Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской Федерации_
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение массовой концентрации акрилонитрила в крови методом капиллярной газовой хроматографии
Методические указания МУК 4.1.3159—14
Издание официальное
Москва • 2014
Федеральная служба но надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение массовой концентрации акрилонитрила в крови методом капиллярной газовой хроматографии
Методические указания МУК 4.1.3159—14
ББК 51.20 И37
И37 Измерение массовой концентрации акрилонитрила в крови методом капиллярной газовой хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2014.—16 с.
ISBN 978—5—7508—1348—3
1. Разработаны ФБУН «ФНЦ медико-профилактических технологий управления рисками здоровью населения» (Т. С. Уланова, Н. В. Зайцева,
Т. В. Нурисламова, Н. Л. Попова, У. С. Бакулина, Г. И. Терентьев); ГБОУ ДПО «Российская медицинская академия последипломного образования» Минздрава России (М. С. Орлов).
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по 1Ч>сударственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 26 декабря 2013 г. № 4).
3. Утверждены врио руководителя Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главного государственного санитарного врача Российской Федерации А. Ю. Поповой 24 февраля 2014 г.
4. Введены впервые.
ББК 51.20
Редактор Н. В. Кожока Технический редактор Е. В. Ломанова
Подписано в печать 01.12.14 Формат 60x84/16 Уел. печ. л. 0,93
Т ираж 200 экз. Заказ 82
Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., л 18, стр. 5, 7
Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены н эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а
Отделение реазизации, тсл./факс 8(495)952-50-89
€> Роспотребнадзор, 2014 <0 Федеральный центр гигиены и
эпидемиологии Роспотребнадзора, 2014
МУК 4.1.3159—14
УТВЕРЖДАЮ Врио руководителя Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главного государственного санитарного врача Российской Федерации
А. Ю. Попова
24 февраля 2014 г.
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение массовой концентрации акрилонитрила в крови методом капиллярной газовой хроматографии
Методические указания МУК 4.13159—14
МУК 4.1.3159—14
Акрилонитрил вызывает снижение артериального давления, атрофические риниты, анемию, лейкопению с наклонностью к лимфоцитозу
107-13-14
ch2=chcn
41,05
-83,5dkl
77.3 0,8064
7.3
11.3 2
и моноцитозу.
Регистрационный номер CAS Формула
Молекулярная масса
т °г
* 1ШЛ) v"
т °г
1 ккш v-'
Плотность, г/см3 Растворимость при Т = 20 °С, %
Давление насыщенных паров при Т = 20 °С, кПа Класс опасности
3. Метрологические характеристики методики выполнеиия измерений
При соблюдении всех регламентированных условий и проведения анализа в точном соответствии с данной методикой значения погрешности (и ее составляющих) результатов измерений не превышают значений, приведенных в табл. 1.
Таблица 1
Диапазон измерений, значения точности (правильности и прецизионности) методики |
Объ
ект
изме
рения |
Диапазон
измерений
массовой
концент
рации
акрило
нитрила,
мг/дм3 |
Показатель точности (границы относительной погрешности при вероятности Р * 0,95),
± б, % |
Показатель повторяемости (относительное срсд-неквадрати-ческое отклонение повторяемости), стП% |
Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), ал, % |
Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в одной лаборатории),
/*, % |
Кровь |
От 0,007 до 0,07 вкл. |
40 |
13 |
20 |
36 |
Св. 0,07 до 1 вкл. |
20 |
5 |
10 |
14 |
|
Значения показателя точности используют: |
МУК 4.1.3159—14
• при оформлении результатов измерений, выдаваемых лабораторией;
• при оценке деятельности лабораторий на качество проведения измерений;
• при оценке возможности использования результатов измерений при реализации методики измерений в конкретной лаборатории.
4. Метод измерения
Выполнение измерений массовой концентрации акрилонитрила в пробе крови проводят методом капиллярной газовой хроматографии с термоионным детектором. Извлечение и концентрирование акрилонитрила из проб крови проводят методом анализа равновесной паровой фазы путем нагревания объекта.
Определению не мешают углеводороды, спирты. Длительность измерений - 10 мин.
5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы
5./. Средства измерений Хроматограф газовый с термоионным детектором и капиллярной колонкой Термометр жидкостный стеклянный Секундомер
Микрошприцы серии МШ-10, диапазон дозируемого объема, мкл 1—10 с ценой деления 0,2 мкл, погрешность 1 %
Шприц газовый вместимостью 2 см3 Весы лабораторные равноплечные второго класса точности; наибольший предел взвешивания 200 г, диапазон взвешивания по шкале мг от 0 до 100 мг, цена деления делительного устройства - 0,05 мг, погрешность взвешивания по шкале мг ± 0,15 мг Меры массы
Колбы мерные вместимостью 2-100-2,
2-1 000-2 см3
Пипетки градуированные 1 -го класса точности вместимостью 1-2-1-1, 1-2-1-2, 1-2-2-5 см3 ГОСТ 29227-91 1
Дозаторы жидкости механические с погрешностью ± 0,1мм3 объемом дозирования 1—
5 см3, 100—1 ООО мм3,20—200 мм3 с одноразовыми наконечниками ГОСТ 28311—89
Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
5.2. Реактивы Вода для лабораторного анализа (бидистилли-рованная)
Спирт этиловый ректифицированный Калий двухромовокислый (бихромат калия), чда Серная кислота концентрированная, осч Акрилонитрил, хч, для хроматографии, содержание основного вещества не менее 99,9 %
Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией.
5.3. Вспомогательные устройства и материалы
Колонка хроматографическая капиллярная из кварцевого стекла с внутренним диаметром 0,32 мм длиной 30 м и толщиной пленки 1,8 мкм
Редуктор кислородный
Сушильный шкаф, обеспечивающий нагрев до 150 °С с погрешностью ± 5 °С Азот газообразный Водород технический Бумага фильтровальная лабораторная Пробирки вакуумные для забора крови с напылением гепарина вместимостью 6 см3 Пробирки из полипропилена конические градуированные на 15 см3, ТС 15А
Примечание. Допускается использование других вспомогательных устройств и материалов аналогичного назначения, технические характеристики которых не уступают указанным. 2
МУК 4.1.3159—14
6. Требования безопасности и охраны окружающей среды
6.1. При выполнении работ необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76.
6.2. Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточновытяжной вентиляцией и соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83.
6.3. При выполнении измерений с использованием газового хроматографа соблюдают правила электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-2009 и инструкцией по эксплуатации прибора.
6.4. При работе с сосудами, работающими под давлением, необходимо соблюдать правила их устройства и безопасной эксплуатации в соответствии с ПБ 03-576-03.
6.5. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать допустимых значений по ГОСТ 12.1.005-88, ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и 2.2.5.2308—07.
6.6. Организуют обучение работающих безопасности труда по ГОСТ 12.0.004-90.
6.7. При работе с биологическими средами соблюдают санитарно-эпидемиологические правила СП 1.3.2322—08.
7. Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие квалификацию не ниже инженера-химика и опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения работ на газовом хроматографе.
8. Условия измерений
При выполнении измерений в лаборатории соблюдают следующие условия:
• температура окружающего воздуха (20 ± 5) °С;
• атмосферное давление от 84,0 до 106,7 кПа (630—800 мм рт. ст.);
• относительная влажность воздуха от 30 до 80 %;
• напряжение в сети (220 ± 10) В;
• частота переменного тока (50 ± 10) Гц.
Выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору. 3
9. Подготовка к выполнению измерений
При подготовке к выполнению измерений проводят следующие работы:
• подготовка стеклянной посуды;
• подготовка хроматографической системы;
• приготовление градуировочных растворов;
• построение градуировочной характеристики;
• отбор проб.
9.1. Подготовка стеклянной посуды В термостойкий стакан вместимостью 2 дм3 помещают 50 г бихромата калия, осторожно приливают по палочке частями, тщательно перемешивая, 1 дм3 концентрированной серной кислоты. Срок хранения 1 год.
Используемую посуду необходимо замочить в свежеприготовленном 3 %-м растворе бихромата калия в серной кислоте, промыть проточной водопроводной водой, ополоснуть дистиллированной водой и высушить в сушильном шкафу при температуре 105 °С.
9.2. Подготовка хроматографической системы Подготовку хроматографа к работе осуществляют в соответствии с инструкцией по эксплуатации хроматографа.
9.2.1. Подготовка хроматографической колонки Хроматографическую колонку перед эксплуатацией устанавливают в хроматограф и, не подключая к детектору, кондиционируют в токе газа-носителя (азота) с расходом 4 см3/мин при температуре 240 °С в течение 2 ч. После охлаждения колонку подключают к детектору и проверяют стабильность нулевой линии при рабочей температуре термостата колонок. При отсутствии мешающих влияний колонка готова к работе.
9.2.2. Условия хроматографирования Устанавливают режим работы газового хроматографа в соответствии со следующими условиями:
температурный режим термостата колонки: 50 °С с выдержкой 1 мин, подъём со скоростью 5 °С/мин до 80 °С, подъём со скоростью 25 °С/мин до 200 °С;
поддув азота 20 см3/мин;
МУК 4.1.3159—14
режим испарителя: температура 200 °С; деление потока 1 : 14,3; режим детектора: температура 320 °С; поддув азота 60 см3/мин; режим расхода газа-носителя (азота): постоянный поток -1,4 см3/мин; время удерживания акрилонитрила: (6,17 ± 0,17) мин.
Записывают нулевую линию при установленных режимных параметрах. При отсутствии флуктуации приступают к работе.
9.3. Приготовление растворов для градуировки
9.3.1. Приготовление исходного раствора акрилонитрила (35,5 мг/дм3). В мерную колбу вместимостью 50 см3 вносят 25 см3 биди-стиллированной воды, микрошприцем вводят 2,2 мм3 (эквивалентно 1,773 мг) акрилонитрила, перемешивают, доводят до метки бидистилли-рованной водой и снова тщательно перемешивают. Массовую концентрацию акрилонитрила в основном растворе рассчитывают по формуле:
Сусл - концентрация акрилонитрила в исходном растворе, мг/дм3;
тт - масса акрилонитрила, мг;
Р - содержание основного вещества (1,001);
Уш - объём мерной колбы, см3.
Концентрация исходного раствора акрилонитрила составляет 35,5 мг/дм3. Срок хранения исходного раствора акрилонитрила - 12 ч.
9.3.2. Приготовление 1 %~го раствора серной кислоты. В термостойкий химический стакан помещают 99 см3 бидистиллированной воды, при непрерывном помешивании приливают 1 см3 концентрированной серной кислоты. Раствор охлаждают. Срок хранения неограничен.
9.3.3. Приготовление градуировочных растворов. Перед приготовлением градуировочных растворов необходимо удостовериться, что применяемая кровь не содержит акрилонитрил.
Серию образцов для градуировки, состоящую из 5 аттестованных смесей, готовят в мерных пробирках вместимостью 5 см3. Для этого в каждую мерную пробирку микрошприцем вводят исходный раствор акрилонитрила в соответствии с табл. 2 и доводят до метки 5 см3 крови, не содержащей определяемый компонент. Кровь подкисляют 1 см5 1 %-го раствора серной кислоты Срок хранения градуировочных растворов -12 ч. 4
1
2
3
4