Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование Российской Федерации

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств касугамицина в воде, почве, зеленой массе, соломе и зерне риса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3291-15

Издание официальное

Москва *2015

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств касугамицина в воде, почве, зеленой массе, соломе и зерне риса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3291-15

ББК 51.23 062

062 Определение остаточных количеств касугамицина в воде, почве, зеленой массе, соломе и зерне риса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания,—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015.—18 с.

ISBN 978-5-7508-1411-4

1.    Разработаны сотрудниками ФГБНУ «Всероссийского НИИ зашиты растений» (И А. Цибульская, Т Д.Черменская, АС.Комарова, В.В.Чело-вечкова).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 22 мая 2015 г. № 1).

3.    Утверждены руководителем Федеральной службы но надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. К). Поповой 28 июля 2015 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.23

© Роспотребнадзор, 2015 © Федеральный центр гигиены

и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015

МУК 4.1.3291-15

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А. Ю. Попова

28 июля 2015 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств касугамицина в воде, почве, зеленой массе, соломе и зерне риса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3291-15

Свидетельство о метрологической аттестации № 01.5.04.194/01.00043/2015 Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения остаточных количеств касугамицина в диапазоне концентраций в воде 0,001—0,01 мг/дм, в почве — 0,05—0,5 мг/кг, в зеленой массе и соломе — 1,0—10,0 мг/кг, в зерне риса 0,1—1,0 мг/кг.

Методические указания носят рекомендательный характер. Касугамиции. ¹

[5-амино-2-мстил-6-(2,3,4,5,6-пентагидроксициклогексил-окси)тетрагидропиран-3-ил]амино-а-иминоуксусная кислота (ШРАС).

с₁₄н_йм,о,.

Молекулярная масса 379,4.

Химически чистое вещество представляет собой бесцветное кристаллическое вещество.

Температура плавления: 202—204 ^вС.

Давление пара при 25 *С: < 1,3 х 10"¹ мПа.

Растворимость (в г/дм¹ при 25 *С): вода - 228; метанол — 0,003; в ацетоне и ксилоле < 0,001.

Стабилен при комнатной температуре. Стабилен в слабых кислотах и нестабилен в сильных кислотах и щелочах. DT_W (50 ^вС) 47 дней (pH 5), 14 дней (pH 9).

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность LD* для крыс более 5 000 мг/кг, острая дермальная токсичность LD^ для кроликов превышает 2 000 мг/кг. Нс оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку глаз кролика, не обладает мутагенными и тератогенными свойствами, не влияет на репродукцию крыс.

Область применения препарата

Системный фунгицид и бактерицид, получаемый ферментацией Streptomyces kasugaensis. Используется для контроля грибных и бактериальных заболеваний на рисе, овощных и плодовых культурах.

Не фитотоксичен для риса, томатов, сахарной свеклы, картофеля и др.

В России для касугамицина гигиенические нормативы нс установлены.

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций. ²

МУК 4.1.3291-15

Метрологические параметры Таблица 1

Анали зируемый объект 3 . е S о g X р. Ill 5*3 Показатель точности’’ Ораницы относительной погрешности). ±5. % (Р = 0.95) г О is 1 III ill jj 8 8 §i§ iii Ilf Ilf ill G S 1 0 Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), Г, % Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях) R, %, (Р *= 0,95) Вода 0,001- 0,01 23 8 12 22 34 Почва 0,05-0,5 23 X 12 22 34 Зерно 0,1-1,0 22 7 11 20 31 Солома 1,0-10,0 22 7 11 20 31 Зеленая масса © с? т о 22 7 II 20 31

** соответствует расширенной неопределенности U,„ при коэффициенте охвата к ■ 2.

Полнота извлечепия, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата

5

МУК 4.1.3291-15

2. Метод измерений

Методика основана на определении касугамицина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием УФ-детсктора после его извлечения из образцов подкисленным метанолом, для почвы - раствором щелочи и последующей очистки на патроне для твердофазной экстракции.

Идентификация касугамицина проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.

Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства измерений

Жидкостный хроматограф с быстрос-канирующим ультрафиолетовым детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки

Весы аналитические с пределом взвешивания до 210 г и пределом допускаемой погрешности 0,1 мг

Весы технические с пределом взвешивания до 150 г и пределом допускаемой погрешности 0,1 г

Колбы мерные на 10, 100 см³

Микродозаторы одноканальные переменного объема от 100 до 1 000 мм³ и от 1 до 5 см³

Цилиндры мерные на 50 и 100 см³

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками. ³

МУК 4.1.3291-15

3.2. Реактивы

Ацетонитрил для ВЭЖХ    ТУ 2634-002-

54260861-2013

Вода для лабораторного анализа (бидистиллированная, деионизованная)    ГОСТ Р 52501 —05

Метанол, хч    ГОСТ 6995-77

Касугаминин, аналитический стандарт с содержанием д.в. 90,0 %

Кислота ортофосфорная, хч    ГОСТ    6552—80

Кислота соляная, хч    ГОСТ 3118-77

Натрия гидроокись, хч    ГОСТ    4328—77

Подвижная фаза: 0,001 %-й раствор соляной кислоты в метаноле

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квали фикацией, нс требующих дополнительной очистки растворителей.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы

Аналитическая колонка, заполненная сорбентом для очень полярных и водорастворимых соединений, работающая в режиме гидрофильной жидкостной хроматографии, (50 х 2,1) мм, 1,7 мкм

Вакуумный манипулятор для работы с патронами для твердофазной экстракции

Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 25, 100, 250 см³    ГОСТ    9737—93

Патроны № 1 для твердофазной экстракции, заполненные октадецильной фазой для полярных аналитов, по 0,5 г

Патроны № 2 для твердофазной экстракции, заполненные сильным катио-нообменником, по 0,4 г    ТУ 4215-002-

-0545-931-94 ⁴

Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, с пределом вакуума до 10 мбар

Центрифуга с максимальной рабочей частотой вращения 4 ООО об./мин

Устройство перемешивающее

(50—200 колебаний в мин)    ТУ4389-007-

-44330709-2011

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2.    Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и ГН 2.2.5.2308-07.

Организация обучения работников безопасности труда — по ГОСТ 12.0.004-90.

5. Требования к квалификации операторов

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п.13. ⁵

МУК 4.1.3291-15

6. Условия измерений

При выполнении измерений выполняют следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) *С и относительной влажности не более 80 %;

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к определению 7. /. Кондиционирование колонки

Перед началом анализа аналитическую колонку кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1—0,2 см³/мин) до стабилизации нулевой линии.

7.2. Подготовка патронов для очистки экстрактов

Патрон № 1 или № 2 для твердофазной экстракции промывают последовательно 3 см³ метанола и 3 см³ воды, после чего они готовы к работе.

7.3. Приготовление растворов

7.3.1.    0,005 Мраствор ортофосфорной кислоты: (0,5 ± 0,01) г 98 %-й ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм’, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.

7.3.2.    Для приготовления 0,005Мгидроксида натрия в мерную колбу объемом 1 дм³ помещают 0,2 г натрия гидроокиси и доводят объем бидистиллированной водой до метки.

7.3.3.    Для приготовления 0,01 %-гораствора соляной кислоты в метаноле в мерную колбу объемом 1 дм³ помещают 0,1 см³ концентрированной соляной кислоты и доводят объем метанолом до метки.

7.3.4.    Для приготовления 0,001 %-го раствора соляной кислоты в метаноле в мерную колбу объемом 100 см^гпомещают 10 см³ 0,01 %-го раствора соляной кислоты в метаноле и доводят объем метанолом до метки.

1

2

3

4

5