МУК 4.1.3204-14
Определение остаточных количеств Азоксистробина (ICIA 5504) и его геометрического изомера (R 230310) в семенах и масле рапса и подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания. Методические указания

Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств Азоксистробина (ICIA 5504) и его геометрического изомера (R 230310) в семенах и масле рапса и подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3204—14

Издание официальное

Москва • 2015

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств азоксистробина (ICIA 5504) и его геометрического изомера (R 230310) в семенах и масле рапса и подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3204—14

ББК 51.23 0-62

0-62 Определение остаточных количеств азоксистробина (ICIA 5504) и его геометрического изомера (R 230310) в семенах и масле рапса и подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015.—28 с.

ISBN 978—5—7508—1406—0

1.    Разработаны Российским государственным аграрным университетом -МСХА им. К. А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России (В. А. Калинин,

Е. В. Довгилевич, А. В. Довгилевич, Е. Н. Тестова).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 26 июня 2014 г. №1).

3.    Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой 30 июля 2014 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.23

Ответственный за выпуск Н. В. Митрохина Редактор Н. В. Кожока Технический редактор Е. В. Ломанова Подписано в печать 17.07.15 Формат 60x84/16    Уел.    печ.    л.    1,63

Т ираж 150 экз.    Заказ 51

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, ВадковскиЙ пер., я 18, стр. 5,7

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован отделением издательского обеспечения отдела научно-методического обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение издательского обеспечения, тел./фахс: 8 (495) 952-50-89

О Роспотребнадзор, 2015 С Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015

МУК 4.1.3204—14

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А. Ю. Попова

30 июля 2014 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств азоксистробина (ICIA 5504) и его геометрического изомера (R 230310) в семенах и масле рапса и подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания _МУК    4.1.3204—14_

Свидетельство о метрологической аттестации от 27.05.2013 № 01.00282-2008/0166.27.05.13.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств азоксистробина (ICIA 5504) и его геометрического изомера (R 230310) в семенах и масле рапса и подсолнечника в диапазоне 0,25—2,5 мг/кг. Методические указания носят рекомендательный характер.

Название действующего вещества ICIA 5504 по ИЮПАК: ме-тил(£)-2-{2-[6-(2-цианофенокси)пиримидин-4-илокси]фенил}-3-метокси-акрилат.

Структурная формула ICIA 5504: ¹

Молекулярная масса: 403,4.

Эмпирическая формула: C₂2H_I7N₃05.

Агрегатное состояние: кристаллический порошок.

Цвет, запах: бесцветный, без запаха.

Давление паров: 1,1 х КГ⁷ мПа (при 20 °С).

Коэффициент распределения октанол-вода: К^ logP = 2,5 (при 20 °С).

Плотность: 1,34 г/см¹ (при 20 °С).

Температура плавления: 116 °С.

Растворимость в воде мг/дм¹ (25 °С): при pH 5,2 - 6,2; pH 7,0 - 6,7; pH 9,2-5,9.

Растворимость в органических растворителях (г/дм¹, 20 °С): ацетон - 86; ацетонитрил - 340; гексан - 0,057; дихлорметан - 400; метанол -20; толуол - 55; этилацетат - 130; н-октанол - 1,40.

Азоксистробин стабилен в водных растворах при pH 5—7 при комнатной температуре, в том числе при концентрациях менее 1 мкг/кг.

В почве период полураспада 8 недель (лабораторные условия), 2 недели (полевые условия). Основным путем разложения вещества на поверхности почвы является фотолиз (период полураспада 11 дней) с образованием геометрического Z-изомера.

Краткая токсикологическая характеристика. Азоксистробин относится к веществам мало опасным по острой пероральной (ЛДэд для крыс более 5 000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД50 для крыс более 2 000 мг/кг), но к опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК₅о для крыс (4 ч) от 698 до 962 мг/м¹). Не обладает генотоксическим, канцерогенным и нейротоксическим действием.

Область применения. Азоксистробин - фунгицид защитного, кура-тивного и искореняющего действия с трансламинарными и системными свойствами. Подавляет прорастание спор и рост мицелия, обладает ан-тиспорулянтной активностью. В дозах 100—375 г/га применяется против мучнистой росы, ржавчины, чешуйчатой пятнистости, пятнистости листьев зерновых, против ржавчины и корневых гнилей на рисе, против милдью виноградной лозы, против ржавчины и корневых гнилей на томате и картофеле, против настоящей и ложной мучнистой росы тыквенных, против корневых гнилей арахиса, цитрусовых, газонных трав. Препарат эффективен против штаммов патогенных грибов, устойчивых к ингибиторам С¹⁴-деметилазы, фенил амидам, дикарбоксимидам и бензимидазолам.

4

МУК 4.1.3204—14

Применяется в России в качестве фунгицида на томатах, огурцах в дозе 0,4—0,5 дм³/га, на винограде в дозе 0,6—0,8 дм³/га и на зерновых в дозе 0,5—1,0 дм³/га. Проходит регистрационные испытания в России на посадках картофеля в качестве фунгицида с нормой расхода 3,0 дм³/га.

В России установлены следующие гигиенические нормативы:

ДСД - 0,03 мг/кг массы человека;

ПДК в воде водоемов 0,01 мг/дм³;

МДУ в продукции (мг/кг): томаты и огурцы - 3,0; виноград - 2,0; клубни картофеля - 0,05; зерно хлебных злаков: ячмень, овес - 0,5; пшеница, рожь, тритикале - 0,3.

МДУ в импортируемой продукции (мг/кг): семена рапса и подсолнечника - 0,5.

R 230310 - Z-геометрический изомер азоксистробина.

Название действующего вещества R-230310 по ИЮ ПАК: (Z)-2-{2-[6-(2-цианофенокси)пиримидин-4-илокси]фенил}-3-метоксиакрилат.

Структурная формула:

О ОСН₃

R 230310 представляет собой кристаллический порошок желтого цвета.

Физико-химические свойства близки к физико-химическим свойствам азоксистробина.

1. Погрешность измерения

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (п - 20) приведены в табл. 2.

5

Метрологические параметры для азоксистробина (IC1A 5504) и его геометрического изомера (R 230310)

Таблица 1

Анализируемый объект Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Показатель точности (граница относительной погрешности) ± 3, % Р = 0,95 Стандартное отклонение повторяемости. Предел повто ряемос ти, г,% Предел воспроиз водимос ти, /?,% Азоксистробин (ICIA 5504) Семена рапса 0,25—2,5 вкл. 25 1,59 4,42 6,19 Масло рапса 0,25—2,5 вкл. 25 1,45 4,03 5,64 Семена подсолнечника 0,25—2,5 вкл. 25 1,89 5,25 7,36 Масло подсолнечника 0,25—2,5 вкл. 25 1,78 4,95 6,93 Геометрический изомер азоксистробина (R 230310) Семена рапса 0,25—2,5 вкл. 25 1,77 4,92 6,89 Масло рапса 0,25—2,5 вкл. 25 1,36 3,78 5,29 Семена подсолнечника 0,25—2,5 вкл. 25 2,21 6,14 8,60 Масло подсолнечника 0,25—2,5 вкл. 25 1,85 5,14 7,20

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для азоксистробина (1CIA 5504) и его геометрического изомера (R 230310)

Таблица 2

Анализируемый объект Метрологические параметры, Р = 0,95, л в 20 Предел обнару жения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Полнота извлечения вещества, % Стандартное отклонение, S, % Доверительный интервал среднего результата, ±, % 1 2 3 4 5 6 Азоксистробин (ICLA 5504) Семена рапса 0,25 0,25—2,5 88,50 1,90 0,89 Масло рапса 0,25 0,25—2,5 86,53 2,67 1,25 Семена подсолнечника 0,25 0,25—2,5 80,84 3,92 1,83

Продолжение табл. 2

1 2 3 4 5 6 Масло подсолнечника 0,25 0,25—2,5 86,76 3,00 1.41 Геометрический изомер азоксистробина (R 230310 Семена рапса 0,25 0,25-2,5 89,61 2,98 1,39 Масло рапса 0,25 0,25—2,5 87,45 3,86 1,81 Семена подсолнечника 0,25 0,25—2,5 81,97 5,63 2,64 Масло подсолнечника 0,25 0,25—2,5 78,78 2,72 1,27

2. Метод измерений

Метод основан на определении азоксистробина (ICIA 5504) и его геометрического изомера (R 230310) с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта на концентрирующих патронах № 1 и колонках с флоризилом.

Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

5./. Средства измерений Весы аналитические класса точности -специальный (I), с наибольшим пределом

взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г ГОСТ Р 53228-08

Весы лабораторные общего назначения класса

точности - средний (III) с наибольшим пределом

взвешивания до 600 г и пределом допустимой

погрешности ± 0,038 г    ГОСТ Р 53228-08

Колбы мерные на 10,25, 50,100, 500 и 1 000 см³ ГОСТ 1770-74

7

Микрошприц объемом 100 мм³ со шкалой деления 0,001 см³ и погрешностью менее 1 % от номинального объема

Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см³    ГОСТ 29227-91

рН-метр/милливольтметр с диапазоном измерения 0...14 рН;± 1 999 мВ Хроматографическая система, включающая:

-    хроматограф жидкостной, снабженный термостатом для колонок с диапазоном температур от 15 до 80 °С, с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу;

-    компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ

Цилиндры мерные на 10,25 и 50 см³    ГОСТ    1770—74

Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы Азоксистробин, CAS 131860-33-8, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,7 %

R 230310, CAS 23783-98-4, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 96,0 %

Ацетон, осч

Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм Вода бидистиллированная (бидистиллят), деионизированная или перегнанная Гелий, очищенный n-Г ексан, хч

МУК 4.1.3204—14

Калий марганцово-кислый, чда Кальций хлористый, ч Кислота соляная, хч

Концентрирующие патроны для твердофазной экстракции с гидрофобным сорбентом с размером частиц 63—200 мкм с привитыми октальными (С8) группами (объем - 1 см³, масса сорбента - 0,6 г) (патрон № 1)

Метилен хлористый, хч Натрий серно-кислый, безводный, хч Натрий углекислый, кислый, хч Натрий хлористый, хч

Флоризил (магния силикат, 99 %, С AS 1343-88-0) для колоночной хроматографии, зернение 60/100 меш.

Этилацетат, чда

Примечание. Допускается использование реактивов с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы Алонж прямой с отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами    ГОСТ 25336-82

Банки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см³ Ванна ультразвуковая с потребляемой мощностью 140 Вт, рабочей частотой 50 Гц, рабочим объемом 4,5 дм³

Вата медицинская гигроскопическая

хлопковая нестерильная    ГОСТ 5556-81

Воронки делительные на 250 см³    ГОСТ 25336-82

Воронки лабораторные, стеклянные    ГОСТ 25336-82

Испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3 000 см³, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об./мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием

9

1