ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Часть 17-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

Москва

^,,утаетилю^и

Заместитель Плавного Государственного санитарного врача СССР

А.И. ЗАЙЧЕНКО

"21" ноября 1985 г.

Ы035-85

ГЛЕТ0ШЕС1ШЕ указания ПО ОПРЕЩдаЖ) ТИОДАНА И ПРОДУКТОВ ЕГО ПРЕВРАЩИШ в веда ХРОГДАТОГРА-ФИЧЕСКИЖ ЬЕТСДАШ

(дополнение к "Методическим указаниям по определению тиодана и продуктов его превращения в растительном материале и почве хроматографическими методами"

Утверждены Зам •Главного Государственного врача СССР А.И.Зайченко 5.06.1978, И883 и к "Методическим указаниям по определению тиодана и продуктов его превращения в мясе,органах и тканях животных хроматографическими методами". Утверждены Зам.

1‘лавиого Государственного санитарного врача СССР 24. УШ. 1983 г, ,112828-83)

I. Краткая характеристика препарата

Тиодан - 1,2,3,4,7,7 - гексахлор бицикло-(2,2,1)-гептан-2,5,6-бис-оксиметилен-сульфит - шеокоэффективный инсектицид, рекомендован для применения на маточных плантациях ягодных культур с запрещением использования ягод, собранных с обработанных участков в пищу. Применяется также для обработки хлопчатника,

Тиодан (эздосульфан), молекулярная масса 408,4, белое кристаллическое вещество, существует в виде двух изомеров: альфа-

- 66

2. Методика определения тиодана и продуктов его превращения в воде

2.1* Принцип метода

Метод основан на хроматографическом определении тиодана и продуктов его превращения в тонком слое пластинок "Силуфол" или газохроматографическом определении препаратов после экстракции их из проб воды н-гексаном.

Хроматографическое определение в тонком слое проводится на пластинках "Силуфол W-254", импрегнировакных о-толидином, который служит в качестве проявляющего реактива, или на пластинках "Силуфол" с использованием в качестве проявляющего реактива раствора азотнокислого серебра. Места локализации тиодана в виде двух его изомеров, а также продуктов его превращения обнаруживают после облучения пластинок ультрафиолетовым светом. Количественное определение проводят путем сравнения величины и интенсивности окраски пятен пробы и свидетелей.

Для газохроматографического определения используется хроматограф с детектором по захвату электронов (ДЭЗ) или постоянной скорости рекомбинации (ДПР), с колонкой длиной I м и насадкой - 5$ *?Е-30 на хрома тоне Н-Ак/-ДМЦЗ. Количественное определение проводят сравнением высот пиков анализируемых и стандартных растворов*

2.1,1. Метрологическая характеристика метода.

Метод ТСХ. Предел обнаружения альфа и бета-изомеров тиодана I мкг, предел определения 0,002 мг/л. Среднее значение степени определения 80,3$, относительное стандартное отклонение 8,1$. Доверительный интервал среднего при .6-0,95 и п=5 10,4$.

Метод ИХ. Предел обнаружения альфа- и бета-изомеров тиодана 0,05 нг, предел определения тиодана 5 х 10*"^ мг/л.

- 67

Среднее значение степени определения 90,0?, относительное стандартное отклонение 7,7?* Доверительный интервал среднего при «6-0,95 и п=5 6,48?

2.2. Реактивы и растворы Петролейный эфир ч., (фракция 40-70°С),Г0СТ II992-7I Ацетон х.ч., ГОСТ 2603-79 н-Гексан ч., ТУ 6-09-3375-78 Натрий сернокислый безводный ч.,Г0СТ 4166-76 Хроматон H-AW-ДВД (0,16-0,20 мм) с 5% ,2Е»30 ЧССР Этиловый спирт, 96?-ный, ТУ 6-09-I7I0-77 о-Толидин ч*, 0,1?-ный раствор в ацетоне Уголь активированный, КАД-мсшотый Пластинки Силу фол UV-254,    ,ЧССР

Серебро азотнокислое х.ч., ГОСТ 1277-81 Аммиак концентрированный х.ч., ГОСТ 3760-79 2-феноксиэтанол ч.

Азот, газообразный ,чда, ГОСТ 9293-74

Стандартный образец тиодана, стандартный раствор тиодана в гексане, содержащий 5 мкг/ш.

2.3* Приборы и посуда Вакуумно-ротационный испаритель, ТУ 25-II-9I7-74 или прибор для отгонки растворителей

Воронки химические диаметром 6 см, ГОСТ 86-13-81 Пробирки градуированные со шлифом, 10-15 мл, ГОСТ 16515-75 Камера для хроматографирования, размером 150 х 200 мм, ГОСТ 10565-75

Колбы н/ш, круглодонные, емкостью 100,150 и 200 мл, ГОСТ 10394-75 Воронки делительные (цидшщрические или грушевидные) емкостью 250, 500 и 1000 мл, ГОСТ 8613-75

- «в -

Микропипетки,ГОСТ 1770-71 Нине тки или шприцы для нанесения проб Пипетки емкостью 1,5,10 мл, ГОСТ 1774-74 Микрошприцы на 5 и 10 мкл

Колонки хроматографические стеклянные для очистки экстрактов 15 х 1,5 см

Камера для хроматографирования, ГОСТ 10563-75

Прибор для облучения УФ-светом с лампой ПЕК-4 или другого типа

Пульверизатор стеклянный, ТОСТ 10391-74

Камера для опрыскивания, ТУ 25-11-430-70

Газовый хроматограф серии Тазохром" или "Цвет", снабженный

детекторами электронного захвата (ДЭЗ) или постоянной скорости

рекомбинации (ДПР)

Колонки стеклянные для газовой хроматографии длиной I м,внутренним диаметром 3 мм Секундомер, ГОСТ 5072-79 Бумажные фильтры, ТУ 6-09-1687-77

2.4# Подготовка к определению

2.4.1# Приготовление пластинок "Снлуфол" перед использованием импрегнируют о-толидином. Для этого каждую пластинку опускают на 0,5 см в 0,1^-нпй раствор о-толлдияа в ацетоне, налитый в камеру для хроматографирования в объеме, равном 60 мл при использовании стандартной камеры для хроматографирования. После того, как фронт растворителя поднимется да верхнэго края пластинки, ее вынимают и высушивают на воздухе, избегая прямых лучей солнечного света. После этого пластинки готовы к употреблению, их также можно хранить в эксикаторе.

При использовании альтернативного способа обнаружения препаратов с помощью проявляющих реактивов применяют пластинки "си-

- 69 -

луфод⁴, не импрегнированные о-толндином.

2,4*2, Приготовление проявляющих реактивов

1,    0,21 г азотнокислого серебра растворяют в 0,5 мл дистиллированной воды, добавляют 1,2 мл 2-феноксиэтанола и доводят объем до 25 мл ацетоном,

2,    0,21 г азотнокислого серебра растворяют в 1,2 мл дистилляро ванной воды, добавляют 1,2 мл 25$ аммиака и доводят до 25 мл (общий объем) ацетоном.

2.4.3.    Приготовление хроматографических колонок для очистки

экстрактов

В нижнюю часть хроматографической колонки помещают около 500 мг обезжиренной органическим растворителем и высушенной ваты и засыпают 1,3 мл сульфата натрия б/в (высота слоя около I см) и 2,5 мл активированного угля (высота слоя в колонке 2 см). Перед употреблением колонки промывают 20 мл н-гексана.

2.4.4.    Отбор и подготовка проб для анализа

Отбор и подготовка проб для анализа производятся в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Зам.Главного Государственного санитарного врача СССР 21.08.79, №2051-79

2.5. Проведение определения

Ход анализа. Из анализируемого образца воды отбирают пробу 500 мл и помещают в делительную воронку. Препараты экстрагируют в делительной воронке гексаном трижды по 30 мл. Объединенный гексановый экстракт фильтруют через бумажный фильтр, заполненный на 2/3 безводным сульфатом натрия, промывают 20 мл гексана. Затем растворитель отгоняют с помощью ротационного испарителя или ь струе воздуха на водяной бале при температуре не выше 50°С. К

-70-

сухому остатку добавляют пипеткой 2-5 ш шш другое точно отмеренное количество гексана. Колбу закрывают притертой пробкой, тщательно ополаскивают растворителем стенки колбы, В хроматограф вводят 5 мкл полученного раствора* Для определения методом ТСХ на пластинку наносят часть раствора или испаряют анализируешй раствор досуха, сухой остаток смывают трижды порциями гексана по 0,2 мл и наносят их на хроматографическую пластинку в одну точку. Если гексановый экстракт из воды содержит муть или другие примеси, то его концентрируют до 5-6 мл и пропускают через насадку колонки с сульфатом натрия и активированным углем. Тиодан и продукты его превращения элюируют из колонки 30 мл н-гексана, концентрируют раствор под вакуумом до 5-10 мл и используют для анализа методом ТСХ или IK. При отсутствии гексана его можно заменить петролейным эфиром.

2.5.1. Хроматографическое определение тиодана в тонком слое

Для хроматографического определения отбирают аликвотную часть экстракта или весь экстракт, предварительно сконцентрировав его до объема 0,3 мл* На хроматографическую пластинку, им-лрегнированную о-толидином, шприцем или пипеткой наносят исследуемую пробу в одну точку так, чтобы диаметр пятна не превышал 2 см. Сухой остаток смывают двумя порциями (по 0,2 мл) гексана или диэтилового эфира и наносят в центр первого пятна. Справа и слева от пробы на расстоянии 2 см наносят стандартные растворы, содержащие I и 5 мкг тиодана пли другие, близкие к определяемым концентрации.

Пластинки с нанесенными растворами помещают в кат,юру для хроматографирования, на дно которой на 30 мин до хроматографирования наливают 50 мл подвижного растворителя - смеси н-гексана с этиловым спиртом в соотношении 3:1.

- 71

После того, как фронт растворителя поднимется на 10 см, пластинку вынимают из камеры и спустя несколько минут подвергают воздействию УФ-света, располагая пластинку на расстоянии 20 см от источника света.

При наличии тиодаиа и продуктов его превращения на пластинке появляются пятна сине-голубого цвета,альфа-тиодана 0,15, бэта-тиодана 0,40, К/ кислородсодержащих продуктов превращения тиодана 0,08-0,1, Р/ тиодансульфата 0,50.

При определении препаратов альтернативным способом образец и свидетели наносят на пластинку * силу фол", не обработанную о-то-лидином, и хроматографируют в петролейном эфире. После развития хроматограммы пластинку опрыскивают одним из проявляющих реактивов. После высушивания на воздухе ее подвергают УФ-облучешш.

пятен

Препараты обнаруживаются на пластинке в виде^коричневого цвета. Более четкие результаты получаются при использовании первого проявителя. Ify альфа-тиодана-0,1, бэта-тиодана0,3б, тиодансульфата - 0,44.

Содержание препарата в пробе вычисляют по формуле;

X s± AL , где Р

X содержание препарата в пробе, мг/л;

А - количество препарата,найденное в пробе на пластинке,ыкг;

Р - количество (объем) исследуемой пробы, мл.

2.5.2. Проведение газохроматографического анализа Условия определения: температура испарителя-220°С, термостата детектора-2Ю°С, термостата колонок-190°С.

Скорость газа-носителя - 100 мл/мин. Шкала электрометра -0,25 . Ю“¹⁰а.

- 72 -

Бремя удерживания альфа-тиодана-3,2 мин, бэта-тиодана-4,3 млн, тиодансульфата-7 мин, эфиртиодана-1,2 глин, гидроксиэфиртиодала-2,5 мин.

Количественное определение проводят, сравнивая высоты или площади пиков исследуемых и стандартных растворов*

В колонку хроматографа вводят 5 мкл раствора.

Содержание препарата вычисляют по формуле:

X »

> где

X - количество препарата, мг/л;

С - концентрация стандартного раствора, мкг/мл;

Нj и Н2 - высоты пиков стандартного и анализируемого растворов,мм; ^{й у}2 “ ^объемы стандартного и анализируемого растворов, введенные в колонку хроматографа, мкл;

Р - объем пробы воды, взятый для анализа, мл;

У3 - объем экстракта пробы для анализа, мл.

3* требования безопасности

Соблюдаются требования безопасности обычно рекомендуемые для работы с химическими реактивами и хяорорганячесКиш пестиш

дами,

4. Настоящие методические указания разработаны Поляковой В.Н.р к.т.н., ВЙЭВ(т-^Москва);

Петровой Т.М., н.б.н., ВШИ зпщптн растений (г,Ленинград),