Постановление Правительства Российской Федерации
от 31 декабря 2010 г. № 1230
"Об утверждении правил и методов исследований и правил
отбора образцов донорской крови, необходимых для применения и исполнения
технического регламента о требованиях безопасности крови, ее продуктов,
кровезамещающих растворов и технических средств, используемых в
трансфузионно-инфузионной терапии"
Правительство Российской Федерации постановляет:
Утвердить прилагаемые правила и методы исследований и
правила отбора образцов донорской крови, необходимые для применения и
исполнения технического
регламента о требованиях безопасности крови, ее продуктов, кровезамещающих
растворов и технических средств, используемых в трансфузионно-инфузионной
терапии.
Правила и методы исследований и правила отбора образцов донорской
крови, необходимые для применения и исполнения технического регламента о
требованиях безопасности крови, ее продуктов, кровезамещающих растворов и
технических средств, используемых в трансфузионно-инфузионной терапии
(утверждены постановлением Правительства Российской Федерации от
31 декабря 2010 г. № 1230)
1. Настоящий документ устанавливает правила и методы
исследований и правила отбора образцов донорской крови, необходимые для
применения и исполнения технического регламента о требованиях безопасности
крови, ее продуктов, кровезамещающих растворов и технических средств,
используемых в трансфузионно-инфузионной терапии, утвержденного постановлением
Правительства Российской Федерации от 26 января 2010 г. № 29.
2. В настоящее время клинически значимыми при переливании
крови и ее компонентов являются группы крови по следующим системам:
система AB0, включающая антигены А,
В;
система Резус, включающая антиген Резус-принадлежности
класса D и антигены эритроцитов С, с, Е, е;
система Келл, включающая антигены эритроцитов класса К.
В норме у человека могут присутствовать указанные антигены и
антитела к антигенам системы AB0.
Переливание крови и (или) ее компонентов, а также
беременность могут способствовать появлению антиэритроцитарных аллоантител.
3. Требования безопасности крови и ее компонентов
предусматривают проведение исследований образцов донорской крови для
определения групп крови по системам AB0,
Резус-принадлежности, а также для определения фенотипа антигенов эритроцитов по
системам Резус и Келл и скрининга антиэритроцитарных аллоантител.
4. В целях обеспечения соблюдения требований безопасности
крови и ее компонентов необходимо использовать следующие иммунологические
методы:
а) метод агглютинации, основанный на слипании и выпадении в
осадок частиц (агглютинатов), корпускулярного антигена под воздействием антител
(агглютининов), - используется для определения групп крови по системам АВ0,
Резус-принадлежности и фенотипа антигенов эритроцитов по системам Резус и Келл,
исследование может проводиться как ручным способом (нанесение реагентов и
образцов крови на плоскую поверхность), так и с применением лабораторного
оборудования (внесение реагентов и образцов крови в гель, в микропланшеты, в
микропланшеты с магнитизированными эритроцитами, а также в колонки на
стеклянных микросферах);
б) метод гемагглютинации, основанный на способности
эритроцитов с адсорбированными антигенами или антителами агглютинироваться в
присутствии гомологичных сывороток или соответствующих антигенов с образованием
гемагглютинатов, - используется для определения Резус-принадлежности, фенотипа
антигенов эритроцитов по системам Резус и Келл, скрининга антиэритроцитарных
аллоантител, исследование проводится в пробирках с помощью центрифугирования, а
также с применением лабораторного оборудования (внесение реагентов и образцов
крови в гель, в микропланшеты, в микропланшеты с магнитизированными
эритроцитами, а также в колонки на стеклянных микросферах).
5. В целях обеспечения соблюдения требований безопасности
крови и ее компонентов необходимо применять следующие правила исследования
групп крови:
а) определение группы крови по системе АВ0:
группа крови по системе АВ0 определяется перед каждым
взятием у донора крови или ее компонентов (далее - донация) с использованием
моноклональных антител специфичности анти-А, анти-В одной серии реактивов;
повторное определение группы крови по системе АВ0 проводится
из образца донорской крови, взятого во время донации перекрестным способом со
стандартными эритроцитами А, В;
допускается определение группы крови по системе АВ0 в образцах
крови доноров плазмы без использования стандартных эритроцитов, если ранее
группа крови по системе АВ0 определена дважды на образцах крови каждого донора
от разных донаций с использованием перекрестного способа исследования со
стандартными эритроцитами;
в каждую серию исследований включаются
"положительный" и "отрицательный" контрольные образцы
(эритроциты А, В, 0 и плазма с антителами специфичности анти-А, анти-В);
в случае расхождения результатов прямого и обратного
определения (выявление экстраагглютинина анти-А1), а также при
ослаблении силы реакции агглютинации при выявлении антигена А для диагностики
подгруппы антигена А используют реактив анти-А1;
выявление экстраагглютинина анти-А1 является
основанием запрета использования компонентов крови для лечебных целей;
б) определение группы крови по системе Резус:
Резус-принадлежность определяется наличием или отсутствием антигена D, выявляемого при исследовании образца донорской крови,
взятого во время донации;
Резус-принадлежность устанавливается как положительная при
наличии антигена D и как отрицательная при отсутствии
антигена D;
определение слабых вариантов антигена D
(Du) является обязательным (доноры, имеющие
слабый или частичный антиген D (Du)
считаются Резус(D)-положительными);
типирование антигенов эритроцитов С, с, Е, е системы Резус
является обязательным и производится дважды на образцах крови каждого донора от
разных донаций различными сериями типирующих реагентов или различными методами.
При совпадении результатов фенотип донора считается установленным и при
последующих донациях не определяется;
в каждую серию исследований включаются
"положительный" и "отрицательный" контроли (эритроциты D- и D+, С- и С+, Е- и Е+, е+ и е-, с+
и с-).
6. В целях обеспечения соблюдения требований безопасности
крови и ее компонентов необходимо применять также следующие правила:
а) правила определения антигена эритроцитов К системы Келл:
исследуется у каждого донора двукратно во время разных
донаций различными сериями типирующих реагентов или различными методами;
при совпадении результатов К-принадлежность считается
установленной и при последующих донациях не определяется;
в каждую серию исследований включаются
"положительный" и "отрицательный" контроли (эритроциты К- и
К+);
б) правила скрининга антиэритроцитарных аллоантител
донорской крови:
скрининг антиэритроцитарных аллоантител донорской крови
проводится у мужчин и женщин при каждой донации независимо от группы крови
системы АВ0 и Резус(D)-принадлежности;
при скрининге антител выявляют клинически значимые антитела с
использованием панели стандартных эритроцитов, состоящей не менее чем из 3
видов клеток, типированных по всем клинически значимым антигенам;
не допускается применение смеси (пула) образцов эритроцитов
для скрининга антиэритроцитарных аллоантител;
специфичность антител к антигенам эритроцитов
устанавливается с идентификационной панелью, состоящей не менее чем из 10
образцов фенотипированных эритроцитов;
выявление антиэритроцитарных аллоантител является основанием
для запрета использования крови и ее компонентов в лечебных целях;
в каждую серию исследований включаются
"положительный" и "отрицательный" контроли (образцы
сывороток, содержащие и не содержащие антитела).
7. Отбор образцов донорской крови для определения групп
крови осуществляется во время донации непосредственно из системы для взятия
крови (емкость однократного применения, используемая для сбора крови и ее
компонентов) без нарушения целостности системы или из специального
контейнера-спутника для проб, имеющегося в составе этой системы, в вакуумсодержащие
(вакуумобразующие) одноразовые пробирки, содержащие антикоагулянт
этилендиаминтетрауксусная дикалиевая или трикалиевая соль.
Пробирки с образцами крови после оседания эритроцитов (не
ранее чем через 30 минут после взятия крови) подвергаются центрифугированию,
режим которого должен соответствовать инструкции производителя реагентов.
Не допускается открытие пробирок с образцами донорской крови
до момента доставки их на исследование в клинико-диагностическую лабораторию.
Транспортировка в лабораторию пробирок с образцами крови
осуществляется в специальных контейнерах при температуре от +17 °С до +24 °С
при условии недопущения прямого воздействия света и встряхивания.
8. В лечебных целях используется кровь и ее компоненты,
идентифицированные по системам АВ0, Резус-принадлежности, фенотипу антигенов
эритроцитов по системам Резус и Келл и не имеющие клинически значимых
аллоантител к антигенам эритроцитов.
9. Безопасность донорской крови и ее компонентов должна
подтверждаться отрицательными результатами лабораторного контроля образцов
донорской крови, взятых во время каждой донации, на наличие возбудителей
гемотрансмиссивных инфекций.
10. В целях выявления маркеров вирусов иммунодефицита
человека, гепатитов В и С и возбудителя сифилиса необходимо использовать
следующие иммунологические и молекулярно-биологические методы:
а) иммунологические методы:
метод иммуноферментного анализа, основанный на выявлении
комплекса антиген-антитело с помощью фермента по изменению окраски
специфического субстрата, - используется для определения маркеров вирусов
иммунодефицита человека, гепатитов В и С и возбудителя сифилиса;
метод иммунохемилюминесцентного анализа, основанный на
выявлении комплекса антиген-антитело при взаимодействии антигенов со
специфическими антителами, химически конъюгированными с люминофорами
(веществами, способными светиться в ультрафиолетовом свете) с последующим
измерением уровня свечения, - используется для определения маркеров вирусов
иммунодефицита человека, гепатитов В и С и возбудителя сифилиса;
метод пассивной гемагглютинации, основанный на способности
эритроцитов с адсорбированными растворимыми антигенами агглютинироваться в
присутствии специфической иммунной сыворотки с образованием гемагглютинатов, -
используется для определения маркеров возбудителя сифилиса;
метод преципитации, основанный на взаимодействии
эквивалентных количеств мелкодисперсных растворимых антигенов
(преципитиногенов) с соответствующими антителами (преципитинами) с образованием
комплекса антиген-антитело (преципитата) и последующим выпадением данного
комплекса в осадок, - используется для выявления неспецифических антител к
кардиолипиновому антигену при диагностике сифилиса;
б) молекулярно-биологические методы:
метод тестирования нуклеиновых кислот, основанный на
обнаружении специфичного участка генома возбудителя инфекции с помощью
многократного увеличения числа копий фрагмента нуклеиновых кислот, -
используется для определения нуклеиновых кислот вирусов иммунодефицита
человека, гепатитов В и С;
метод мультиплексного анализа, основанный на одновременном
обнаружении нуклеиновых кислот нескольких возбудителей инфекций, - используется
для определения нуклеиновых кислот вирусов иммунодефицита человека, гепатитов В
и С.
11. При определении маркеров вирусов иммунодефицита
человека, гепатитов В и С и возбудителя сифилиса необходимо соблюдать следующие
правила:
а) в отношении маркеров вирусов иммунодефицита человека и
гепатитов В и С:
образцы крови доноров исследуются на наличие антител к
вирусу иммунодефицита человека и антигена р24 вируса иммунодефицита человека
(одновременно), поверхностного антигена вируса гепатита В и антител к вирусу
гепатита С, а также неспецифических антител к кардиолипиновому антигену и
суммарных антител к возбудителю сифилиса;
допускается проведение исследования с целью одновременного
определения наличия антител к вирусу гепатита С и антигена вируса гепатита С;
первое иммунологическое исследование на наличие маркеров
вирусов иммунодефицита человека, гепатитов В и С проводится в единичной
постановке;
при получении положительного результата анализа исследование
повторяют 2 раза с сохранением условий первой постановки, включая реагенты;
в случае получения хотя бы одного положительного результата
при повторном тестировании на маркеры вирусов иммунодефицита человека исследуемый
образец донорской крови признается положительным и подлежит направлению для
подтверждающего исследования в лабораторию специализированного учреждения для
постановки лабораторного диагноза и получения следующих заключений: антитела к
вирусу иммунодефицита человека и антиген р24 вируса иммунодефицита человека не
определены, неспецифическая или сомнительная серологическая реакция, инфекция,
обусловленная вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ-инфекция);
при получении хотя бы одного положительного результата при
повторном тестировании на маркеры вирусов гепатита В и С исследуемый образец
донорской крови признается положительным и подлежит исследованию в
подтверждающем тесте для постановки лабораторного диагноза;
б) в отношении маркеров возбудителя сифилиса: при проведении
первого тестирования на сифилис исследования осуществляются в единичной
постановке;
при получении положительного результата в любом из тестов
исследование повторяют 2 раза с сохранением условий первой постановки, включая
реагенты;
при получении положительного результата хотя бы в одной из
двух повторных постановок любого лабораторного теста образец донорской крови
признается положительным на сифилис.
12. Молекулярно-биологические исследования проводятся
дополнительно (до, после, одновременно) к обязательным иммунологическим
исследованиям на маркеры вирусов иммунодефицита человека и гепатитов В и С и
наиболее эффективны для обеспечения безопасности компонентов крови с коротким
сроком годности (менее 6 месяцев), а также для свежезамороженной плазмы, не
прошедшей карантинизацию. Указанные исследования проводятся для идентификации
конкретной нуклеиновой кислоты вирусов иммунодефицита человека, гепатитов В и
С, а также для установления общей составляющей указанных нуклеиновых кислот
(мультиплексный анализ) без дополнительной идентификации нуклеиновой кислоты
конкретного возбудителя инфекций с соблюдением следующих правил:
первое молекулярно-биологическое исследование проводится в
единичной постановке;
при получении положительного результата исследование
повторяют 2 раза с сохранением условий первой постановки, включая реагенты;
в случае получения хотя бы одного положительного результата
при повторном тестировании образец донорской крови признается положительным;
подтверждение результатов молекулярно-биологических
исследований осуществляется на основании углубленного клинико-лабораторного
обследования доноров крови и ее компонентов.
13. Отбор образцов донорской крови для определения маркеров
вирусов иммунодефицита человека, гепатитов В и С и возбудителя сифилиса
осуществляется во время донации непосредственно из системы для взятия крови
(емкость однократного применения, используемая для сбора крови и ее
компонентов) без нарушения целостности системы или из специального
контейнера-спутника для проб, имеющегося в составе этой системы, в
вакуумсодержащие (вакуумобразующие) одноразовые пробирки, соответствующие
применяемым методикам исследований.
Не допускается открытие пробирок с образцами донорской крови
до момента доставки их на исследование в клинико-диагностическую лабораторию.
Транспортировка в лабораторию пробирок с образцами
осуществляется в специальных контейнерах при температуре от +17 °С до +24 °С
при условии недопущения прямого воздействия света и встряхивания.
Пробирки с образцами крови после оседания эритроцитов или
отделения сгустка крови (не ранее чем через 30 минут после взятия крови)
подвергаются центрифугированию.
Для получения сыворотки или плазмы кровь подвергают
центрифугированию в течение 10 - 15 минут при ускорении 9810 - 11772 м/с2.
Повторное центрифугирование не рекомендуется.
Лабораторное исследование образцов донорской крови
иммунологическими методами для определения маркеров гемотрансмиссивных инфекций
проводится не ранее чем через 18 часов после взятия крови.
14. Клинико-диагностические лаборатории, осуществляющие
исследование образцов донорской крови, применяют методики, являющиеся
неотъемлемой частью реагентов, зарегистрированных в установленном порядке в
соответствии с законодательством Российской Федерации. Методики исследований,
интерпретация результатов должны соответствовать инструкциям производителей
реагентов и оборудования.
15. Деятельность клинико-диагностических лабораторий,
осуществляющих исследование образцов донорской крови в целях обеспечения ее
безопасности, организуется в соответствии со следующими документами в области
стандартизации:
ГОСТ
Р ИСО 15189-2009 "Лаборатории медицинские. Частные требования к
качеству и компетентности";
ГОСТ
Р ИСО 15198-2009 "Клиническая лабораторная медицина. Изделия
медицинские для диагностики in vitro. Подтверждение
методик контроля качества, рекомендуемых изготовителями пользователям";
ГОСТ
Р 53133.3-2008 "Технологии лабораторные клинические. Контроль качества
клинических лабораторных исследований. Часть 3. Описание материалов для
контроля качества клинических лабораторных исследований";
ГОСТ
Р 53133.4-2008 "Технологии лабораторные клинические. Контроль качества
клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила проведения клинического
аудита эффективности лабораторного обеспечения деятельности медицинских
организаций";
ГОСТ
Р 53079.1-2008 "Технологии лабораторные клинические. Обеспечение
качества клинических лабораторных исследований. Часть 1. Правила описания
методов исследований";
ГОСТ
Р 53079.2-2008 "Технологии лабораторные клинические. Обеспечение
качества клинических лабораторных исследований. Часть 2. Руководство по
управлению качеством в клинико-диагностической лаборатории. Типовая
модель";
ГОСТ
Р 53079.4-2008 "Технологии лабораторные клинические. Обеспечение
качества клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения
преаналитического этапа";
ГОСТ
Р 53022.1-2008 "Технологии лабораторные клинические. Требования к
качеству клинических лабораторных исследований. Часть 1. Правила менеджмента
качества клинических лабораторных исследований";
ГОСТ
Р 53022.2-2008 "Технологии лабораторные клинические. Требования к качеству
клинических лабораторных исследований. Часть 2. Оценка аналитической надежности
методов исследования (точность, чувствительность, специфичность);
ГОСТ
Р 53022.3-2008 "Технологии лабораторные клинические. Требования к
качеству клинических лабораторных исследований. Часть 3. Правила оценки
клинической информативности лабораторных тестов".