МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ (Минсельхоз России)

ДЕПАРТАМЕНТ ВЕТЕРИНАРИ^'

\

107139, Москва, Орликов пер., 1/ Для телеграмм: Москва, 84 М и н россе л ьхо з п род Телекс: 417738 ЛЕН Телефон: 975-58-50

11,09.00 г, № 13^7*2/2137

На

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ по патоморфологичсской диагностике болезней животных, птиц и рыб в ветеринарных лабораториях

1. Общие положения

Патологическая морфология, как метод исследования в ветеринарной лаборатории занимает особое место. Во-первых, только патоморфология устанавливает развитие общепатологических процессов (дистрофии, воспаления, расстройства кровообращения, процессы регенерации, развитие опухолей, пороки, уродства и др.). Во-вторых, патолого анатомическое исследование трупов или внутренних органов - это начальный этап в цепи последующих исследований (бактериологических, вирусологических, биохимических, токсикологических и др. ), в комплексе с ними позволяет достоверно диагностировать многие болезни, а с использованием гистологического метода - около 40 болезней животных и птиц, что обусловлено "Методическими указаниями по проведению обязательного минимума исследований в ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных", утв. ГУВ МСХ СССР 24.06.1971 г., другими нормативными документами.

В ветеринарную лабораторию направляют трупы, внутренние органы целиком или частью (обобщенное название "патологический материал", "патматериал") для исследования с целью определения, установления причин заболевания или гибели животных, птицы и рыбы при подозрении шущфекпионную, инвазионную болезнь, отравление или нарушение обмена ве

Патологоанатомическое    >дят    в    специальном    помещении,

допроиодом с кранами для холодной и горячей воды, канализацией. Устанавливаются 1*2 стола из нержавейки или иного материала для вскрытия. Основное требование, чтобы столы можно мыть и дезинфицировать. Помещение вскрывочной оснащают бактерицидными лампами, холодильной камерой (шкафом), создают запас дезинфицирующих средств.

Патолого анатомическое исследование проводят с соблюдением мер личной профилактики. В распоряжении патологоанатома (вскрывающего) должен быть необходимый набор спецодежды (халат), спец, обуви (сапоги резиновые, калоши или др.), предметов спец, зашиты (клеенчатый фартук, клеенчатые нарукавники, колпак или косынка, анатомические или хирургические перчатки, защитные очки, маска). На случаи поступления патматериала, зараженного возбудителями П группы (по медицинской классификации), должно быть предусмотрено наличие защитного костюма типа "Кварц". Для дезинфекции рук, одежды, инструментов должны быть всегда свежеприготовленные дезрастворы, а также туалетное и хозяйственное мыло, полотенце. Необходимо иметь аптечку с настойкой йода, бактерицидным пластырем, клеем БФ-2, перевязочным материалом и др. В случае травмы (ранения) рук вскрытие следует немедленно прекратить, из ранки выжать как можно больше крови, ранку продезинфицировать (настойкой йода, спиртовым раствором бриллиантовой зелени или др.), заклеить (коллодием, целлоидином, клеем БФ-2, лейкопластырем или др.), при необходимости наложить повязку’. Затем надевают другие перчатки и продолжают вскрытие.

2. Методы вскрытия трупов животных, птиц и рыб

Существует два основных метода вскрытия:

а)    метод полной эвисцсрашш, когда органы шеи, грудной, брюшной и тазовой полостей выделяются из трупа целиком, без рассечения, в виде одного анатомического комплекса;

б)    метод частичного рассечения анатомо-физиологических систем (отдельно органы дыхания, желудочно-кишечный тракт, паренхиматозные органы и т.д.).

Первый метод применяют в основном при вскрытии мелких, а второй - крупных животных. Иногда исследования органов проводят на месте их анатомического расположения.

Последовательность вскрытия полостей, выделения и исследования органов определяет вскрывающий в каждом конкретном случае в зависимости от анамнестических данных, анатомо-физиологических особенностей животного, результатов предварительного осмотра трупа и др. Соблюдается следующая последовательность вскрытия трупа:

-    Наружный осмотр. Обращают внимание на положение трупа, выраженность трупного окоченения, состояние наружных покровов, естественных отверстий, видимых слизистых оболочек, наружных половых органов, состояние подкожной клетчатки, скелетной мускулатуры, поверхностных лимфоузлов. Определяют пол, породу, масть, отметины, размеры, примерный возраст, упитанность. Затем устанавливают выраженность трупных изменений (охлаждение, трупное окоченение, трупные пятна, трупное разложение).

-    Внутренний осмотр. Трупу придают определенное положение, в зависимости от вида животного и его размеров. Мелких животных вскрывают в спинном, крупных -в полубоковом или боковом положении. Перед вскрытием брюшной полости у самок отделяют молочную железу, у самцов - наружные половые органы.

Трупы лошадей вскрывают в правом боковом положении, учитывая, что толстый отдел кишечника расположен преимущественно в правой половине брюшной полости. Вскрытие начинают с отделения левых грудной и тазовой конечностей. Разреза-

7

Для гистологического исследования срезы изготавливают из кусочков печени и почек, окрашивают гематоксилин-эозином, а для выявления лептоспир - серебрением по Левадити.

Срок гистологического исследование до 15 дне.’:.

НД: ГОСТ 25386-91, Животные сельскохозяйственные. Методы лабораторной диагностики легттослироза.

Методические указания по лабораторной диагностике лептоспироза животных. Рекомендованы ГУВ МСХ СССР 15.10.1975.

Jlucmtpuoi.

Патологическая морфология варьирует в зависимости от формы заболевания

Нервная форма. На вскрытии отмечают гиперемию, отек мягкой мозговой оболочки и вещества мозга, реже - кровоизлияния в оболочках, небольшие очаги размягчения в каудальной часта ствола головного мозга. Отдельные точечные и мелкопятнистые кровоизлияния в паренхиматозных органах, наиболее постоянно - под эпикардом, в заглоточных и подчелюстных лимфоузлах.

У свиней - острое катаральное воспаление желудочно-кишечного тракта и серозный лимфаденит.

Септическая форма. Встречается у птиц и грызунов, а у животных - у поросят, ягнят и телят. Особенностью листериозной септицемии считают очаговые некротические поражения печени, реже лимфоузлов, селезенки, легких, сердца, почек. На месте погибших элементов паренхимы образуются гранулемы. Наблюдают также застойные явления и кровоизлияния на серозных и слизистых оболочках, в лимфатических узлах, острый катаральный или геморрагический гастроэнтерит, дистрофические процессы в паренхиматозных органах, гиперплазию селезенки и лимфоузлов. У поросят -катаральная бронхопневмония.

Генитальная форма. Аборты (во второй половине беременности) или рождение нежизнеспособного приплода. У абортированных плодов отечность подкожной клетчатки, скопление красноватой жидкости в грудной и брюшной полостях В печени, иногда в других органах - мелкие некрозы.

Смешанная форма. Встречается редко. Наблюдают сочетание воспалительных изменений в центральной нервной системе и поражение внутренних органов, как при септической форме.

Для гистологического исследования срезы изготавливают из кусочков головного и спинного мозга, внутренних органов, окрашивают гематоксилин-эозином.

При гистоисследовании в разных отделах головного и спинного мозга находят периваскулиты, состоящих из лимфоцитов, отек, дегенерацию нейронов, нейронофа-гию, микроабсцессы и некротические очаги

Отличительным признаком от энцефалита вирусной этиологии являются очаговые скопления из монопитарных, лимфоидных клеток и сегментоядерных лейкоцитов.

При септической форме находят в печени, селезенке и надпочечниках гранулемы из клеток лимфоидно-гистаошггарного типа. В органах ягнят находят зернистую дистрофию клеток печени и почек, воспалительные изменения в тонком отделе кишечника и сычуге, мелкоочаговую бронхопневмонию.

Срок гистологического исследования от 5 до 10 дней.

НД: Лабораторная диагностика листериоза животных и людей, меры борьбы и профилактики (инструктивные документы). Утв. ГУВ Госагропрома СССР 13.02.1987. Утв. ГУ карантинных инфекций М3 СССР 04.09.1986.

Псрипмслмония крупного рогатого скота.

На вскрытии отмечают крупозное воспаление легких и фибринозный плеврит. Пораженные участки легких гепатизированы, окрашены в красный (красная гепатаза-ция) или серый (серая гепатизация) цвета, а в целом имеют мраморный вид.

11

Для гистологического исследования срезы изготавливают из измененных участков легких, бронхиальных и средостенных лимфоузлов, окрашивают гематоксилин-эозином.

При гистоисследовании находят гиперемию легочных капилляров. На стадии красной гепатизацки альвеолы заполнены фибрином с примесью лейкоцитов и эритроцитов. на стадии серой • признаки анемии: из капилляров кровь вытеснена скопившимся в альвеолах фибрином. Альвеолярное строение напоминает рыбачью сеть. В бронхах и средостенных лимфоузлах лимфоидная гиперплазия.

Срок гистоисследования 5-7 дней.

НД. Методические указания по проведению обязательного минимума исследований, в ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных. Утв. ГУВ МСХ СССР 24.06.Т971.

Респираторный микоплахчоз.

Трупы птицы истощены. Вокруг носовых отверстий корочки засохшего экссудата серо-коричневого цвета. У цыплят и индюшат серозный конъюнктивит и припуха-ние инфраорбитальных синусов. В верхних дыхательных путях серозный или катаральный экссудат, у некоторых птиц - со сгустками фибрина или зернами казеозных масс, которые могут полностью закупоривать носовую полость и инфраорбитальный синус. Слизистая оболочка гиперемирована, набухшая, иногда с точечными н полосчатыми кровоизлияниями. При хроническом течении слизистая бледная, неравномерно утолщена, слабо гиперемирована.

Изменения в легких сопровождаются кровенаполнением, серозным отеком, катаральным или фибринозным воспалением. В участках воспаления обнаруживают серо-желтые некротические очаги, реже - инкапсу лированные секвестры. Их обнаруживают также в бронхах, соединяющих легкое с воздухоносным мешком. При этом просвет бронха заполнен фибринозно-казеозной массой. В воздухоносных мешках на ранних стадиях патологического процесса обнаруживают росинчатоподобные полушаровил-ные образования, очаговые утолщения н помутнение стенок, серозный экссудат с примесью небольшого количества фибрина в полости; при хроническом течении - резкое утолщение и полную непрозрачность стенки, частичный ее некроз, фибринозно-казеозные массы в полости. На поздних стадиях может быть почти полное эарашенне воздухоносного мешка соединительной тканью.

Чаще поражаются грудные воздухоносные мешки.

Изменения в других органах: в сердце - гиперемия коронарных сосудов, студенистая инфильтрация жира по их ходу, при наслоении колисептицемии- фибринозный перикардит, иногда зернистая дистрофия миокарда; в печени - дистрофия г$патоцитов, фибринозное воспаление капсулы; в почках - дистрофия эпителия канальцев; в селезенке - гиперплазия лимфоидной ткани; в железистом желудке и кишечнике -катаральное воспаление.

Патологоанатомические изменения позволяют поставить лишь предварительный диагноз.

Для гистологического исследования срезы изготавливают из стенки каудальной части носа, трахеи, измененных легких и воздухоносных мешков, окрашивают гемато ксилин-зози ном.

При гистоисследовании характерные изменения заключаются в следующем:

а) пролиферация эпителия слизистой оболочки верхних дыхательных путей и бронхов на фоне катарального, реже фибринозного воспаления с преобладанием в инфильтрате лимфоидных и плазматических клеток, гиперплазия лимфофоллихулов, трубчатое удлинение слизистых желез, выросты слизистой оболочки, напоминающие папилломы;

12

б)    катархльная или крупозная пневмония с очаговыми некрозами, окруженными гигантскими клетками, инкапсулированные секвестры;

в)    катаральный аэросаккулит, иногда с некротизацней стенки, иногда с образованием гигантоклеточных гранулем и инхапсулированых секвестров.

Срок гистологического исследования до 5 дней.

НД: Методические указания по проведению обязательного минимума исследований в ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных. Утв. ГУВ МСХ СССР 24.06.1971.

Сап.

Характерным патологоанатомическим признаком является сапной узелок. Он представляет собой инфекционную гранулему с просяное зерно (милиарный), горошину и больше, округлой формы. Молодые узелки полупрозрачные с гнойным, центральным участком, окружены красным пояском гиперсмированной, отечной ткани. Зрелые узелки содержат серовато-белую крошковидную некротическую массу, а по периферии окружены зоной сероватого цвета (грануляционная ткань) и красноватым пояском гиперемии. В старых узелках некротичесхая масса сухая, хорошо развита соединительная капсула.

Грануляционная ткань, окружающая сапной узелок, напоминает туберкулезную гранулему, состоит из зоны эпителиоидных, гигантских и лимфоидных клеток. Обызвествление бывает только в старых очагах.

В легких, кроме милиарных и крупноочаговых сапных изменений - результата генерализации - развиваются пневмонии ацинозные, ашшозно-нодозные, лобулярные, сливные, лобарные и кавернозные. Их патогенез связан с интраканпхулярным распространением воспалительного процесса по разветвлению бронхиального дерева н поражением анатомических структур легкого.

Ацинозная пневмония - поражается самая мелкая структура легкого, апинус, совокупность альвеол, обслуживаемых конечной бронхиолой. Образуются очажки размером 2 -3 мм. с неправильными контурами.

Ашшозио-ыодозная пневмония возникает при слиянии рядом расположенных ацинозных очажхов, которые имеют размер 3-4 мм. но меньше легочной дольки, очертания изрытые.

Лобулярная пневмония охватывает целые легочные дольки, очаги размером 1-1,5 см.

Сливная пневмония - поражается часть доли легкого, обычно сопровождается в виде бронхопневмонии. Легкие за пределами участка поражения синюшно-красного цвета, уплотнены, из бронхов выделяется гноевидная жидкость. Лобарная пневмония охватывает целые доли легкого. При прорыве некротических масс в бронх образуются каверны - кавернозная пневмония.

В одном легком могут развиваться разные виды сапной пневмонии. Сапные поражения могут распространяться на трахею, гортань и носовые перегородки. Поэтому в подслизистой ткани часто находят бугорки, язвы различного размера и формы с валикообразными краями грануляционной ткани н белым саловидным дном из той же ткани. При заживлении язв образуются рубцы, напоминающие морозный узор на оконном стекле.

При сапе поражаются лимфоузлы (подчелюстные, заглоточные, бронхиальные, средостенные, портальные и др.). Они увеличиваются в размере, становятся бугристые, в толше обнаруживаются сапные узелки на разных этапах формирования или диффузные поражения с гнойным размягчением.

Сап кожи возникает в результате генерализации и выражается образованием сапных узелков по ходу лимфатических сосудов кожи, поэтому они располагаются линейно (четхообразно;, находятся под эпидермисом.

13

Для гистологического исследовали* срезы изготавливают из кусочков пораженных органов и тканей (легких, лимфоузлов, кожи и ар.), окрашивают гематоксилин-эозином.

При гистоисследовании обращают внимание на характер строения сапной гранулемы. В сформированном узелке различают некротизированный, с глыбкамв хроматина, нередко с отложением извести, центр, окруженный зоной эпителноидных и лимфоидных клеток, среди которых находятся гигантские клетки, фибробласты и коллагеновые волокна. В более зрелых очагах находят соединительно-тканную капсулу. В гистосрезах из легкого находят мелкие очажки скоплений лейкоцитов в состоянии карно-рексиса и кариопикноза, а при сапной бронхопневмонии - в альвеолах серозно-фибринозный экссудат, лейкоциты и эпителиоидные клетки с ядрами в состоянии пик-ноза и рекснса. Для гранулем носовой перегородки характерно расположение зон эпн-телиондных и лимфоидных клеток.

Результаты патологоморфологических исследований учитывают вместе с другими исследованиями для установления диагноза.

Срок гистологического исследования до 15 дней.

НД: Наставление по диагностике сапа. Уть. Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода России 26.02.1996.

Методические указания по проведению обязательного минимума исследований в ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных. Утв. ГУВ МСХ

СССР 24.06.1971.

32 Болезни вирусной при РОД bi.

Аденоматоз легких овей и коз.

Болеют животные старше 1 года.

При вскрытии находят плотные, резко отграниченные, от неизмененных участков, возвышающиеся над поверхностью легочной плевры очаги сероватого, бледно-розового цвета, саловидные на разрезе. При диффузном поражении доли легких бугристые и состоят из слившихся аденоматозных очагов

Для гистологического исследования срезы изготавливают из пораженных легких и окрашивают гематоксилин-эозином.

При ги сто исследовании обнаруживают железистоподобные структуры, схожие по строению с аденокарциномой.

Срок гистологического исследования 5 дней.

НД: Временные методические указания по лабораторной диагностике аденома-тоза овец и коз. Утв. ГУВ МСХ СССР 2.07.1985.

Алеутская болезнь норок (плазмоцнтоз, пшергаммаглобулинемия.)

Протекает остро, подостро и хронически. При подостром и хроническом течении трупы истощены. На деснах, твердом и мягком небе часто множественные мелкие кровоточащие язвочки с коричневым дном. Почки нередко уменьшены в объеме, серожелтого цвета, сморщены, приобретают вид тутовых ягод. С обострением процесса почки увеличены, поверхность зернистая. На серо-желтом фоне коркового слоя выделяются точечные кровоизлияния и мелкие очажки (крапчатый вид).

Изменения в почках являются патогномоничными для данной болезни.

Печень непостоянно увеличена, имеет цвет красного дерева либо мускатного ореха. Желчный пузырь пустой, воспален. Стенка его утолщена, шероховатая, оливкового цвета. Селезенка, как правило, увеличена, темно-вишневого цвета, пятнистая, капсула напряжена. В хронических случаях селезенка иногда подвергается атрофии. Внутренностные лимфатические узлы часто набухшие, сочные, светло-серого цвета.

14

Для гистологического исследования срезы изготавливают из пораженных почек, печени, селезенки, лимфоузлов, окрашивают гематоксилин-эозином

При гистоисследовании обнаруживают картину плазмоиитоза. В норме плазмо-циты образуются и встречаются в костном мозге, при алеутской болезни их можно увидеть в почках, печени, селезенке и лимфоузлах. Плазм о питы - это крупные клетки с эксцентрически расположенным ядром и веерообразным ободком протоплазмы. Зерна хроматина располагаются под ядерной оболочкой как спицы в колесе При окрашивании по Браше (метиловый зеленый и пиронин) ядро окрашивается в светло-зеленый, а протоплазма в ярко-рубиновый цвет.

Как известно, плазматические клетки являются продуцентами антител. Эту функцию они выполняют в присутствии и при участии лимфоидных клеток. Поэтому при алеутской болезни в органах встречаются лимфоидно-плазматические пролифера-ты.

В почках при остром течении плазмошггы располагаются вокруг клубочков и канальцев коркового слоя. В полостях отдельных гломерул, в расширенных канальцах коркового слоя находят плотный белковый выпот и эритроциты. В подострых и хронических случаях в канальцах видны зернистые, гиалиновые и кровяные цилиндры (дис-протеинемия), зернисто-жировая дистрофия эпителия.

В печени при остром течении лимфоидно-плазмоцитарные инфильтраты обнаруживают в области триад, при подостром и хроническом - инфильтрация более интенсивная.

В селезенке и лимфоузлах кроме плазматических встречаются ретикулярные клетки.

Наиболее патогномоничными следует считать изменения в почках и печени.

Срок гистологического исследования 7 дней.

НД: Методические указания по проведению обязательного минимума исследований в ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных Утв. ГУВ МСХ СССР 24.06.1971.

Бешенство.

Патологоанатомические изменения малохарактерны. На вскрытии трупов отмечают истощение, цианоз слизистых оболочек, острое серозное воспаление желудочно-кишечного тракта. Слизистая гиперемирована, набухшая, по вершинам складок полосчатые, мелкопятнистые и точечные кровоизлияния и отдельные эрозии. У павших животных, особенно у собак, в желудке часто находят инородные предметы. Со стороны кишечника отмечают застойные в катаральные явления. В паренхиматозных органах застойные явления. Кровь плохо свертывается, темно-красного цвета Головной и спинной мозг - с признаками острой гиперемии и отека. В мозжечхе и продолговатом мозге диаледезные кровоизлияния.

Несмотря на то, что в патологоанатомической картине отсутствуют специфические изменения, по комплексу признаков можно заподозрить бешенство.

Для гистологического исследования срезы изготавливают из аммоновых рогов, мозжечка, продолговатого мозга и больших полушарий, окрашивают по Туревичу или Ленцу.

При гистоисследовании патогномоничным для бешенства является обнаружение телец-включений Бабеша-Негрн округлой или овальной формы величиной от 1 до 30 мкм (чаше 3 • 9 мкм). Это гомогенные ацидофильные белковые вещества, которые включают в себя базофнльные зернистые образования вирусных нуклеокалсинов различной структуры. Количество и размеры их прямо зависят от длительности инкубационного периода и продолжительности болезни.

15

В начальной стадии заболевания тельца Бабсша-Нсгри могут отсутствовать, но в цитоплазме нейронов обнаруживаются мелкие (размером до кокковых микроорганизмов) округлые ацидофильные бесструктурные гранулы.

В гистопрепаратах обнаруживают также изменения, характерные для острого энцефалита: периваскулярные инфильтраты в виде муфт преимущественно из лимфоидных клеток, вакуолизацию и острое набухание ганглиозных клеток, "узелки бешенства" из глиальных клеток на месте распавшихся нейронов.

Срок гистологического исследования до 5 дней.

НД: Методические указания по лабораторной ли агностике бешенства. Утв ГУВ МСХ СССР 27.02.1970 г.

Вирусный энтерит норок (болезнь форта Виллиам, панлейхопения. инфекционный энтерит),

Острая контагиозная болезнь норок, вызываемая вирусом и характеризующаяся воспалительно-некротическим поражением слизистой оболочки кишечника и желудка.

При вскрытии устанавливают резкую гиперемию слизистой желудка, гиперемию серозной кншечнкха. Слизистая оболочка кишечника местами отсутствует, оставшиеся участки набухшие и гидеремированы. Стенка кишечника истончена, напоминает папиросную бумагу. Брыжеечные лимфоузлы увеличены, гиперсмированы и отечны. Селезенка обычно увеличена. В печена и легких видимых изменений не обнаруживают.

В ветеринарную лабораторию направляют свежие трупы или убитых животных, или участки тошей и подвздошной кишок, зафиксированные в растворе формалина. Окраска гистосрезов гематоксилин-эозином.

При исследовании гистосрезов находят некроз слизистой оболочки кишечника, слушиванне цилиндрического эпителия, десквамадию, увеличение в 3-5 раз размеров эпителиальных клеток - "баллонирующие” клетки, наличие которых считают специфическим признаком. Срок гистологического исследования до 7 дней.

НД: Временные методические указания по гистологическому исследованию на вирусный энтерит норок. Утв. ГУВ МСХ СССР 23.05.1984 №115-ба.

Висна-маеди.

Клинико-морфологически протекает в двух формах:

-    висна - нервно-паралитическая;

-    маедн - респираторная.

Патоморфологические изменения при висва-маеди являются результатом иммунологической реакции, следствием проявления действия клеточного иммунитета на ан-тигенно измененные клетки хозяина.

Впсна (изнурение, истощение) - у павших животных отмечают атрофию подкожной жировой клетчатки и скелетных мышц, увеличение количества и помутнение спинномозговой жидкости, гиперемию мягкой мозговой оболочхи и субэпидимарных участков головного мозга, гиперемию и утолщение петель сосудистого сплетения боковых желудочков.

Для гистологического исследования срезы изготавливают из разных отделов головного мозга (продолговатый, варолиев мост, мозжечок, четверохолмие, эпиталамус, область боковых желудочков), окрашивают гематоксилая-эозином.

При гистоисследовании находят негнойный демиелизируюший менинго-энцефалит (мононуклеариоклсточные пролифераты в мягкой мозговой оболочке, в сером н белом веществе, в сосудистом сплетении боковых желудочков, лейкоцитарные перкваскулиты в сером я, особенно, белом веществе, диффузные или очаговые пролифераты из клеток глии, демиелоиизацию нервных волокон, очаговые некрозы мозгового вещества. Прогрессирующая интерстициальная пневмония.

16

ют кожу и брюшную стенку по белой линии, другой разрез - поперечный вдоль реберной дуги или перпендикулярно до поясничных мышц. Обращают внимание на содержимое брюшной полости, положение органов, вздутие кишечника и др. Отделяют мышцы от грудной клетки и делают два распила ребер, одни на границе с головкам;: ребер и второй отступя 5-6 см от грудной кости. Отделяют всю левую грудную стенку. Обращают внимание на содержимое грудной полости, положение органов и др. Для вскрытия ротовой полости удаляют нижнюю челюсть.

Дальнейшее патологоанатомическое исследование проводят по общепринятой

схеме.

Трупы крупного рогатого скота вскрывают в левом боковом или полубоковом положении, учитывая, что объемистый рубец находится в левой половине брюшной полости. Вскрытие брюшной и грудной полостей производят так же, как у лошади.

Трупы свиней вскрывают в спинном паложенин. Вскрывают и осматривают брюшную, грудную и ротовую полости, далее по общепринятой схеме.

Трупы собак, кошек, пушных зверей вскрывают в спинном положении.

Трупы птицы вскрывают в спинном положении. Проводят внешний осмотр, обращают внимание на пол, возраст, размеры тела и вес, упитанность, телосложение, состояние оперения, состояние слизистых оболочек и др.

Возрасту птиц определить бывает трудно. Обычно о нем судят по оперению, так как рост пера подчиняется определенному ритму, отставание в развитии птицы не препятствует росту пера. По этом)’ признак)' возраст у птицы можно определить с большой точностью.

Таблица №1

Развитие оперения в зависимости от возраста цыплят.

Состояние опереиия	Возраст (дней)
Тушка покрыта эмбриональным пухом, в крыльях насчиты-! вается 3-5 перьев.	1-3
1 Крылья доходят до хвоста	8
Оперяются плечи.	8-12
Появляются перья по обе стороны груди	13-16
Оперяется спина, и появляются перья на загривке и голени. Хвост поднимается кверху.	21
Оперяется задняя сторона шеи. вырастают маховые перья первого порядка.	35
Оперяются голова и нижняя часть туловища.	42

После седьмой недели жизни точно возраст определяют по смене маховых перьев.

В крыле десять маховых перьев первого порядка. Через каждые две недели последовательно выпадает одно маховое перо, начиная с внутреннего.

Можно также использовать характерные отличительные признаки молодых и взрослых птиц.

3

Основные отличительные признаки молодых и взрослых птиц.

Таблица 2

До одного года Старше одного года Клюв: мягкий, рог светлый Твердый, рог темный Когти: мягкие, короткие, остроутловатые. Твердые, длинные, по краям закругленные. Кожа: тонкая, нежная, белая, особенно под крыльями и на внутренней поверхности бедер. Толстая, грубая, желтоватая, особенно у птиц старше 2 лет. Чешуя ног: гладкая, блестящая. Шероховатая, у птиц старше 2 лет желтоватая. Кольца трахеи: легко сдавливаются Кости твёрдые, негибкие, неподвижные (особенно у водоплавающей птицы). Гребень: тонкий, гладкий, к 11-12 мес. полностью развит Толстый, шероховато-бугристый, окрашен несколько бледнее, с лёгким синеватым оттенком. Шпоры у петуха: до 5 мес. едва заметные, к 7 мес. достигают в длину 3 мм (без ороговевшего хоица). Длинные (до 10 мм), с ороговевшим концом. После 2 лет достигают 27 мм и изогнуты кверху. Перья: (утка, гусь) нежные, пух исчезает после 2.5 мес. Грубые Ногти: (индейка) чёрные В два года - серо-чёрные, в 3 года - розово-красные.

Следует обращать внимание на состояние кожи и кожных образований. Проверяют наличие кровоизлияний, сыпи, новообразований, ранений и др. Местные припухлости кожи могут быть связаны с развитием опухолей, что имеет диагностическое значение.

Для вскрытия грудобрюшной полости удаляют перо и пух с шеи, груди и живота, обнаженную поверхность кожи смачивают водой или дезинфицирующей жидкостью для того, чтобы мелкий пух и перо не прилипали к коже и не разлетались в воздухе. Делают разрез кожи по средней линии от подклювья до ануса и осторожно снимают кожу по обе стороны от разреза. Отпрепаровывают кожу с конечностей, предварительно сделав к ним перпендикулярные разрезы от белой линии. Взяв рукой за конечности, вылущивают бедренную кость из тазобедренного сустава с одной и другой стороны. Теперь труп будет лежать в спинном положении без дополнительной фиксации. Разрезают брюшные мышцы от конца грудной кости до ануса. Затем от конца грудной кости ножницами вправо и влево делают разрез до подреберья. Отделяют грудную кость, глубоко подрезая грудные мышцы, отростки грудной кости, стернальные ребра, кара-коидную кость и ключицу.

Осмотр органов производят по общепринятой схеме.

Патологоанатомическое исследование рыбы имеет важное диагностическое значение при большинстве болезней. Для вскрытия отбирают свежие трупы (жабры без признаков разложения) или живых больных рыб. В последнем случае рыбу обездвиживают: усыпляют пшнодилом (5-10 мг/л), хлоралгидратом (2-4 мг/л); разрушают спинной мозг иглой или разрезом позвоночника в области затылка.

Патологоанатомическое исследование рыбы начинают с наружного осмотра, обращая внимание на состояние внешних покровов, плавников, глаз и др. Удаляют жаберные крышки, обнажают жабры. Отмечают изменение их окраски, рисунка, наличие кровоизлияний, очагов некроза, цист паразитов и т. д. Ножницами отрезают 2-3 дужки

4

и просматривают под лупой. При необходимоеtи отделььые дсиисткм исследую; под микроскопом, для чего их помешают на предметное стекло, накрывают покровным. Определяют толщину складок, выявляют патологические изменения жабер. Брюшную полость рыб вскрывают путем разреза брюшной стенки по белой линии впереди от анального отверстия до области межчелюстного пространства. Вторым полулунным разрезом, проходящим по уровню боковой линии, отсекают брюшную стенку, обнажая внутренние органы.

Осматривают брюшную и сердечную полости, обращая внимание на расположение органов, наличие жидкости, се количество, цвет, запах, консистенцию, или газа, паразитов, внешний вид внутренних органов. У половозрастных особей отделяют гонады, отмечая при этом имеющуюся патологию: цвет, кровоизлияния, наличие мертвых икринок и др. Затем надрезают кишечник в области псевдодиафрагмы и ануса и извлекают весь комплекс внутренних органов. Отделяют желудок, кишечник, печень с желчным пузырем, селезенку. Отделяют плавательный пузырь и осматривают почки. Отмечают их размеры, консистенцию, цвет, кровенаполнение, наличие кровоизлияний, очагов некроза, рисунок на разрезе и др. Кишечник вскрывают, промывают в воде и просматривают состояние слизистой, учитывают количество гельминтов и др. При осмотре сердца отмечают размер, форму, состояние миокарда, степень наполнения полостей кровью, ее свертываемость, наличие сгустков, кровоизлияний. При осмотре плавательного пузыря отмечают форму , толщину и прозрачность оболочек, наличие кровоизлияний, пятен гемосидерина, экссудата или гноя в полости и т. д.

Черепную коробку вскрывают с помощью четырех разрезов: два боковых проходят от носовых ямок до затылочной области, третьим отсекают крышку у носовых ямок, четвертым - в области затылка. Осматривают оболочки головного мозга, характеризуют состояние вещества мозга.

При осмотре скелетной мускулатуры обращают внимание на цвет, консистенцию, наличие кровоизлияний, отеков, припухлостей, цист паразитов и др.

Результаты патологоанатомического исследования вместе с клиническими симптомами составляют комплекс признаков, на основании которых устанавливают диагноз, непосредственную причину заболевания и гибели рыб. В сомнительных случаях данные патологоанатомического исследования уточняют гистологическим -исследованием патматериала.

2.1.    Протоколирование вскрытия. Это письменное изложение всех тех отклонений от нормы или изменений, которые была отмечены при наружном осмотре трупа, вскрытии полостей и исследовании органов, равным образом - при исследовании отдельно представленных внутренних органов или их частей (кусочков), объединенных термином "патматернал" Записи должны быть точными и объективными. .

Письменное изложение результатов патологоанатомического исследования ведут в форме протоколов (можно использовать готовые бланки) или в форме отдельной записи. При вскрытии теленка, подсвинка, овцы, трупа животных других видов или отдельных птиц, доставленных в лабораторию для исследования, протокольные записи делают по каждому вскрытию, отдельной экспертизой. Если в лабораторию доставляют несколько поросят, шенков зверей, взрослых птиц или молодняк для одних и тех же целей исследования (отравление, подозрение на инфекцию и др.), протокольную запись можно делать одну на всю группу с указанием количества трупов или убитых животных, количества экспертиз (например, эксп. №1-7). При этом всю группу условно нумеруют, отмечают схожие патологоанатомические изменения или какие-либо особенности у отдельных трупов.

2.2.    Правила отбора и доставки патологического материала для гистологического исследования Для гистологического исследования отбирают кусочки печени, почек.

5

селезенки, легких, сердца, лимфоузлы, участки кишечника Для диагностики ряда заболеваний пробы отбирают из головного мозга, других тканей

Патматериал отбирают от свежих трупов или убитых животных. Из разных участков патологически измененных органов (тканей) вырезают небольшие кусочки толщиной не более 2 см (в лаборатории из них вырезают кусочки не толше 1 см). Вместе с пораженной захватывают и непораженную ткань. Выбор направления разрезов зависит от особенностей микроскопического строения, характера поражения органа. Из почки, лимфоузла вырезают оба слоя, из печени, селезенки, легких - захватывают капсулу.

2.3. Отобранный материал тотчас помешают в фиксирующую жидкость. Для этого используют.

-    Водный раствор продажного формалина (формалина 10-20 мл, воды водопроводной 90-80 мл.). Разводить формалин дистиллированной водой не рекомендуется;

-    Этиловый спирт. Используется как абсолютный, так и 96^е;

-    Ацетон. Применяется при необходимости быстрого фиксирования ткани.

Для выявления тонких цитологических струстур употребляются сложные фиксирующие жидкости:

-    Жидкость Карнуа (спирт абсолютный 60 мл, хлороформ 30 мл, уксусная кислота ледяная 10 мл). Жидкость готовится перед применением;

-    Жидкость Буэна (насыщенный водный раствор пикриновой кислоты 70 мл, формалин продажный 25 мл, уксусная кислота ледяная 5 мл). Жидкость готовится перед применением;

-    Жидкость Мюллера (двухромовокислый калий 2^ г., сернокислый натрий 1,0 г., дистиллированная вола 100 мл.);

-    Жидкость Орта (жидкость Мюллера 90 мл, формалин продажный 10 мл.);

-    Жидкость Ценкера (жидкость Мюллера 100 мл. сулема 5,0 г., уксусная кислота ледяная 5 мл.). Уксусная кислота добавляется перед применением;

Патологический материал фиксируют в стеклянной, эмалированной, керамической или полиэтиленовой посуде. Объем фиксирующей жидкости должен быть в 10 или более раз превышать объем патматериал а. Через сутки фиксирующую жидкость меняют. В ветеринарной лаборатории патматериал помещают в свежую фиксирующую жидкость.

Помещенный в фиксирующую жидкость патматериал отправляют в ветеринарную лаборатории В холодное время года во избежание промерзания патматериал, профилированный в формалине, перекладывают в 30-50% - ный раствор глицерина, приготовленный на 10%-ном растворе формалина, или в 70^е спирт, или в насыщенный раствор поваренной соли. При пересылке по почте профихеированный патматериал упаковывают в полиэтиленовый пакет. Кусочки перекладывают марлей или ватой, пропитанные раствором формалина или смесями, исключающими промерзание. Пакет с материалом помещают в другой или третий пакеты, затем упаковывают в бандероль или посылку.

Патматериал, отправляемый на исследование, маркируют. В емкость с кусочками помещают этикетку из плотной бумаги с указанием животного и даты отбора проб. Надписи делают простым карандашом. Если в емкости материал от нескольких животных, то каждый из них помещается в марлевый мешочек (или узелок), вместе с материалом помещается своя этикетка.

Патологический материал, предназначенный для гистологического исследования, следует уплотнить, иначе нельзя изготовить тонкие (10-20 мкм) срезы. Уплотнение гемогенизирует (делает однородным) материал, скрепляет тканевые элементы.

6

Наиболее употребительными способами уплотнения материала являются парафин, целлоидин, лед. желатина. Применяются также гликоль полиэтилен (карбовакс), эфирный воск, метакрилат, полиэтилен гликоль в смеси с нитроцеллюлозой и др.

2.4. Заливка в парафин.

Парафин представляет собой плотную массу, состоящую из смеси высокомолекулярных предельных углеводородов. Получают парафин как путем очистки озокерита (земляной воск), так и перегонкой из разных сортов нефти - бурых углей, торфа, сланцев. Парафин не обладает запахом, вкусом, растворяется в хлороформе, ксилоле, бензоле, сероуглероде, эфире. В патолого-гистологической технике пользуются аморфными сортами парафина. Перед употреблением парафин гемогевизируют, т.е. придают парафину аморфность и пластичность посредством повторного, сильного нагревания (на водяной бане, в кипящей воде) и быстрого охлаждения в снегу или холодной воде. Для большей пластичности к продажному парафину добавляют до 5% пчелиного воска.

Порядок заливки в парафин:

На 1 кусочек требуется 8-10 мл растворов.

Парафиновые блоки наклеивают на деревянные кубики, которые хранят в сухом

месте.

2.5. Заливка в целлоидин.

Целлоидин представляет собой чистый сорт коллодионной нитроклетчатки. Продается в виде пластин или стружки. До недавнего времени в качестве целлоидина использовали кино - рентгенопленку, легко воспламеняющуюся, т.е. имеющую нитро целлу л о кдную основу.

Заливка в целлоидин является наиболее распространенным и удобным способом уплотнения, т.к. обеспечивается более быстрая проводка и приготовление срезов. Порядок заливки в целлоидин:

На 1 кусочек требуется 8-10 мл растворов.

Целлоидиновые блоки наклеивают на деревянные кубики, которые хранят в 70° спирте.

Лед в качестве уплотняющего средства применяют при изготовлении срезов на замораживающем микротоме.

Для гистологического исследования следует использовать только спирт этиловый ректификованный ГОСТ 5962-67.

7

Для получения спирта	Нужно взять миллилитров
	96° спирт	Н20	90° спирт	Н20	80° спирт	Н20	70° спирт	Н20
40°	42	58	44	56	50	50	57	43
45*	47	53	50	50	56	44	64	36
50*	52	48	56	44	63	37	71	29
60е	63	37	67	33	75	25	86	14
70е	73	27	78	22	88	12	-	-
80е	83	17	89	11	-	-	-	-
90е	94	6	-	-	•	-	-	-

Правило смешивания ("правило креста").

Требуемую концентрацию раствора спирта пишут в месте пересечения двух линий, а исходную концентрацию - у концов этих линий слева (большая - вверху, меньшая - внизу). Затем на каждой линии производят вычитание одного стоящего на ней числа из другого и разность пишут у свободного конца той же линии. Полученные числа (расположены справа вверху и внизу) указывают сколько весовых частей каждого раствора следует взять, чтобы получить раствор требуемой концентрации.

Пример: Для получеь<ц* iv.v uwtu    еццрта    «..*    >'«/t'UOiw    следу    с;    ъзть

40 мл (весовых частей) 95%-ного спирта и 55 мл (весовых частей) воды 95    40

\ /

40

/ \

0    55

3. Специальная часть

ЗЛ.Болезни бактериальной природы

Туберкулез животных.

При диагностике туберкулеза обязательному осмотру подвергают заглоточные, подчелюстные, бронхиальные, средостенные, брыжеечные, надвымянные лимфоузлы, легкие, печень, селезенку', молочную железу, брюшину, кишечник.

Характерным патологоанатомическим признаком является туберкул (бугорок), инфекционная гранулема. Это округлые очаги, едва различимые глазом (субмилиарные), размером с просяное зерно (милиарные, от лат. milium -просо), до 1 см. и больше (солитарные). В центральной части очага находится серовато-белая некротическая масса - казеозный (от лат. caseus - творог) творожистый некроз, нередко с отложением извести. Вокруг некротического очага располагается типичная грануляционная ткань, состоящая из двух зон (от греч-zone - пояс): внутренний - из эпитслиоидных и гигантских клеток, наружный - из лимфоидных клеток.

Исходя из анатомического строения легких, поражения туберкулезом проявляются в виде:

- ацинозной пневмонии (от лат. acinus - гроздь), в воспалительный процесс вовлекаются ацинусы, которые объединяют несколько альвеол;

В

*    ашшозно-нодозной пневмонии {.от лат nodus узел), в воспалительный процесс вовлекаются несколько ацинусов, образуются фокусы размером до1 см., но меньше легочной дольки;

•    лобулярной пневмонии (от лат. lobula - долька), возникающей при поражении в пределах легочной дольки, часто встречается у крупного рогатого скота и свиней;

- лобарной пневмонии (от лат. lobus - доля), характеризующейся казеозным некрозом целых легочных долей, чаше передних.

Нередко разные виды туберкулезной пневмонии наблюдаются в одном легком. При прорыве казеозной массы в бронхи (прорыв грануляоионной зоны, при кашле и др.) образуются каверны (от лат, cavema - пещера) - кавернозная пневмония.

При поражении серозных покровов (плевра, брюшина, эпикард) у жвачных животных развивается так называемая жемчужница, которая характеризуется образованием узелков, напоминающих жемчуг.

У других животных туберкулез серозных покровов проявляется в виде казеозного плеврита, перитонита или перикардита с отложением на серозных покровах казеозных масс.

Туберкулез лимфатических узлов протекает в виде бугоркового, диффузного, казеозного лимфаденита и крупноклеточной гиперплазии. Лимфоузлы увеличены в размерах, имеют бугорковую поверхность, на разрезе видны казеозные очаги различной величины.

Туберкулез вымени проявляется в виде милиарного, крупноочагового лобулярного и казеозного мастита. На вскрытии находят узелхи различной величины или поражения долек вымени.

У крупного рогатого скота диагноз считают установленным при обнаружении типичных для туберкулеза патологоанатомических изменений в органах и лимфоузлах, или только в лимфоузлах.

У свиней обнаруживают обызвестленныс инкапсулированные единичные пли конгломерируюшие некрозы в лимфоузлах головы и брыжейки, реже - в легких, печени.

У маралов и пушных зверей регистрируют генерализованный процесс с образованием множественных туберкулов в органах и лимфоузлах.

Для гистологического исследования вырезают материал из органов и лимфоузлов, гистосрезы окрашивают гематоксилин-эозином.

Предварительный диагноз ставят на основании обнаружения гранулем с некротическим, частично или полностью обызвествленным центром, окруженным эпителио-идными, лимфоидными и гигантскими клетками и соединительво-тканной капсулой.

Срок гистологического исследования до 10 дней.

НД: ГОСТ 26072-89. Животные и птица сельскохозяйственные. Методы лабораторной диагностики туберкулеза.

Наставление по диагностике туберкулеза животных. Утв. ГУВ Госагропром* СССР 25.02.1986.

Туберкулез птиц.

Обязательному исследованию подвергают печень, селезенку, илеоцекальное соединение, трубчатую кость. Обнаруживают характерные для туберкулеза патологоанатомические изменения.

Анатомической особенностью птиц является отсутствие лимфоузлов, поэтому туберкулезные изменения происходят преимущественно в печени, кишечнике, яичнике, яйцеводах и костях. Опорным пунктом диагноза является туберкул, строение его сходно с туберкулом у млекопитающих. Казеозный некротический центр обызвествлению подвергается редко. Туберкулы находят в кишечнике, чаше в илеоцекальном участке

9

кишечника, т.к. здесь значительно развит лимфофолликулярный аппарат, а также в легких. часто в печени, селезенке.

Для гистологического исследования материал вырезают из печени, селезенки, илеоцекального соединения, других органов и тканей. Гистосрезы окрашивают гематоксилин-эозином, на микобактерии - по Циль-Нильсону. При гистоисследовании обнаруживают гранулемы, по строению сходные с таковыми у млекопитающих, типичные кислотоустойчивые микобактерии.

Срок гистологического исследования до 7 дней.

НД: ГОСТ 26072-89. Животные и птица сельскохозяйственные. Методы лабораторной диагностики туберкулеза.

Паратуберкула.

Обязательному патологоанатомическому осмотру подвергают кишечник и мезентериальные лимфоузлы. К специфическим изменениям относят:

-    у крупного рогатого скота - утолщение стенки тошей и подвздошной кишок, складчатость слизистой оболочки, поражение мезентериальных лимфоузлов;

-    у овец - в брыжеечных лимфоузлах в отличие от крупного рогатого скота - казеозные некротические очажки;

-    у верблюдов - в патологический процесс вовлекаются сычуг, сетка и кишечник, брыжеечные лимфоузлы;

-    у северных оленей и диких жвачных (косули, оленя) - тяжелые поражения в кишечнике и паренхиматозных органах.

Для гистологического исследований срезы изготавливают из кусочков подвздошной кишки и брыжеечных лимфоузлов, окрашивают гематоксилнн-эозином, на мнхобактерии - по Цнлъ-Нильсону в модификации окраски.

При гистоисследовании обнаруживают диффузные или в виде гранулем разрастания эпителиоидных клеток, иногда присутствуют гигантские клетки типа Лагганса. В гистосрезах, окрашенных по Циль-Нил ьсону, почта всегда находят Mycobacterium paratuberculosis, которые фагоцитированы эшггелиоидными и гигантскими клетками, но могут находиться и вне клеток.

Срок исследования от 5 до 10 дней.

НД: ГОСТ 26073-84. Животные сельскохозяйственные. Методы лабораторной диагностики оарагубеокудеза.

Лептоспироз.

У жвачных животных, лошадей, реже у свиней отмечают желтуху, на коже - облысение, в межмышечной ткани, средостении, брыжейке, сальнике, околопочечном пространстве - отечность. Гиперемия селезенки, увеличение лимфоузлов. Печень увеличена, глинистого цвета, дряблая. Почки увеличены, вишнево-глинистого или темно-коричневого цвета, множественные мелкие кровоизлияния. Моча темно-вишневого цвета.

У свиней часто безжелтушяый лептоспироз, протекает без симптом но. Наблюдаются аборты и мертворожденность. При вскрытии трупов плодов обнаруживают желтушность, отеки, геморрагический диатез.

У собак наблюдают две формы: желтушная (икторогемоглобинурия) и безжел-тушная (штутгартская болезнь, тиф собак). Патологоанатомические изменения при желтушной форме сходны с описанными у других животных. При безжелтушной форме развиваются эрозии и язвы на слизистой ротовой полости. Геморрагический гастроэнтерит. Содержимое желудка и кишечника окрашено в черно-красный цвет. Поражается гортань, верхняя треть трахеи. Легкие гиперемированы, уплотнены (за счет обызвествления межальвеолярных перегородок). Печень набухшая, с желто-бурыми пятнами. В почках острый или хронический интерстециальный нефрит.

Ю