Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав ногребш с. icii и бдагоподучни человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств химических веществ в объектах окружающей среды, атмосферном воздухе, воздухе рабочей зоны и сельскохозяйственной продукции

Сборник методических указаний МУК 4.1.1960,4.1.1961,4.1.1963—4.1.1980—05

ББК 51.21 060

060 Определение остаточных количеств химических веществ в объектах окружающей среды, атмосферном воздухе, воздухе рабочей зоны и сельскохозяйственной продукции: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2007.—196 с.

1.    Разработаны Московской сельскохозяйственной академией им. К.

А. Тимирязева. Учебно-научным консультационным центром «Токсикология пестицидов и агрохимикатов» (Калинин В. А.. Калинина Т. С., Рыбакова О. И.. Калинин А. В.).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по санигарно гигиеническому нормированию Минздрава России (протокол № I от 31 Mapia 2005 г.).

3.    Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г. Г. Онищенко 21 апреля 2005 г.

4.    Введены в действие с 1 июля 2005 г.

5.    Введены впервые.

Ы>К 51.21

<    Роспотребнадзор, 2007

<    Федеральный центр ттппены и мшдемносют пн Роспотребнадзора, 2007

МУК 4.1.1965—05

ный водно-ацетоновый экстракт упаривают на роторном испарителе до объема 150—180 мл и переносят в делительную воронку. Флутриафол переэкстрагируют в хлористый метилен трижды порциями по 50 мл. встряхивая делительную воронку в течение 2 мин. Нижние органические слои собирают, фильтруя через безводный сульфат натрия. Объединенный экстракт выпаривают досуха на роторном испарителе. Далее проводят очистку на колонке с флорисилом по п. 2.6.2.

2.6.1.3. Сок винограда. 50 мл сока помещают в делительную воронку объемом 500 мл, добавляют 50 мл смеси гексан : ацетон в соотношении 1 : 9 и встряхивают в течение 2—3 мин. Гексановый слой отбрасывают. К собранному водно-ацето но во му слою добавляют 5 мл гексана и интенсивно встряхивают в делительной воронке. После полного разделения фаз собирают водно-ацетоновый слой, гексановый слой отбрасывают. Объединенный экстракт переносят в чистую делительную воронку, добавляют 25—30 мл дистиллированной воды и персэкстрагн-руют флутриафол в хлористый метилен трижды порциями по 50 мл. Дихлормстановый экстракт фильтруют через безводный сульфат натрия и выпаривают досуха на роторном испарителе. Далее проводят очистку на колонке с флорисилом по п. 2.6.2.

2.6.2. Очистка экстрактов на колонке с флорисилом

Сухой остаток растворяют в 2 мл смеси гексан : ацетон (3 : 2). Пипеткой количественно вносят анализируемую пробу в хроматографическую колонку. Колбу ополаскивают еще 2 мл той же смеси и раствор вносят в хроматографическую колонку, затем открывают кран и дают раствору впитаться в сорбент. После этого в колонку вносят 10 мл смеси гексан : ацетон в соотношении 2:3, элюат отбрасывают. Флутриафол элюируют 10 мл смеси гексан : ацетон в соотношении 1 : 5. элюат собирают и выпаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона и хроматографируют.

2.6.3. Условия хроматографирования

Газовый хроматограф «Кристалл 2000М» с ДЭЗ или аналогичный. Колонка кварцевая капиллярная 30 м х 0.32 мм с неподвижной фазой НР-1 (0.25 мкм).

Температура колонки программируется от 200 °С (4 мин) до 220 °С со скоростью 10 °С/мин.

Температура испарителя 250 °С. детектора 280 °С.

Скорость газа-носителя (азот) через колонку 3 cmV.mhh.

45

МУК 4.1.1965—05

Объем вводимой пробы 2 мкл. Время удерживания флутриафола 10 мин 29 ± 2 с.

2.6.6. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. содержание флутриафола в пробе (X. мг/кг) вычисляют по формуле:

Я₂-СУУ,

H,/>v₂

Я/ - высота (площадь) пика флутриафола в стандартном растворе, мм (мве);

Я? - высота (площадь) пика флутриафола в анализируемой пробе, мм (мв е):

V- объем экстракта подготовленного для хроматографирования, мл;

Р - навеска анализируемого образца, г;

С - концентрация флутриафола в стандартном растворе, мкг/мл;

Vj и У₂- дозируемые в хроматограф объемы стандартного и анализируемого растворов, мкл. Концентрацию флутриафола в анализируемом образце вычисляют как среднее из 2 параллельных определений.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор флутриафола 50 мкг/мл. разбавляют.

3. Требования техники безопасности

При проведении работы необходимо соблюдать требования инструкции «Основные правила безопасной работы в химической лаборатории». общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, а также инструкции по эксплуатации газового хроматографа и электрооборудования до 400 В.

4. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости результатов измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335—2003. «ГСИ. Вну тренний контроль качества результатов количественного химического анализа».

5. Разработчики

Долженко В. И.. Цибульская И. А.. Карпова Л. М.

Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений. г. Санкт-Петербург.

МУК 4.1.1960—1.1.1961. 4.1.63—4.1.1980—05

Содержание

Измерение конценграций Пропетамфоса методом газожидкостной

хроматографии в воздухе рабочей зоны: МУК 4.1.1960—05 .............................5

Определение остаточных количеств дифеноконазола в воде методом

высокозффегстивной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1961—05...........11

Определение остаточных ко.гичеств лямбда-Цит алотргша

в корнеплодах моркови и луке-репке методом газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.1963-^)5....................................................................20

Определите остаточных количеств 3-гидроксикарбофурана (основног о метабо.тита карбофурана) в корггегподах и зелёной массе сахарной свёгсгы, в семенах и масле рапса (г орчицы) методом г азожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.1964—05....................................................................29

Определение остаточных количеств флутриафола в гигодах яблони, яг одах и соке винограда методом г азожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.1965—05................................................................................................39

Определение остаточных ко.гичеств ггротиоконазола по его основному мегабо.титу иротиокоггазол-дестио в зерне и соломе зерновых колосовых к\льт\р методом гозожи;гкостной хроматографии:

МУК 4.1.1966—05................................................................................................47

Определегше остаточггых количеств крезоксим-мстила в огурцах, томатах, ягодах и соке виног рада методом г азожи;гкостной

хроматографии: МУК 4.1.1967—05....................................................................57

Определение остаточггых количеств имазетаиира в гзоде, почве, семенах и масле сои методом газожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.1968—05................................................................................................67

Оггределеггие остаточггых количеств ацетохлора в ботве, корнегподах сахарной свеклы и корнеплодах моркови методом газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.1969—05....................................................................77

Оггределеггие остаточггых количеств фиггронила и его мегаболитов (МВ 46513, МВ 45950, МВ 46136) в зеленой массе пастбищных трав методом капиллярной г азожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.1970—05................................................................................................84

Оггределеггие остаточггых количеств хлорпрофама в картофельных

чипсах методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1971—05...........93

Определение ос таточных количеств метрибузина в воде, почве, томатах и картофеле методом г азожидаоспгой хроматографии:

МУК 4.1.1972—05..............................................................................................103

Определение остаточных количеств зиоксиконазола в бо тве и корнегподах сахарной свегсгы методом газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.1973—05..................................................................113

Оггределеггие остаточггых количеств иираклоегробина в зерне, соломе, зеленой массе и зерновых колосовых культур методом

высоко->ф(|>е1СШВНой жидаоспгой хроматографии: МУК 4.1.1974—05.........122

3

Определение остаточных количеств метсульфурон-метила в семенах, масле и соломке льна методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии: МУК 4.1.1975—05..................................................................135

Определение остаточных количеств клопиралида в семенах, масле и соломке льна, в семенах и масле рапса методом газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.1976—05..................................................................146

Определение остаточных количеств имидаклоприда в яблоках, кат ете, ботве и корнеплодах свеклы, семенах кукурузы, семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии: МУК 4.1.1977—05..................................................................158

Определение остаточных количеств глифосата в зерне и масле сои, семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной

жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1978—05............................................169

Измерение концентраций про гиокона зола в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.1979—05..............................................................................................181

Определение остаточных количеств про токола зола и его основного метаболита протиоконазола-дестио в воде, протиоконазола и протиоконазола-дестио но метаболиту протиоконазолу-дестио в почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1980—05............................................190

4

МУК 4.1.1965—05

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в с(|юрс защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

21 апреля 2005 г.

Дата введения: с 1 июля 2005 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств флутрнафола в плодах яблони, ягодах и соке винограда методом газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.1965—05

1. Вводная часть

Действующее вещество: флутриафол. Структурная форму ла:

СА: (±) чх-(2-фторфенил)-а-(4-фгорфенил)-1Н-1 Д,4-триазол-1 -этанол. Эмпирическая формула: C16H13F2N3O.

Мол. масса: 301.3.

Твердое белое кристаллическое вещество.

Температу ра плавления: 130°С. Давление паров при 20 °С 7,1 • 10'⁶

шРа.

39

Коэффициент распределения н-октанол/вода: K_cw log Р = 2.3 (20 °С).

Растворимость (20 °С) в воде 130 мг/л. хорошо растворим в ацетоне 190 г/л. дихлорметане 150 г/л. метаноле 69 г/л. слабо растворим в гексане 0,3 г/л.

В почве период полураспада DTs₀ 65—125 дней.

Оральная токсичность (LD₅₀) для крыс 1480 мг/кг.

Гигиенические нормативы для флутриафола: МДУ (мг/кг) виноград - н.д.. яблоки - 0.05*.

Область применения: фунгицид широкого спектра действия для борьбы с болезнями листа и колоса зерновых культур, также применяется для защиты плодовых, зернобобовых и других культур. Используется для борьбы с почвенными, семенными и аэрогенными инфекциями.

2. Методика определения флутриафола в плодах яблони, ягодах и соке винограда методом газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод определения флутриафола в винограде и яблоках основан на экстракции пестицида органическими растворителями, очистке перераспределением между двумя нссмешивающимися растворителями и. при необходимости, на колонке с флорисилом. Количественное определение проводят методом газожидкостной хроматографии с использованием детектора электронного захвата (ДЭЗ).

2.1.2. Избирательность метода

Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования. Присутствие других пестицидов, близких по химическому строению и области применения, определению нс мешает.

2.1.3. Метрологическая характеристика метода

Метрологическая характеристика метода представлена в таблице.

40

Таблица

Метрологическая характеристика метода

Объект анализа Предел обнару жения, мг/кг Диапазон измеряемых концешра-ций, мг/кг Среднее значение определения, % (п=24) Стандартное отклонение S, % Доверительный интер-IULI среднего. п=24, Р=0,95 яблоня, плоды 0,05 0,05—0,5 85,8 5,40 4,95 виноград, ягоды 0,025 0,025—0,5 83,4 5,75 4,15 нинофад. сок 0,025 0,025—0,5 83,0 5,95 4,15

2.2. Реактивы, материалы

Флутриафол, аналитический стандарт Ацетон, осч Ацетон, чда

Вода дистиллированная н-Гексан. хч

Натрий серно-кислый безводный, чда

Натрия хлорид, хч

Стекловата

Серная кислота ОСЧ 11-5

Флорисил 150-250 мкм (Merck. Германия),

Хлористый метилен, чда

2.3. Приборы и посуда Газовый хроматограф Кристалл 2000М или аналогичный с ДЭЗ Колонка кварцевая капиллярная 30 м х 0.32 мм с неподвижной фазой НР-1 (0.25 мкм).

Весы аналитические ВЛА-200 или аналогичные Весы технические ВЛКТ-500 Установка ультразвуковая «Серьга» Ротационный испаритель вакуумный ИР-1М или аналогичный Микрошприц МШ-10. МШ- ЮМ Насос водоструйный

41

МУК 4.1.1965—05

тоне. Из полученного раствора готовят градуировочные растворы с концентрациями 5. 10, 25. 50 мкг/мл методом последовательного разбавления ацетоном.

Для внесения в образец при определении полноты извлечения используют соответствующий стандартный раствор флутриафола в ацетоне.

2.5.4. Построение градуировочного графика

Для построения градуировочного графика зависимости высоты (площади) пика от концентрации флутриафола в растворе в хроматограф вводят по 1 мкл градуировочных растворов (нс менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, нс менее 4 точек по диапазо-ну измеряемых концентраций), измеряют высоты или площади пиков и строят график зависимости среднего значения высоты, мм (площади, мв.с) пика от концентрации флутриафола в градуировочном растворе (мкг/мл).

2.5.5. Подготовка колонки с флорисилом для очистки экстракта

В нижнюю часть колонки помещают тампон из стекловаты, затем слой 0,5 см безводного сульфата натрия и заполняют через воронку суспензией 5 г флорисила в 25 мл гексана при открытом кране колонки. Затем вносят слой 1 см безводного сульфата натрия и подключают выход колонки к водостру йному насосу хм у плотнения слоя сорбента. После этого колонку промывают 15 мл гексана, затем смесью гексан : ацетон в соотношении 2 : 3 и закрывают кран, когда у ровень растворителя достигнет верхнего края сорбента. Колонка готова к работе.

2.5.6. Проверка хроматографического поведения флутриафола на колонке с флористом

В подготовленную колонку пипеткой вносят 1 мл стандартного раствора флутриафола и дают впитаться. После этого вносят 10 мл смеси гексан : ацетон (2 : 3). элюат отбрасывают. Элюирование флутриафола проводят 40 мл смеси гексан : ацетон (1:5 ), отбирая фракции по 5 мл. ударивают досуха, остаток растворяют в 1 мл ацетона и хроматографируют фракции, содержащие флутриафол. объединяют, упаривают досуха, остаток растворяют в 1 мл ацетона и хроматографируют. Рассчитывают содержание флутриафола в элюате. определяют полноту извлечения препарата из колонки и необходимый хзя этого объем элюирующей смеси.

Примечание: профиль вымывания флутриафола может измениться при использовании флорисила другой партии.

43

МУК 4.1.1965—05

2.5.7. Подготовка приборов и средств измерения

Установка и подготовка всех приборов и средств намерения проводится в соответствии с требованиями стандартов и технической документации.

2.6. Проведение определения

2.6.1. Экстракция и очистка экстрактов

2.6.1.1.    Плоды яблони. Навеску измельченных плодов 50 г помещают в коническую колбу объемом 250 мл и экстрагируют флутриафол 150 мл ацетона на ультразвуковой установке в течение 15 мин. Надоса-дочную жидкость фильтруют через складчатый фильтр «красная лента» в делительную воронку объемом 1 ООО мл. Экстракцию повторяют дважды порциями по 100 мл ацетона. После третьей экстракции осадок переносят на фильтр, колбу ополаскивают 20 мл ацетона и вносят в делительную воронку через фильтр с осадком. К объединенному экстракту добавляют 100 мл дистиллированной воды и промывают 20 мл гексана. встряхивая делительную воронку в течение 2-х минут. После полного разделения слоев верхний гексановый слой отбрасывают и промывку повторяют дважды порциями по 20 мл гексана. Промытый гексаном водно-ацетоновый экстракт концентрируют на роторном испарителе до объема 130—150 мл и переносят в делительную вороню, ополаскивая концентратор. Псрсэкстрагируют флутриафол в хлористый метилен трижды порциями по 50 мл. встряхивая воронку в течение 2 мин. Нижний органический слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия, затем промывают осушитель 10 мл хлористого метилена. Объединенный дихлормстановый экстракт упаривают досуха и проводят очистку на колонке с флорисилом по п. 2.6.2.

2.6.1.2.    Ягоды винограда. Навеску размолотых ягод 50 г помещают в коническую колбу объемом 500 мл и экстрагируют флутриафол 150 мл ацетона на ультразвуковой установке в течение 15 мин. Экстракт фильтруют через складчатый фильтр «красная лента» в делительную вороню объемом 1 000 мл. Экстракцию повторяют дважды порциями экстрагента по 150 мл. после чего остаток переносят на фильтр, колбу и осадок промывают 20—30 мл ацетона. К объединенном) экстракту в делительную воронку добавляют 20 мл гексана и встряхивают в течение 2 мин. После полного разделения фаз 90 % нижнего водно-ацетонового слоя отделяют. После этого эмульсию пограничного слоя разбивают внесением в него малого количества хлористого натрия. Остатки водноацетонового слоя собирают, гексановый слой отбрасывают. Объединен-