Федеральная служба по надзору в сфере зашиты нрав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды

Сборник методических указаний

Выпуск 3 Часть 7 МУК 4Л.1412—4.1.1415—03

1

ББК 51.23+51.21 060

060 Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник методических указаний.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2005.— Вып. 3.—Ч. 7.—39 с.

1.    Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф. Ф. Дрисмана (акад. РАМН. проф. В. Н. Ракитский. проф. Т. В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К. А. Тимирязева (проф. В. А. Калинин, к. х. н. А. В. Довгилевич): при участии Дспартамс1гта госсанэпиднадзора Минздрава России (А. II. Веселов). Разработчики методик указаны в конце каждой из них.

2.    Меюдические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.

3.    Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации. 11ервым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, акад. РАМН Г. Г. Онищенко 24 июня 2003 г.

4.    Введены с 30 июня 2003 г.

5.    Введены впервые.

ББК 51.23.+51.21

© Роспотребнадзор, 2005 © Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2005

2

МУК 4.1.1413—03

9. Обработка результатов измерений

Массовую концентрацию клефоксидима в пробе воздуха рабочей зоны X. мг/м . рассчитывают по формуле:

^20

С - концентрация клефоксидима в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному график) в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования.

см³:

V20- объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст.. температура 20 °С)

_ 0386-7»-и/ 273+7’

Т - температу ра воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор).

°С:

Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.; и - расход воздуха при отборе пробы. дм³/мин;

/ - длительность отбора пробы, мин.

Примечание. Идентификация и расчет концентрации клефоксидима в iqx>-бах могут быть проведены с ПОМОЩЬЮ программ обработки хроматографических данных с применением компьютера, включенного в аналитическую систему.

10. Оформление результатов измерений

За результат анализа (X) принимается среднее арифметическое результатов двух параллельных определений X] и Х₂ (X = (Х_} + Х₂)/2). расхождение между которыми нс превышает значений норматива оперативного контроля сходимости (d): I Xi—Х₂1 < d.

d = ^d°^{mH Л} , мг/м³, где 100

d - норматив оперативного контроля сходимости, мг/м³:

d on, - норматив оперативного контроля сходимости. % (равен 15%).

Результат количественного анализа представляют в виде:

21

МУК 4.1.1413—03

•    результат анализа X (мг/м¹). характеристика погрешности ft. %. Р = 0.95 или

•    X ± Л мг/м¹. Р = 0.95. где

Л 8-Х    J

А =-. мг/м¹

100

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

11. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335—95. ГСИ «Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа».

12. Разработчики

Юдина Т. В.. Федорова Н. Е.. Волкова В. Н. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана. г. Мытищи Московской обл.).

22

МУК 4.1.1412—4.1.1415—03

Содержание

Измерение концентраций карбоксина в воздухе рабочей юны и атмосферном воздухе населенных мест методом высокоэф(|)ектнвной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.1412—03.............................................................4

Измерение концентраций клсфоксидима

в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной

жидкостной хроматографии. МУК 4.1.1413—03......................................14

Измерение концентраций кломазона в воздухе рабочей юны методами высокоэффективной •жидкостной и газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.1414—03.......................................................................................23

Определение клома зона в воде хроматографическими

методами. МУК 4.1.1415—03.....................................................................32 ¹

УТВЕРЖДАЮ Главный государственный санитарный врач Российской Федерации,

Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации Г. Г. Онищенко

24 июня 2003 г.

Дата введения: 30 июня 2003 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций клефоксидима в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания _МУК    4.1.1413—03_

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей юны массовой концентрации клефоксидима в диапазоне 0,5— 5.0 мг/м¹.

Клсфоксидим - действующее вещество препарата Аура Плюс. КЭ. (75 г/л), фирма-производитель БАСФ. Германия.

3-гидрокси-5-0/мс-тиан-3-ил)-2-{ 1-|(2ДХ)-2-(4-хлорфснокси)про-поксиимино]-бутил}-циклогекс-2-ен-1-он (IUPAC)

М. м.: 466,0

Бесцветная вязкая жидкость без запаха. Температура кипения 185 °С (с разложением). Давление паров при 20 °С: 0.17 мПа. Раство-

14

МУК 4.1.1413—03

римость в органических растворителях при 20 °С (г/л): ацетон и этила-цстат - более 700: изопропиловый спирт - 330. Растворимость в воде при 20 °С - 5.31 мг/л. Вещество мгновенно разлагается в водных растворах при pH 5. DTso- 140 дней (pH 7). более 300 дней (pH 9).

Константа диссоциации рКа 5.91.

Агрегатное состояние в воздухе рабочей зоны - аэрозоль.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность (LD ») для крыс 5 000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD 5о) для крыс > 4 000 мг/кг. острая ингаляционная токсичность (LK50) для крыс > 5 200 мг/м\

Область применения препарата. Клсфокснди.м - гербицид системного действия из группы ингибиторов биосинтеза жирных кислот, используется для уничтожения однолетних и многолетних паковых сорняков в посевах риса.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) кле-фоксидима в воздухе рабочей зоны - 1 мг/м³.

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, нс превышающей ± 25 %. при доверительной вероятности 0,95.

2. Метод измерения

Измерения концентраций клсфоксидима выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Концентрирование клсфоксидима из воздуха осуществляют на бумажные фильтры «синяя лента», экстракцию с фильтра проводят метанолом.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 2 нг.

Определению нс мешают компоненты препаративной формы.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерений Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны

15

Весы аналитические ВЛА-200	ГОСТ 24104
Пробоотборное устройство ОП-442ТЦ (ЗАО «ОПТЭК». г. Санкт-Петербург) или аспирационное устройство ЭА-1	ТУ 25-11-1414—78
Барометр-анероид М-67 Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2. цена деления 1 °С. пределы измерения	ТУ 2504-1797—75
0—55 °С	ТУ 215—73 Е
Колбы мерные, вместимостью 1(К) и 1 (К)() см3	ГОСТ 1770
Пипетки градуированные 2 класса точности, вместимостью 1,0.2.0, 5.0. 10 см3	ГОСТ 29227
Пробирки градуированные, вместимостью 5 или 10 см3	ГОСТ 1770
Цилиндры мерные 2 класса точности, вместимостью 500 и 1 000 см3	ГОСТ 1770
Допускается использование средств измерения с аналогичными
или лучшими характеристиками.
3.2. Реактивы
Клсфоксидим с содержанием действующего вещества 98.5 % (БАСФ. Германия) Ацетонитрил для хроматографии, хч Вода бидистиллированная, деионизованная или	ТУ-6-09-4326—76
перегнанная над КМпО(	ГОСТ 6709
Метиловый спирт (метанол), хч	ГОСТ 6995
Допускается использование реактивов иных производителей с ана-
логичной или более высокой квалификацией.
3.3. Вспо.\ 1 агате ъьмые устройства,	материалы
Бумажные фильтры «синяя лента», обеззоленные	ТУ 6-09-2678—77
Воронки конусные диаметром 30—37 и 60 мм Груша резиновая Колбы грушевидные на шлифе, вместимостью	ГОСТ 25336
100 см3	ГОСТ 10394
Колбы круглодонные на шлифе, вместимостью 250 см3	ГОСТ 9737
Мембранные фильтры капроновые, диаметром 47 мм

МУК 4.1.1413—03

Насос водоструйный    ГОСТ    10696

Пробирки центрифужные    ГОСТ    25336

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или ротационный вакуумный испаритель

В-169 фирмы Buchi. Швейцария    ТУ 25-11-917—74

Стаканы химические, вместимостью 100 см³ ГОСТ    25336

Стекловата Стеклянные палочки Установка для перегонки растворителей Набор для фильтрации растворителей через мембрану

Холодильник водяной, обратный    ГОСТ 9737

Хроматографическая колонка стальная, длиной 20 см. внутренним диаметром 2 мм. содержащая Sphcrisorb S5 ODS 2. зернением 5 мкм

Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа, вместимостью 50—100 мм³

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

■4. Требовании безопасности

4.1.    При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1005-88.

4.2.    При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя. с опытом работы на жидкостном хроматографе.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

17

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности нс более 80 %.

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят очистку ацетонитрила (при необходимости), подготовку подвижной фазы для ВЭЖХ. приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

7.1. Очистка ацетонитрила Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пснтоксидом фосфора нс менее 1 ч. после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.2. Приготовление 0,005 М раствора ортофосфор и ой кислоты Для приготовления 0.005 М раствора орто(|юсфорной кислоты в мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 0.35 см³ орто-фосфорной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

7.3. Подготовка подвижной фиш для ВЭЖХ

В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 550 см³ 0.005 М ортофосфорной кислоты, добавляют 450 см³ ацетонитрила, перемешивают. фильтруют и дегазируют.

7.4. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку подвижной фазой (п. 7.3) в течение 30 мин при скорости подачи растворителя 0.4 см /мин до установления стабильной базовой линии.

7.5. Пригото(иение градуировочных растворов

7.5.1. Исходный раствор клефоксидима для градуиповки (концентрация 1 мг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0.1 г клефоксидима. доводят до метки метанолом, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике не более месяца.

МУК 4.1.1413—03

Растворы №№ 1—5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного стандартного раствора.

7.5.2.    Раствор Я9 1 клефоксидима Оля градуировки (концентрация 10 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 1 см³ исходного стандартного раствора клефоксидима с концентрацией 1 мг/см³ (п. 7.5.1). разбавляют метанолом до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение 2 недель.

7.5.3.    Рабочие растворы NqNq 2—5 клефоксидима Оля градуировки (концентрация 0,1—1,0 мкг/см³). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают по 1,0. 2.5. 5.0 и 10.0 см³ стандартного раствора № 1 с концентрацией К) мкг/см³ (п. 7.5.2). доводят до метки подвижной фазой (подготовленной по п. 7.3). тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №№ 2—5 с концентрацией клефоксидима 0.1. 0.25. 0.5 и 1.0 мкг/см³, соответственно.

Растворы готовятся и используются в день анализа.

7.6. Отбор проб

Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны». В течение 15 мин последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух аспирируют в течение 5 мин с объемным расходом 1—5 дм³/.мин через бумажный фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродсржатсль.

Для измерения концентрации клефоксидима на уровне 0.5 ОБУВ воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 1 дм³ воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при 4 °С - 5 дней.

7.7. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристик), выражающую зависимость площади пика (отн. единицы) от концентрации клефоксидима в растворе (мкг/см³). устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки №№ 2—5.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.7.1. Осуществляют нс менее 3 параллельных измерений. Устанавливают площадь пика клефоксидима.

7.7.1. Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:

19

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором

Колонка стальная длиной 25 см. внутренним диаметром 2.1 мм. содержащая Spherisorb S5 ODS 2. зернением 5 мкм.

Температура колонки: комнатная.

Подвижная фаза: 0.005 М орто<|юс<|юрная кислота - ацетонитрил (55 : 45. по объему).

Скорость потока элюента: 0.4 см³/мин.

Рабочая длина волны: 250 нм.

Чувствительность: 0.005 ед. абсорбции на шкалу.

Объем вводимой пробы: 20 мм³.

Ориентировочное время выхода клсфоксидима: 8,9—9.1 мин.

Линейный диапазон детектирования: 2—20 нг.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор кле-фокендима с концентрацией 1.0 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой (подготовленной по п. 7.3).

Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 2 стандартных растворов различной концентрации. Если значения площади отличаются более чем на 7 %от данных, заложенных в градуировочную характеристику, се строят заново, используя свежеприготовленные рабочие стандартные растворы.

8. Выполнение измерений

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 см³, заливают 10 см³ метанола, помещают на встряхива-тсль на 10 мин. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями метанола, объемом 10 см³.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. остаток растворяют в 5 см³ подвижной фазы (подготовленной по п. 7.3) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.7.1.

Проб> вводят в инжектор хроматографа нс менее двух раз. Устанавливают площадь пика, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию клсфоксидима в хроматографируемом растворе.

Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного фильтра.

1