Государственное санитарно-эпндсмно.кн ичсское нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение вредных веществ в биологических средах

Сборник методических указаний МУК 4.1.2102—4.1.2116—06

Издание официальное

Москва • 2008

Федеральная сдужба по напору в сфере защиты нрав ноз ребшедей н G.iaioiio.ivmiih че.ювека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение вредных веществ в биологических средах

Сборник методических указаний МУК 4.1.2102—4.1.21*16—06

7.3. Приготовление растворов

7.3.1.    Хромовая смесь. В термостойкий стакан вместимостью 2 дм³ насыпают 50 г хромовокислого калия, осторожно приливают по палочке частями, тщательно перемешивая. 1 дм³ концентрированной серной кислоты.

7.3.2.    Элюент для хроматографии. 60 см³ ацетонитрила смешивают с 40 см³ дистиллированной воды. Подвижную фазу фильтруют через воронку Шотта (пор 16) и дегазируют барботированисм гелия в течение 5 мин со скоростью 50—60 см/мин. Затем добавляют 2.5 % уксусной кислоты и 1 %диэтиламина (объемных %).

7.3.3.    Хлористоводородная кислота, 2 моль дм³. В мерную колбу вместимостью 1 дм³, наполненную до половины объема дистиллированной водой, прибавляют 61.0 см³ концентрированной хлористоводородной кислоты (плотность 1,19 г/см³), доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.

7.3.4.    2,4-Динитрофенилгидразин, 0,2 %-й раствор в 2М хлористоводородной кислоте. В мерную колбу на 100 см³ вносят 0.2 г 2.4-динит-рофенилгидразина и доводят до метки 2М раствором хлористоводородной кислоты.

7.3.5.    Исходный раствор альдегидов для калибровки (раствор А). В мерную колбу объемом 500 см³, содержащую дистиллированную воду. в которую предварительно добавляют 5 см³ 0.2 %-го раствора

2.4-динитрофснилгидразина. переносят 4 см³ ГСО формальдегида с концентрацией 1,0 мг/см³ (4,0 мг), 5.0 мм³ (3,9 мг) ацетальдегида. 5.0 мм³ (4,03 мг) пропионового альдегида. 5.0 мм³ (4.08 мг) масляного альдегида и доводят водой до метки. Стандартные растворы готовят с предварительным охлаждением альдегидов и дистиллированной воды. Срок хранения - 8 ч. Содержание альдегидов в растворе А составляет (с учетом плотности и содержания основного вещества): формальдегида -

8.0    мкг/см³; ацетальдегида - 7.8 мкг/см³; пропионового альдегида -

8.1    мкг/см³; масляного альдегида - 8.2 мкг/см³.

Исходный раствор ацетона для калибровки (раствор В). В мерную колбу объемом 200 см³, содержащую дистиллированную воду, в которую предварительно добавляют 5 см³ 0.2 %-го раствора 2.4-динитрофснилгидразина. переносят 5.0 мм³ (3.96 мг) ацетона и доводят водой до метки. Срок хранения раствора -8 ч. Содержание ацетона в растворе В составляет (с учетом плотности и содержания основного вещества) 19.8 мкг/см³.

116

МУК 4.1.2111—06

7.3.6. Получение 2,4-динитрофенилгидразонов формальдегида, ацетальдегида. пропионового и масляного альдегидов и ацетона (используются для идентификации гидра юнов альдегидов и ацетона в анализируемых пробах). Эквимолярные количества 2.4-ДНФГ и анализируемого вещества кипятят в очищенном от альдегидов и кетонов этаноле в течение 1 ч в присутствии каталитических количеств хлористоводородной кислоты. Выпавший в осадок 2.4-динитро<|>снилгидразон соответствующего альдегида (ацетона) отфильтровывают и псрскристаллнзовывают из этанола до постоянной температуры плавления.

7.4. Подготовки хроматографической колонки

Колонку устанавливают на хроматограф и подают элюирующую жидкость, подготовленную в соответствии с п. 7.3.2. со скоростью 100 мм³/мин до установления равновесия колонки, которое определяют по стабильности нулевой линии детектора.

7.5. Установление градуировочной характеристики

7.5.1.    Строят две зависимости площади хроматографического пика от концентрации альдегидов и ацетона в крови в диапазонах 0.001 — 0.010 мкг/см³ и 0.01—0.10 мкг/см³ - для альдегидов. 0.01—0,10 мкг/см³ и 0.1—2.0 мкг/см³ - для ацетона. Градуировочные характеристики устанавливают по пяти сериям растворов для градуировки. Каждую серию, состоящую из пяти растворов, готовят из растворов А и В.

7.5.2.    Для приготовления градуировочных смесей отбирается проба крови объемом нс менее 60 см³. В соответствии с п. 8 проводят анализ пробы крови на содержание альдегидов и ацетона. При наличии анализируемых веществ в холостой пробе вычитают их (|юновое содержание при построении калибровки.

7.5.3.    Градуировочные растворы готовят в мерных колбах объемом 5 см³. Для этого в каждую колбу вносят растворы А и В в соответствии с табл. 1 и 2. прибавляют 0.05 см³ раствора гепарина, доводят объем до метки цельной кровью и перемешивают. Анализируют свежеприготовленные растворы.

117

Таблица 1 Растворы для установления градуировочной характеристики при определении в кроки альдегидов в диапазоне концентрации 0,001—0,010 мкг/см3 и ацетона в диапазоне концам раций 0,01—0,10 мкг/см3

11омер раствора 1 2 3 4 5 Объем раствора А, мм* 0,6 1,2 2,5 4,5 6,5 Массовая концагграция формальдепш, мкг/см3 0,001 0,002 0,004 0,007 0,010 Массовая концентрация ацетальдегида, мкг/см3 0,001 0,002 0,004 0,007 0,010 Массовая концешрация нронионового альдегида, мкг/см3 0,001 0,002 0,004 0,007 0,010 Массовая концентрация масляного альдегида, мкг/см3 0,001 0,002 0,004 0,007 0,010 Объем раствора В, мм* 2,5 5,0 10,0 17,5 25,0 Массовая концапрация ацетона, мкг/см* 0,01 0,02 0,04 0,07 0,10

Таблица 2 Растворы для установления градуировочной характеристики при определении в крови альдегидов в диапазоне копнен граций 0,01—0,10 мкг/см3 и ацетона в диапазоне концентраций 0,1—2,0 мкт/см3

I IoMq) раствора 1 2 3 4 5 Объем растора А, мм* 6,0 12,5 25,0 44,0 63,0 Массовая концентрация формальдегида, мкг/см3 0,01 0,02 0,04 0,07 0,10 Массовая конценграция ацетальдегида. мкг/см3 0,01 0,02 0,04 0,07 0,10 Массовая концентрация прошюнового альдегида, кг/с Nr 0,01 0,02 0,04 0,07 0,10 Массовая конценграция масляного аль-дегида, мкг/см3 0,01 0,02 0,04 0,07 0,10 Объем раствора В, nint* 25,0 125,0 250,0 375 500 Массовая конценграция ацетона, мкг/cNf* 0,10 0,5 1,0 1,48 1,98

В делительную воронку помешают 2,0 см³ градуировочного раствора. разводят дистиллированной водой до объема 40 см . добавляют 2.0 см³ 0.2 %-го раствора 2.4-динитрофенилгидразина в 2М хлористоводородной кислоте. 2 капли концентрированной хлористоводородной кислоты. 5 см³ гексана и экстрагируют 15 мин. После расслоения жидкостей верхний слой (гексановый) переносят в центрифужную пробирку

МУК 4.1.2111—06

с завинчивающейся крышкой и центрифугируют 20 мин со скоростью 1 500 об./мин. затем 2 см³ гексана переносят в бюксу и высушивают в потоке воздуха. Высушенный остаток растворяют в 0.4 см³ элюента и анализируют аликвотную часть (10 мм³) в условиях:

элюент - (ацетонитрил : вода = 60 : 40) + 2.5 % уксусной кислоты + 1 % диэтиламина:

колонка 80 х 2 мм. заполнена Диасорбом Ci₆

2.4- днннтрофснилгидразона пропионового альдегида 5.04 мин;

2.4- динитрофснилгидразона масляного альдегида    7.95 мин.

Градуировочный коэффициент рассчитывают по формуле:

ic,/s,

is 1 = 1

А =-.    где

п

С,- концентрация вещества в градуировочной смеси, мкг/см³;

Si - среднее значение пяти измерений площади пика /'-й концентрации. единицы оптической плотности (е.о.п.);

п - количество градуировочных смесей (п = 5).

7.6. Отбор проб

Отбор проб венозной крови в объеме нс менее 4 см³ проводят в чистую пробирку с притертой пробкой, в которую предварительно добавлено 0.1 см³ раствора гепарина. Срок хранения пробы в холодильнике -2 дня.

8. Выполнение измерений

Выполняют два параллельных измерения образца крови. В делительную вороню помещают 2.0 см³ крови, разбавляют дистиллированной водой до объема 40 см³, добавляют по 2.0 см³ 0.2 %-го раствора

2.4-динитрофенилгидразина в 2М хлористоводородной кислоте. 2 капли концентрированной хлористоводородной кислоты. 5 см³ гексана и экстрагируют 15 мин. После отстаивания верхний слой (гексановый) переносят в центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой и центрифугируют 20 мин со скоростью 1 500 об./мин. После расслоения жидкостей 2 см³ гексанового экстракта переносят в бюксу и высушива-

119

ют в потоке воздуха. Высушенный остаток растворяют в 0.4 см³ элюен-та. вводят в хроматограф аликвотную часть (10 мм³) и анализируют в условиях, указанных в п. 7.5.

Идентификацию хроматографических пиков 2.4-динитрофенил-гидразонов формальдегида, ацетальдегида, пропионового и масляного альдегидов и ацетона проводят путем сравнения времен удерживания хроматографических пиков в анализируемой пробе и в растворах

2.4-дннитрофснилгидразонов альдегидов и ацетона, полученных согласно п. 7.3.6.

9. Вычисление результатов измерения

Концентрацию альдегидов и ацетона в крови (мкг/см³) вычисляют по формуле:

X = S_rK. где

Л' - концентрация вещества в анализируемой пробе, мкг/см³;

Sj - площадь пика соответствующего 2.4-днннтрофснилгндразона

альдегида (или ацетона) на хроматограмме, с.о.п.;

К - градуировочный коэффициент.

За результат измерения А' принимают среднее арифметическое значение двух параллельных измерений А'/, Х₂, расхождение между которыми нс должно превышать значения предела повторяемости г_п (табл. 3). Результат измерения представляют в виде (X ± А) мкг/см³, где Д - характеристика погрешности, мкг/см³. при Р = 0.95 равная:

S • X 100

S- относительное значение характеристики погрешности. %.

10. Внутренний контроль качества результатов измерений

Внутренний контроль качества (ВКК) результатов измерений - повторяемость. внутрилабораторная прецизионность (воспроизводимость), точность - осуществляют с целью получения оперативной иш|юрмации о качестве результатов измерений и принятия при необходимости оперативных мер по его повышению в соответствии с нормативным документом МИ 2335—2003 «ГСОЕИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа».

Методика выполнения измерений обеспечивает получение результатов измерений с нормативами, не превышающими значений, приведенных в табл. 3 и 4.

120

МУК 4.1.2111—06

Таблица 3 Значения пределов повторяемости н воспроизводимости при доверите. 11>ной вероятности Р = 0,95

Наименование определяемого компонента и диапа зон измерений, мкг/см3 Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами параллельных определений), Гт % 11редел внутрилабораторной воспроизводимости (относительное значение донускаемо- I о расхождения между двумя результатами измерении, полученными в одной лаборатории, но в разных у словиях), Rx,-% Формальдегид, от 0,001 до 0,100 вкя. 26,9 28,1 Ацетальдегид, от 0,001 до 0,100 вкл. 21,2 24,8 11ронионовый альдегид, от 0,001 до 0,100 вкл. 25,5 27,4 Масляный альдегид, от 0,001 до 0,100 вкл. 25,1 26,2 Ацетон, от 0,01 до 2,000 вкл. 25,6 28,3

Таблица 4 Диапазон измерении, значения показателен точности, повторяемости, воспроизводимости

11аименование определяемого компонента и диапазон измерений, мг/дм3 (мкг/см3) Показатель повторяемости (относительное среднеквадраги-ческое отклонение повторяемости), <7г,% Показатель воспроизводимости (относительное сре;о!еквад-ратическое отклонение воспроизводимости), aR, % I Указатель точности (ipa-ницы относительной по-трешности при вероятности Р - 0,95), ± 6, % Формальдегид, от 0,001 до 2,000 вкл. 11,9 12,7 26,5 Ацетальдегид, от 0,001 до 0,100 вкл. 7,7 10,2 14,2 11ропионовый альдегид, от 0,001 до 0,100 вкл. п,з 13,5 24,3 Масляный альдегид, от 0,001 до 0,100 вкл. 10,8 12,7 23,8 Ацетон, 8,1 10,4 21,7

Определение вредных веществ в биологических средах: Сборник методических указаний.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2008.—183 с.

1.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 11.07.06 №2).

2.    Утверждены и введены в действие Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 9 августа 2006 г.

3.    Введены впервые.

ЬКК 28.072

<    Роспотребнадзор, 2008

<    Федеральный центр iтн ненм и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2008

МУК 4.1.2102-4.1.2116—06

Содержание

Измерение массовой концешрации селена в моче методом атомко-

абсорбционной спектрометрии: МУК 4.1.2102—06............................................4

Определение массовой концентрации ванадия в пробах крови методом атомно-абсорбционной спектрометрии с электротермической

атомизацией: МУК 4.1.2103—06........................................................................14

Определение массовой концентрации меди, магния, кадмия в пробах мочи

методом атомно-абсорбционной спектрометрии: МУК 4.1.2104—06..................25

Определение массовой концентрации марганца, свинца, магния в пробах

волос методом атомно-абсорбционной спектрометрии: МУК 4.1.2105—06 37

Определение массовой концентрации марганца, свинца, магния в пробах крови методом атомно-абсорбционной спектрометрии:

МУК 4.1.2106—06................................................................................................50

Определение массовой концентрации фенола в биосредах (моча)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2107—06....................................63

Определение массовой концентрации фенола в биосредах (кровь)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2108—06....................................74

Определение массовой концентрации 2-хлорфенола в биосредах (моча)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2109—06....................................85

Определение массовой концентрации формальдегида, ацетальдегида, пропионового альдегида, масляного альдегида и ацетона в пробах мочи методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2110—06................................................................................................96

Измерение массовой концентрации формальдегида, ацетальдегида, пропионового альдегида, масляного альдегида и ацетона в пробах крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2111—06..............................................................................................ПО

Определение массовой концентрации хлороформа, 1,2-дихлорэтана, гетрахлормешна. хлорбензола в биосредах (кровь)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2112—06..................................125

Определение массовой концентрации хлороформа, 1,2-дихлорэтана, тетрахлорметана в биосредах (моча) методом газохроматографического

анализа равновесного пара: МУК 4.1.2113—06...............................................137

Определение массовой концентрации хлороформа. 1,2-дихлорэтана, тетрахлорметана, хлорбензола в биосредах (моча)

газохроматографическим методом: МУК 4.1.2114—06..................................149

Определение массовой концепграции хлороформа, 1,2-дихлорэтана,

тетрахлорметана в биосредах (кровь) методом газохромато1рафического

анализа равновесного пара: МУК 4.1.2115—06...............................................162

Определение массовой концентрации стирола в пробах крови методом

высокоэффективной жидкостной хромаго1рафии: МУК 4.1.2116—06.........174

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в с(|)срс защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

9 августа 2006 г.

Дата введения: 1 сентября 2006 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение массовой концентрации формальдегида, ацетальдегида, пропионового альдегида, масляного альдегида и ацетона в пробах крови методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания _МУК    4.1.2111—06_

1. Область применения

Методические указания по определению концентрации алифатических альдегидов и ацетона в крови предназначены для использования Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, лечебными и научными учреждениями, работающими в области профпатологни и экологии человека, научно-исследовательскими институтами, занимающимися вопросами гигиены окружающей среды.

Методические указания разработаны с целью обеспечения контроля за содержанием альдегидов и ацетона в биологических средах у населения, проживающего в районах с повышенным уровнем загрязнения окружающей среды.

Методические указания разработаны в соответствии с требованиями ГОСТ Р 8.563-96 «ГСОЕИ. Методики выполнения измерений». ГОСТ Р 1.5-92 «ГСС. Общие требования к построению, изложению, оформлению и содержанию стандартов».

Методика выполнения измерений обеспечивает определение альдегидов в крови в диапазоне концентраций 0.001—0.100 мкг/см³, ацетона -0.01—2.00 мкг/см³ с погрешностью, нс превышающей 26.5 % - для формальдегида. 14.2 % - для ацетальдегида. 21,7 % - для ацетона. 24.3 % -

МУК 4.1.2111—06

для пропнонового альдегида. 23.8 % - для масляного альдегида, при доверительной вероятности Р = 0.95.

Формальдегид (НСНО)    Молекулярная масса 30,03

Формальдегид (муравьиный альдегид, метаналь) - бесцветный газ с резким раздражающим запахом. Температу ра кипения: -19.2 °С. плотность: 0.8153 г/см³. Хорошо растворим в воде, спиртах и других полярных растворителях. При низких температурах смешивается с неполярными растворителями (толуолом, диэтиловым эфиром, этилацетатом) [5]. Обладает раздражающим, сенсибилизирующим и кожно-резорбтив-ным действием, оказывает гепатотропный эффект, относится к веществам. обусловливающим канцерогенную опасность [3].

Ацетальдегид (СН₃СНО)    Молекулярная масса 44,05

Ацетальдегид (уксусный альдегид) - бесцветная жидкость с удушающим запахом. Температу ра кипения:    20.16    °С.    плотность:

0.778 г/см³. Смешивается во всех соотношениях с водой и большинством органических растворителей [1]. Оказывает наркотическое, раздражающее. мутагенное и канцерогенное действие [3].

Пропионовый альдегид (СН₃СН_:СНО) Молекулярная масса 58.08 Пропноновый альдегид (пропаналь) - бесцветная жидкость с характерным запахом. Температу ра кипения:    48.8    °С.    плотность:

0.8058 г/см³. Растворим в воде, смешивается со многими органическими растворителями [4]. Оказывает наркотическое действие, вызывает изменения со стороны дыхательной системы, паренхиматозных органов, угнетает гемопоэз [3].

Масляный альдегид (СНз(СН₂):СНО) Молекулярная масса 72.11 Масляный альдегид (бутаналь) - бесцветная прозрачная жидкость с резким запахом. Температура кипения: 75.7 °С. плотность: 0.817 г/см³ [2]. Растворим в воде, смешивается со многими органическими растворителями. Оказывает наркотическое, раздражающее и кожно-резорбтив-ное действие [3].

Ацетон (СН3СОСН3)    Молекулярная масса 58.08

Ацетон (диметилкетон) - летучая бесцветная жидкость с характерным запахом. Температура кипения: 56.1 °С. плотность: 0.792 г/см³ [1]. Смешивается с водой и органическими растворителями (эфиром, хлоро-(|юрмом. бензолом, чстырс.х.хлористы.м углеродом). Обладает наркотическим и кожно-резорбтивным действием, угнетает репродуктивную функцию. Преимущественно действует на центральную нервную систему [3].

111

2. Сущность метода

Методика основана на предварительном переводе альдегидов и ацетона в производные 2.4-динитрофенилгидразина. концентрировании продуктов дериватизации из биологического материала экстракцией гексаном, высушивании гексанового экстракта, растворении высушенного остатка в ацетонитриле и анализе на жидкостном хроматографе.

Измерение концентрации альдегидов и ацетона выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием УФ-дстсктора.

Измерению не мешают спирты, органические кислоты, кетоны и другие альдегиды.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, растворы н реактивы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений. вспомогательные устройства, материалы и реактивы:

3.1. Средства и смерен и и

Жидкостный хроматограф «Милихром-4» с

ультрафиолетовым детектором

Весы лабораторные ВЛР-200 аналитические

Гири Г2-210

Термометр стеклянный

Микрошприцы МШ-10

Цилиндр мерный, вместимостью 50 см³

Пипетки градуированные, вместимостью 1.2. 5 см³

Колбы мерные, вместимостью 5. ИХ). 200. 500 и

1 ООО см³

Редуктор кислородный Стандартные образцы:

Формальдегид в воде с концентрацией 1.0 мг/см³

3.2. Вспомогательные устройства

Колонка металлическая длиной 8 см и внутренним диаметром 2 мм. заполненная сорбентом Диасорб С16 зернением 5—6—7 мкм Центрифуга ЦЛМН-Р10-01 -«Элскон» Дистиллятор

Сушильный шкаф ШСС-80 П УХЛ 4.2 Дефлегматор длиной 300 мм

Холодильник шариковый ХШ-300 (6 шар.) Холодильник прямой XПТ-3-300 Воронка Шотта (пор 16)

Воронки делительные, вместимостью 250 см³ Бюксы СВ '%

Пробирки центрифужные пропиленовые с завинчивающейся крышкой, вместимостью 15 см³, пр-во «Sarstedl» (Германия)

Колбы для перегонки круглодонные.

вместимостью 1.0; 2.0 дм³

Стакан термостойкий, вместимостью 2 дм³

3.3. Реактивы Гексан для хроматографии, осч Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, осч

Вода дистиллированная Ацетальдегид, чда Пропионовый альдегид, чда Масляный альдегид, чда Ацетон, осч (чистота не менее 99.75)

2.4- Дннитрофснилгидра шн (2.4-ДНФГ). ч

2.4- Динитрофснилгидра юн формальдегида, перскристаллизованный из очищенного этанола, чистота нс менее 99.0 %

2.4 - Ди н нтро(|)с нил гидра то н а цста л ьде гида. перскристаллизованный из очищенного этанола, чистота нс менее 99.0 %

2.4- Ди н нтрофс н и л гидразо н про п ио но во го альдегида, перскристаллизованный из очищенного этанола, чистота нс менее 99.0 %

2.4- Дннитрофснилгидразон масляного альдегида, перскристаллизованный из очищенного этанола, чистота нс менее 99.0 %

2.4- Ди н итрофс н ил гидразон а цсто на. перскристаллизованный из очищенного этанола, чистота нс менее 99.0 %

Кислота хлористоводородная (плотность 1.19), хч ГОСТ 3118-77 Перманганат калия, ч    ГОСТ 20490-75

МУК 4.1.2111—06

Спирт этиловый, очищенный от альдегидов и кетонов кипячением с 2.4-динитрофенилгидра-зином. перегнанный Калий двухромовокислый, чда Серная кислота Кислота уксусная, хч

Диэтиламин, ч. перегнанный для хроматографии Раствор гепарина в ампулах (5 ООО ед. в 1 см³)

3.4. Материалы

Г слий газообразный

3.5. Растворы

Хромовая смесь Элюент для хроматографии 2 М водный раствор хлористоводородной кислоты 0.2 %-й раствор 2.4-динитрофенилгидразина в 2М хлористоводородной кислоте Исходный раствор альдегидов для калибровки Исходный раствор ацетона для калибровки

Допускается применение других типов средств измерений, вспомогательного оборудования, химреактивов и материалов по метрологическим и техническим характеристикам нс уступающих перечисленным.

4. Требования к безопасности

4.1.    При работе с реактивами соблюдают требования безопасности по ГОСТ 12.1.007-88 и 12.1.005—88.

4.2.    При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79. противопожарной безопасности по ГОСТ

12.1.004—91 и меры безопасности, указанные в «Руководстве по правилам эксплуатации прибора».

5. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений допускаются лица, имеющие квалификацию нс ниже инженера-химика с опытом работы на жидкостном хроматографе.

114

МУК 4.1.2111—06

6. Условия измерений

6.1.    При подготовке проб к анализу и приготовлении растворов соблюдают следующие условия:

•температура воздуха 15—25 °С:

•атмосферное давление 630—800 мм рт. ст.;

• влажность воздуха не более 80 % при температу ре 25 °С.

6.2.    Выполнение измерении на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендуемых технической документацией по прибору.

7. Подготовка к выполнению измерении

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: подготовка посу ды и растворителей, приготовление растворов, подготовка хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики.

7.1. Подготовка посуды

Использу ему ю посу ду замочить на 1 ч в хромовой смеси, промыть проточной водопроводной водой, ополоснуть дистиллированной водой и просу шить при температуре 120 °С.

7.2. Подготовка растворите, /ей

7.2.1.    Очистка ацетонитрила от примесей. В колбу вместимостью 2 дм³ помещают 1 дм³ ацетонитрила и 20 г КМпО,. кипятят с шариковым холодильником в течение 1 ч. затем перегоняют с дефлегматором при температуре 81.6 °С. отбирая фракции по 200 см³. Когда в колбе останется около 200 см³ продукта, перегонку прекращают. Остаток можно смешивать с новой порцией растворителя. Перву ю фракцию (200 см³) отбрасывают, а остальные проверяют на поглощение в УФ-области (оптическая плотность при 200 нм не должна превышать 0.05 о.е./см).

7.2.2.    Очистка диэтила ми на от примесей. В колбу вместимостью 1.0 дм³ помещают 0.5 дм³ диэтиламина и перегоняют с прямым холодильником. Первые и последние порции (50 см³) отбрасывают, оставляют среднюю порцию. Перегнанный раствор должен быть бесцветным.

7.2.3.    Очистка этилового спирта от альдегидов и кетонов. К 1 дм³ 96 %-го спирта добавляют 2 г 2.4-динитро фенил гидразина, 0.5 см³ концентрированной хлористоводородной кислоты и кипятят с шариковым холодильником 1 ч. Перегоняют с дефлегматором в приборе со стеклянными шлифами, отбрасывая первые и последние 100 см³, после этого отгоняют вторично.

115