаллы.

Цвет, запах: белые.

Давление насыщенного пара 0,011 мПа при 20°С.

Коэффициент распределения в системе октанал/вода Ko_W iogP = 2,58 - 2,S3 (pH 1).

к

Растворимость и воде: 31J мг/лм^л (pH I. 25^ПС). 0.6 r/л (20^1>С). В этаноле 1250. дитгшюнпм эфире 243. гептане 1,1 (все в г/кг, 20^ft).

2,4-Д является сильной кислотой ерКа = 2.73. Гидролитически стабильна, и водных растворах и образует водорастворимые соли со щелочными металлами к аминами. В жесткой воде кальциевые и магниевые соли выпадают о осадок.

Краткая токсикологическая характеристика: 2,4-Д (кислота) относится к умеренно опасным веществам по острой пероральной (ЛДяо для крыс - 639 - 764 мг/кг для мышеи * 138 мг/кг), опасным по ингаляционной токсичности (JlKvj (24 час) для крыс >1790 мг/дм¹ воздуха) и умеренно опасным по накожной токсичности (ЛДзд для крыс более 1600 мг/ю).

2-й класс опасности.

В России установлены следующие гигиенические нормативы:

ДСД • 0,0001 мг/кг/сутки;

МДУ в сельскохозяйственной продукции (мг/кг): все продукты -нд (предел обнаружения -0,005).

Область применения.

2,4-Д - селективный, системный гербицид, эффективно подавляющий рост и развитие большинства двудольных широколистных сорных растений. У чувствительных к препарату растениях происходит угнетение процессов фотосинтеза, стимуляция или угнетение дыхания, нарушение метаболизма азотосодержащих соединений, разобщение процессов окисления и фосфорилирования, снижение синтеза макроэрги чески х фосфорных соединений и другие нарушения. Устойчивые растения обладают большей способностью к детоксикации гербицида и регуляторными системами, обеспечивающими стабильность обменных реакций.

Зарегистрирован в России под торговым названием Элант. КЭ (эталгексиловый эфир. 564 г кислоты/л) в качестве гербицида для подавления однолетних двудольных сорных растений в посевах кукурузы 0,8-1.2 л/га, а также Агрорекс, КЭ, (этилгскспловый эфир 2.4-Д + Карфентразои-этил, 500 + 21 г/л соответственно).

1. МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА.

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в Таблице 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

сГ

Таблица, I.

Метрологические параметры для 2,4-Д

Анализируемый объект I Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Показатель точности (граница относительной погрешности), ±5, % Р-0,95 Стандартное отклонение повторяемости, Or, % Предел повторяемости, г, % Предел воспроизводимости, R, % Масло кукурузы от 0,01 до 0,05 50 3 9 И от 0,005 до 0,01 вкл. 100 4 11 13

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (п = 20) приведены в Таблице 2.

Таблица 2.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение,

доверительный интервал среднего результата для 2,4-Д.

Анализируемый объект Метрологические параметры, Р = 0,95, п = 20 Предел обнару жения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Среднее значение определения, % Стандартное отклонение, S,°/o Доверительный интервал среднего результата, ±, % Масло кукурузы 0,005 0,005-0,05 80,0 3,9 + 1,5

2. МЕТОД ИЗМЕРЕНИЯ.

Метод основан на определении 2,4-Д методом ГЖХ с использованием детектора по захвату электронов после извлечения ее из масла кукурузы 5% водным раствором гидрокарбоната натрия, переэкстракции в эфир, с последующим бутилированием и очисткой на колонке с Флоризилом.

Идентификация проводится по времени удерживания. Количественное определение -методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Избирательность обеспечивается путем подбора капиллярной колонки и условий программирования температуры.

3. СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, РЕАКТИВЫ, ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ УСТРОЙСТВА И МАТЕРИАЛЫ.

3.1. Средства измерений.

Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 24104-2001 или аналогичные.

С

Весы лабораторные общего назначения с наибольшим прелелом взвешивания ло 500 г и пределом допустимой погрешности + 0,038 г, ГОСТ 19491-74,

Колбы мерные на 25, 50, 100 см\ Г'ОСТ ] 770-74,

Мерные цилиндры на 10, 25 и 50 ем\ ГОСТ 1770-74.

Микрошпрмц на 10 мм\ ТУ 2.833.106.

Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см\ ГОС']' 20292-74.

Хроматограф газовый «Кристалл 2000мл с детектором по захвату электронов (')ЗД) с приделом детектирования ло Линдану 4хЩГ^м г/см³ и приспособлениями для капиллярной колонки. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2.    Реактивы.

Азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74.

Ацетон х.ч., ТУ 6-09-3513-86,

н-Бутаиол, х.ч., ГОСТ 6006-78. свежеперегнаиный.

Вода дистиллированная. ГОСТ 7602-72. и-Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.

Гелий, очищенный марки “А”, ТУ 51-940-80.

2,4-Д, аналитический стандарт с содержанием 99,3% д.в., ГСО 7648-99.

Диэгиловый эфир, х.ч., ГОСТ 6262-79.

Кислота серная концентрированная, ч., ГОСТ 4204-77.

Натрия гидрокарбонат, х.ч, ГОСТ 4201-89 Натрий сернокислый, безводный, х.ч., ГОСТ 4166-76.

Стандартный раствор 2,4-Д в этаноле - 1 мг/мл (хранить и холодильнике, срок годности 120 суток).

Флоризил для колоночной хроматографии с размером частиц 60- 80 меш, фирма «Мерк».

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

3.3,    Вспомогательные устройства, материалы.

Ванна ультразвуковая “Серьга” ТУ 3.836.008.

Виалы с тефлоновыми прокладками, Aldrich, cat. № Z27.702-9,

Воронки химические для фильтрования, стеклянные, ГОСТ 8613-75.

Воронки делительные на 250 см³, ГОСТ 10054-75.

Испаритель ротационный Rota vapor R110 Buchi или ИР-lM, ТУ 25-11-917-74 с водяной ба-

¥

Колбы конические плоскодонные па 100 и 250 см^л, К1ШМ00, КПШ-250,ГОСТ 10394-72. Концентраторы грушевидные (конические) 100 и 250 см\ ГОС'!’ 10394-72 Колонка хроматографическая капиллярная кварцевая 1IP-1, 100% мстнлиилнкоп, длина 30 м. внутренний диаметр 0,25 мм, толщина пленки 0,25 мкм, фирмы Хыолсгт Паккард.

Колонки хроматографические, стеклянные или пластиковые, длина 150 - 250 мм, диаметр 15 мм.

Нагревательный блок для виал, Dri-BIock DB-3, Tecam.

Насос диафрагменный FT. 19 фирмы KNPNcu Laboporl.

Полипропиленовые банки емкостью 250 см\

Стаканы стеклянные на 100 и 500 см\ ГОСТ 6236-72.

Установка для перегонки растворителей.

Допускается применение хроматоцэафических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ.

4Л. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезонас-ности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4,2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по гост 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ и воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2,2.5.1313-03 «Предельно-допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004,

5. ТРЕБОВАНИЯ К КВАЛИФИКАЦИИ ОПЕРАТОРОВ.

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию нс ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «л ибо ран г», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЙ.

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

'процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20±5)^пс и относительной влажности не более 80%.

-выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомемдо-ванных технической документацией к прибору.

7. ПОДГОТОВКА К ОПРЕДЕЛЕНИЮ.

7.1.    Подготовка колонки, заполненной Флоризилом, для очистки пестрит и.

На дно пластиковой хроматографической колонки (высота 15 см, диаметр 1,5 см) но мешают пробочку из стекловаты и заполняют колонку Флоризилом на высоту И) см, На слой Флорнзила насыпают слой безводного сернокислого натрия толщиной КО см. Перед нанесением пробы колонку промывают 15 см³ ацетона, высушивают, н 15 см*¹ гексана. Колонка готова к работе.

7.2.    Проверка хроматографического поведения 2,4-Д на колонках с Флоризилом,

При отработке методики или поступлении новой партии Флоризила проводят изучение поведения 2,4-Д на колонке. На заранее подготовленную, как описано в пункте 7,1., колонку наносят 2 см³ стандартного раствора бутилового эфира 2,4-Д в пексане с концензраии-ей 0,1 мкг/см³. Затем последовательно наносят на колонку 10 см³ гексана и 5 см^Л смеси г ексана с ацетоном в соотношении 10:1, элюаты отбрасывают.

2,4-Д элюируют с колонки последовательно 3-4-мя порциями объёмом 5 см¹ каждая смеси гексана с ацетоном в соотношении 2:1. Каждую порцию собирают отдельно в концентраторы и выпаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани не выше 25-30°С.

Сухой остаток каждой фракции растворяют в 2 см³ гексана и 1 мм³ пробы вводят о хроматограф.

Рассчитывают содержание вещества в элюате, определяют полноту смыва бутилового эфира 2,4-Д с колонки н необходимый объём элюата.

7.3.    Бутилироваиис

К сухому остатку в виале добавляют I см³ 2% раствора концентрированной серной кислоты в бутаноле. Плотно закрывают виал крышкой и помещают в блок для впал, нагретый до 100°С. Бутилирование проводят в течение 30 минут. Далее виал охлаждают до комнатной температуры и добавляют в виал 5 см³ гексана и 20-25 см³ дистиллированной воды.

Смесь интенсивно встряхивают и после разделения фаз верхний гексановый слой, содержащий бутиловый эфир 2,4-Д, используют для анализа.

7.4. Приготовление рабочих растворов

7.4.1.    Приготовление раствора для бути л про ванн и.

Раствор готовят пол тятЙ. строго соблюдая технику безопасности.

В мерную колбу объемом 100 см³ наливают около 60 см³ п-бутанола и осторожно приливают 2 см*¹ концентрированной серной кислоты к. Перемешивают раствор и доводят объем до метки бутанолом. Бутилирующую смесь хранят под тягой в течение одного месяца. Перед приготовлением раствора и-бутанол перегоняют.

7.4.2.    Приготовление 4н водного раствора серной кислоты.

Раствор готовят под тягой, строго соблюдая технику безопасности.

В мерную колбу объемом 1 дм'¹ напивают около 500 см³ и осторожно приливаюr 112 см³ концентрированной серной кислоты к дистиллированной воде. Осторожно перемешивают раствор, добавляют воды, но не до мелей. Когда раствор остынет, его доводят водой до метки.

7.4.3.    Приготовление 5% водного раствора гидрокарбоиата натрия.

В стакан на 500 см³ помещают 50 гидрокарбоната натрия. Доливают около 200 см*' воды и растворяют соль на ультразвуковой ванне, помешивая стеклянной палочкой. Раствор переливают о мерную колбу объемом 1 дм³. При необходимости процедуру повторяют. Раствор в колбе доводят водой до метки.

7.4.4.    Приготовление стандартных растворов 2,4-Д.

100 мг 2,4-Д (аналитического стандарта) вносят в мерную колбу вместимостью 100 см³, растворяют навеску в этаноле и доводят объем до метки этанолом (стандартный раствор № I, концентрация 1 мг/см³). Раствор хранится в холодильнике около 120 суток.

Методом последовательного разбавления исходного раствора №1 этанолом готовят стандартный раствор № 2 с концентрацией 5,0 мкг/см³, который может храниться в холодильнике не более 30 суток.

7.4.5.    Приготовление стандартных растворов бутилового эфира 2,4-Д.

Стандартные растворы бутилового эфира 2,4-Д используют для построения градуировочного графика, а также для проверки его поведения на колонке с Флоризююм. Отбирают 1 см³ стандартного раствора № 2 в виалу, удаляют растворитель током теплого воздуха и проводят бутилирование, как указано в разделе 7.3. Получают стандартный раствор № 3 бутилового эфира 2,4-Д с концентрацией 1,0 мкг/см³ по кислоте. Из него последовательным разбавлением в гексане готовят рабочие растворы с концентрациями: 0,1; 0,05; 0,02; 0,01 мкг/см³.