Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1 

8 страниц

244.00 ₽

Купить ГОСТ Р 51239-98 — бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль"

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Распространяется на фруктовые и овощные соки, нектары и сокосодержащие напитки и устанавливает метод определения массовой концентрации L-яблочной кислоты в виде свободной кислоты или соли.

 Скачать PDF

Переиздание

Оглавление

1 Область применения

2 Нормативные ссылки

3 Определение, обозначения и сокращения

4 Сущность метода и реакции

5 Реактивы

6 Аппаратура

7 Проведение испытания

8 Выражение результатов

9 Точность определения

10 Отчет об испытании

Приложение А (справочное) Статистические результаты кругового испытания

Приложение Б (справочное) Библиография

 
Дата введения01.07.1999
Добавлен в базу01.09.2013
Завершение срока действия01.07.2019
Актуализация01.01.2021

Этот ГОСТ находится в:

Организации:

25.12.1998УтвержденГосстандарт России462
РазработанМГУ пищевых производств
ИзданИПК Издательство стандартов1999 г.
ИзданИПК Издательство стандартов2002 г.

Fruit and vegetable juices. Determination of L-malic acid content

Стр. 1
стр. 1
Стр. 2
стр. 2
Стр. 3
стр. 3
Стр. 4
стр. 4
Стр. 5
стр. 5
Стр. 6
стр. 6
Стр. 7
стр. 7
Стр. 8
стр. 8

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ


ГОСТ Р 51239-98 (ДИН 1138-94)

СОКИ ФРУКТОВЫЕ И ОВОЩНЫЕ

Метод определения L-яблочной кислоты

Издание официальное

ГОССТАНДАРТ РОССИИ Москва

Предисловие

I РАЗРАБОТАН Московским государственным университетом пищевых производств

ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 335 «Методы испытаний агропромышленной продукции на безопасность»

2    ПРИНЯТ И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постаноазеннем Госстандарта России от 25 декабря 1998 г. N? 462

3    Настоящий стандарт предстаазяет собой аутентичный текст национального стандарта ФРГ ДИН 1138—94 «Фруктовые и овощные соки. Ферментативное определение L-яблочной кислоты. Спектрофотометрнческое определение НАДФ (н и коти н ам идаде н и н дн н укл еотида) * с дополнительными требованиями, отражающими потребности народного хозяйства (разделы 2, 5, 7, 8 и 9 и пункты 6.1 и 6.5)

4    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

5    ПЕРЕИЗДАНИЕ

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания на территории Российской Федерации без разрешения Госстандарта России

120

ГОСТ Р 51239-98 (ДИН 1138-94)

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

СОКИ ФРУКТОВЫЕ И ОВОЩНЫЕ Метол определения L-яблочной кислоты

Fruit and vegetable jukes. Determination of L-ntalic acid content

Дата введения 1999—07—01

1    Область применения

Настоящий стандарт распространяется на фруктовые и овощные соки, нектары и сокосодср-жашие напитки и устанавливает метод определения массовой концентрации L-яблочной кислоты в Blue свободной кислоты или соли.

2    Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ 3769-78 Аммоний сернокислый. Технические условия ГОСТ 4328-77 Натрия гидроокись. Технические условия ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

3    Определение, обозначения и сокращения

3.1    В настоящем стандарте применяют следующие термины с соответствующими определениями: массовая копией фации L-яблочной кислоты во фруктовых и овощных соках, нектарах и

сокосолержащих напитках: Массовая концентрация L-яблочной кислоты, определенная в соответствии с настоящим стандартом и выраженная в г/дм3.

3.2    В настоящем стандарте применяют следующие обозначения и сокращения:

НАД — Р-никотннамндадсниндинуклсотид;

НАДН — ^-никотннамиладениндинуклеотид (восстановленная форма):

ГОТ - глутаматоксалоацетатгрансаминаза;

L-МДГ — L-малатдегидрогеназа;

Е — международная единица, определяющая количество (активность) фермента, которое служит катализатором для превращения при 25 °С I мкмоля вещества в минуту.

4    Сущность метола и реакции

Метод 11. 2) основан на ферментативном преобразовании L-яблочной кислоты в оксалоаиетат под действием НАД в присутствии L-МДГ, смещении равновесия реакции путем связывания образовавшегося оксалоацетата L-глутаматом в присутствии ГОТ и спектрофотометрическом измерении массовой концентрации образовавшегося НАДН, эквивалентной массовой концентрации L-яблочной кислоты в пробе (I, 2).

L-МДГ

L-яблочная кислота + НАД* <- оксалоацстат    +    НАДН    +    Н+,    (1)

гот

оксалоаиетат + L-глутамат <- L-аспартат    +    а-кетоглутарат.    (2)

Издание официальное

5    Реактивы

5.1    Общие требования

При проведении анализа используют химически чистые или чистые для анализа реактивы.

Допускается использовать имеющиеся в продаже готовые наборы реактивов для определения L-яблочной кислоты при условии, что качество реагентов нс ниже указанного в настоящем стандарте.

Препараты глииилглицнна, L-глутаминовой кислоты и НАД должны содержать не менее 90 % основного вещества.

5.2    Г л и и и л г л и и и н о в ы й буферный раствор активной кислотности 10,0 pH

4,75 г глииилглицнна и 0,88 г L-глутаминовой кислоты растворяют в 50 см1 дистиллированной воды по ГОСТ 6709. Устанавливают активную кислотность раствора равной 10,0 pH приблизительно 4,6 см* раствора гидроокиси натрия по ГОСТ 4328 молярной концентрации с (NaOH) ■ 10 моль/дм3. Объем раствора доводят дистиллированной водой до 60 см3. Буферный раствор устойчив при температуре 4 "С 3 мес.

5.3    Раствор НАД

0.420 г НАД растворяют в 12 см3 дистиллированной воды. Раствор устойчив при температуре 4 ‘С 1 мес.

5.4    Суспензия фермента ГОТ

Раствор глутаматоксалоаиетаттрансамнназы массовой концентрации 0,002 г/см3, содержащий L-аспартат и а-кетоглутарат в качестве субстрата, смешивают с раствором сернокислого аммония по ГОСТ 3769 молярной концентрации с ((NH4)2S04) = 3.2 моль/дм3. Удельная активность суспензии ГОТ составляет не менее 400 Е/см3. Суспензия устойчива при температуре 4 *С 12 мес.

5.5    Суспензия фермента L-МДГ

Раствор L-малатдегидрогеназы массовой концентрации 0,005 r/см3 смешивают с раствором сернокислого аммония по ГОСТ 3769 молярной концентрации с ((KH4)2S04) = 3,2 моль/дм3. Удельная активность суспензии L-МДГ составляет не менее 6000 Е/см3. Суспензия устойчив;) при температуре 4 *С 12 мес.

6    Аппаратура

Обычная лабораторная аппаратура, а также указанная в 6.1—6.4.

6.1    Дозаторы пипеточные объемами доз 100, 50 и 25 см3 и относительной погрешностью дозирования ±1 % (3) или пипетки градуированные номинальной вместимостью 2.0; 1.0; 0.5; 0,2; 0.1 и 0,02 см3 и допускаемой относительной погрешностью ±1 %.

6.2    Кюветы фотометрические из оптического стекла или пластмассы толщиной поглощающего слоя I см для измерений при длинах волн 334. 340 шли 365 нм.

6.3    Шпатели пластиковые или палочки стеклянные оплавленные длиной от 10 до 15 см для перемешивания содержимого кюветы при проведении фотометрических измерений.

6.4    Спектрофотометр или фотометр фотоэлектрический для измерений при длинах волн 334, 340 или 365 нм, допускаемой абсолютной погрешностью измерений коэффиине>гта пропускания ±1 %.

6.5    Весы лабораторные общего назначения наибольшим пределом взвешивания 20 г и допускаемой погрешностью ±0,0001 г.

7    Проведение испытания

7.1 Подготовка пробы к испытанию

Как правило, пробы нс нуждаются в особых методах подготовки к испытаниям. Результаты испытания по настоящей методике выражают в граммах на кубический дециметр.

Испытания концентрированных продуктов проводят после их разбавления дистиллированной водой до получения значения относительной плотности разбавленного продукта согласно рецептурам натурального сока, нектара или сокосодсржащсго напитка. При этом относительную плотность разбаапенной пробы выражают в граммах на кубический дециметр.

Результаты испытаний концентрированного продукта могут быть также выражены в граммах на килограмм. При расчете результата испытаний учитывают массу пробы концентрированного продукта и фактор разбавления.

При испытании продуктов высокой вязкости и/ил и с очень большим содержанием мякоти результаты испытаний выражают в граммах на килограмм продукта.

Продукты с мутной взвесью перед испытанием хорошо перемешивают.

122

ГОСТ P 51239-98


Сильно окрашенные продукты рекомендуется разбавить в большей степени, чем указано ниже. При этом пробы с очень низкой концентрацией L-яблочной кислоты рекомендуется предварительно осветлить путем центрифугирования.

Пробу разбавляют дистиллированной водой до получения значения массовой концентрации L-яблочной кислоты в интервале от 0.02 до 0.35 г/дм3. Допускается использование при проведении испытания окрашенной разбавленной пробы.

7.2 Определение

7.2.1    Общие требования

Определения проводят при постоянной температуре в интервале от 20 до 25 *С. Допускается проводить определения при постоянной температуре в интервале от 25 до 37 °С при условии получения равноценных результатов.

Абсорбционный максимум НАДН находится при длине волны 340 нм. При использовании спектрофотометра переменной длины волны все измерения проводят в максимуме поглощения света НАДН. При использовании спектрофотометра с ртутной лампой измерения проводят при длинах волн 334 или 365 нм.

Для дозирования буферных растворов, а также растворов проб, ферментов и коферментов используют только градуированные пипетки или автоматические дозаторы.

7.2.2    Контрольный раствор

В фотометрическую кювету вносят 1,00 см3 буферного раствора по 5.2. 0,20 см3 раствора НАД по 5.3, 1.50 см3 дистиллированной воды и 0.01 см3 суспензии ГОТ по 5.4. Смесь перемешивают пластиковым шпателем или стеклянной палочкой, выдерживают 3 мин и измеряют оптическую апотность раствора относительно оптической плотности воздуха — М|)к.

7.2.3    Раствор пробы

В кювету спектрофотометра (фотометра) вносят 1,00 см3 буферного раствора по 5.2. 0,20 см3 раствора НАД по 5.3. 1,40 см3 дистиллированной воды. 0.01 см3 суспензии ГОТ по 5.4 и 0,1 смподготовленной пробы. Смесь перемешивают пластиковым шпателем или стеклянной папочкой, выдерживают 3 мин и измеряют оптическую плотность раствора относительно оптической плотности воздуха — Ы|)„р.

7.2.4    Ферментативная реакция и количественное определение

В каждую из кювет с контрольным раствором по 7.2.2 и раствором пробы по 7.2.3 вносят по 0,01 см3 суспензии L-МДГ по 5.5 и перемешивают пластиковым шпателем ши стеклянной папочкой. По окончании реакции (через 5—10 мин) измеряют оптические плотности растворов относительно оптической плотности воздуха — (/L)np и (/4>)к. Окончание реакции проверяют повторным считыванием показаний прибора через 2 мин.


8 Выражение результатов

8.1    В ферментативных реакциях, лежащих в основе данного метода, образующийся в кювете НАДН приводит к изменению оптической плотности раствора (Д4). а его массовая концентрация пропорциональна массовой концентрации L-яблочной кислоты в пробе.

АА =    (3)

8.2    Массовую концентрацию L-яблочной кислоты в пробе р, г/см5, вычисляют в соответствии с законом Ламберта-Вера по формуле


М У, F

Р “ t 6 Г, 1000


АА,


(4)


где 3/— молярная масса L-яблочной кислоты, 134,09 г/моль;

У, — общий объем раствора в кювете, см3;

F— фактор разбавления по 7.1;

£ — молярный коэффициент поглощения НАДФМ. дм3 ммоль-1 см-1:

-    при длине волны 340 нм — 6,3,

-    при длине волны 365 нм — 3,4 (ртутная лампа),

-    при длине волны 334 нм — 6,18 (ртутная лампа);

6 — толщина поглощающего слоя в кювете, см;


V> — объем пробы, см3.


123


3


Если ист отклонении от объемов, указанных в 7.2.3, то

(5)

р = 3,647.-^.

8.3    При использовании имеющихся в продаже наборов реактивов численный коэффициент (3.647) в уравнении (5) может быть иным из-за изменения общего объема раствора ( Г,) в кювете.

8.4    За результат испытаний принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, округленное до сотых долей.

9 Точность определения

9.1    Сходимость

Абсолютное расхождение между результатами двух параллельных определений, выполненных в одной лаборатории, не должно превышать более чем в 5 % случаев значения показателя сходимости г, г/дм3, расечигыB;ieмото по формуле

г- 0,014+0,030 р,.    (6)

где Р| — среднеарифметическое результатов двух параллельных определений.

9.2    Воспроизводимость

Абсолютное расхождение между результатами двух измерений, выполненных в двух лабораториях, не должно превышать более чем в 5 % случаев значения показателя воспроизводимости R, г/дм3, рассчитываемого по формуле

R - 0.032+0.070 р2,    (7)

где р2 — среднеарифметическое результатов двух измерений.

10 Отчет об испытании

В отчете об испытании должны быть указаны:

• информация, которая необходима для идентификации пробы (вилы пробы, ее происхождение, описание);

-    ссылка на настоящий стандарт;

-    дата и способ отбора пробы (если возможно);

-    дата доставки пробы;

-    результаты испытаний и наименования единиц измерений, в которых они приводятся;

-    лата испытания;

-    информация о выполнении условий воспроизводимости метода;

-    замечания об особенностях проведения испытания;

4

-    особые условия проведения испытания, которые не учтены настоящим стандартом, но могли бы оказать влияние на результаты испытания.

124


ПРИЛОЖЕНИЕ Л (справочное)


Статистические результаты кругового испытания

Проведенное н соответствии с |4| круговое испытание дало следующие характеристики точности метода, приведенные в таблице A.I.

Испытание проводилось под руководством Отдела пищевой химии Института Макса фон Петгенкофера Федерального министерства здравоохранения, г. Берлин. ФРГ.

Год проведения кругового испытания — 1983.

Число участвовавших лабораторий    — 24.

Количество проб    — 4.


Таблица A.I

Наименование величины, характеризующей

Значение величины для пробы

круговое испытание

А

В

С

D

Чисто лабораторий, оставшихся после исключения тех. в которых полученные результаты были забракованы

22

20

21

23

Чисто исключенных лабораторий

2

4

3

1

Чисто принятых результатов

ПО

99

104

119

Среднеарифметическое (р,). г/дм’

1.26

2.54

7,22

8.92

Срсднсквадратичсскос отклонение результатов определений (з,). г/дм*

0.0232

0.0284

0.0652

0.1142

Относительное срсднсквадратичсскос отклонение результатов определений (RSD,). %

3.36

1.12

0.90

1.28

Показатель сходимости {г), г/дм-'

0.06

0.08

0.18

0.32

Срсднсквадратичсскос отклонение результатов

ИЗМСрСНИЙ (Зд). г/дм'

0.0486

0.0675

0.1876

0.2350

Относительное срсднсквадратичсскос отклонение результатов измерений (RSDK). %

3.86

2.66

2.60

2.63

Показатель воспроизводимости (Я). г/дм'

0.14

0.19

0.52

0.66


Примечания

1    Установлена линейная зависимость между г, R и среднеарифметическими.

2    Характер проб:

-    А — апельсиновый сок;

-    В — стандартный раствор:

-    С — яблочный сок;

-    D — вишневый нектар.


125


5


ПРИЛОЖЕНИЕ Б (справочное)

Библиография

|l| Bestimmungdcr L-Acpfclsacurc; En/ymaiisch: Nr. 21, 1985. — In: Analyscn/|Sanimlung| Internationale Frucht-saft-Union. — Loscblattausgabc. stand 1989. Zug: Schwcizcrischcr Obstvciband |2| Untcrsuchung von Lcbcnsmhteln: Bestimmung von L-Acpfclsacurc (L-Malat) in Fruchtsacftcn: L3I.OO-I5. 1984—11. In: Amtlichc Sammlung von Untcrsuchungsvcrfahrcn nach § 35 LMBG: Vcrfahrcn air Probenahme und Untcrsuchung von Lcbcnsmittcln. Tahakerzeugnissen. kosmctischcn Vlittcln und Bcdarfgcgcnstacndcn/Bun-desgesundheitsamt. Loscblattausgabc. Stand 31.12.1991. Bd. I. — Berlin. Kocln: Bcuth Verlag GmbH |3| ТУ 64—13329—81 Дозаторы пи поточные

|4| ИСО 5725—86 Точность методов испытания. Определение повторяемости и воспроизводимости для метода стандартного испытания с помощью межлабораторных испытаний

ОКС 67.080    Н59    ОКСТУ9Ю9

6

Ключевые слова: фруктовый сок; овощной сок; нектар; сокосодсржащнй налиток; L-яблочная кислота; спектрофотометрия

126