ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Часть 17-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

Москва

ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ЬРЬЦЦ1ТШШ_>Б0ДЕ31Ш1 РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИИ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ ДОГМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Чаотъ 17-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомнссии по химическим средствам борьбы с вредителями,боле8нями растений и сорняками

Москва -

с легко воспламеняющимися жидкостями и концентрированными кислотами.

ц. Нестоящая методика разработана сотрудниками Институте биоорганн-ческоЯ химии им.Шемякина АН СССР Егоровым И.В. я Граменицкой В.Н.

5. Методические уже занял апробированы во ВНИИХС8Р (Новикова К.Ф.) и в институте органической химии им.Зелинского (Громова Г.П.).

Хлорорганнческие пестициды

7.    Временные методические указания по определению блазера в воде, почве, сое и зеленых листьях методом хроматографии в тонкой слое

27 ноября 1984 Г* №3156-84

8.    Временные методические указания по определению

дилора в меде методом тонкослойной хроматографа    22    мая 1985 г. №3884-85

9.    Временные методические указания по хроматографическому определению Щ в воде

22 мая 1985 г. №3876-85

10.    Временные методические указания по определению

модауна в воде и почве газохидкостной хроматографией    21    ноября 1985 Г. №4030-85

11.    Методические указания по определению тиолана и продуктов его превращения в воде хроматографическими методами _{а ноября 1Э6}5 г. №4035-85

12.    Временные методические указания по определению триалдата методом газожидкостной хроматографии в воде, почве и зерне пшеницы

21 ноября 1985 г. №4032-85

13.    Временные методические указания по определению мэтодами ПОС н ТСХ аналога ювенильного гормона п-хлорфенилового вФвпа гераниола в Берне пшеницы, почве,воде в зеленых листьях

12 апреля 1985 г. №3254-85

14.    Временные методическиеиу указания по определению остаточных количеств фозилада в свекле методом газожидкостной хроматографии

22 мая 1965 г. £3675-85

15.    ременные методические указания по определению регулятора роста растений ЭБ£-5 в воде, растительном материале методом ТСХ

21 ноября 1985 г. £4031-65

16.    Методические указания по определению остаточных количеств хлорорганлческлх пестицидов и продуктов их разложения (./«-изомера ПИТ. V-изомера ГХИГ. гептахлора, альдрина. кельтана. ДДЭ. ЛЛД. ЛИТ)

в воде хроматографическими методами при совместном присутствия j _{1986 Гв} Ш20-86

Азотсодержащие пестициды

17.    Временные методические указания по определению ацетала в воде, почве, картофеле, верне и зеленой массе кукурузы и сои методами ГаХ и ТСХ

21 ноября 1985 г. £4029-85

18.    Методические указать по определению диФенамяда в в воде методом тонкослойной хроматографии

21 ноября 1985 г. £4033-85

19.    Методические указания по определению карахола и его метаболита бензоклпродкислоты в почве методом газожидкостной хроматографии

31 июля 1984 г. £3072-84

20. Временные методические указания по определению лентаграна в растительной продукции, почве и воде ТСХ

12.04.85 г. №3253-85

21.    Методические указания по определению монуро-на и дкуроиа в чае методом газожидкостной хроматография ₃ 1Шваря Is85 г> >Ш87-85

22.    Временные методические укаэания по определению набу в воде, почве, капусте, сое и зеленых листьях методом хроматографа в тонком слое _{22 мая 19й5 г>} *3860-85

23.    Временные методические указания по определению раукдапа в воде методом ТСХ (дополнение к №2434-81)

21 ноября 1985 Г. №4034-85

24.    Временные методические указания по определению сонаяена в воде, почве и зеленой массе сои хроматографическими методами

3 января 1985 г. №3200-85

25.    Временные методические укаэания по определению соналена в маслах подсолнечника, репса

и клещевины ISX 22 мая 1985 Г. №3894-85

26. Временные методические указания по определению стомпа методом ПК в табаке

12 апреля 1985 Г. №3252-85

27. Методические укаэания по определению тклта в растениях,почве, воде методом гозоаидкост-

ной хроматографии

3 января 1985 г, $ 3190-86

28.    Методические указания по определению триадимо-фона ( байлотона) методом ТСХ в воде

22 мая 1986 г. *• 3692-85

29.    Методические указания по определению фонмедл»{Улмп_| и

десмедифама в воде природных водоемов ТСХ

21 ноября I^Qdt> г. > 4036-83

Прочие пестициды

30.    бременимо методические указания по определению остаточных количеств арилона по бемзолсульфонамяду в зернах хлопка,почве и воде тонкослойной хроматографией

21 ноября 196эг. '* 4037-85

31.    Методические указания по определению гидразида малеиновой кислоты в табаке колориыеярическиы методом

12 апреля I9j5r. $3251-35

32. Методические указания по определению диметилсуль-Фоксида и его метаболита диметнлсульФона методом гаэожидкястной хроматографии в сахарной свекле, картофеле и зеленой массе

28 мая 1986 г. $ 4119-86

33. Временные методические указания по определению

остаточных количеств препарата 320-К в зерне и

воде тонкослойной хроматографией

22 мая 1985 г. $ 3390-85

34. Временные методические указания по определению ДРХ-4189 С ГЛИИ) в воде, почве, растительном материале методом газожидкостной хроматографии 22 мая 1985г. $ 3885-85

Настоящие методпческие указания предназначены для санитарно-эпидемиологических с таили Я и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома . СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве гфшиальнкх Группой экспертов при Госкомиссяи по химическим ерсдствам борьбы с вредителей,болезнями растений и сорняками Гпоагропрома СССР

Методические указания согласовали и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИОДяТО им.Марпиновского В.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

РЩКШОНШ КОЛЛЕГИЯ

Л.Г.Александрова, Д.Б.Гйрешх, А.А.Калинина (за;4.председателя), Ц.А.Клисенко (председзтеть), Г.И.Короткова, М.В.Письменноя, Г.А.Хохолькога, В.Е.Кривейчук.

"УТВЕВДАЮ"

Заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР

А.М.ЗАЙЧЕНКО

"22" мая 1985 г. №3890-85

ЕРШЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПРЕПАРАТА 320-К В ЗЕРНЕ И ВОДЕ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ

I. Краткая характеристика препарата

Препарат 320-К - новый отечественный, гаметоцид для стерилизации пыльцы зерновых культур и подсолнечника. Действующее начало препарата - калиевая соль цис-2-метил-З-циклогексенкарбоновой

кислоты.

В чистом виде соль 320-К - твердое вещество, белого цвета, весьма гигроскопичное, хорошо растворимое в воде, практически нерастворимое в органических растворителях.

ЛДзд для белых беспородных мышей I.4I7 г/кг, введение препарата в желудок белых крыс на уровне 1000 ыг/кг массы тела не вызывало гибели животных.

ПДК в зерне и воде еще не установлены.

2. Методика определения препарата 320-К в зерне и воде тонкослойной хроматографией 2.1. Основные положения

2.1 Л. Принцип метода

Метод основан на превращении соли 320-К в кислоту 320 (цис-2-

метил-3-циклогексенкарбоновую) и экстракции последней ацетоном_} обработкой

- 38 -

измельчённого зерна смесью 0.1н НС£ н ацетона. После упаривания аце-тона кислоту 320 извлекают из водного слоя бензолом. Конечное определение проводят хроматографией на пластинках    ^    25*».

2.1.2 Метрологическая характеристика метода.

Диапазон измеряемых концентраций 0.1 - 0.5 мг/кг в зерне 0.002 - 0.02 мг/кг в воде Предел обнаружения 2-10 мкг в хроматографируемой пробе.

Предел обнаружения 0.1 мг/кг в зерне в 0.002 мг/кг в воде.

Среднее значение определения стандартных количеств препарата Ъ при *ы15

85.C# в зерне 80.05» в воде Стандартное отклонение i при в»15

-    10.0# для зерна

-    8.0# для воды Относительное стандартное 5^

-    12.9 для зерна

-    10.3 для воды

Доверительный интервал среднего при р-0.95 и и-5

85.0    i 12.9# для зерна

80.0    - 10.3# для воды Размах варьирования R

70 -100# для зерна 70 - 99# для воды

2.1.3 Избирательность метода.

Метод селективен. Хлороргакические я фосфорорганичесхне пестициды

определению не мешают

-a 9 -

2.2    Реактивы и материалы.

Ацетон,ГОСТ 2603-71, осч Бензол_frOCT 5955-75, осч

Диоксав₍ГОСТ 10**55-63, хч

Хлороформ, Vf 6-09-4 263-76, хч

Спирт этиловый 96^-ныЯ, ТУ 6-О9-Г7Г0-77

Муравьиная кислота,ГОСТ 5848-73. хч

Уксусная кис лота, ГОСТ 18290-7 2, хч

Натрий углекислый кислый, ГОСТ 42*3-79, хч

Натрий фосфорнокислый дву заме ценный, ГОСТ П773-76, хч

Магний сернокислый,ГОСТ 4523-77, хч

Соляная кислота,ГОСТ 3118-77, хч

Цис-2-метил-З-ииклогексенкарбоновая кислота (320)

Индикаторная универсальная бумага,ТУ 6-09-11*1-71

Бром сре половый синий индикатор, ТУ 6-09-1058-76, чдэ

Метиловый красный индикатор, ТУ 6-09-4070-75, чае

Стандартные растворы кислоты 320 в бензоле с содержанием

ICO мкг (раствор А) и 10 мкг (раствор Б)

Спиртовой раствор бромсренолового синего и метилового красного (раствор В)

Водвыь 0.1 М раствор натрия Фосфорнокиса.двуэaweаи(.раствор Г) Пластинки    ixyj    254    15x15    см

0.1 н раствор соляной кислоты 5*-ный раствор бикарбоната натрия

2.3    Приборы, аппаратура и посуда.

Гомогенизатор тканей типа РТ-Х

Магнитная мешалка типа ММ 2А (Чехословакия)

Ротационный вакуумный испаритель типа Uniрал-350 (Польша) Весы аналитические типа ВЛА - 2CCU

Микрошприц на 10 мкл типа МШ-10, ТУ 2-ЯЗЗ-106

- 22C -

Колбы мерные ГОСТ 1770-7* ёмкостью 100 мл

Колбы плоскодонные с притёртыии пробками ГОСТ 10394-72 на 100мл Колбы круглодонные с притёртыми пробками ГОСТ 10394-72 ёмкостью 100 мл к 20 мл

Воронки Бюхнера, ГОСТ 9Г47-ЯТ

Пипетки, ГОСТ 1770-74 на 1мл и 10мл

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74 на 100мл, 50мл и Юмл

Камеры хроматографические , ГОСТ 10565-75

Вороги делительные, ГОСТ 10054-75 на 250 ил и 1500 мл

Пульверизатор стеклянный , ГОСТ I03^QI-74

Пробирки калиброванные, ГОСТ 10394-72 на 5 мл

2.4 Подготовка к определению.

2.4.1    Приготовление стандартных растворов кислоты 320 в бензоле.

Для приготовления стандартного раствора А в мерной колбе ёмкостью 100 мл взвешивают 100 ыг кислоты 320 с точностью - 0,0002 г. Содержимое колбы растворяют в 30 мл бензола и затем доводят юбьём раствора до метки тем не растворителем. Для приготовления раствора Б из раствора А пипеткой отбирают 10 мл, переносят в мерную колбу ёмкостью 100 мл и добавлением бензола доводят объём раствора до метки.

Растворы А и Б при хранении при комнатной температуре стабильны в течение года*

2.4.2    Приготовление растворов для проявления хроматограмм.

Для приготовления раствора В в мерной колбе на Х00 мл взвешивают 20 мг бромфенолового синего и 60 мг метилового красного, растго-ряют красители в 50 мл спирта и прибавлениеиспирта доводят объём рш-тзора до метки.

Раствор красителей прз хранении в течение месяца в холодильнике стабилен*

Для Приготовления раствора Г в мерной колбе на 100 мл растворя-

- 221 -

от : rMa^HPO^-I? H^O в 50 мл воды и доводят объем раствора до 100 мл.

Раствор Г стабилен при хранении при комнатной температуре в течение года.

Раствор для проявления хроматограмм опрыскиванием готовят непосредственно перед употреблением смешввакием равных объёмов растворов В и Г.

2.5    Отбор проб.

Отбор проб для анализа проводят в соответствии с утвержденными Министерством здравоохранения СССР "Унифицированными правилами отборе проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов внешней среды для определения микроколичеств пестицидов (* 2051/79 от 2I.7III.79 г).

Из партии зерна, подлежащей анализу, отбирает II г (при необходимости зерно предварительно подсушивает) измельчает с помощью гомогенизатора тканей и отбирает навеску массой 1C г.

2.6    Проведение определения.

Навеску измельчённого зерна (10 г) помещают в коническую плоскодонную колбу ёмкостью ICO мл, добавляет 10 мл 0.1 н HCI и 20 мл ацетона. Кислоту 320 экстрагирует перемешиванием в течение часа ка магнитной мешалке. Экстракт отделяют от зерна фильтрованием на воронке Бюхнера с бумажным фильтром, собирая в круглодонную колбу ёмкостью ICO мл. Экстракцию ацетоном (порциями по 20 мл) повторяют ещё два раза. Из объединенного экстракта с помощью ротационного вакуумного испарителя упаривают ацетон (на поверхности водного остатка появляется жирные пятка). Водный остаток переносят в делительную воронку ёмкостью 250 мл, колбу дважды смывают подкисленной до рК-3 водой (порциями по 5 мд) и дважды бензолом (порциями по 5 мл). Сливы также переносят в делительную воронку. Далее водный слой отделяют и трижды

- 222 -

экстрагирует бензолом (объём бензола каждый раз равен объёму водного слоя). Объединённый бензольный экстракт энергично перемешивают Ю минут на магнитной мешалке с ЗЙ-ным раствором tfaHC0₃, прибавляя последний в количестве необходимом для того, чтобы pH смеси был 9-10. После обработки водный слой отделяют на делительной воронке, а бензольный слой промывают 3 раза водой (объём воды ра: ен 1Д обьёиа бензольного слоя). Зоду от промывки объединяют с водным слоем. Суммарный водный слой подкисляют C.I н HCI до pH 3 и трёхкратно экстрагируют бензолом (объём бензола каждый раз равен объёму водного слоя). Объединённый бензольный экстракт сушат над прокаленным MoSO^, далее суши-тель отфильтровывают, промывают сухим бензолом, который после промывки объединяют с бензольным экстрактом. Полученный бензольный раствор упаривают сначала с помощью ротационного вакуумного испарителя а затем струёй воздуха до объёма 0.5 мл и с помощью хапилляра количественно наносят на пластинку    UV25*.

Для обнаружения препарата 320-К в воде пробу водь - I литр помещают в делительную воронку ёмкостью 1500 мл, воду подкисляют кони.

HCI до pH 3 и экстрагируют киолоту 320 бензолом трижды порциями по 100 мл. Бензольный экстракт сушат над прокалённым сульфатом магния, Фильтруют порциями через бумажный фильтр в круглодониую колбу ёмкостью 20 мл. Далее поступают , как описано выше для яерна Условия хроматографирования.

Сконцентрированный до 0.2-0.5 мл экстракт с помощью стеклянного капилляра количественно с помощью бензола переносят на пластинку

U\J 25* размером 15x15 см. Справа и слева на пластинку наносят серию стандартных растворов кислоты 320 с содержанием последней 1,2,3,* и 5 мкг. Серию стандартных растворов кислоты 320 получают следующим образом: в градуированные пробирки на 5 мл пипеткой последовательно помещают 0.1, 0.2, 0.3, 0.* и 0.5 мл стандартного раствора Б, что (соответствует I, 2, 3, * * 5 мкг кислоты 320. В последних трёх пробирках консентриругт раствор до 0.2-0.Э мл струёй воздуха.

- 223 -

Затем из каждой пробирки капилляром количественно с помощью бензола переносят стандарты на хроматографическую пластинку.

Хроматограмму развивают в системе бензол:диоксан:хлороформ:му-равьинвя кислота (5:1:2:0,02) или в системе бензол:диоксан:хлоро-форыгуксусная кислота (10: 2:5:0*02). Хроматограмму сушат на воздухе. а затем обрабатывают опрыскиванием из пульверизатора проявителем, приготовленным непосредственно перед обработкой смешением равных объемов растворов В и Г. Кислота 320 проявляется на хроматограмме в виде красного пятна на зеленом фоне, 8 в первой системе О»39;»0,I, а во второй 0,64*0,4.

2.7* Обработка результатов анализа.

Количественное определение препврвта Э20-К проводят методом соотношения со стандартами по площади и плотности пятна кислоты

320.

Содержание препарата 3 2Э-К в мг/кг или в мг/л вычисляют по формуле:

А ‘ V * 178,264 Р * Ve- 140,184

А - количество кислоты 320, найденное в пробе путем сравнения со стандартами, мкг Р - навеска зерна в г или объем анализируемой воды в мл 178,264 -мол. вес препарата 3 20-К 140,184 - мол. вес кислоты 320 V - конечный объем раствора, мл

Ve- объем аликвоты, взятой для хроматографирования, мл 3. Требования безопасности.

Необходимо соблюдать правила безопасности, принятые для работы