Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1
 

6 страниц

244.00 ₽

Купить ГОСТ Р 51435-99 — официальный бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Официально распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль".

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Настоящий стандарт устанавливает метод определения содержания патулина в яблочном соке, концентрированных яблочных соках и напитках, содержащих яблочный сок, с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии

  Скачать PDF

Переиздание

Оглавление

1 Область применения

2 сущность метода

3 Реактивы

4 Приборы и лабораторное оборудование

5 Отбор проб

6 Проведение испытаний

7 Обработка результатов

8 Точность метода

9 Протокол испытаний

Показать даты введения Admin

ГОСТ Р 51435-99 (ИСО 8128-1-93)


ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ


СОК ЯБЛОЧНЫЙ,


СОК ЯБЛОЧНЫЙ КОНЦЕНТРИРОВАННЫЙ И НАПИТКИ, СОДЕРЖАЩИЕ


ЯБЛОЧНЫЙ СОК


Метод определения содержания патулина с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии


Издание официальное


ГОССТАНДАРТ РОССИИ Москва



Предисловие

1    РАЗРАБОТАН Всероссийским научно-исследовательским институтом консервной и овощесушильной промышленности (ВНИИКОП)

ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 93 «Продукты переработки плодов и овощей»

2    ПРИНЯТ И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 22 декабря 1999 г. № 590-ст

3    Стандарт содержит аутентичный текст международного стандарта ИСО 8128-1—93 «Сок яблочный, сок яблочный концентрированный и напитки, содержащие яблочный сок. Определение содержания патулина. Часть 1. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии», кроме приложения «Библиография»

4    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

5    ПЕРЕИЗДАНИЕ

II

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Госстандарта России

188

ГОСТ Р 51435-99 (ИСО 8128-1-93)

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

сок яблочный, сок яблочный концентрированный и напитки,

СОДЕРЖАЩИЕ ЯБЛОЧНЫЙ СОК

Метод определения содержания патулина с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии

Apple juice, apple juice concentrates and drinks containing apple juice. Method for determination of patulin content using high performance liquid chromatography

Дата введения 2001—01—01

1    Область применения

Настоящий стандарт устанавливает метод определения содержания патулина в яблочном соке, концентрированных яблочных соках и напитках, содержащих яблочный сок, с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Предел обнаружения патулина настоящим методом составляет 10 мкг/дм3 при условии, что взятый для анализа объем пробы готового к употреблению сока составляет 5 см3.

2    Сущность метода

Метод основан на экстракции патулина из исследуемой пробы этилацетатом, очистке экстракта перераспределением в водный раствор карбоната натрия и количественном и качественном анализе экстракта с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием спектрофотометрического детектора в ультрафиолетовой области.

3    Реактивы

Используют реактивы аналитической чистоты и воду квалификации «для ВЭЖХ».

3.1    Растворитель: этилацетат.

3.2    Подвижная фаза — раствор ацетонитрила в воде объемной концентрации 10 %.

3.3    Экстрагирующий раствор — водный раствор безводного карбоната натрия концентрации 14 г/дм3.

3.4    Ацетатный буфер, pH 4.

Смешивают 16,4 см3 уксусной кислоты [с (СН3СООН) = 0,2 моль/дм3] с 3,6 см3 раствора ацетата натрия [с (CH3COONa) = 0,2 моль/дм3].

3.5    Уксусная кислота, ледяная.

3.6    Стандартный раствор патулина (С7Н604).

3.6.1 Приготовление стандартного раствора

Навеску патулина массой 10,0 мг, взятую с точностью до 0,1 мг, растворяют в мерной колбе с одной отметкой вместимостью 100 см3 в ацетатном буфере (3.4). Объем содержимого в колбе доводят до метки ацетатным буфером.

Пипеткой переносят 10,0 см3 приготовленного раствора в другую мерную колбу с одной отметкой вместимостью 100 см3, объем содержимого в колбе доводят до метки ацетатным буфером. Массовая концентрация патулина в приготовленном стандартном растворе составляет около 10 мкг/см3.

Измеряют оптическую плотность стандартного раствора при длине волны 276 нм на подходящем спектрофотометре с использованием кварцевых кювет рабочей длиной 10 мм.

Издание официальное

3.6.2 Расчет концентрации стандартного раствора патулина

Концентрацию стандартного раствора патулина (3.6.1) рр s, мкг/см3, вычисляют по формуле

(1)

А М1000 С

^276

где А — оптическая плотность стандартного раствора патулина;

А276 — молярный показатель поглощения раствора патулина при длине волны 276 нм, дм3 • моль-1- см-1276 = 14600);

М— молярная масса патулина, г/моль;

С — постоянная прибора (обычно С = 1).

4    Приборы и лабораторное оборудование

Перед использованием лабораторное оборудование промывают раствором гипохлорита натрия концентрации 10 г/дм3.

Обычное лабораторное оборудование, в частности следующее:

4.1    Жидкостный хроматограф, снабженный спектрофотометрическим детектором в ультрафиолетовой области (пригодным для работы при длине волны 276 нм) и самописцем или интегратором.

4.2    Обращенно-фазовая колонка ODS'1 или другая аналогичная колонка со следующими параметрами:

-    эффективность не менее 35000 теоретических тарелок на метр;

-    длина 250 мм;

-    внутренний диаметр 4,6 мм;

-    неподвижная фаза размером частиц 5 мкм.

5    Отбор проб

Проба, поступающая в лабораторию, должна быть представительной и без следов порчи или изменения свойств продукта при транспортировании и хранении.

6 Проведение испытаний

6.1    Приготовление испытуемого раствора

При испытаниях концентрированных яблочных соков их разводят водой 1:5 по объему. Дальнейшую процедуру проводят для всех продуктов одинаково, как описано ниже.

6.1.1    Пробу объемом 5,0 см3 экстрагируют порцией этилацетата объемом 5,0 см3 (3.1) в течение не менее 1 мин. Экстракцию повторяют еще два раза новыми порциями этилацетата объемом по 5,0 см3. Этилацетатные фазы объединяют и эктрагируют раствором карбоната натрия (3.3) объемом 2,0 см3.

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ — Экстракцию раствором карбоната натрия проводят как можно быстрее, например в течение 1—2 мин, из-за нестабильности патулина в щелочной среде.

6.1.2    Карбонатную фазу (6.1.1) экстрагируют свежей порцией этилацетата объемом 5,0 см3, экстракт объединяют с предыдущими порциями. Карбонатную фазу отбрасывают. К экстракту добавляют 5 капель уксусной кислоты (3.5), смесь перемешивают и упаривают на ротационном испарителе до объема 1—2 см3.

6.1.3    Полученный таким образом раствор количественно переносят во флакон вместимостью около 5 см3 с помощью нескольких порций этилацетата объемом около 1 см3 каждая. Раствор упаривают досуха в токе азота при температуре 40 °С. Остаток растворяют в 0,5 см3 подвижной фазы (3.2) или ацетатного буфера (3.4).

6.2 Построение градуировочного графика

Порции стандартного раствора патулина (3.6.1) объемом 1,0; 2,0; 3,0; 5,0 и 7,5 см3 переносят пипеткой в пять мерных колб с одной отметкой вместимостью 10 см3, объем содержимого в колбах доводят до метки ацетатным буфером (3.4); получают градуировочные растворы.

Устанавливают скорость потока подвижной фазы через колонку жидкостного хроматографа около 1см3/мин. Чувствительность детектора хроматографа устанавливают таким образом, чтобы оптической плотности 0,01 соответствовал сигнал величиной на полную шкалу регистрирующего устройства.

ODS — октадецилсилан.

190

ГОСТ Р 51435-99

В хроматограф (4.1) вводят от 0,010 до 0,030 см3 каждого градуировочного раствора. Градуировочный график строят, откладывая по оси абсцисс концентрацию патулина в микрограммах на кубический сантиметр, по оси ординат — соответствующие величины высоты или площади пиков.

6.3 Проведение определения

В хроматограф вводят от 0,010 см3 до 0,030 см3 испытуемого раствора (6.1.3) при тех же условиях, что и при построении градуировочного графика.

Идентификацию пика патулина в испытуемом растворе проводят сравнением с пиками патулина в градуировочных растворах. Следует отличать пик патулина от пика оксиметилфурфурола (ОМФ).

7    Обработка результатов

Концентрацию патулина в испытуемом растворе определяют непосредственно по градуировочному графику (6.2). Содержание патулина в продукте рр , мкг/дм3, вычисляют по формуле

р, = ^103,    (2)

у2

где t — концентрация патулина в испытуемом растворе, определенная по градуировочному гра-фику, мкг/см3.

Vx — объем, до которого сконцентрирован этилацетатный экстракт, см3;

V2 — объем пробы продукта, взятый для экстракции, см3.

8    Точность метода

8.1    Сходимость результатов

г = 41,9 мкг/дм3; sr = 14,9 мкг/дм3,

где г — предел сходимости;

sr — среднеквадратическое отклонение сходимости.

8.2    Воспроизводимость результатов

R = 47,5 мкг/дм3; SR = 22,6 мкг/дм3,

где R — предел воспроизводимости;

SR — среднеквадратическое отклонение воспроизводимости.

9    Протокол испытаний

В протоколе испытаний указывают:

-    метод испытаний;

-    результат испытаний;

-    окончательный результат с оценкой сходимости, если была проверена сходимость результатов.

Также следует отметить особенности проведения испытаний, не указанные в настоящем стандарте или рассматриваемые как несущественные, с побочными обстоятельствами, способными повлиять на результат испытаний.

3

Протокол испытаний должен содержать информацию, необходимую для полной идентификации образца.

191

ОКС 67.160.20    Н59    ОКСТУ    9109

Ключевые слова: яблочный сок, концентрированный яблочный сок, напитки, содержащие яблочный сок, патулин, определение содержания, высокоэффективная жидкостная хроматография

192