МУК 4.1.3095-13
Определение остаточных количеств пикоксистробина в зеленой массе, зерне и масле кукурузы, в семенах и масле подсолнечника, рапса и сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пикоксистробина в зеленой массе, зерне и масле кукурузы, в семенах и масле подсолнечника, рапса и сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.13095—13

Издание официальное

Москва • 2013

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пикоксистробина в зеленой массе, зерне и масле кукурузы, в семенах и масле подсолнечника, рапса и сон методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3095—13

ББК 51.23 060

060 Определение остаточных количеств пикоксистробина в зеленой массе, зерне и масле кукурузы, в семенах и масле подсолнечника, рапса и сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2013.— 24 с.

ISBN 978—5—7508—1232—5

1.    Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К. А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России (В. А. Калинин, Е. В. Довгилевич, А. В. Довгилевич, Е. Н. Щсрбинкнна).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 30 мая 2013 г. № 1).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г. Г. Онищенко 31 июля 2013 г.

4.    Введены впервые.

ББК S1.23

Редактор Н, В. Кожока Технический редактор Е. В. Ломанова

Подписано в печать 11.10.13 Формат 60x88/16    Печ. л. 1,5

Т ираж 200 экз.    Заказ 62

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, В алко вс кий пер., д. 18, стр. 5,7

Оригинал-макет подготовлен к печпи и тиражирован отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, телефакс (495)952-50-89

О Роспотребнадзор, 2013 О Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2013

МУК 4.1.3095—13

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

31 июля 2013 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пикоксистробина в зеленой массе, зерне и масле кукурузы, в семенах и масле подсолнечника, рапса и сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3095—13

Свидетельство о метрологической аттестации от 4 октября 2012 г. № 01.00282—2008/0134.04.10.12.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств в зеленой массе кукурузы в диапазоне 0,05—0,5 мг/кг, в зерне и масле кукурузы, а также в семенах и масле подсолнечника, рапса и сои в диапазоне 0,02—0,2 мг/кг.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Название действующего вещества по ИСО: пикоксистробин.

Название действующего вещества по ИЮПАК: метил (Е)-З-метокси-2-[2-(6-трифторметил-2-пиридилоксиметил) фенил]акрилат.

Структурная формула:

Эмпирическая формула: CigHieFjNO*

Молекулярная масса: 367,3.

Агрегатное состояние: порошок.

Цвет, запах: от белого до светло-бежевого цвета, без запаха. ³

3

Давление паров: 5,5 х 10 ³ мПа (при 20 °С).

Коэффициент распределения октанол-вода (20 °С): К** logP = 3,6.

Температура плавления: 75 °С.

Растворимость в воде мг/дм³ (20 °С): 3,1.

Растворимость в органических растворителях (г/дм³, 20 °С): метанол -- 96; 1,2-дихлорэтан, ацетон, ксилол, этилацетат - более 250.

Устойчив к гидролизу в диапазоне pH 5—7.

Краткая токсикологическая характеристика

Пикоксистробин относится к веществам малоопасным по острой пероральной (ЛДзо ДЛЯ крыс более 5 000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД50 для крыс 2 120 мг/кг), но к умеренно опасным веществам по ишаляционной токсичности (ЛК50 для крыс (4 ч) более 2 000 мг/м³). Не вызывает покраснения кожных покровов и глаз кроликов. Не обладает генотоксическим, канцерогенным и тератогенным свойствами.

Область применения

Пикоксистробин - фунгицид защитного, ограниченно системного действия, применяется для борьбы с широким спектром заболеваний, вызываемых ложномучнисторосяными и мучнисто-росяными грибами.

Предлагается в России в качестве фунгицида в посевах зерновых колосовых культур при норме расхода 120 г д.в./га.

В России для пикоксистробина установлены следующие гигиенические нормативы: ДСД - 0,04 мг/кг массы тела человека; ОБУВ в атмосферном воздухе - 0,01 мг/м³; ОДК в почве - 0,4 мг/кг; ПДК в воде водоемов - 0,03 мг/дм³; МДУ в зерне хлебных злаков - 0,2 мг/кг, в корнеплодах сахарной свеклы - 0,05 мг/кг.

МДУ в импортируемой продукции (мг/кг): семена масличных -

0,05.

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р - 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (и = 20) приведены в табл. 2. ⁴

4

МУК 4.1.3095—13

Таблица 1

Метрологические параметры для ликоксистробина

Анали

зируе

мый

объект

Диапазон определяемых концентраций, мг/кг

Показатель точности (граница относительной шнреш-ности), ± 6, %,Р = 0,95

Стандартное отклонение повторяемости, <х„%

Предел

повто

ряемос

ти,

г,%

Предел воспроизводимости, Я. %

Норматив оперативного контроля точности, К_у мг/кг (Р - 0,95, т ~ 2)

Зеленая

0,05—0,1 вкл.

50

1,00

2,78

3,89

0,59 • X *

кукурузы

0,1—0,5 вкл.

25

1,61

4,48

6,27

0,30 X^й

Зерно

0,02—0,1 вкл.

50

1,99

5,53

7,75

0,59 • X *

кукурузы

0,1—0,2 вкл.

25

2,11

5,87

8,21

0,30-**

Масло

0,02—0,1 вкл.

50

1,3!

3,64

5,10

0,59 • X *

кукурузы

0,1—0,2 вкл.

25

1,23

3,42

4,79

0,30 •А'*

Семена

подсол-

печника

0,02—0,1 вкл.

50

2.39

6,64

9,30

0,59 •А'*

0,1—0,2 вкл.

25

1,79

4,98

6,97

0,30*’

Масло

подсол-

нечника

0,02—0,1 вкл.

50

1,80

5,00

7,01

0,59 • X *

0,1—0,2 вкл.

25

1,31

3,64

5,10

0,30 X*

Семена

0,02—0,1 вкл.

50

1,64

4,56

6,38

0,59 • X *

рапса

0,1—0,2 вкл.

25

1,61

4,78

6,27

0,30- X*

Масло

0,02—0,1 вкл.

50

1,49

4,14

5,80

0,59 • X *

рапса

0,1—0,2 вкл.

25

1,40

3,89

5,45

0,30-**

Семена

0,02—0,1 вкл.

50

1,73

4,81

6,73

0,59 • X *

сои

0,1—0,2 вкл.

25

1,05

2,92

4,09

0,30 X*

Масло

0,02—0,1 вкл.

50

1,68

4,67

6,54

0,59 • X *

сои

0,1—0,2 вкл.

25

1,57

4,37

6,11

0,30*’

* X - среднее значение массовой концентрации ликоксистробина в пробе, мг/кг.

5

Таблица 2

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для пикоксистробина

Анализируемый

объект

Метрологические параметры, Р = 0,95, л = 20

Предел

обнару

жения,

мг/кг

Диапазон определяемых концентраций, мг/кг

Полнота извлечения вещества, %

Стандартное отклонение,

S. %

Доверительный интервал среднего результата, ±, %

Зеленая масса кукурузы

0,05

0,005—0,05

82,16

3,29

1,54

Зерно кукурузы

0,02

0,02—0,2

81,03

2,51

1,18

Масло кукурузы

0,02

0,02—0,2

78,96

0,86

0,40

Семена подсолнечника

0,02

0,02—0,2

72,14

1,36

0,64

Масло подсолнечника

0,02

0,02—0,2

78,07

3,03

1,42

Семена ралса

0,02

0,02—0,2

73,23

1,41

0,66

Масло рапса

0,02

0,02—0,2

74,26

2,80

1,31

Семена сои

0,02

0,02—0,2

73,49

1,72

0,80

Масло сои

0,02

0,02—0,2

75,19

2,63

1,23

2. Метод измерений

Метод основан на определении пикоксистробина с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового диодно-матричного детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами, на колонках с окисью алюминия, на концентрирующих патронах № 1 и 2.

Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства измерений Весы аналитические класса точности по ГОСТ Р 53228—2008 - специальный (I), с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г

МУК 4.1.3095—13

Весы лабораторные общего назначения класса точности по ГОСТ Р 53228-2008 - средний (111) с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности ±0,038 г

Колбы мерные на 10,25, 50, 100, 500 и

1 000 см³    ГОСТ    1770—74

Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см³    ГОСТ 29227-91

рН-метр/милливольтметр с диапазоном измерения 0...14 pH; ± 1 999 мВ Хроматографическая система, включающая:

-    хроматограф жидкостный с диодноматричным детектором, снабженный термостатом для колонок с диапазоном температур от 15 до 80 °С и стандартным автосамплером для автоматического ввода пробы в хроматографическую систему;

-    компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ

Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 см³    ГОСТ 1770-74

Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Пикокеистробин, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,2 %

Алюминий окись для хроматографии, ч Ацетон, осч

Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм Вода дистиллированная и (или) бидистиллиро-ванная (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости)

Гелий, очищенный n-Гексан, хч

Калий марганцово-кислый, чда ⁷

ТУ 6-09-3916—75 ТУ 6-09-3513—86 'ГУ 6-09-2167—84

ГОСТ 6709-72 ТУ 51-940—80 ТУ 6-09-3818—89 ГОСТ 20490-75

7

МУК 4.1.3095—13

Кальций хлористый, ч

Концентрирующие патроны для твердофазной экстракции с гидрофильным слабокислым сорбентом с постоянной активностью с размером частиц 63—200 мкм (С) (объем - 1 см³, масса сорбента - 0,6 г), (патрон № 1) Концентрирующие патроны для твердофазной экстракции с пщрофобным сорбентом с размером частиц 63—200 мкм с привитыми гексаде-цильными (С 16) группами (объем - 1 см³, масса сорбента - 0,6 г), (патрон № 2)

Натрий серно-кислый, безводный, хч Натрий хлористый, хч

ТУ 6-09-4711—81

ТУ 4215-002-05451931—94

ТУ 4215-002-05451931—94 ГОСТ 4166-76 ГОСТ 4233-77

Примечание. Допускается использование реактивов с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы

Алонж прямой с отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами Аппарат для встряхивания проб с возвратнопоступательным направлением колебаний, с максимальной загрузкой 10 кг, с амплитудой колебаний 30 мм и скоростью от 10 до 300 колебаний в минуту

Банки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см³ Ванна ультразвуковая с потребляемой мощностью 140 Вт, рабочей частотой 50 Гц, рабочим объемом 4,5 дм³

Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная Воронки делительные на 250 см³ Воронки лабораторные, стеклянные Испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3 000 см³, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об./мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием объемом 5 дм³ и с диапазоном температур от 20 до 100 °С

ГОСТ 25336-82

ГОСТ 5556-81 ГОСТ 25336-82 ГОСТ 25336-82

8

МУК 4.1.3095—13

Колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1 ООО см³    ГОСТ    25336—82

Колбы круглодонные со шлифом (концентра-торы) на 100,250 и 4 000 см³    ТУ    92-891.029—91

Колонка хроматографическая стальная, длиной 150 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 3,5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами С18 Насос диафрагменный, химически стойкий на 100 %, с мощностью электропривода 245 Вт, предельным вакуумом 100 мбар/абс, с избыточным давлением 1 бар и скоростью откачки 34 дм³/мин

Предколонха хроматографическая стальная, длиной 12,5 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами С8 Стаканы стеклянные, термостойкие объемом 106—500 см³

Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4 000 см³ и приемной конической колбой объемом 1 000 см³ Фильтры обездоленные нейтральные, быстро фильтрующие, диаметром 11 см, зольность одного фильтра 0,00072 г Фильтры для очистки растворителей, диаметром 20 мм с отверстиями пор 20 мкм Шприц инъекционный однократного применения объемом 10 см³

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-2009, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно ⁹

ГОСТ 25336-82

ТУ-6-09-1678—86

ГОСТРИСО 7886-1—09

9