Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации__

4Л. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пропиконазола в семенах, масле и зеленой массе рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2334-08

Издание официальное

Москва • 2009

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. Методы контроля. Химические факторы

Определение остаточных количеств пропиконазола в семенах, масле и зеленой массе рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2334-08

МУК 4.1.2334-08

Концентрирующий патрон Диапак-диол промывают последовательно с помощью медицинского шприца 10 см³ смеси гексан-ацетон (1:1, по объему) и 5 см³ гексана со скоростью 5 см³/мин,

73, Проверка хроматографического поведения пропиконазола на колонке с оксидом алюминия

В круглодонную колбу вместимостью 10 см³ помещают ОД см³ градуировочного раствора №1 пропиконазола с концентрацией 10 мкг/см³ в гексане (п. 7.5.2). Отдувают растворитель током теплого воздуха, остаток растворяют в 3 см³ гексана, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку с оксидом алюминия, подготовленную по п.7.2. Промывают колонку 50 см³ гексана со скоростью 1-2 капли в сек., элюат отбрасывают. Затем колонку промывают 60 см³ смеси гексан-ацетон (9:1, по объему). Фракционно (по 10 см³) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 1 см³ гексана, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., и анализируют на содержание пропиконазола по п.9.5.

7*4, Подготовка и кондиционирование хроматографической колонки

Капиллярную кварцевую колонку ZB-1 (типа SE-30) устанавливают в термостат хроматографа и, не подсоединяя к детектору, кондиционируют при температуре 280°С и скорости газа-носителя 2 см³/мин в течение 8-10 часов.

7,5. Приготовление градуировочных растворов

7.5Л. Исходный раствор пропиконазола для градуировки (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,010 г пропиконазола, растворяют в 40-50 см³ гексана, доводят этим же растворителем до метки, тщательно перемешивают.

Раствор хранят в морозильной камере при температуре не выше -18°С в течение 3-х месяцев.

7.5.2. Раствор пропиконазола №1 для градуировки (концентрация 10 мкг/см³).

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного раствора пропиконазола с концентрацией 100 мкг/см³ (п.7.5.1.), разбавляют гексаном до метки. Этот раствор используют для приготовления рабочих градуировочных растворов №№ 2-5.

10

МУК 4.1.2334-08

Для приготовления проб семян и зеленой массы с внесением при оценке полноты извлечения пропиконазола из исследуемых образцов используют ацетоновый раствор пропиконазола с концентрацией 10 мкг/см³, а для приготовления проб масла — раствор пропиконазола в гексане с концентрацией 10 мкг/см³.

Градуировочный раствор № 1, а также ацетоновый и гексановый растворы пропиконазола хранят в морозильной камере при температуре не выше -18°С в течение месяца.

7.5.3. Рабочие растворы №№ 2-5 пропиконазола для градуировки (концентрация 0,05-0,5мкг/см).

В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают 0.5, 1.0, 2.5 и 5.0 см³ градуировочного раствора № 1 пропиконазола с концентрацией 10 мкг/см³ (п.7.5.2), доводят до метки гексаном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №№ 2-5 с концентрацией пропиконазола 0.05,0.1,0.25 и 0.5 мкг/см³, соответственно.

Растворы готовят непосредственно перед использованием.

7.6. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мВ*с) от концентрации пропиконазола в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки. На график наносят сумму площадей двух характерных пиков.

В инжектор хроматографа вводят по 1 мм³ каждого градуировочного раствора (п.7.5.3) и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.5. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.

8. Отбор и хранение проб

Отбор проб производится в соответствии с « Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (№ 2051-79 от 21.08.79 г.) и правилами, определенными ГОСТом 10852-86 «Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб» и ГОСТом 8988-77 «Масло рапсовое. ТУ».

Пробы зеленой массы хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более одного дня; для длительного хранения пробы замораживают и хранят при температуре — 18°С до анализа. Пробы семян высушивают до стандартной влажности и хранят в бу-

МУК 4.1.2334-08

мажных или тканевых мешочках в сухом, хорошо проветриваемом шкафу. Пробы масла хранят в плотно закрытой стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре не выше 4°С. В некоторых случаях масло получают из семян рапса экстракцией органическими неполярными растворителями (петролейный и диэтиловый эфиры) непосредственно перед проведением анализа.

9. Выполнение определения 9*1* Экстракция пропиконазола

9.1.1. Зеленая масса. Образец измельченного растительного материала массой 20 г помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 см³, добавляют 100 см³ смеси ацетон-вода (8:2, по объему) и суспензию перемешивают в течение 1 часа на аппарате для встряхивания. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу вместимостью 250 см³. Осадок на фильтре промывают 50 см³ смеси ацетон-вода (8:2, по объему). Экстракт и промывную жидкость переносят в химический стакан, перемешивают, измеряют объем раствора и 1/10 его часть (эквивалентную 2 г образца) переносят в круглодонную колбу, куда добавляют 10 см³ деионизованной воды. Далее проводят очистку экстракта по п. 9.2.

9.1.2* Семена. Образец размолотых семян массой 10 г помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 см³, добавляют 70 см³ ацетонитрила и помещают на аппарат для встряхивания на 1 час. Суспензию фильтруют под вакуумом на воронке Бюхнера через бумажный фильтр в колбу вместимостью 250 см³. Осадок на фильтре промывают 30 см³ ацетонитрила. Экстракт и промывную жидкость переносят в химический стакан, перемешивают, измеряют объем раствора и 1/5 его часть (эквивалентную 2 г образца) переносят в круглодонную колбу, куда добавляют 20 см³ деионизованной воды. Дальнейшую очистку экстракта проводят по п. 9.2.

9.1.3. Масло. К образцу масла массой 5 г, помещенного в плоскодонную колбу вместимостью 250 см³, добавляют 50 см³ ацетонитрила и колбу помещают на встряхиватель на 30 мин. Верхний ацетонитрильный слой декантируют в круглодонную колбу вместимостью 100 см³ через слой ваты, помещенной в конусную воронку. К оставшемуся в колбе маслу приливают 20 см³ ацетонитрила и операцию экстракции повторяют. После декантации ацетонитрильного слоя вату промывают 10 см³ ацетонитрила, которые объединяют с фильтратом.

МУК 4.1.2334-08

Объединенную ацетонитрильную фазу, пропущенную через вату, переносят в химический стакан, перемешивают, измеряют объем раствора и 2/5 его части (эквивалентные 2 г образца) переносят в плоскодонную колбу вместимостью 100 см³. Раствор помещают в морозильник холодильника на 3 часа и затем фильтруют через бумажный фильтр в круглодонную колбу вместимостью 100 см³. К фильтрату добавляют 20 см³ деионизованной воды. Дальнейшую очистку экстракта проводят по п.9.2.

9,2, Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей

Экстракты, полученные по пп. 9Л. 1., 9.1.2. и 9.1.3. и помещенные в круглодонные колбы, упаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка (8-10 см³) при температуре не выше 40°С. К водному остатку прибавляют 15 см³ насыщенного раствора хлорида натрия, перемешивают и переносят в делительную воронку вместимостью 100 см³. В воронку вносят 20 см³ гексана, интенсивно встряхивают в течение 2-х мин. После разделения фаз верхний органический слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу вместимостью 100 см³. Операцию экстракции водной фазы повторяют еще дважды, используя по 20 см³ гексана. Объединенную органическую фазу, пропущенную через слой сульфата натрия, упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 30°С и подвергают дополнительной очистке на колонке по п.9.3.

9,3, Очистка экстракта на колонке с оксидом алюминия

Сухой остаток в круглодонной колбе, полученный по п. 9.2., растворяют в 3 см³ гексана, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин. Раствор наносят на колонку, подготовленную по п. 7.2. Колбу обмывают 3 см³ гексана, которые также наносят на колонку. Промывают колонку 45 см³ гексана со скоростью 1 -2 капли в сек., элюат отбрасывают. Пропиконазол элюируют с колонки 50 см³ смеси гексан-ацетон (9:1, по объему), собирая элюат непосредственно в круглодонную колбу вместимостью 100 см³. Раствор упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе при температуре 30°С.

МУК 4.1 .2334-08

9.4. Очистка экстракта на концентрирующем патроне Диапак-диол

Сухой остаток в круглодонной колбе, полученный по разде-лу 9.3., растворяют при помощи ультразвуковой ванны в 2 см³ гексана и переносят в подготовленный концентрирующий патрон Диапак-диол (п. 7.2.). Патрон промывают 5 см³ смеси гексан-ацетон (9:1, по объему), элюат отбрасывают. Пропиконазол элюируют 5 см³ смеси гексан-ацетон (8:2, по объему) в круглодонную колбу вместимостью 25 см³. Раствор упаривают досуха на роторном испарителе при температуре 30°С. Остаток в колбе растворяют в 5 см³ гексана, помещая в ультразвуковую ванну на 1 мин., и раствор анализируют на содержание пропиконазол а по п. 9.5.

9.5. Условия хроматографирования

Газовый хроматограф «Кристалл 2000М» с электронозахватным детектором с пределом детектирования по линдану не выше 8,2x10'¹ г/см³.

Колонка капиллярная кварцевая ZB-1, длина 25 м, внутренний диаметр 0,32 мм, толщина пленки 0,5 мкм, неподвижная фаза SE-30, фирма Phenomenex (США)

Температура термостата испарителя - 260°С, детектора - 300°С, термостата колонки (программа: от 220°С (2 мин.) со скоростью 2°/мин до 230°С (6 мин.); со скоростью 10°/мин до 260°С (5 мин.).

Расход газов: газа-носителя (азот) - 2,8 см³/мин; поддувочного газа через детектор - 4,2 см³/мин

Деление потока: 1:1,5

Время удерживания характерных пиков пропиконазола:

Пропиконазола 1-7 мин.ЗО сек.

Пропиконазола 2-7 мин. 45 сек.

Объем вводимой пробы: 1 мм³.

Линейный диапазон детектирования: 0,02 - 0,5 нг.

Каждую анализируемую пробу вводят 3 раза и вычисляют среднюю сумму площадей характерных пиков пропиконазола.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,2 мкг/см³, разбавляют гексаном. ²

МУК 4.1.2334-08

10. Обработка результатов анализа

Для обработки результатов хроматографического анализа используется программа сбора и обработки хроматографической информации «Хроматэк Аналитик», версия 1.20.

Альтернативная обработка результатов.

Содержание пропиконазола рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

Hi х А х V

X =-------------,    где

Н₀хш

X - содержание пропиконазола в пробе, мг/кг;

Н\ - сумма площадей пиков образца, мВ;

Н₀ — сумма площадей пиков стандарта, мВ;

А - концентрация стандартного раствора пропиконазола, мкг/см³; V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

ш - масса анализируемой части образца (г) / для зеленой массы, семян и масла - 2 г/.

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

где Х|, Х2- результаты параллельных определений, мг/кг;

г - значение предела повторяемости (таблица 1), при этом

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ. ¹

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

(^±А) мг/кг при вероятности Р= G.95,

где X- среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

Д- граница абсолютной погрешности, мг/кг;

Д =6 *Х/ 100,

5 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %.

В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание вещества в пробе «менее нижней границы определения»

< 0,05 мг/кг для рапса (семена, масло и зеленая масса) *

* -0,05 мг/кг — предел обнаружения для рапса.

13. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 « Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

13.1.    Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2.    Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.

Величина добавки С_а должна удовлетворять условию:

где ± Д^рД^р) - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию

16

МУК 4.1.2334-08

компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно) мг/кг, при этом:

А_л =±0,84 А, где А- граница абсолютной погрешности, мг/кг;

А =6 ♦Х/100,

6 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %. Результат контроля процедуры К_к рассчитывают по формуле:

КгГ-Х-С_Л)

где X, Х_уС_д~ среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п.11) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг;

Норматив контроля К рассчитывают по формуле

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К*) с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

IkJsk,

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R)

(3)

17

МУК 4.1.2334-08

где Хь Х₂ ~ результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/кг;

R-предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %.

18

ББК 51.21 0-60

0-60 Определение остаточных количеств пропиконазола в семенах, масле и зеленой массе рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии. Методические указания. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009. - 18 с.

1. Разработаны: ГНУ Всероссийским научно-исследовательским институтом фитопатологии (Л.В. Дубовая, А.М. Макеев).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения (протокол от 6 декабря 2007 г. № 3).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Оншценко 15 февраля 2008 г.

4.    Введены в действие с 10 апреля 2008 г.

5.    Введены впервые.

ББК 51.21

Формат 60x88/16    Печ.    л.    1,25.

Тираж 200 экз.

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., д. 18/20.

Тиражировано отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а.

Отделение реализации, тел ./факс 952-50-89

© Роспотребнадзор, 2009 © Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009

МУК 4.1.2334-08

Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный Государственный санитарный врач Российской Федерации

15 февраля 2008 г.

Дата введения: 10 апреля 2008 г.

4.1. Методы контроля. Химические факторы

Определение остаточных количеств пропиконазола в семенах, масле и зеленой массе рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2334-08

Настоящие методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной хроматографии для определения массовой концентрации пропиконазола в семенах, масле и зеленой массе рапса в диапазоне 0,05-0,5 мг/кг.

Название вещества по ИСО: Пропиконазол Название вещества по ИЮПАК: (±)-1-[2-(2,4-дихлорфенил)-4-пропил-1,3-диоксолан-2-илметил]-1Н-1,2,4-триазол (смесь 2 стереоизомеров в непостоянном соотношении)

C15H17CI2N3O2 Мол. масса: 342,2

3

МУК 4.1.2334-08

Желтоватая вязкая жидкость без запаха. Температура кипения: 120°С (1,9 Па); > 250°С (101 кПа). Давление паров при 20°С: 2,7 х 10'² мПа, Коэффициент распределения н-октанол/вода: K₀w log Р = 3,72 (pH 6,6,25°С). Растворимость (г/дм³) при 20°С: гексан - 47, вода - 0,1; полностью смешивается с этанолом, ацетоном, толуолом и н-октанолом.

Вещество устойчиво к высокой температуре и гидролизу.

Пропиконазол медленно разрушается в почве (DT₅o⁼40-70 дней) и слабо передвигается по почвенному профилю.

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность (LD₅₀) для крыс и мышей -1500 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD₅₀) для крыс - > 4000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC50) для крыс - > 5800 мг/м³ воздуха. LC₅₀ для рыб 5,7 мг/дм³ (96 час.).

Фунгицид нетоксичен для птиц, пчел, дождевых червей и водорослей.

Рекомендуемый норматив для пропиконазола в семенах и масле рапса-0,1 мг/кг.

Область применения препарата

Пропиконазол - системный фунгицид широкого спектра действия с защитным и искореняющим эффектом. Механизм его действия связан с подавлением биосинтеза эргостерина. Эффективен против возбудителей мучнистой росы, ржавчины, септориоза, церкоспорел-леза, ринхоспориоза, гельминтоспориозной пятнистости, ризоктонио-за, монилиниоза на зерновых злаках, кукурузе, рисе, арахисе и косточковых плодовых. Используется для обработки вегетирующих растений.

Применяется в России в качестве фунгицида системного действия путем двукратной обработки вегетирующих растений зерновых злаков и сахарной свеклы с нормой расхода до 0,125 кг д.в./га.

1. Метрологические характеристики метода

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р=0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

4

МУК 4.1.2334-08

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для полного диапазона концентраций (п=20) приведены в таблице 2.

Таблица 1

Анализируемый объект Диапазон определяемых концентраций, м г/кг Показатель точности (граница относительной погрешности) ±5, % Стандартное отклонение повторяемости Or, % Предел повторяе мости г,% Предел воспроизводимости R, % Семена более ОД до 0,5 25 2,6 7,3 11,3 от 0,05 до ОД вкл. 50 2,8 7,8 12 Д Масло более ОД до 0,5 25 2,5 7,0 10,8 от 0,05 до ОД вкл. 50 2,7 7,6 И,7 Зеленая масса более ОД до 0,5 25 1,9 5,3 8 Л от 0,05 до ОД вкл. 50 2.5 7.0 10,8

Таблица 2 Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для п=20, Р=0,95

Анализи руемый объект Метрологические параметры, Р = 0,95, п = 20 Предел обнару жения, мг/кг Диапазон определяемых КОН- ; центраций, мг/кг Среднее значение определения, % Стандарт ное откло нение, S, % Относительное отклонение DS, % Довери тельный интервал среднего, % Семена 0,05 0,05 - 0,5 83,3 2,9 1,3 ±2,7 Масло 0,05 0,05-0,5 82,7 3,3 1,5 ±3,0 Зеленая масса 0,05 0,05 - 0,5 83,5 2,7 1,2 ±2,6

5

МУК 4.1.2334-08

2. Метод измерений

Методика основана на определении вещества с помощью капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с электронозахватным детектором (ЭЗД). Контроль пропиконазола в матрицах осуществляется по содержанию вещества после экстракции его из зеленой массы водным ацетоном, из семян и масла ацетонитрилом, очистки экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, а также на колонке с оксидом алюминия и концентрирующем патроне Диапак-диол.

Идентификация проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Избирательность обеспечивается путем подбора капиллярной колонки и условий программирования температуры.

3, Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерений Газовый хроматограф «Кристалл 2000М» с ЭЗД (СКБ «Хроматэк», Россия)

Весы аналитические ВЛА-200

Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,036 г Колбы мерные вместимостью 2-100-2, 2-1000-2 Меры массы

Пипетки градуированные 2*го класса точности вместимостью 1,0,2,0, 5,0; 10 см¹ Пробирки градуированные с пришлифованной пробкой вместимостью 5 см³

Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 25, 50,100, 500 и 1000 см³

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

6

МУК 4.1 2334-08

5.2. Реактивы

Пропиконазол, аналитический стандарт фирмы Сингента (Швейцария) с содержа

нием д в 99,5%

Ацетон, чда    ГОСТ 2603-79

Ацетонитрил, хч    ТУ 6-09-3534-87

Вода бидистиллированная или деионизованная    ГОСТ 6702

н-Гексан, хч    ТУ 6-09-3375

Натрий сернокислый, безводный,    хч    ГОСТ 4166

Натрий хлористый, хч    ГОСТ 4233

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

5.5. Вспомогательные устройства^ материалы Азат газообразный (баллон), осч    ГОСТ    9293

Аппарат для встряхивания типа АВУ-бс    ТУ    64-1-2851-78

Ванна ультразвуковая, модель D-50, фирма Branson lnstr. Со (США)

Вата медицинская Воронка Бюхнера

Воронки делительные вместимостью 100 и 250 см³ Воронки конусные диаметром 30-37 и 60 мм Дефлегматор елочный Колба Бунзена

Колбы плоскодонные вместимостью 250 см³ Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 25 и 100 см³ ГОСТ 9737 Колонка кварцевая капиллярная ZB-1, длиной 25 м, внутренним диаметром 0,32 мм, толщина пленки 0,5 мкм, неподвижная фаза SE-30, фирма Phenomenex (США) или аналогичная

Колонка хроматографическая стеклянная, длиной 25 см, ГОСТ 9737 внутренним диаметром 8-10 мм

Мельница электрическая лабораторная    ТУ 46-22-236

Насос водоструйный вакуумный    ГОСТ 10696

Оксид алюминия, нейтральный (Мерк, Г ер мания)

И степени активности

7

МУК 4.1.2334-08

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или    ТУ    25-11-917

ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi (Швейцария)

Стаканы химические вместимостью 100 и 500 см³ Стекловата

Установка для перегонки растворителей

Фильтры бумажные «красная лента», обеззоленные    ТУ 6-09-2678-77

или фильтры из хроматографической бумаги Ватман ЗММ Шприц для ввода образцов для газового хроматографа вместимостью 1-10 мм³ (Hamilton, США)

Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313- 03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004,

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя с опытом работы на газовом хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

МУК 4.1.2334-08

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20+5)°С и относительной влажности не более 80%.

•    выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, подготовка колонки с оксидом алюминия и концентрирующего патрона Диапак-диол.

7.1. Очистка органических растворителей

7.1.1.    Очистка н-гексана

Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до прекращения окрашивания последней в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

7.1.2.    Очистка ацетона

Ацетон перегоняют над перманганатом калия и поташом (на 1 л ацетона 10 г КМп0₄ и 2 г К₂С0₃).

7,2. Подготовка колонки с оксидом алюминия и концентрирующего патрона Диапак-диол для очистки экстракта

Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см и внутренним диаметром 8-10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 7 г оксида алюминия нейтрального II степени активности в 15 см³ гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку последовательно промывают 20 см³ смеси гексан-ацетон (9:1, по объему) и 15 см³ гексана со скоростью 1-2 капли в сек., после чего она готова к работе.

9

1

2