Федеральная служба но напору к сфере шииты нрав iioipe6ine.ien н б.1агоно.|учни человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды

Сборник М У К 4.1.2758—4.1.2767— 10

ББК 51.21 060

060 Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2011.—163 с.

1.    Методические указания разработаны Ф1 "УН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана Роспотребнадзора».

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 14.10.2010 № 2).

3.    Введены впервые.

ББК 51.21

€> Роспотребнадзор, 2011 €> Федеральный центр гигиены н эпидемиологии Роспотребнадзора, 2011

МУК 4.1.2762—10

Рабочая длина волны: 230 нм

Объем вводимой пробы: 20 мм³

Ориентировочное время выхода мстрафснона: 7,73—7,97 мин

Линейный диапазон детектирования: 2—20 нг.

7.6. Подготовка фильтров для отбора проб воздуха

Из пенополиуретана вырезают фильтр толщиной 2—2.5 мм. диаметром 48—50 мм, соответствующий внутреннему диаметру фильтро-держателя. Диаметр бумажного фильтра «синяя лента» также должен соответствовать внутреннему диаметру фильтродсржатсля.

Фильтры из пенополиуретана и бумаги последовательно по 3 раза промывают на воронке Бюхнера этанолом, затем ацетонитрилом порциями 25—30 см³, сушат с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

7.7. Подготовка салфеток для проведения смыва

7.7.1. Приготовление раствора натрия углекислого с массовой болей 5 %

Навеску (25 ± 0.1) г натрия углекислого помещают в мерную колбу вместимостью 500 см³, растворяют в деионизированной воде, доводят водой до метки, перемешивают.

7.7.2. Подготовка салфеток для проведения смыва

Вырезают салфетки (лоскуты) из белой бязи размером 10 х 10 см. затем их последовательно обрабатывают 5 %-м раствором углекислого натрия (при кипячении), водой до нейтральной реакции промывных вод. 2-кратно промывают этиловым спиртом, сушат на воздухе при комнатной температу ре. До использования салфетки хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

8. Отбор н хранение проб воздуха

Отбор проб осуществляют в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздух) рабочей зоны» и Руководства Р 2.2.2006—05 (прилож. 9. обязательное) «Общие методические требования к организации и проведению контроля содержания вредных веществ в воздухе рабочей зоны», пункт 2 «Контроль соответствия максимальным ПДК».

Воздух с объемным расходом 2—4 дм³/мин аспирируют через пробоотборную систему, состоящую из последовательно соединенных бумажного фильтра «синяя лента» и фильтра из пенополиуретана (ППУ). помещенных в фильтродержатель.

Для измерения концентрации метрафенона на уровне предела обнаружения (0.1 мг/м³) необходимо отобрать 5 дм³ воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильнике при температуре 4—5 °С - 30 дней.

9. Условия проведения смыва

Смывы проводят в конце работы или после выполнения отдельных операций с открытых и закрытых спецодеждой или другими СИЗ участков тела (лоб. лицо. шея. грудь, предплечье, голень, кисти рук. включая межпальцевые промежутки).

До работы выбирают участок кожи, обрабатывают его для удаления загрязнений, фиксируют площадь (нс менее 200 см²). При необходимости отбирают (|юновыс смывы.

Смыв выполняют способом обмыва фиксированного участка кожи этиловым спиртом, помещая 20 см³ в стеклянную емкость с металлической крышкой. Тканевой салфеткой, смоченной растворителем, с помощью пинцета (индивидуально) обмывают этот участок сверху вниз. Операцию повторяют дважды.

Срок хранения отобранных проб смывов, помещенных в герметично закрытые емкости, в морозильной камере при температуре -18 °С -30 дней.

10. Выполнение измерений

10.1. Воздух рабочей юны Экспонированные фильтры (бумажный фильтр «синяя лента» и фильтр из ППУ) переносят в химический стакан вместимостью 150 см³, заливают 20 см³ ацетона, помещают на аппарат дтя встряхивания (встряхиватель) на 10 мин. Растворитель сливают, фильтры еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 20 см³, выдерживая на встряхиватслс по 10 мин.

Объединенный экстракт переносят (через воронку) в круглодонную колбу вместимостью 150 см³. упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани нс выше 35 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 5 см подвижной фазы (подготовленной по п. 7.2). тщательно перемешивают и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.5.1.

10.2. Смывы с кожных покровов

Пробу смыва сливают (через воронку) в колбу дзя упаривания, с помощью пинцета извлекают салфетку, помещают в конусную химичс-

МУК 4.1.2762—10

скую воронку, установленную в муфту колбы для упаривания, тщательно отжимают и промывают этиловым спиртом дважды порциями по 10 см³, предварительно ополаскивая растворителем емкость, в которой находилась проба.

Объединенный раствор упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани нс выше 35 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 2 см³ подвижной фаты (подготовленной по п. 7.2) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.5.1.

Пробу вводят в испаритель хроматографа нс менее двух раз. Устанавливают площадь пика действующего вещества, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию мстра(|юнона в хроматографируемом растворе.

Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 1.0 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой (нс более чем в 50 раз).

11. Обработка результатов анализа 11.1. Воздух рабочей зоны

Концентрацию мстра(|>снона в пробе возду ха (А), мг/м³, рассчитывают по формуле:

Х= С • W/V_t, где

С - концентрация мстра<|>снона в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

ГГ - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования. см³;

V,- объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст.. температу ра 20 °С). дм³. V,-R • Р • и • */(273+ 7), где

'/’-температура возду ха при отборе проб (на входе в аспиратор). °С;

Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;

и - расход возду ха при отборе пробы. дм³/мин;

t - длительность отбора пробы, мин:

11 - коэффициент, равный 0.386 язя возду ха рабочей зоны.

За резу льтат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

71

2-|б|-б,|-Ю0

(<5, + <5,)

Л'/.    -    результаты    параллельных    определений,    мг/ м³;

R - значение предела повторяемости (табл.), при этом г = 2.8^

11.2. Смывы с кожных покровов

Концентрацию метрафенона в пробе смыва X. мкг/смыв. рассчитывают по формуле:

Х=С-и: где

С - концентрация метрафенона в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному график) в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см .

IV-объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³.

Примечание: Идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.

12. Оформление результатов измерений

О- среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/м³ (мкг/смыв):

Л - граница абсолютной погрешности, мг/м³ (мкг/смыв):

л 8-0

А =-.    где

100

<5 - граница относительной погрешности методики (показатель точности по диапазону концентраций, табл.). %.

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание метрафенона в пробе воздуха рабочей зоны - менее 0,1 мг/м³; в пробе смыва менее 0,2 мкг/смыв»*

*    0,1 мг/м³; 0,2 мкг/смыв - пределы обнаружения при отборе

5 дм³ воздуха рабочей зоны; в пробе смыва (фиксированная площадь смыва, 200 см‘), соответственно.

МУК 4.1.2762—10

13. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерении осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-(1-6)-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

Таблица

Значения характеристики погрешности, нормативов оперативною контроля точности, повторяемости, воспроизводимости

Анали зируе мый объект	.Диапазон определяемых концентраций, мг/м3, мкг/смыв	Характеристика потреш-иости, ±6,%, Р = 0,95	Норматив оперативного контроля точности, К, мг/м3, мкг/смыв, (Р = 0,95, т-2)	Стандартное отклонение повторяемости. аг, мг/м3, мкг/смыв	11редел повторяемости, г, мг/м3, мкг/смыв	Предел восироиз- во;ц!.мос1и. R, мг/м3, мкг/смыв. (Р = 0,95, т = 2)
Воздух рабочей 301 ты	0,1—10 мг/м3	22	0,21 -5	0,039 • 5	0,11 7)	о,п-с5
Смывы с кожных покровов	0,2—2,0 мкг/смыв	21	0,21 -5	0,049 • 5	0,14-5	0,17-5

X - массовая концентрация анализируемого компонента в пробе. О-среднее значение (мг/м³. мкг/смыв).

13.1.    Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2.    Плановый внутрнлабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздушной среды и смывов с кожных покровов. Объем отобранных для контроля процедуры выполнения анализа проб воздуха и смывов с кожи должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике, фиксированная площадь смыва должна быть увеличена в 2 раза. После отбора проб экстракт с фильтра, а также пробу смыва делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы -X. Во вторую часть делают добавку анализируемого компонента (величина добавки Х₀ должна соответствовать 50— 150% от содержания компонента в пробе, общая концентрация не должна превышать верхнюю границу диапазона измерения) и анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы с добавкой - X. Результаты анализа исходной рабочей пробы (А) и рабочей пробы с добавкой (X) получают в условиях

повторяемости (один аналитик, использование одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т. д.).

Решение об удовлетворительности процедуры анализа принимают при выполнении условия:

\Х-Х-Х_д\йК, где    (2).

А* =0.21 • Т) (воздушная среда).

/С =0.21 • О (смывы с кожи).

Ъ = 1/2(Л+.r-.V<,)

X, А" - результаты измерений исходной рабочей пробы и пробы с добавкой, соответственно (мг/м¹, мкг/смыв):

Х₀- величина добавки (мг/м¹. мкг/смыв):

К - норматив оперативного контроля точности (в соответствии с диапазоном концентраций, табл.), мг/м¹. мкг/смыв.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, нс должно превышать предела воспроизводимости (R):

\Х/ -Х₂\ <, R. где    (3)

R = 0.13 • (воздушная среда):

R = 0,17 • ~5 (смывы с кожи)

Z5 = 1/2(ЛГ/ + Х₂). где

Л'/, Х₂ - результаты измерений в двух разных лабораториях (мг/м¹. мкг/смыв).

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций. табл.), мг/м¹. мкг/смыв.

Если выполняется условие (3). то воспроизводимость измерений считается удовлетворительной.

При превышении норматива контроля воспроизводимости эксперимент повторяют, при повторном превышении указанного норматива выясняют причины и по возможности их устраняют.

14. Разработчики

Юдина Т. В.. Федорова Н. Е.. Волкова В. Н. (ФГУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана Роспотребнадзора»).

МУК 4.1.2758—4.1.2767—10

Содержание

Измерение концентраций клодинафоп-пропаргила в воздухе рабочей зоны, атмосферном возду хе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом капиллярной газожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2758—10..................................................................................................4

Измерение концентраций пропизохлора в воздухе рабочей зоны и с mi .max с кожных покровов операторов методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2759—10....................................................................18

Измерение концентраций мепикват хлорида в возду хе рабочей зоны, атмосферном возду хе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом капиллярной газожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2760—10................................................................................................30

Определение остаточных ко:шчеств имидаклоприда в цитрусовых, ягодах и соке винограда методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2761—10................................................................................................46

Измерение концентраций метрафенона в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2762—10....................................................................62

Измерение концентраций мезосульфурон-метила, иодосульфу рон-мепгт-нагрия, дифлюфеникана и мефенпир-дкэтила в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов хроматографическими методами:

МУК 4.1.2763—10................................................................................................75

Определение метрибузина в биологических средах экспериментальных животных (почках, печени, юловном мозге, семенниках, моче, кате) методом капиллярной газожидкостной хроматографи: МУК 4.1.2764—10... 95 Измерение концентраций диметоата в атмосферном воздухе населенных мест методом капиллярной газожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2765—10..............................................................................................111

Измерение концентраций тиенкарбазон-метила, ципросульфамида и изоксафлютола в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2766—10..............................................................................................121

Измерение концентраций флуоксастробина, клотианидина, протиоконазола и тебуконазола в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов хроматографическими методами: МУК 4.1.2767—10................139 ¹

УТВЕРЖДАЮ

Руководитель Федеральной службы по надзору в c(J)epc «шиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

17 ноября 2010 г.

Дата введения: 17 декабря 2010 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций метрафенона в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2762—10

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов массовой концентрации метрафенона в диапазонах:    0,1—1,0мг/м³ и 0,2—

2.0 мкг/смыв. соответственно.

Метрафенон

(3-бром-6-метокси-2-метилфенил)(2.3.4-тримстокси-6-мстилфе-нил)метанон (IUPAC)

о о у н₃с СН₃ о

c_I9H₂₁Bio₅

Мол. масса 409.3

62

МУК 4.1.2762—10

Кристаллическое вещество белесого цвета с алифатическим запахом. Температура плавления 99.2—100.8 °С. Плотность 1.45 г/см³. Давление паров 0,153 мПа (20 °С). 0.256 мПа (40 °С). Растворимость в органических растворителях при 20 °С (в г/дм³): ацетон - 403: ацетонитрил -165: дихлорметан - 1 950: н-гексан - 4.8: метанол - 26.1: толуол - 363: этилацетат - 261. Растворимость в воде при 20 °С (в мг/дм³): 0.474 (ди-стиллированная вода): 0.552 (pH 5): 0.492 (pH 7): 0.457 (pH 9). Коэффициент распределения н-окта но л/во да K_tnv log/-* = 4.3 (25 °С. pH 4). Стабилен в водной среде (50 °С) при pH 4. 7. 9 в течение 5 дней.

Агрегатное состояние в воздухе рабочей зоны - аэрозоль и пары.

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность (LD₅o) для крыс > 5 000 мг/кг: острая дермальная токсичность (LD₅₀) для крыс > 5 000 мг/кг: острая ингаляционная токсичность (LCso) для крыс > 5 000 мг/дм³ (4 ч).

Область применения

Мстрафснон - фунгицид класса бензофенонов. рекомендуемый для обработки зерновых колосовых культур в период вегетации, заблаговременно. до появления первых признаков болезней.

Рекомендуемый ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) в воздухе рабочей зоны - 1.3 мг/м³.

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, нс превышающей ± 25 %. при доверительной вероятности 0.95.

2. Метод измерений

Измерения концентраций мстрафенона выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Концентрирование мстрафенона из воздуха осуществляют на пробоотборную систему из последовательно соединенных бумажного фильтра «синяя лента» и фильтра из пенополиуретана (ППУ). экстракцию с фильтров выполняют ацетоном. Смыв с кожных покровов проводят этиловым спиртом.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 2 нг. Средняя полнота извлечения с фильтров - 82,84 %. с поверхности кожи

- 83.57 %.

63

МУК 4.1.2762—10

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы н материалы

3.1. Средства илмерепии

Жидкостный хроматограф «Agilent 1200»

(США) с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны Барометр-анероид М-67 Весы аналитические ВЛА-200 Колбы мерные 2-100-2. 2-500-2 и 2-1000-2 Меры массы

Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1.0. 2.0. 5.0. 10 см³ Пробоотборное устройство ОП 442ТЦ (ЗАО «ОПТЭК». г. Санкт-Петербург)

Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2.

цена деления 1 °С. пределы измерения 0—55 °С ТУ 25-2021.003—88 Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 25. 500 и 1 000 см³

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лу ч ш и м и хара ктер ист и ка м и.

3.2. Реактивы Мстра(|юнон. аналитический стандарт с содержанием действующего вещества 99.7 %

(CAS № 2200899-03-6)

Ацетон, осч    ГОСТ 2603-79

Ацетонитрил для хроматографии, хч    ТУ 6-09-4326—76

Вода бидистиллированная или деионизованная ГОСТ 6709-72 Калий марганцовокислый (перманганат калия), хч ГОСТ 20490-75 Калий углекислый (карбонат калия, поташ), хч. прокаленный    ГОСТ 4221-76

Кислота орто(|юс(|юрная. хч. 85 %    ГОСТ 6552-80

Натрий углекислый    ГОСТ 83-79

Спирт этиловый (этанол) ректификованный    ГОСТ Р 51652-2000

или ГОСТ 183(H)—87

Фос<|юр (V) оксид (фосфорный ангидрид.

пентоксид фосфора), хч    ТУ 6-09-4173—85

Допускается использование реактивов иных производителей с более высокой квалификацией, нс требующих выполнения п. 7.1 (очистки растворителей).

64

МУК 4.1.2762—10

3.3. Вспомогательные устройства, материалы Аппарат для встряхивания типа АВУ-бс    ТУ 64-1-2851—78

Баня водяная

Бумажные фильтры «синяя лента», обе тленные ТУ 2642*0014)5015242—07 Бязь хлопчатобумажная белая Воронка Бюхнера

Воронки конусные диаметром 40—45 мм Г руша резиновая Колба Бунзена

Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 150 см³ Линейка

Мембраны микропористые капроновые ММК Механическая (бытовая) ломтерезка фирмы BOSCH MAS 4600 (Германия)

Набор для фильтрации растворителей через мембрану

Насос водоструйный Ножницы

Пенополиуретан ППУ ПЕНОР 301 Арктика Пинцет медицинский нержавеющий Стаканы химические с носиком, вместимостью 150 см³    ГОСТ 25336-82

Стекловата

Стеклянные емкости вместимостью 100 см³ с герметичной металлической крышкой Стеклянные палочки Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 30 Ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi. Швейцария Установка для перегонки растворителей Фильтродержатель

Хроматографическая колонка стальная, длиной 150 мм. внутренним диаметром 4.6 мм. содержащая Eclipse XDB С18. зернением 5 мкм Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50—100 мм³

Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

65

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76. требования по электробсзопасностн при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-79. а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе на должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и 2.2.5.2308—07. Организация обучения работников безопасности труда -по ГОСТ 12.0.004-90.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя. с опытом работы на жидкостном хроматографе, освоивших данную методику и подтвердивших экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

К проведению пробоподготовкн допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ. кондиционирование хроматографической колонки, приготовление растворов для градуировки и внесения, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров «синяя лента», фильтров из ППУ и салфеток для отбора проб, отбор проб.

66

МУК 4.1.2762—10

7.1. Очистка раствори те ieu

7.1.1. Очистка ацетона

Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия и прокаленным карбонатом калия или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок нс менее 30.

7.1.2. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пснтоксидом фосфора (на 1 дм³ ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 ч. после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм³ ацетонитрила 10 г карбоната калия).

7.2. Подготовка подвижной фачы для ВЭЖХ

7.2.1.    Приготовление 0,2 %-го раствора ортофосфорнои кислоты. В мерную колбу вместимостью 1 ООО см³ помещают 500 см³ бидистил-лированной или деионизованной воды. 2 см³ ортофосфорной кислоты, перемешивают доводят до метки бидистиллированной или деионизованной водой и еще раз тщательно перемешивают.

7.2.2.    Приготовление подвижной фазы. В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 700 см³ ацетонитрила и 300 см³ 0.2 %-й орто-(|юс(|юрной кислоты, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.3. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.2) при скорости подачи растворителя 1.0см/мин до установления стабильной базовой линии.

7.-1. Приготовление градуировочных растворов и растворов внесении

7.4.1.    Исходный раствор метрафенона для градуировки (концентрация ЮОмкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0.01 (К) г метрафенона. растворяют в 50—60 см³ ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.

Раствор хранят в холодильнике при температуре 4—6 °С в течение месяца.

Растворы № 1—5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.

7.4.2.    Раствор Ns 1 метрафенона для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного раствора метрафенона с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 7.4.1). разбавляют ацетонитрилом до метки.

67

Градуировочный раствор № 1 хранят в холодильнике при температуре 4—6 °С в течение месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внсссно-найдсно».

7.4.3. Рабочие растворы №2—5 метрафенона для градуировки (концентрация 0,1—1,0 мкг/см³). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают по 1,0; 2.0; 5.0 и 10 см³ градуировочного раствора № 1 с концентрацией К) мкг/см³ (п. 7.4.2), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по п. 7.2. тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №2—5 с концентрацией метрафенона 0,1; 0.2; 0,5 и 1.0 мкг/см³. соответственно.

Рабочие растворы сразу после приготовления помещают в холодильник. где хранятся при температуре 4—6 °С нс более 15 дней.

7.5. Установление градуировочной характеристики Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мЕА • с) от концентрации метрафенона в растворе (мкг/см³). устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам хтя градуировки № 2—5.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.5.1. Осуществляют нс менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площади пиков, на основании которых строят градуировочную зависимость.

Градуировочную характеристик) проверяют перед проведением измерения по анализу одного из градуировочных растворов. Если значение площади отличается более, чем на 11 % от данных, заложенных в градуировочную характеристик), ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы хтя градуировки.

7.5.1. Условия хроматографирования Измерения выполняют при следующих режимных параметрах: Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны

Хроматографическая колонка стальная, длиной 150 мм. внутренним диаметром 4.6 мм. содержащая Eclipse XDB С18. зернением 5 мкм Температу ра колонки: 25 °С

Подвижная фаза: ацстонитрнл-О.2 %-я орто-фосфорная кислота (70 : 30. по объему)

Скорость потока элюента: 1.0 см/мин

68

1