Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование Российской Федерации

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ СЫРЬЕ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Сборник методических указаний МУК 4.1.2138-4.1.2151—06

Издание официальное

Москва. 2009

ББК 51.21 037

037 Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах* сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник методических указаний.—М: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009.—146с.

1.    Сборник подготовлен Федеральным научным центром гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана (академик РАМН, проф. В. Н. Ракитский, проф. Т. В. Юдина); при участии специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Разработчики методов указаны в каждом из них.

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

3.    Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г. Г. Онищенко.

4.    Введены впервые.

ББК 51.21

Формат 60x88/16    Печ. л.    9,25

Тираж 100 экз.

Тиражировано отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, тел ./факс 952-50-89

Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 0,1 мкг/см³, разбавляют гексаном (не более чем в 50 раз),

7.5. Приготовление фильтров для отбора проб воздуха

Из пенополиуретана вырезают фильтр толщиной 2 -2,5 мм, диаметром 48-50 мм, соответствующий внутреннему диаметру фильтродержателя. Диаметр фильтра «синяя лента» также должен соответствовать внутреннему диаметру фильтродержателя.

Фильтры из пенополиуретана и бумаги последовательно по три раза промывают на воронке Бюхнера сначала этанолом, затем ацетоном порциями по 25-30 см³, сушат с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

7,6* Отбор проб

Отбор проб проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 17.2.4.02-81 ОПА «Общие требования к методам определения загрязняющих веществ в воздухе населенных мест».

Воздух с объемным расходом 5 дм³/мин аспирируют через последовательно соединенные бумажный фильтр «синяя лента» и фильтр из пенополиуретана, помещенные в фильтродержатель.

Для измерения концентрации 2,4-Д на уровне 0,8 ПДК атмосферного воздуха необходимо отобрать 125 дм³ воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при +4-б°С - 30 дней.

8. Выполнение измерений

Экспонированные фильтры («синяя лента» + пенополиуретан) переносят в химический стакан вместимостью 400 см³, заливают 30 см³ смеси этанол-вода (9:1, по объему), стакан закрывают пластинкой из фторопласта и помещают на встряхиватель на 10 минут. Растворитель сливают в грушевидную колбу вместимостью 100 см³, фильтры еще дважды обрабатывают новыми порциями по 15 см³ смеси этанол-вода (9:1, по объему), выдерживая на встряхивателе по 5 минут.

Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 45°С досуха. В колбу с сухим остатком вносят 2 см³ 2% раствора серной кислоты в н-бутаноле, плотно закрывают пробкой, укрепляемой фиксатором. Помещают в термостат, нагретый до 100°С, выдерживают 1 час. Далее колбу охлаждают до комнатной температуры, вносят 5 см³ гексана и 20-25 см³

/Г

дистиллированной воды. Смесь интенсивно встряхивают. С помощью пипетки отбирают 2,5 см³ верхнего гексанового слоя, переносят в мерную пробирку вместимостью 5-10 см³, растворитель отдувают потоком теплого воздуха до объема 0,5 см³, анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.4.1.

Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию 2,4-Д в хроматографируемом растворе.

Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированных фильтров.

9. Обработка результатов измерений

Массовую концентрацию 2,4-Д в пробе атмосферного воздуха X, мг/м³, рассчитывают по формуле:

Х« С* К* W/V₀, где С - концентрация 2,4-Д в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³:

К = 2 (коэффициент, учитывающий часть экстракта, взятый для анализа);

Vo - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к нормальным условиям (давление 760 мм рт.ст., температура 0° С)

Vo- 0,357    Ш/(273+Т),

где Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), град.С,

Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт.ст. и-расход воздуха при отборе пробы, дм³/мин, t - длительность отбора пробы, мин.

Примечание: Идентификация и расчет концентрации 2,4-Д в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.

а

10. Оформление результатов измерений За результат анализа (X) принимается среднее арифметическое результатов двух параллельных определений Х| и Х2 (X « (Х| + Хг)/2), расхождение между которыми не превышает значений норматива оперативного контроля сходимости (d):

lx, -Xj|sd.

d = d mi * X/100, мг/м\ где d -норматив оперативного контроля сходимости, мг/м³;

d отк. - норматив оперативного контроля сходимости, % (равен 10%). Результат количественного анализа представляют в виде:

• результат анализа X (мг/м³), характеристика погрешности 5, % (равна 25%), Р * 0,95 или Х± Л мг/м³, Р “ 0,95, где Л - абсолютная погрешность

Л 6-х    .    з

Д — .мг/м

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание 2,4-Д в пробе атмосферного воздуха - менее 0,00008 мг/м³»*

* - 0,00008 мг/м³ - предел обнаружения при отборе 125 дм³ воздуха.

П. Контроль погрешности измерений Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1*6.2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

12. Разработчики

Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Горячева JI.B. (ФГУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана Роспотребнадзора»).

/з

Содержание

МУК 4.1.2138-06.............................................................................................4

2.    Методические указания индоксакарба в воздухе рабочей зоны методом

капиллярной газожидкостной хроматографии МУК 4.1.2139-06..........................................14

3.    Методические указания по определению остаточных количеств бромадиолона в

воде методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2140-06...........23

4.    Методические указания по измерению концентраций манкоцеба в атмосферном

методом капиллярной газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2142-06....................45

6.    Методические указания по измерению концентраций МЦПА в атмосферном

воздухе населенных мест методом капиллярной газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2143-06........................................................................................ 56

7.    Газохроматогрофическое определение 1 -метоксипропан-2-ол ацетата в атмосферном

воздухе. МУК 4.1. 2144-06................................................................................65

8.    Фотометрическое определение натрия перкарбоната в атмосферном воздухе.

МУК 4,1.2145-06...........................................................................................77

9.    Методические указания по газохроматографическому определению концентраций

1,1 диметилгидразина в почве, МУК 4.1.2146-06...,...............................................85

10.    Методические указания по измерению концентраций хлорсульфурона

в атмосферном воздухе населенных мест методом газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2147-06...........................................................................................94

11.    Методические указания по измерению концентраций проквиназида

в воздухе рабочей зоны методом капиллярной газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1. 2148-06..........................................................................................106

12.    Методические указания по определению остаточных количеств пропаргита в воде

методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2149-06...................................114

13.    Методические указания по измерению концентраций цимоксанила в воздухе рабочей зоны, смывах с кожных покровов операторов и в атмосферном воздухе населенных мест методом капиллярной газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2150-06...........................................................................................126

14.    Методические указания по измерению концентраций метомила в воздухе рабочей

зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2151-06.......138

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по измерению концентраций 2,4-Д в атмосферном воздухе населенных мест методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Настоящие методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной хроматографии для определения в атмосферном воздухе массовой концентрации 2,4-Д в диапазоне 0,00008- 0,0008 мг/м³.

2.4- Д - действующее вещество препарата ЗЕРНОМАКС, КЭ (500 г/л 2,4-Д кислоты в виде сложного 2-этклгексилового эфира), производитель ЗАО Фирма «Август»

2.4- Д

(2,4-дихлорфенокси)уксусная кислота (ИЮПАК)

С₈Н₆С1₂0₃ Мол. масса 221,0

Бесцветное кристаллическое вещество со слабым фенольным запахом. Температура плавления: 140,5°С. Давление паров: 1,86*10’² мПа (25°С). Плотность 0,7-0,8. Коэффициент распределения окганол/вода: KowlogP = 2,58-2,83 (pH 1); 0,04-0,33 (pH 5). Растворимость в воде (мг/дм³, 25°С): 311 (pH 1), 20 031 (pH 5), 23 180 (pH 7), 34 196 (pH 9). Растворимость в органических растворителях (г/кг, 20°С): этанол -1250, диэтиловый эфир - 243, гептан - 1.1, толуол - 6.7, ксилол - 5.8; окганол - 120 г/дм³ (25°С). 2,4-Д является сильной кислотой, образует водорастворимые соли со щелочными металлами и аминами. При нормальных условиях вещество стабильно к

окислению и гидролизу, устойчиво в кислой и щелочной средах. Константа кислотности рКа - 2,73. Устойчивость к фотолизу: DT50 - 7.5 дня. Этилгексиловый эфир 2,4-Д быстро гидролизуется в почве, воде, а также в присутствии влаги с образованием 2,4-Д-кислоты: DT50 - менее 1 дня.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль и пары.

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс - 639-764 мг/кг, для мышей - 138 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD 50) для крыс * > 1600 мг/кг; кроликов - > 2400 мг/кг, острая ингаляционная токсичность (LK30) для крыс - >1,79 мг/дм³ воздуха (24 часа).

Область применения препарата

2,4-Д - селективный системный гербицид, эффективно подавляющий рост и развитие большинства двудольных широколистных сорных растений.

В составе препарата ЗЕРНОМАКС, КЭ (500 г/л) 2,4-Д кислота содержится в виде сложного 2-этилгексилового эфира. Препарат рекомендуется к применению в качестве гербицида против однолетних и некоторых многолетних двудольных сорняков на зерновых культурах (пшеница яровая и озимая, ячмень).

ОБУВ 2,4-Д в атмосферном воздухе населенных мест - 0,0001 мг/м³.

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей ± 25%, при доверительной вероятности 0,95.

2. Метод измерения

Измерения концентраций 2,4-Д выполняют методом капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с детектором электронного захвата ионов (ДЭЗ) после дериватизации кислоты в бутиловый эфир.

Концентрирование 2,4-Д из воздуха осуществляют на последовательно соединенные бумажный фильтр «синяя лента» и фильтр из пенополиуретана, эхетракцию вещества с фильтров проводят смесью этанол-вода. Метод включает определение 2,4-Д, присутствующей в воздухе в виде свободной кислоты и ее солей.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 0,01 нг, средняя полнота извлечения 84,7%.

Определению не мешают компоненты препаративной формы, а также гербициды, используемые одновременного с 2,4-Д - дикамба и хлорсульфурон.

Г

3. Средства измерений! вспомогательные устройства, реактивы и материалы 3*1. Средства измерений

Газовый хроматограф «Кристалл-2000М», ТУ 9443-001-12908609-95 снабженный детектором электронного захвата ионов Номер Госреестра (ДЭЗ) с пределом детектирования по линдану 1,4 х 10 *14 г/с. 14516-95 Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 24104 Меры массы ГОСТ 7328 Микрошприц типаМШ-ЮМ, вместимостью 10 мм3 Пробоотборное устройство ОП-442ТЦ (ЗАО “ОПТЭК", г. Санкт-Петербург) ТУ 2.833.105 Барометр-анероид М-67 ТУ 2504-1797-75 Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления 1°С, пределы измерения 0 - 55°С ТУ215-73Е Колбы мерные вместимостью 50 и 100 см3 ГОСТ 1770 Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 см3 ГОСТ 29227 Пробирки градуированные на шлифе вместимостью 5*10 см3 ГОСТ 1770 Цилиндры мерные вместимостью 25,50 и 100 см1 ГОСТ 1770 Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками. 3.2. Реактивы 2,4-Д, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества 99,1% (НИИХСЗР, НПК «Блок-1») ГСО 7652-99 Азот особой чистоты, из баллона ГОСТ 9293 Ацетон, осч ГОСТ 2306 Бария оксид, хч ГОСТ н-Бутанол, хч ГОСТ 6006 Вода дистиллированная ГОСТ 6709 я-Гексан,хч ТУ-б-09-3375 Кислота серная концентрированная, хч € ГОСТ 4204

ГОСТ Р 51652-2000 или ГОСТ 18300

Эфир диэтиловый (для наркоза)    Фармакопея СССР

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

3,3. Вспомогательные устройства, материалы

Аппарат для встряхивания типа АВУ-бс Баня водяная

Бумажные фильтры "синяя лента", обеззолеиные Вакуумный эксикатор Вата хлопковая Воронка Бюхнера

Воронки конусные диаметром 30-37 и 60 мм Груша резиновая Колба Бунзена

Колбы плоскодонные вместимостью 100 и 400 - 500 см³ Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 50,100 см³ Насос водоструйный

Пенополиуртан пористый ППУ ПЕНОР-301

Ротационный вакуумный испаритель фирмы Buchi,

Швейцария

Стаканы химические, вместимостью 100,400 см³    ГОСТ    25336

Стекловата

Стеклянные палочки

Установка для перегонки растворителей

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками,

4. Требования безопасности

4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по

¥

элекгробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12,1.019, а также требования» изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе на должно превышать норм» установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно-допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории,

б. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20±5)°С и относительной влажности не более 80%.

•    выполнение измерений на газовом хромато!рафе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции:    очистка

органических растворителей (при необходимости), приготовление бутилирующей смеси, градуировочных растворов, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

7,1, Очистка органических растворителей

7.1.1, Очистка и- бутанола

н-Бутанол перегоняют с дефлегматором над небольшим количеством оксида бария. Используют свежеперегнанным.

7. А 2. Очистка н-гексана

Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты, до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

7.2. Приготовление 2% раствора серной кислоты в н-бутаноле

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 50-60 см³ н-бутанола, осторожно вносят 2 см³ концентрированной серной кислоты, доводят н-бунанолом до метки, перемешивают. Бугилирующую смесь хранят под тягой в течение месяца.

7.3, Приготовление градуировочных растворов и раствора внесения

7.3.1.    Исходный раствор 2,4-Д (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,0100 г 2,4-Д, доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике при 4-б°С в течение 3-х месяцев.

7.3.2. Раствор №1 2,4-Д (концентрация 10 мкг/см³) В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного раствора 2,4-Д с концентрацией 100 мг/см³ (п. 7.3.1.), разбавляют ацетоном до метки.

Градуировочный раствор № 1 хранят в холодильнике при температуре 4-6°С в течение месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «вксссно-иайдено».

7.3.3.    Исходный раствор бутилового эфира 2,4-Д для градуировки

(концентрация 2,4-Д    1    мкг/см³).    В круглодопную колбу вместимостью 50 см³

помещают 1 см³ раствора № 1 с концентрацией 2,4-Д 10 мкг/см³, отдувают растворитель потоком теплого воздуха (помещая колбу на слабо подогретую водяную баню). В колбу с сухим остатком вносят 1 см³ 2%-иого раствора серной кислоты в н-бунаноле, плотно закрывают пробкой, укрепляемой фиксатором. Помещают в термостат, нагретый до 100°С, выдерживают 1 час. Далее колбу охлаждают до комнатной температуры, вносят 10 см³ гексана и 20-25 см³ дистиллированной воды. Смесь интенсивно встряхивают. После полного разделения фаз верхнюю гексановую фракцию отделяют, отбирая с помощью пипетки. Исходный раствор бутилового эфира

2,4-Д с концентрацией 1 мкг/см³ хранится в холодильнике не более 10-ти дней.

Растворы № 1-4 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора.

7.3.4.    Рабочие    растворы    №    2    -    5    бутилового    эфира    2.4-Д    для

градуировки (концентрация 2,4-Д 0.01 -0.1 мкг/см³). В 4 мерные колбы вместимостью 50 см³ помещают по 0,5; 1; 2,5 и 5 см³ исходного раствора бутилового эфира 2,4-Д с концентрацией 2,4-Д 1 мкг/см³ (п. 7.3.3.), доводят до метки гексаном, тщательно

перемешивают, получают рабочие растворы №Ха 2 - 5 с концентрацией 2,4-Д 0,01; 0,02; 0,05 и 0,1 мкг/см³, соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике в течение 10-ти дней.

7.4. Установление градуировочной характеристики Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мВЧек) от концентрации 2,4-Д в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки №№ 2-5.

В испаритель хроматографа вводят по 2 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют по п.7.4.1. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площадь пика действующего вещества.

Градуировочный график проверяют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов. Если значения площадей отличаются более чем на 10% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки.

7.4.1. Условия хроматографирования Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

Хроматограф газовый «Кристалл-2000М» с детектором электронного захвата

ионов.

Колонка капиллярная DB-5, длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, толщина пленки сорбента 0,25 мкм Температура детектора: 320°С испарителя: 230°С

Температура термостата колонки программированная. Начальная температура -200°С, выдержка 1 мин, нагрев колонки со скоростью 7,5 град./мин до температуры 240°С. Время анализа 15 мин.

Скорость газа 1 (азот): 30,5 см/сек, давление 120 кПа, поток 0,94 см³/мин,

Газ (2): деление потока 1 : 6; сброс 5,7 см³/мин

Продувка: температура колонки 280°С, время 5 мин, газ (1): 120 кПа;

газ (2): 5 см³/мин

Хроматографируемый объем: 2 мм³

Ориентировочное время удерживания бутилового эфира 2,4-Д: 5,13 мин Линейный диапазон детектирования: 0,02 ~ 0,2 нг

/о