ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР
ПРЕПАРАТЫ БИОЛОГИЧЕСКИЕ СУХИЕ
МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ КИСЛОРОДА ВО ФЛАКОНАХ С ПРЕПАРАТОМ
Издание официальное
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО СТАНДАРТАМ Москва
УДК 615.37.619:006.354 Группа Р39
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР
ПРЕПАРАТЫ БИОЛОГИЧЕСКИЕ СУХИЕ
Метод определения кислорода во флаконах с препаратом
Biological dry compounds. Method for determination of en content in bottles of compc
ОКСТУ 9380
Срок действия с 01.07.89 до 01.07.94
Несоблюдение стандарта преследуется по закону
Настоящий стандарт распространяется на сухие биологические препараты, применяемые в ветеринарии, и устанавливает хроматографический метод определения количества кислорода, содержащегося в заполненных азотом и герметично закрытых флаконах с сухими биологическими препаратами.
Сущность метода заключается в отборе пробы газа из флакона с сухим препаратом, вводе ее в хроматограф, получении на хроматограмме двух разделенных пиков кислорода и азота и количественном определении кислорода.
1. МЕТОД ОТБОРА ПРОБ
1.1. Для проведения испытания из серии готового препарата методом случайного отбора из разных мест берут 3 флакона с сухим препаратом.
1.2. Взятые флаконы проверяют на целостность и герметичность, тщательно осматривая поверхности флаконов с целью выявления трещин, а также проверяя плотность прилегания закатанного колпачка и резиновой пробки. Флаконы с трещинами или дефектами укупоривания для испытания не используют.
2. АППАРАТУРА, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ
Хроматограф газовый марки ЛХМ-8МД или других аналогичных марок с детектором по теплопроводимости и газохроматографической колонкой диаметром 3,0 мм и длиной 1000 мм.
(£) Издательство стандартов, 1988
С. 2 ГОСТ 27785-88
Печь муфельная с температурой нагрева до 1000°С.
Измеритель расхода газа с бюреткой 4—1—50 по ГОСТ 20292-74.
Секундомер СДС-пр-1 по ГОСТ 5072-79.
Шприц медицинский типа «Рекорд» вместимостью 1 см3 или микрошприц марки МШМЛ62.793.014 к хроматографу ЛХМ-8МД.
Сетки проволочные тканые с ячейками 0,3—0,5 мм по ГОСТ 6613-86.
Лупа измерительная 10х типа ЛПИ-457 по ГОСТ 25706-83.
Эксикатор диаметром 250 мм по ГОСТ 25336-82.
Ступка фарфоровая.
Линейка металлическая длиной 30 см по ГОСТ 427-75.
Сита молекулярные — цеолит синтетический марки СаА зернением 0,3—0,5 мм.
Игла медицинская 0840 по ГОСТ 25377-82.
Трубка резиновая медицинская внутренним диаметром 4,2X2 мм, длиной 10 м по ГОСТ 3399-76.
Бутыль вместимостью 3000 см3.
Пробка резиновая по ГОСТ 7852-76.
Масло силиконовое.
Гелий.
Азот газообразный особой чистоты по ГОСТ 9293-74.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72.
3. ПОДГОТОВКА к ИСПЫТАНИЮ
3.1. Подготовка колонки
Синтетический цеолит измельчают в фарфоровой ступке, отсеивают на ситах порошок дисперсностью 0,3—0,5 мм, промывают его дистиллированной водой для удаления пыли, высушивают и прокаливают в муфельной печи в течение 2 ч при температуре 450—500°С, затем охлаждают в эксикаторе на сетках до комнатной температуры.
Хроматографическую колонку устанавливают вертикально и засыпают синтетическим цеолитом, уплотняя его вибратором или легким постукиванием снизу. Колонку не досыпают на 1 см и закупоривают сеткой. Заполненную колонку устанавливают в термостате хроматографа и, не присоединяя к детектору, пропускают через нее поток гелия или азота особой чистоты (30—40 см3/мин) в течение 3 ч при температуре 160— 180°С. Затем колонку присоединяют к детектору и продолжают через нее пропускать гелий или азот, пока не прекратится дрейф нулевой линии при максимальной чувствительности детектора.
ГОСТ 27785-88 С. 3
3.2. Под гото в к а хроматографа
Подготовку хроматографа к работе и включение выполняют в соответствии с заводской инструкцией. Режим работы хроматографа осуществляется при следующих параметрах:
Температура колонки 40°С
Температура детектора ....... 60°С
Скорость газа-носителя гелия:
в измерительной колонке 60 см’/мин
в колонке сравнения ....... 30 сма/мин
Скорость диаграммной ленты..... 2400 мм/ч
Объем пробы, подаваемой в испаритель:
для шприца «Рекорд» . » . ■ . . .от 150 до 250 дм3
для шприца МШМЛ62.793.014 . ... 60 дм3
В зависимости от предполагаемой объемной доли кислорода и объема пробы выбирают ток и чувствительность детектора в соответствии с таблицей.
|
Объемная доля кислорода. % |
|
|
Чувствительность |
|
дм1' |
мА |
Кислород |
Азот |
|
Св, 0,05 до 0,5 вклгач. |
60
150-250 |
170±5
140±2 |
1/3
1/3 |
1/100
1/100 |
|
Св, 0,5 до 5,0 включ. |
60
150—250 |
170+5
140+2 |
1/10
1/10 |
1/100
1/100 |
|
Св, 5,0 |
60 |
150±5 |
1/10 |
1/10 |
|
150-250 |
110±2 |
1/10 |
1/10 |
При отсутствии данных об объемной доли кислорода во флаконах испытание проводят при максимальной чувствительности детектора.
Готовность хроматографа к анализу и его работоспособность проверяют, используя в качестве газовой пробы атмосферный воздух.
3.3. Подготовка флакона с препаратом к испытанию
Для отбора пробы газа из флакона с препаратом выравнивают давление газа во флаконе с атмосферным давлением. Выравнивание давлений проводят азотом, который подается из баллона через редуктор под давлением 10 КПа (0,1 кгс/см2) по резиновому шлангу в ресивер-бутыль вместимостью не менее 3000 см3, а из него по резиновому шлангу в медицинскую иглу, которой прокалывают резиновую пробку испытуемого флакона. Перед прокалыванием иглой пробки флакона азот пропускают через систему хроматографа в течение 30 мин с целью удаления остатков воздуха в ней и проверяют чистоту выходящего азота на содержание в нем кислорода на хроматографе. Затем пере-
крывают подачу азота в ресивер и спустя 15 с прокалывают иглой пробку флакона, выравнивая давление в нем с атмосферным. Через 2—3 с иглу из пробки извлекают.
3.4. Подготовка медицинского шприца
3.4.1. Предварительно устанавливают на штоке шприца металлическую трубку диаметром 4 мм, длиной 30 мм для ограничения хода поршня с целью достижения объема под поршнем 150—250 мкл и проверяют шприц на герметичность. Для этого шприц с плотно надетой иглой вкалывают в резиновую пробку, погружают всю иглу с канюлей и наконечником шприца в воду и при легком надавливании на поршень следят за появлением пузырьков воздуха. Если пузырьки воздуха не выходят в месте соединения канюли иглы со шприцем и поршень не подается при нажатии на него, шприц следует считать герметичным для анализа. В целях уплотнения и легкости хода поршня перед его использованием слегка смазывают внутреннюю поверхность цилиндра шприца в нижней его части тонким слоем силиконового масла.
3.4.2. Подготовленным к отбору газа медицинским шприцем с иглой прокалывают резиновую трубку, по которой выходит гелий из колонки сравнения хроматографа, и дважды медленно шприцем набирают и выпускают гелий. В третий раз, набрав гелий в шприц и расположив его иглой вниз, отбирают пробы газа из флакона с препаратом.
4. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЯ
4.1. Из каждого флакона отбирают две пробы газа и последовательно одну за другой, с интервалом 3—4 мин, вводят в испаритель хроматографа. Для этого прокалывают резиновую пробку флакона, выдавливают гелий из шприца во флакон и спустя 1—2 с набирают под поршень шприца пробу газа. Шприц извлекают из пробки флакона и быстро переносят к испарителю хроматографа в вертикальном положении. Точно по центру канала прокалывают иглой шприца прокладку испарителя и вводят в испаритель хроматографа.
Пробу в испаритель вводят плавным нажатием пальца на шток с таким расчетом, чтобы поршень двигался плавно с одинаковой скоростью для всех вводимых проб. Извлекают иглу шприца из испарителя также плавно, удерживая шприц в вертикальном положении.
Через 110—120 с после ввода пробы на хроматограмме самописец вычерчивает пик кислорода, а затем пик азота. Если какой-либо из пиков не укладывается в размер ширины диаграммной ленты или его размер мал, следует изменить чувствительность хроматографа в соответствии с заводской инструкцией.
ГОСТ 27785-88 С. 5
Через 20—25 проколов следует заменить резиновую прокладку испарителя на новую.
5. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ
5.1. Рассчитывают площадь пиков кислорода и азота. Для этого на хроматограмме измеряют высоту и ширину пиков кислорода и азота с помощью металлической линейки длиной 30 см, увеличительной лупы и жесткого острозаточенного карандаша. Высоту пиков измеряют от базовой линии до вершины пика, ширину пика — на половине его высоты. При измерениях берут расстояние от внутреней толщины линии пика до наружной.
Площадь пиков кислорода (5о2)и азота (Snj) в квадратных миллиметрах вычисляют по формулам:
So, = hrb,;
S.V, = Лg • Ь'2)
где Ни ht— высота пиков кислорода и азота, мм; b 1, Ь2 — ширина пиков кислорода и азота, мм.
5.2. Объемную долю кислорода (X) в процентах в каждой пробе газа вычисляют ло формуле
где So2, Sn2—площади пиков кислорода и азота, мма.
5.3. За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов определений в трех флаконах препарата.
Относительная приведенная погрешность метода при доверительной вероятности Р = 0,95 не должна превышать 10%.
С. 6 ГОСТ 27785-88
ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ
1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Государственным агропромышленным комитетом СССР
ИСПОЛНИТЕЛИ
Ю. П. Чернецкий, канд. техн. наук (руководитель темы); Ю. А. Рябков; Ю. Г. Опарин; В. В. Желтое, канд. вет. наук; Е. В. Пронина, канд. хим. наук; Н. В. Алкеев, канд. физ.-мат. наук
2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 26.07.88 № 2751
3. Срок первой проверки — 1995 г.
4. ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
б. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ
Редактор Я. Е. Шестакова Технический редактор М. И. Максимова Корректор А. М. Трофимова
Сдано в наб. 08.08.88. Подп. в печ. 23.09.88 0,5 уел. п. л. 0,5 усе. кр.-отт. 0,37 уч.-иэд. л. Тяр. 4 293 Цена 3 коп.
Ордена «Злах Почета» Издательство сгаюда»ртов, 123840. Москва. ГСП. Новощжскенсюкй nqp.,3 Тип. «Московский печатник». Москва, Лялин пер., 6. Зак. 2699
