Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1
 

10 страниц

304.00 ₽

Купить ГОСТ Р 51484-99 — официальный бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Официально распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль".

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Распространяется на растительные масла и животные жиры и устанавливает метод определения состава жирных кислот, которые находятся в положении 2 (b или среднем положении) в молекулах триглицеридов в растительных маслах и животных жирах.

  Скачать PDF

Переиздание

Действие завершено 15.02.2015

Оглавление

1 Область применения

2 Нормативные ссылки

3 Сущность метода

4 Правила приемки

5 Реактивы

6 Аппаратура

7 Подготовка к определению

8 Проведение определения

9 Обработка результатов

10 Повторяемость

11 Воспроизводимость

Приложение А Приготовление липазы и проверка активности

Приложение Б Библиография

Показать даты введения Admin

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Масла растительные и жиры животные

МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОСТАВА ЖИРНЫХ КИСЛОТ В ПОЛОЖЕНИИ 2 В МОЛЕКУЛАХ ТРИГЛИЦЕРИДОВ

Издание официальное

ГОССТАНДАРТ РОССИИ Москва


Предисловие

1    РАЗРАБОТАН Временным творческим коллективом, образованным в рамках договора № 9842002 Е 4075 между АФНОР и ВНИЦСМВ с участием членов Технического комитета по стандартизации ТК 238 «Масла растительные и продукты их переработки*

ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 238 «Масла растительные и продукты их переработки*

2    ПРИНЯТ И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 22 декабри 1999 г. № 640-ст

3    Настоящий стандарт гармонизироваи с международным стандартом ИСО 6800:1997 «Масла растительные и жиры животные. Метод определения состава жирных кислот в положении 2 в молекулах триглицеридов*

4    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

5    ПЕРЕИЗДАНИЕ

II

Настоящий стандарт нс может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Госстандарта России

161

ГОСТ F 51484-99

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Масла растительные и жиры животные

МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОСТАВА ЖИРНЫХ КИСЛОТ В ПОЛОЖЕНИИ 2 В МОЛЕКУЛАХ

ТРИГЛИЦЕРИДОВ

Vegetable oils and animal fats.

Method for determination of the composition of fatty acids in the 2-position in the triglyceride molecules

Дата введения 2001—01—01

I Область применения

Настоящий стандарт распространяется на растительные масла и животные жиры и устанавливает метод определения состава жирных кислот, которые находятся в положении 2 (Ь или среднем положении) в молекулах триглицеридов в растительных маслах и животных жирах.

В силу природных свойств активности панкреатической липазы метод применим только для жиров температурой плавления ниже 45 *С.

Этот метод нс может без ограничений применяться для всех жиров и масел, в частности, содержащих значительные количества:

-    жирных кислот с 12 и менее атомами углерода (например кокосовое масло, пальмоядровос масло, молочные жиры, содержащие масляную кислоту );

-    жирных кислот с 20 и более атомами углерода и высокой степенью иснасышснкости (более четырех двойных связей) (например рыбные жиры и жиры морских млекопитающих);

-    жирных кислот, имеющих вторичные группы, содержащие кислород.

П р и м с ч а и и с — Жирные кислоты с двойными связями в положении от (I) — 16) до (D — II) (например пстроэслиновая кислота) лишь вслабой степени подвергаются воздействию панкреатической липазы. Это может привести к искажению результатов.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 61-75 Кислота уксусная. Технические условия

ГОСТ 450-77 Кальций хлористый технический. Технические условия

ГОСТ 2603-79 Ацетон. Технические условия

ГОСТ 3118-77 Кислота соляная. Технические условия

ГОСТ 4328-77 Натрия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 5471-83 Масла растительные. Правила приемки и методы отбора проб

ГОСТ 5848-73 Кислота муравьиная. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 6995-77 Метанол-яд. Технические условия

ГОСТ 8285-91 Жиры животные топленые. Правила приемки и методы испытания ГОСТ 9293-74 Азот газообразный и жидкий. Технические условия ГОСТ 9805-84 Спирт изопропиловый. Технические условия

ГОСТ 18300-87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия ГОСТ 20015-88 Хлороформ. Технические условия

ГОСТ 24104-88 Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ Р 51483-99 Масла растительные и жиры животные. Определение методом газовой хроматографии массовой доли метиловых эфиров индивидуальных жирных кислот к их сумме

Иыаннс официальное

ГОСТ Р 51484-99

ГОСТ Р 51486-99 Масла растительные и жиры жшютные. Получение метиловых эфиров жирных кислот

ИСО 661—89*^ Масла и жиры животные и растительные. Подготовка испытуемой пробы

ИСО 5555—91!> Масла и жиры животные и растительные. Отбор проб

3    Сущность метола

Метод включает нейтрализацию свободных жирных кислот, очистку испытуемой пробы с помощью колоночной хроматографии, частичный энзиматический гидролиз глицеридов, отделение 2-моноглпцсрцдов с помощью тонкослойной хроматографии и определение их жирнокислотного состава с помощью газовой хроматографии.

4    Правила приемки и методы отбора проб

4.1    Правила приемки и отбор проб:

-    растительных масел — по ГОСТ 5471;

-    животных жиров — по ГОСТ 8285.

При экспортно-импортных поставках — по ИСО 5555.

5    Реактивы

5.1    Реактивы для очистки испытуемой пробы

5.1.1    Спирт изопропиловый по ГОСТ 9805 или спирт этиловый по ГОСТ 18300.95 % (объемная доля).

5.1.2    Гексан по 111 или эфир легкий петролейный температурой кипения в пределах <30—60) *С.

5.1.3    Спирт изопропиловый по ГОСТ 9805 или спирт этиловый по ГОСТ 18300. 50 % (объемная доля).

5.1.4    Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор молярной концентрации с (NaOH) = =0,5 моль/дм1.

5.1.5    Фенолфталеин по |2|. спиртовой раствор массовой долей 1 %.

5.1.6    Окись алюминия активированная нейтральная для хроматографии I степени активности, активированная перед использованием в течение 2 ч при 260 *С и хранящаяся в эксикаторе.

5.1.7    Азот по ГОСТ 9293, особой чистоты.

5.2 Реактивы для гидролиза триглицеридов

5.2.1    Эфир лиэтиловый по |3|, нс содержащий перекисей.

5.2.2    Кислота соляная по ГОСТ 3118 концентрации с (НС1) = 6 моль/дм1.

5.2.3    Натрии халат, раствор массовой долей 0,1 %. пригодный для энзимов.

5.2.4    Кальций хлористый по ГОСТ 450, раствор концентрации 220 г/дм1.

5.2.5    Раствор буферный, 2-амнно-2-(пшроксимстил)пропан-1.3-диол2 3> молярной концентрации I моль/дм1; раствор доводят соляной кислотой (5.2.2) до pH 8 по pH-метру. Раствор хранят при температуре 0—4 'С и используют в течение 14 дней.

5.2.6    Липаза панкреатическая активностью 8—20 сд/мг. Липазу хранят сухой в холодильнике. Перед употреблением доводят порцию порошка до комнатной температуры.

Примечание — Липаза необходимой активности имеется в продаже. При необходимости она может быть получена и испытана в соответствии с методикой, приведенной в приложении А.

5.3 Реактивы для отделения 2-чоног.1ицерилов

5.3.1    Спирт этиловый по ГОСТ 18300, 95 % (объемная доля).

5.3.2    Гексан по |1| и эфир легкий петролейный. температурой кипения в пределах 30—60 *С.

5.3.3    Ацетон по ГОСТ 2603.

5.3.4    Силикагель порошкообразный со связующим веществом для тонкослойной хроматографии.

5.3.5    Растворитель проявляющий

Готовят смесь, состоящую из 70 см1 гексана или петролейного эфира (5.3.2). 30 см1 диэтилового эфира и I см1 муравьиной кислоты (5.3.7). нс менее 98 % (объемная доля) или уксусной кислоты (5.3.7).

2

5.3.6    21, 7,-Дихлорфлуорссцсин. спиртовой раствор индикатора массовой датсй 0,2 %. Слабощелочная реакция достигается добавлением одной капли гидроокиси натрия молярной конпентра-цпи I модь/дм4 на 100 см4 раствора.

5.3.7    Кислота муравьиная по ГОСТ 5848 или уксусная по ГОСТ 61.

5.4 Реактивы для анализа 2-чоноглиисрнлов с помощью газовой хромаю!рафии Реактивы по ГОСТ Р 51486 и ГОСТ Р 51483.

6    Аппаратура

6.1    Установка для очистки испытуемой пробы

6.1.1    Баня водяная с терморегулятором, обеспечивающая нагрев до 40 *С.

6.1.2    Колонка стеклянная для хроматографии внутренним диаметром 13 мм и длиной 400 мм, снабженная стеклянным пористым фильтром и пробкой.

6.1.3    Испаритель ротационный с колбой вместимостью 250 см4.

6.1.4    Трубка для пробулькиваиия азота.

6.1.5    Воронка делительная ВД-1(3)-500 ХС по ГОСТ 25336.

6.1.6    Колба К-1-100-29/32 ТС по ГОСТ 25336.

6.2 Аппаратура для пиролиза триглицеридов

6.2.1    Центрифуга

6.2.2    Пробирки центрифужные стеклянные вместимостью 10 см4 со шлифом.

6.2.3    Встряхиватсль вибрационный электрический.

6.2.4    Баня водяная с терморегулятором, обеспечивающая температуру (40±0,5) *С.

6.2.5    Шприц для подкожных инъекций вместимостью I см4 с тонкой иглой.

6.2.6    Секундомер.

6.3 Аппаратура для отделения 2-чоно1линеридов

6.3.1    Камера хроматографическая для тонкослойной хроматографии с пр1гтсртой стеклянной крышкой, пригодная для размещения стеклянных пластинок размером (200x200) мм.

6.3.2    Устройство для нанесения адсорбента на стеклянные пластинки и аппликатор.

6.3.3    Пластинки стеклянные размером (200 х 200) мм.

6.3.4    Микрошприи, обеспечивающий нанесение капель объемом 3—4 мм4.

6.3.5    Приспособление для опрыскивания пластинок раствором индикатора.

6.3.6    Микрошпатсль.

6.3.7    Термостат, обеспечивающий температуру (103±2) *С.

6.3.8    Лампа ультрафиолетовая для определения положения пятен на хроматографических пластинках, например, при длине волны 254 нм.

6.3.9    Колб;! К-1-25-14/23 ТС по ГОСТ 25336 с воздушным холодильником длиной приблизительно I м со шлифом.

6.3.10    Колб;! Ки-1-250-29/32 ТС по ГОСТ 25336.

6.3.11    Колба Ки-2-50-18(22) ТС по ГОСТ 25336.

6.3.12    Фильтр стеклянный пористый 16—40 мкм.

6.3.13    Эксикатор, содержащий эффективный осушитель.

6.4    Аппаратура для анализа 2-моиоглиисридон с помощью газовой хроматографии:

Аппаратура - по ГОСТ Р 51483 и ГОСТ Р 51486.

6.5    Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 3-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 500 г.

7    Подготовка к определению

7.1 Подготовка испытуемой пробы

Готовят испытуемую пробу из лабораторной пробы по ИСО 661.

Если кислотность пробы ниже или равна 3.0 %. пробу очищают, пропуская ее через окись алюминия по 8.2.

Если кислотность более 3.0 %, вначале нейтрализуют пробу гидроокисью натрия в присутствии растворителя по 8.1, затем очищают ее, пропуская через окись алюминия по 8.2.

ГОСТ Р 51484-99

8 Проведение определения

8.1    Нейтрализация пробы гилроокисью натрия

Растворяют (10±1) г испытуемой пробы и 100 см3 гексана млн легкого петролейного эфира (5.1.2) и переносят раствор в делительную воронку (6.1.5). Приливают 50 см' изопропилового или этилового спирта (5.1.1). несколько капель раствор;! фенолфталеина (5.1.5) и объем гидроокиси натрия (5.1.4). эквивалентный содержанию свободных жирных кислот жир;! или масла, с избытком 0.5 %. Тщательно перемешивают в течение 1 мин и приливают 50 см3 волы, вновь перемешивают и дают отстояться. После разделения слоев спивают нижний слой, содержащий мыло, и промежуточные слои (слизистые и нерастворимые вещества). Промывают раствор нейтрализованного масла в гексане или легком петролейном эфире последовательными порциями по 25 см3 раствора изопропилового или этилового спирта (5.1.3) до тех пор. пока розовый цвет фенолфталеина нс исчезнет.

Переносят раствор в колбу ротационного испарителя (6.1.3) и выпаривают большую часть растворителя под вакуумом. Высушивают масю при 30—40 *С под вакуумом в токе азота (5.1.7) до тех пор. пока растворитель нс будет удален полностью.

8.2    Очистка пробы пропусканием через окись алюминия

Готовят суспензию из 15 г активированной окиси алюминия (5.1.6) в 50 см3 гексана или легкого петролейного эфира (5.1.2) и заполняют сю при постукивании хроматографическую колонку (6.1.2). Убеждаются, что окись алюминия ровно заполнила колонку, оставляют слой растворителя на 1—2 мм выше верхнего уровня адсорбента. Осторожно приливают в колонку приготовленный и нейтрализованный (если необходимо) раствор 5 г испытуемой пробы в 25 см3 гексана или легкого петролейного эфир;! (5.1.2) и собирают весь элюот в круглодонную колбу вместимостью 100 см(6.1.6).

Удаляют большую часть растворителя выпариванием в ротационном испарителе под вакуумом, затем высушивают масло при 30—40 *С под вакуумом в токе азота (5.1.7) до тех пор. пока растворитель нс будет удален полностью.

8.3    Гидролиз триглицеридов

8.3.1    Взвешивают навеску продукта массой (0.1 ±0.01) г очищенной испытуемой пробы (8.2) в центрифужную пробирку вместимостью 10 см3 (6.2.2). Если эта навеска нс жидкая при комнатной температуре, помешают пробирку в ячейку водяной бани при температуре 60—65 *С. Если при этом навеска нс расплавится полностью, ее продолжают выдерживать в бане, но нс более 10 с.

Вынимают пробирку из водяной бани и продолжают выполнять в быстрой последовательности испытания в соответствии с 8.3.2—8.3.5.

8.3.2    Добавляют к жидкой навеске предварительно взвешенные 20 мг липазы (5.2.6) и 2 смбуферного раствора (5.2.5). Осторожно встряхивают и добавляют последовательно 0.5 см3 раствора холата натрия (5.2.3) и 0.2 см3 раствора хлорида кальция (5.2.4). Закрывают пробирку пробкой, осторожно встряхивают и сразу же помешают пробирку в ячейку водяной бани при 40 *С. выполняя ручное встряхивание в течение (60+2) с. Вес операции до начала ручного встряхивания должны быть выполнены за 30 с.

8.3.3    Извлекают пробирку из водяной бани и интенсивно встряхивают при 40 °С в течение (120±2) с, используя встряхиватсль (6.2.3).

8.3.4    Незамедлительно приливают 1 см3 соляной кислоты (5.2.2) и 1 см3 днэтилового эфира (5.2.1). Закрывают пробкой и интенсивно встряхивают на встряхиватслс (6.2.3).

8.3.5    Центрифугируют содержимое центрифужной пробирки и переносят органическую фазу в пробирку для испытания с помощью шприца (6.2.5). Если проба была твердой при комнатной температуре, повторяют экстракцию с сшс 1 см3 днэтилового эфира и объединяют экстракты в пробирке для испытания.

8.4 Отделение 2-моноглицеридов

8.4.1 Подготовка пластинок

4

Тщательно очищают стеклянные пластинки (6.3.3) этиловым спиртом (5.3.1), гексаном или легким петролейным эфиром (5.3.2) и ацетоном (5.3.3) до тех пор. пока жировые вещества нс будут удалены полностью.

165

Взвешивают 30 г силикагеля (5.3.4) в коническую колбу вместимостью 250 см ' (6.3.10). Приливают 60 см3 волы. Закрывают пробкой и интенсивно встряхивают в течение I мин. Сразу же вносят суспензию в аппликатор (6.3.2). Наносят на очищенные пластинки слон толщиной 0.25 мм. Оставляют пластинки высыхать нс менее чем на 1 ч на воздухе.

В любом случае, подготовлены ли пластинки способом, описанным выше, или приобретены готовыми, активируют пластинки в термостате (6.3.7) при 103 *С в течение I ч. Перед использованием пластинки охлаждают до комнатной температуры в эксикаторе (6.3.13).

Для уменьшения скорости продвижения кислот пластинки с силикагелем должны быть пропитаны борной кислотой.

Испытуемая смесь должна быть разделена с помощьютонкослойной хроматографии как можно скорее.

В связи с тем. что некоторые силикагели содержат органические вещества, которые могут оказывать влияние на результаты в процессе хроматографического анализа, рекомендуется выполнять контрольное определение для того, чтобы убедиться, что силикагели нс содержат таких веществ. В противном случае заранее очищают подготовленные пластинки, помещая их в хроматографическую камеру с растворителем (5.3.5) и дают растворителю подняться до верха пластинки.

Допускается применение других хроматографических пластинок, по техническим характеристикам нс хуже указанных.

8.4.2 Отделение 2-моноглнцсридов

С помощью микрошприиа (6.3.4) на подготовленную пластинку (8.4.1) наносят экстракт (8.3.5) каплями в Blue сплошной полосы, проходящей на расстоянии 15 мм от нижнего края пластинки.

Устанавливают пластинку в хроматографическую камеру (6.3.1). которая была предварительно насыщена парами разделяющего растворителя (5.3.5). Закрывают камеру крышкой и осуществляют хроматографирование веществ на пластинке до тех пор, пока фронт растворителя нс достигнет уровня на расстоянии 10 мм от верхнего края пластинки.

Хроматографическое разделение проводят при температуре 20 "С. Высушивают пластинку на воздухе при температуре 20 *С и опрыскивают ее раствором индикатора (5.3.6). используя приспособление для опрыскивания (6.3.5). Отмечают полосу моноглнцеридов [Rf~ 0,035 приблизительно) в ультрафиолетовом свете (6.3.8) и соскребают ее мнкрошпателсм (6.3.6). избегая попадания в нее компонентов с линии старта.

Если очищенные испытуемые пробы (8.2) были жидкими при комнатной температуре, помешают собранный силикагель в колбу для метилирования вместимостью 25 см3 (6.3.9) и выполняют операции, описанные в 8.5.

Если очищенные испытуемые пробы (8.2) были твердыми при комнатной температуре, переносят силикагель в коническую колбу вместимостью 50 см' (6.3.11). содержащую 15 смднэтилового эфира. Интенсивно встряхивают и переносят содержимое на стеклянный пористый фильтр (6.3.12). Промывают фильтр троекратно, используя каждый раз порцию по 15 см3 диэтнло-зюго эфира, и собирают фильтрат в колбу дли выпаривании. Выпаривают эфирный раствор до объема 4—5 ем3 и переносят его в предварительно взвешенную круглодонную колбу вместимостью 25 см(6.3.9). Затем выпаривают растворитель в токе азота. Взвешивают остаток. Полученное количество моноглнцеридов должно колебаться от 10 до 30 % от массы испытуемой пробы. Если результат иной, повторяют пиролиз триглицеридов (8.2) или проверяют активность липазы (см. приложение А).

8.5 Анализ 2-моноглнцеридов с помощью газовой хроматографии

Готовят метиловые эфиры жирных кислот из моноглнцеридов, подвергая собранный силикагель (или экстракт моноглицерзиов из силикагеля) процедуре, установленной ГОСТ Р 51486. используя метод, пригодный для нейтральных жиров и масел. Проводят газохроматографический анализ метиловых эфиров по ГОСТ Р 51483.

9 Обработка результатов

Рассчитывают отношение массы метилового эфира каждой жирной кислоты в положении 2. выраженное в процентах, к общей массе метиловых эфиров жирных кислот в 2-моноглицсридах. Результаты записывают с точностью до первого десятичного знака.

166

ГОСТ Р 51484-99

10    Повторяемость

Расхождение между результатами двух независимых единичных определений, выполненных при использовании одного метода, на идентичном испытуемом материале, в одной лаборатории, одним аналитиком, на одном оборудовании, в течение короткого промежутка времени, нс должно превышать, при доверительной вероятности Р = 0.95:

0.2 (абсолютное значение) — при содержании искомых веществ менее 5 %;

I (абсолютное значение) и 3 (по отношению к среднему значению двух результатов) — при содержании искомых веществ, равном или более 5 %.

11    Воспроизводимость

Расхождение между результатами двух единичных определений, выполненных одним методом, на идентичном испытуемом материале, в разных лабораториях, разными аналитиками, на различном оборудовании, нс должно превышать, при доверительной вероятности Р= 0,95:

0.5 (абсолютное значение) — при содержании искомых веществ менее 5 %;

3 (абсолютное значение) и 10 (по отношению к среднему значению двух результатов) — при содержании искомых веществ, равном или более 5 %.

6

167

ПРИЛОЖЕНИЕ А (обязательное)

Приготовление липазы и проверка активности

Л.1 Приготовление липазы

Охлаждают 5 кг свежей свиной иоджслудочкой железы ло О ‘С. Удаляют твердый жир и сосднпитслы1ую ткань, ее окружающую, и измельчают железу до получения жидкой пасты. Перемешивают эту пасту с 2.5 дмбезводного ацетона в течение 4—6 ч на холоде и затем центрифугируют.

Экстрагируют остаток еще три раза, используя тот же объем анстона; дважды используют смесь одной объемной доли ацетона и одной объемной доли диэтилового эфира и дважды используют лиэтиловыЙ эфир.

Высушинлктг ехггаток в течение 4S ч под вакуумом до образования порошка. Порошок хранят в холодильнике.

Л.2 Проверка активности липазы

Готовят- масляную эмульсию, встряхивая смесь 165 см3 гуммиарабика конпс1прапки 100 г/дм3, 15 г дробленого льда и 20 см ' предварительно нейтрализованного масла в течение 10 мин на пригодном для этой цели миксере.

Наливают последовательно 10 см3 эмульсии. 0.3 см3 расгвора хлорат натрия (200 г/дм3) и 20 см3 диспылиронанной воды в стакан вместимостью 50 см3.

Помешают стакан в водяную баню при 37 *С (см. примечание).

В стакан опускают электроды pH-метра и нропс.ысрную мешалку и. испальзуя бюретку вместимостью 5 см3, приливают но каплям раствор с (NaOH) = 0.1 моль/дм3 до тех нор, пока нс будет достигнуто значение pH 8,5.

Придивают соответствующий (см. примечание) и точно отмеренный объем 0.1 %-ной водной суспензии анализируемого порошка липазы. Как только pH достигнет значения 8.3 по шкале pH-метра, включают секундомер и добавляют раствор малярной концентрации с (NaOH) = 0.1 моль/дм3 гак. чтобы значение pH 8.3 сохранялось. Записывают объем раствора щелочи, приливаемого каждую минуту в течение 10 мин.

Наносят полученные данные на график, отглатывая на оси X время в минутах и на оси У объем в cam-»метрах кубических раствора щелочи, использованного для подлержания постоянного значения pH. Результат должен выражаться в виде прямой линии.

Примечания

1    Когда ис1юлыуют жидкое масло, гидролиз про1юдят при 37 *С. Однако для испытания устанавливают температуру 40 *С. поиюляюшую проанализировать жиры, имеющие температуру плавления до 45 *С.

2    Дли испытания образцов используют такое количество суспензии липазы, при котором потребляется I см3 раствора щелочи за 4—5 мин. Такой результат обычно достигается при использовании 2—5 см3 суспензии липазы, то есть от I до 5 мг порошка.

Блики на липазы определяется как количество энзима, которое требуется для высвобождения I мкмоль кислоты в минуту при 37 *С и pH 8.3.

Активность А. выраженную в единицах липазы на миллиграмм использованного порошка, определяют по формуле

где V— объем израсходованного раствора гидроокиси натрия,разделенный на время опыта.рассчптанный по |рафику.см3/мин;

т — масса испытуемой пробы порошка липазы; используемая липаза должна иметь активность от 8 до 20 единиц липазы на миллиграмм; с — концентрация раствора гидроокиси натрия, ммоль/дм3 — с = 100 ммоль/дм3.

168


ПРИЛОЖЕНИЕ Б (сираночное)

Ьиб.1ио| рафия

|1| ТУ 6-09-3375-78 Гексан

|2| ТУ 6-09-5360—87 <t>ciKXi<)yra;iciiii

|3| ТУ 75-06804—90 Эфир диэтнловый

ОКС 67.200.10    Н69    ОКСТУ    9109

8

Ключевые слова: сельскохозяйственные продукты, пищевые продукты, растительные масла, животные жиры, жирные кислоты, химический анализ, определение, химический состав, тонкослойная хроматография, газовая хроматография

169

1

163

2

11 Действуют до введения в действие ГОСТ Р. разработанных на основе соответствующих ИСО.

3

Синонимы: три(гилроксиметил)мстиламин, три(п(дроксиметил)ачиномстан.

4

   164