Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций хлорантраншшпрола в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2460—09

ББК 51.21

И37

И37 Измерение концентраций хлорантранилипрола в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009—14 с.

1.    Разработаны Федеральным научным центром гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана (Т. В. Юдина, Н. Е. Федорова, В, Н. Волкова.).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 25 декабря 2008 г. №3).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г. Г. Онищенко 2 февраля 2009 г.

А. Введены в действие с 29 апреля 2009 г.

5. Введены впервые.

ББЕС 51.21

© Роспотребнадзор, 2009 © Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009

МУК 4.1.2460—09

уровне 0,5 ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,7 дм³.Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильнике при температуре 4—6 °С - 7 дней.

9. Условия проведения смыва

Смывы проводят в конце работы или после выполнения отдельных операций с открытых и закрытых спецодеждой или другими СИЗ участков тела (лоб, лицо, шея, спина, грудь, предплечье, голень, кисти рук, включая межпальцевые промежутки).

До работы выбирают участок кожи, обрабатывают его с целью удаления загрязнений, фиксируют площадь (не менее 200 см²). При необходимости отбирают фоновые смывы.

Смыв проводят способом обмыва фиксированного участка кожи этиловым спиртом, помещая 20 см³ в стеклянную емкостью с металлической крышкой. Тканевой салфеткой, смоченной растворителем, с помощью пинцета (индивидуально) обмывают кожный покров сверху вниз. Операцию повторяют дважды.

Срок хранения отобранных проб смывов, помещенных в герметично закрытые емкости, в морозильной камере при температуре -18 °С -30 дней.

10. Выполнение измерений

10.1. Воздушная среда

Экспонированный фильтр переносят в химический стакан вместимостью 150 см³, заливают 20 см³ этилового спирта, помещают на истрл-хиватель на 10 минут. Растворитель сливают, фильтр обрабатывают новыми порциями этилового спирта объемом 10 см³ еще дважды, выдерживая на встряхивателе по 10 минут.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 5 см³ подвижной фазы (подготовленной по п. 7.2.1 или 7.2.2) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в л. 7,5.1.1 или 7.5.1.2.

И

МУК 4.1.2460—09

10.2, Смывы с кожных покровов Пробу смыва сливают (через воронку) о колбу для упаривания, с помощью пинцета извлекают салфетку, помещают в конусную химическую воронку, установленную в муфту колбы дня упаривания, тщательно отжимают и промывают этиловым спиртом дважды порциями по 10 см³, предварительно ополаскивая растворителем емкость, в которой находилась проба.

Объединенный раствор упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 2 см³ подвижной фазы (подготовленной по и. 7.2.1 или 7.2.2) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.5.1.1 или 7.5.1.2.

Пробу вводят в испаритель хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика действующего вещества, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию хлорантраншшпрола в хроматографируемом растворе.

Образцы, дающие пики, большие, чем 1радуировочный раствор с концентрацией 1,5 мкг/см^э, разбавляют подвижной фазой.

Перед анализом опытных образцов проводят хроматографирование холостых (контрольных) проб-экстрактов неэкспонированного фильтра и салфетки.

11. Обработка результатов анализа

1L1. Воздушная среда

Массовую концентрацию хлорантраншшпрола в пробе воздуха X, мг/м³, рассчитывают по формуле:

y п ^{w х =} Сх-—, где

С - концентрация хлорантраншшпрола в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

W- объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

V, - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 ®С), дм³.

МУК 4.1.2460—09

А - ——, мг/м³ (мкг/смыв)

100

Результат измерений должен иметь тот же десятинный разряд, что и погрешность.

Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде;

«содержание хлорантранилипропа в пробе воздуха рабочей зоны -менее 0, 1 мг/м³; смыва-менее 0,1 мкг/смыв»*

*- 0,1 мг/м³; О, I мкг/смыв - пределы обнаружения при отборе 5 дм³ воздуха рабочей зоны; в пробе смыва (фиксированная площадь смыва, 200 см²) соответственно.

13. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-6. 2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

14. Разработчики

Юдина Т. В., Федорова Н. Е., Волкова В. HL (ФГУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана Роспотребнадзора»).

Измерение концентраций хлораптранилипрола в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2460—09

Технический редактор А. В. Терентьева

Подписано в печать 30.06.09 Формат 60x88/16    Пен.    л.    1,0

Тираж 200 экз.

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., д. 18/20

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, тсл./факс 952-50-89

МУК 4 Л .2460—09

Бесцветное кристаллическое вещество. Температура плавления 208—210 °С. Давление паров 6,3 х 10‘¹²Па при 20 °С; 2,1 * 10^-п Па при 25 °С. Растворимость в органических растворителях при 20 °С (в г/дм³): ацетон - 3,446; ацетонитрил - 0,7i 1; диметилформамид - 124; дихлорме-тан - 2,476; этилацетат - 1,144; метанол - 1,714; толуол - 0,32; и-октанол - 0,386; w-гексан < 0,0001. Растворимость в воде при 20 °С (в мг/дм³): 0,972 (pH 4), 0,880 (pH 7), 0,971 (pH 9). Коэффициент распределения «-октанол/вода K_ow logP 2,76.

Агрегатное состояние в воздушной среде - аэрозоль.

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность (LD₅₀) для крыс и мышей - более 5 000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD₃o) Для крыс - более 5 000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC₅₀) для крыс - более 5,1 г/дм³ (4 ч).

Область применения препарата

Хлорантранилипрол - инсектицид широкого спектра действия химического класса антранилдиамидов, рекомендуется к применению для защиты яблонь от плодожорки, листовертки, а также картофеля от колорадского жука.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) хло-рантранилипрола в воздухе рабочей зоны - 1,5 мг/м³.

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей ± 25 %, при доверительной вероятности 0,95.

2. Метод измерений

Измерения концентраций хлорантранилипрола выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Концентрирование хлорантранилипрола из воздуха осуществляют на бумажный фильтр «синяя лента», экстракцию с фильтров проводят этиловым спиртом. Смыв с кожных покровов также проводят этиловым спиртом.

4

МУК 4.1.2460—09

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы 2 иг. Средняя полнота извлечения с фильтров - 95,76 %, с поверхности кожи - 84,01 %.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерений Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны (фирмы Номер Госреестра Perkin-Elmer, США)

Барометр-анероид М-67 Весы аналитические ВЛА-200 Колбы мерные 2-100-2 и 2-1 000-2 Меры массы

Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0,2,0, 5,0,10, 15 см³ Пробирки градуированные вместимостью 5 или

10 см

Пробоотборное устройство ПУ-4Э исп.1 (ЗАО «ОПТЭК», г. Санкт-Петербург)

Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2,

цена деления 1 °С, пределы измерения 0—55 °С ТУ 215-73Е

Цилиндры мерные 2-го класса точности

вместимостью 10,250,500 и 1 000 см³    ГОСТ    1770

Допускается использование средств измерения с ашиюпршшт пни лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Хлорантранилипрол, аналитический стандарт с содержанием основного вещества 99,2 %

(фирмы «Du Pont»)

Ацетонитрил для хроматографии, хч    ТУ-б-09 -4326 76

Вода бидистиллированная, деионизованная или перегнанная над КМп0₄    ГОСТ    6709

Кислота орто-фосфорная, хч, 85 %    ГОСТ    6552

5

МУК 4 Л .2460—09

Кислота муравьиная

Метиловый спирт (метанол), хч    ГОСТ 6995

Этиловый спирт (этанол) ректификованный ГОСТ Р 51652 или

ГОСТ 18300

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

3.3. Вспомогательные устройства, материалы

Аппарат для встряхивания типа АВУ-бс Бумажные фильтры «синяя лента», обеззоленные Бязь хлопчатобумажная белая Воронки конусные диаметром 30—37 мм Груша резиновая

Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 100 см³

Мембранные фильтры капроновые,

диаметром 47 мм

Пасос водоструйный

Пробирки центрифужные

Ротационный вакуумный испаритель В-169

фирмы Buchi, Швейцария

Стаканы химические низкие с носиком,

вместимостью 150 см³

Стекловата

Стеклянные емкости вместимостью 100 см³ с герметичной металлической крышкой Стеклянные палочки Установка для перегонки растворителей Набор для фильтрации растворителей через мембрану

Хроматографическая колонка стальная, длиной 250 мм, внутренним диаметром 2,0 мм, содержащая Spherisorb® S5 ODS 2, зернением 5 мкм Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Кромасил 100 С18, зернением 5 мкм

6

МУК 4.1.2460—09

Шприц для ввода образцов для жидкостного

хроматографа вместимостью 50—100 мм³

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313—03 «Предельно-допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда по ГОСТ 12.0.004.

5* Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %.

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка ацетонитрила (при необходимости), подготовка подвижной фазы

7

МУК 4.1.2460—09

для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление растворов для градуировки и внесения, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров и салфеток для отбора проб, отбор проб.

7.L Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7,2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

7.2.1.    Подвижная фаза №1 (для анализа по п. 7.5.1.1) В мерную колбу вместимостью I ООО см³ помещают 350 см³ бидистиллированной или деионизованной воды, 1,0 см³ муравьиной кислоты, 650 см³ метанола, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.2.2.    Подвижная фаза №2 (для анализа по п. 7.5.1.2) В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 450 см³ бидистиллированной или деионизованной воды, 1,0 см³ орто-фосфорной кислоты, 550 см³ ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.3. Кондиционирование хроматографической колонки. Промывают колонку (п. 7.5.1.1 или п. 7.5Л.2) подвижной фазой (приготовленной по л. 7.2Л или п. 7.2.2) при скорости подачи растворителя соответственно 0,3 или 0,8 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

7.4. Приготовление градуировочныхрастворо и растворов внесения

7.4.1.    Исходный раствор хпорантраиипипропа для градуировки (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят 0,0100 г хлораитранилипрола, добавляют 50—70 см³ ацетонитрила, перемешивают, доводят ацетонитрилом до метки, вновь перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3-х месяцев.

Растворы Ns 1—5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.

7.4.2.    Раствор № 1 хлорантранилипрола для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/см³) В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного раствора хлорантранилипрола с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 7.4.1), разбавляют ацетонитрилом до метки, перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

8

МУК 4.1.2460—09

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внесено-найдено».

7,4,3. Рабочие растворы М2—б хпорантранилипрола для градуировки (концентрация 0,1—1,5 мкг/см³). В 5 мерных колб вместимостью 100 см³ помещают по 1,0, 2,0, 5,0, 10 и 15 см³ градуировочного раствора №1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.4.2), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по jl 7.2.1 или п. 7.2.2, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №№ 2—6 с концентрацией хлорантра-нилипрола 0,1; 0,2; 0,5; 1,0 и 1,5 мкг/см³, соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике в течение 7 дней.

7.5. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (относительные единицы) от концентрации хлорантранили-прола в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки №№ 2—6.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.5.1 Л и п. 7.5.1.2. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площади пиков действующего вещества.

Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 2 растворов для градуировки различной концентрации. Если значения площадей отличаются более чем на 13,5 % от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки.

7.5.1.    Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

Жидкостный хроматограф «Perkin Elmer» (США) с ультрафиолетовым детектором

Рабочая длина волны:    260 нм

Объем вводимой пробы:    20 мм³

7.5.1.1.    Хроматографическая колонка стальная, длиной 250 мм, внутренним диаметром 2,0 мм, содержащая Spherisorb® S5 ODS 2, зернением 5 мкм

Температура колонки:    комнатная

Подвижная фаза:    метанол-вода-муравьиная

кислота (65:35:0.1, по объему) 0,3 см³/мин

9

МУК 4.1.2460—09

Ориентировочное время выхода хлорантранилипрола:    6,9—7,1    мин

7.5АХ Хроматографическая колонка стальная, длиной 250 мм, внутренним диаме1ром 4,0 мм, содержащая Кромасил 100 С18, зернением 5 мкм

Температура колонки:

Подвижная фаза:

Скорость потока элюента:

Ориентировочное время выхода хлорантранилипрола:    7,9—8,1 мин

Линейный диапазон детектирования Хлорантранилипрола    2—30 г.

7.6» Подготовка фильтров для отбора проб воздуха

Диаметр бумажного фильтра «синяя лента» должен соответствовать внутреннему диаметру фильтродержателя.

Фильтры последовательно по 3 раза промывают на воронке Бюхнера этанолом порциями 25—30 см³, сушат с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

7.7 Подготовка салфеток для проведения смыва

Вырезают салфетки (лоскуты) из белой бязи размером 10 х 10 см, последовательно обрабатывают их 5 %-м раствором углекислого натрия (при кипячении), водой до нейтральной реакции промывных вод, 2-кратно промывают этиловым спиртом, сушат на воздухе при комнатной температуре. До использования салфетки хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

8. Отбор и хранение проб воздуха

Отбор проб проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005— 88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны». Воздух с объемным расходом 1—4дм³/мин аспирируют через бумажный фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации хлорантранилипрола на уровне предела обнаружения (0,1 мгш) необходимо отобрать 5 дм³ воздуха, на