Сборник

ИНСТРУКЦИЙ

no Во с болезнями пыБ

Министерство сельского хозяйства и продовольствия Российской Федерации

Сборник ИНСТРУКЦИЙ

по борьбе с болезнями рыб.

часть 1

Москва Отдел маркетинга АМБ-агро 1998

Содержание

I. ОРГАНИЗАЦИЯ ВЕТЕРИНАРНОГО НАДЗОРА ЗА РЫ ЬОХОЗЯЙСТВЕННЫМИ ПРЕДПРИЯТИЯМ И..........

и. встепшлпюодштлшшь ирлвиллдиягшювощпых

ХОЗЯЙСТВ.................-........................-...........-............................

1.2.    ВЕТЕРИНЛРПО-СЛНИТЛИ (ЫП ПРАВИЛА ДЛЯ ЛОСОСЕВЫХ

РЫБОВОДНЫХ ЗАВОДОВ-...............................................................

1.3.    ВЕТКРИ11API(О-САНПТАРНЫВ ПРАВИЛА ДЛЯ ЗАВОДОВ ПС

РАЛИ-ДКНИЮ ОСЕТРОВЫХ РЫВ....................................................

1.4.    ВЕТ]1РИ11ЛРНО-С:ЛШ1ТЛРНЫЕГ1РЛ1^НЛЛДЛЯ карантинных

рыбоводных хозяйств.....................-..............-.....................-

1.5.    НЕТЕРИНАПЮ-С ЛНПТАРНЫЕ ПРАВИЛА ДЛЯ ПЛЕМЕННЫХ

РЫБОВОДНЫХ ХОЗЯЙСТВ..................-......................................

1.6.    ИНСТРУКЦИЯ по ветеринарному надзору за

перевозками ЖИВОЙ РЫБЫ, ОПЛОДОТВОРЕННОЙ ИКРЫ, РАКОВ И ДРУГИХ ВОДНЫХ ОРГАНИЗМОв...................................

1.7.    I*1 iKOМЕНДЛЦИИ ПС ПЛАНИРОВАНИЮ И ПРОВЕДЕНИЮ

11РОТИП09ПИЭООТИЧКСКИХ МЕРОПРИЯТИЙ В РЫБОВОДНЫХ

ХОЗЯЙСТВАХ............-........-......................................-...................

I .Я. I (РАВИЛА ВЗЯТИЯ ПАТОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА, КРОПИ, КОРМОВ И ПЕРЕСЫЛКИ ИХ ДЛЯ ЛАБОРАТОРНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ............................................................................

2. ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ РЫБ.................. _............-59

2.1 111 1РУСНЫББОЛЕЗНИ.........-................. -...........................

2. 1. /. Методические указания по идентификации вирусов и

лабораторной диагностике вирусных болезней рыб...........................

2.1.2. Инструкция о мероприятиях пп профилактике и борьбе.

с се сен ней сиремией карпа (13BK)............ -....................

2.23. Инструкция о мероприятиях пп профилактике и борьбе с инфекционным некрозом гемопоэтической ткани

лососевых рыб.....-........ -...............................................................

2.1.1. Инструкция о мероприятиях по профилактике и ликвидации инфекционного некроза поджелудочной

железы лососевых рыб.........-.......................................-............... —

2.1.5. Инструкция о мероприятиях по борьбе с вирусной

геморрагической септицемией рыб........................................................

2.2. Бактериальные болезни и микозы

2.2 1 Инструкция о мероприятиях по профилактике и мерам

борьбы с фурункулезом лососевых рыб...................................................

2.2.2.    Временная инструкция но борьбе с ииОриозом рыб.....-......-................

2.2.3.    Методические указания по диагностике

чритрпдерматита карпа.........................................................................

2.2.2. Инструкция о мероприятиях пп борьбе с азралюпозом

карповых рыб .................. -...........

2.2.5. Методические указания пс определению патогенности

азромонад по степени ДНКизнпй активности....................................

307

2.2.6.    Инструкция о мероприятиях по профилактике и

ликвидации псевдомоноза рыб................. .......

2.2.7.    Методические указания по лабораторной диагностике

псевдомонозор рыб................................................................

2.2.8.    Временная инструкция о мероприятиях по борьбе с

миксобактсриозами лососевых рыб...................................

2.2.9.    Инструкция о мероприятиях по борьбе с

бронх иомикозом рыб........................................................

2.2.10.    Временная инструкция о мероприятиях по борьбе с сапролегниозом рыбы и икры в рыбоводных хозяйствах.

3. ИНВАЗИОННЫЕ БОЛЕЗНИ...

3.1. Г1РОТОЗООЗЫ___________________________________________________________

3.1.1.    Временная инструкция о мероприятиях но борьбе с

амбифриозом рыб в рыбоводных хозяйствах.....................

3.1.2.    Инструкция о мероприятиях по борьбе с

ихтиофтириозом рыб............................................

3.1.3.    Инструкция о мероприятиях по борьбе с

хилодопеялезом рыб в рыбоводных хозяйствах____

3.1.4.    Инструкция о мероприятиях по борьбе с

триходиниозом рыб в рыбоводных хозяйствах..................

3.1.5.    Временная инсп\рукция о мероприятиях по борьбе с

криптобиозом каспийской кумжи (каспийского лосося) на рыбоводных заводах........................................................

3.1. б. Инструкция о мероприятиях по борьбе с костиоюм рыб............................................................................

3.1.7.    Временная инструкция о мероприятиях по борьбе с

гексамитозом рыб......................... -........................

3.1.8.    Инструкция о мероприятиях по борьбе с кокцидиозныи

энтеритом карпа в прудовых хозяйствах.........................

3.1.9.    Инструкция по борьбе с миксобояезом толстолобиков о

прудовых рыбоводных хозяйствах..................................

3.1.10.    Временная инструкция о мероприятиях по борьбе с

хлоромиксозом лососевых рыб...........................................

3.1.11.    Временная инструкция о мероприятиях по борьбе с

воспалением плавательного пузыря (ВПП) карм.............

3.1.12.    Временная инструкция о мероприятиях по борьбе с

микроспоридиозами лососевых рыб .................................

3.1.13.    Временная инструкция о мероприятиях по борьбе с

гяугеозам судака.....................................................

3.2. ГЕЛЬМИНТОЭЫ--------------------------------------------------

3.2.1.    Инструкция о мероприятиях по борьбе с

гиродактияозом рыб ..............................................

3.2.2.    Инструкция о мероприятиях по борьбе с

дактилогирозом рыб о рыбоводных хозяйствах..............

3.2.3.    Инструкция о мероприятиях по борьбе с Сотриоцсфааезпм рыб в прудовых хозяйствах и садковых хозяйствах на водоемах-охладителях УЭС и

3.2.4.    Инструкция о мероприятиях по борьбе с кавиозом

карпа в прудовых хозяйствах..................... 242

3.2.5.    Инструкция о мероприятиях по борьбе с

кариофиллезом рыб .......................................................................... 245

3.2.6.    Прем емкая инструкция о мероприятиях по борьбе с

триеиофорозом лососевых и сиговых рыб........................ 248

3.2.7.    Инструкция о мероприятиях по борьбе с лигулеjom и

диграммозом рыб.......................................................... 25/

3.2.8 Премеипая инструкция о мероприятиях по борьбе с

протеоцефпясзом сиговых рыб...............................-............-............... 254

3.2.9.    Инструкция о мероприятиях по борьбе с дилепидозом

рыб................................................................. 256

3.2.10.    Временная инструкция о мероприятиях по борьбе с

ихтиокотияюрыюм сиговых рыб...................... 261

3.2.11.    Временная инструкция о мероприятиях по борьбе с

диплостомозами пресноводных рыб........................................................264

3.2.12.    Методические указания по определению возбудителей

диплпстомозов пресноводных рыб..................... 271

3.2.13.    Инструкция о мероприятиях по борьбе с филометроидозом карповых рыб в прудовых

хозяйствах......................... ..................... 287

3.3. КРУСГЛЦЮЗЫ И ДРУГИЕ ПАРАЗИТОЗЫ....................................„......................291

3.3.1. Инструкция о мероприятиях по борьбе с лернеозои рыб

в прудовых хозяйствах ....... ..............291

3.3 2. Временной инструкция о мероприятиях по борьбе с симэргазмлеюм растительноядных рыб в прудовых хозяйствах.................. 294

3.3.3.    Инструкция о мероприятиях по борьбе с аргулезом рыб.....................297

3.3.4.    Инструкция о мероприятиях по борьбе с писциколсзом

рыб в рыбоводных хозяйствах................................................................300

3.3.5.    Инструкция о мероприятиях по борьбе с полиподиозом

оеетрообразных рыб.................. S03

309

СБОРНИК ИНСТРУКЦИЙ ПО БОРЬБЕ С БОЛЕЗНЯМИ РЫБ

Координатор А.Б.Шестопалов

Редактор, д.б.н. А. М. Наумова

Редактор, к.ь.н. А.И.Мачпев

Технический редактор, оформление издания Л.В. Карпов

Компьютерная верстка Т.Л.Перова

Иэд. лиц. ЛР №021259 от 05.12.97. Сдано в набор 07.09 S8.

Подписано в печать 19.10.98. Бум. офсетная. Формат 60x86/16. Гарнитура Таймс Печать ризографическая. Уел. печ. л. 18,3. Тираж 500. Заказ 236.

АМБ-агро, 111621, Москва, ул. Оренбургская, 15 «б».

УДК 597-12 + 616.99-08 +576.893.1+576.895.1+576.895-3+576.89 +616.98-036.2:578+616.98-036.2:579.8

ISBN 5-93098-002-0

Сборник включает документы но организации нетернпарно-го надзора за рыбохозяйственными предприятиями и инструкции но борьбе с основными инфекционными и инвазионными болезнями рыб.

Подготовлен специалистами ветеринарных, рыбохозяйственных и других НИИ (ВИЭВ, ВИГИС, ВГНКИ, ЦП МВ Л и Республиканский эпизоотический отрад Департамента ветеринарии Минсельхозпрода России, ВНЙИГ1РХ, ГосНИОРХ, СибрыбНИИПроект, РосрыбНИИПрОскт, ЛРГУ, ВНИИР, КпсиНИИРХ, ВНИРО, ИнПА РАН, Институт цитологии РАН, ЦПС, ЦИПС).

Сборник предназначен для специалистов широкого профиля рыбоводных предприятий всех форм собственности, ихтиопатоло-гичсской и ветеринарной службы, рыбохозяйственных и ветеринарных НИИ и ВУЗов.

Ответственные за выпуск: начальник отдела организации противоэпнзоотичсских мероприятий, к.в.н. Н. А Еременко, гл. специалист, к.в.н. А.Н.Мачнсв (Департамент ветеринарии Минсельхозпрода России), проф. ТО.Л.Стрелков, д.б.И. А.М.Наумова (Межведомственная ихтиологическая комиссия Департамента рыболовства Минсельхозпрода России, ГосНИОРХ, ВНИИ ирригационного рыбоводства РАСХН).

Издается по заказу Департамеюпа ветеринарии. Межведомственной ихтиологической комиссии. Департамента рыболовства. Центральной производственной станции по борьбе с болезнями рыб Ассоциации Росрыбхоз Минсельхозпрода России, Отделении ветеринарной медицины РАСХН

© Департамент науки и технического npoipecca © Департамент ветеринарии

© Межведомственная ихтиологическая комиссия Департамента рыболовства Минсельхозпрода России

2

Инфекционные

болезни

рыб

В раздел включены действующие документы, утвержденные 1"УВ МСХ СССР соответственно порядку их изложения: 18мая 1967 г. с изменениями от 31 мая 197J г,; 21 мая 1985 г.; 29 декабря 1979 г.; 8 апреля 1985 г.; 23 апреля 1985 г.; 31 мая 1971 г.; 31 августа 1981 г. (извлечения).

Методические указания по лабораторной диагностике пссвдомонозов рыб

2.2.7. Методические указания по лаоооатооноИ диагностике псепдомонозов пыБ

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ    УТВЕРЖДАЮ

(Минсельхозпрод России)

ДЕПАРТАМЕНТ ВЕТЕРИНАРИИ

107139, Москва, Орликов пср., 1/11 Для телеграмм: Москва, 84 Минсельхозпрод Телекс: 4177.48 ЛЕН Телефоны: 975-58-50; 975-54-23 22.09ю98г. № 13-4-2/1403

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по лабораторной диагностике псевдомонозов рыб

). Общие положения

1.1.    Пссвдомоноз - инфекционная болезнь тепловодцых, холод-новодных и аквариумных рыб, встречающаяся в прудовых и индустриальных хозяйствах.

1.2.    Возбудителями пссвдомоноза являются вирулсшныс штаммы бактерий рода Pseudomonas. Чаще всего встречаются' виды Ps.fluorcsccns, Ps.putida, Ps.aurcofacitns, I’s.cypriniscpticum, Ps.intestinalis, Ps.anguilliscptica, Ps.chlororaphis. Каждый из н их видов может вызвать заболевание самостоятельно, в ассоциации друг с другом или друшми микроорганизмами.

1.3.    Для бактериологического исследования берут только живую больную рыбу. В каждом случае исследуют нс мснсс 5 экземпляров рыб с признаками болезни.

2. Бактериологическое исследование

2.1. Высевы производят из асцитной жидкости, печени, почек, селезенки, из крови (отдельно из каждой пробы) па чашки с МПА (pH 7,2-7,4).

156

Меюдические указания по лабораторной диажоомке пссвдоминоэов рыб

2.2.    Заболевание характеризуется септическим течением, поэтому и посевах из крови и паренхиматозных органов, как правило, обильный рост культуры возбудителя.

2.3.    Поссп можно производить шкжуляциопной пстлей, погружая сс в обследуемый орган и поворачивая несколько раз, шш пинцетом с изогнутыми брашнами,

2.4.    Посевы инкубируют при 25-2б^сС в течение 4К-72 часов. На МПА бактерии рода Pseudomonas образуют бесцветные или серова-то-белше полупрозрачные, круглые выпуклые колонии с ровными краями. На 3-4-е сутки отмечают образование желто-зеленого или оранжево-желтого флюоресцирующего пигмента. Ps.cypriniseplieum и некоторые штаммы Ps.fiuorescens могут образовывать слизистые колонии.

2.5.    При обнаружении на агаре характерною роста подозрительные колонии пересевают' на среду Юшглсра и чере-з 18 часов культуры, давшие на этой среде щелочную реакцшо (столбик и скошенная поверхность окрашивается в малиновый цвст), подвергают дальнейшему изучению. Для дифференциации возбудителей рода Pseudomonas от бактерий сходных с ними родов (табл. 1) определяют оксидазную активность, способность расщеплять глюкозу в среде Хыо-Лейфсопа (тест окисления-ферментации).

2.5.1.    Для определения оксида зной активности на небольшой участок скошенной поверхности с культурой наносят каплю смеси реактивов - 1%-ного водного раствора димстил-пярафенилендиамина (птдрохлорида или оксалата) и 1%-ного рас-твора а-нафтолп в 60° спирте-ректификате. Оксидазоположитель-ные колонии окрашиваются в синий цвет через 30-60 секунд- Окси-дазоотрицательные культуры дальше нс исследуются.

2.5.2.    При проведении теста окисления-ферментации (О/Ф) исследуемую культуру засевают уколом до дна в пробирку с 6 мл среды Хыо-Лсйфсона. Посевы инкубируют 96 часов при 25-26°С. Возбудители псевдомоноза окисляют глюкозу в аэробных условиях, поэтому среда в верхних слоях становится соломенно-желтой, нижний слой остается без изменения - ферментация нс происходит.

2.5.3.    В случае сомнительного результата теста окисления-ферментации проводят дополнительные исследования декарбокси-лазиой активности выделенных культур. Исследуемую культуру высевают в четыре пробирки со средой Мсштера ИЛИ Биргср-Крушииской, в три из которых добавлено по одной из аминокислот (аргинин, лизин, оршпин), четвертая - контрольная. Затем на поверхность среды наслаивается стерильное вазелиновое масло (примерно 1 мл). Посевы инкубируют 4 сугок при 25-26°С. Возбуди-

157

Методические указания по лабораторной диагностике пссвдомонозов рыб

тели псевдомоноза обладают аргшшн-дегидролазой, ио нс дскар-боксилируют лязип и орнитин, в результате чего цвет среды Бнргср-Крупшнской в пробирке с аргинином становится синим. Цвет среды Меллера изменяется до фиолетового, при слабой реакции становится голубовато-серым.

2.5.4.    Для определения видовой принадлежности культур проводят высевы на среды Гисса с маннитом, сахарозой, мальтозой, лактозой (см. табл. 2).

2.5.5.    Подвижность культуры определяют при посеве на среду Хъю-Лейфсона. Подвижные культуры растут диффузно, вызывая помутнение всей среды, неподвижные - строго по уколу (Ps.fluorescenc f. capsulata).

3. Биологическое исследование

3.1.    Биологическую пробу ставят на 6-10 клинически здоровых рыбах того же вида и возраста, от которых выделена культура возбудителя, завезенных из хозяйства, благополучного по данному заболеванию.

3.2.    Двухсуточную бульонную культуру вводят 4-6 рыбам внутримышечно и 4-6 рыбам внутрибрюшинно в дозе 0,3 мл. Рыбам массой более 150 г вводят по 0,5 мл культуры. Температура поды в аквариуме, где содержится зараженная рыба, должна быть в пределах 15-25° С.

3.3.    Одновременно ставят котроль на 6-10 рыбах, которым вводят стерильный МПБ в тех. же дозах. Срок наблюдения - 16 суток.

3.4.    В случае проявления заболевания или гибели рыб проводят бактериологическое исследование.

3.5.    Биологическую пробу считают положительной, если вес зараженные рыбы заболевают и не менее 50% из них погибает с признаками псевдомоноза, а из крови и внутренних органов реизоли-руют исходную культуру.

3.6.    Лабораторный диагноз на пссвдомоноз считают установленным при выделении культуры со свойствами, характерными для возбудителей болезни, и патогенпой дня подопытных рыб.

С утверждением настоящих Методических указаний утрачивают силу <f Методические указания по лабораторной диагностике нсеодомонозое рыб л. утвержденные ГУП Госагропромо СССР 12.06.1986 г

158

Методические указания по лабораторной диагностике псеадомоиозов рыб

Приложение I

Таблица I

Дифференциации бактерий рила Pseudomonas oi' бактерий сходных с ними родов

Основные признаки Pseudomonas Vibrio Aeronionas Plesiuinonas Оксидаза + + + + Расщепление глюкозы на среде ХмО'Ленфеила о/- О/Ф О/Ф -/Ф Лшин- дскарбоксилаза - + - + Ориитин- докарбоксилаза - + - + Аргннин- дскарбокеилазя + “ - +

Таблица 2

Дифференциации представителей рода Pseudomonas

Оспенные признаки Ps.fluo- rcscens Ps.puti- da Ps.intes -tinalis Ps.der- moalba Ps.aure ofsciens Ps.cyp- rinisep- ticum Ps.chlo- roraphis Наличие капсулы и мазках “ + “ Маннит - - К К К - • Мальтоза - к к к - - - Лактоза - к - к к - - Сахароза к/- -/к к к к - К

159

Методические указания по лабораторной дидгмостике псеьдомонодое рыб

Приложение 2

Рецепты специальных сред

1.    Среда Хъю-Лейфсона, Состав: пептона -2.0 г, хлорида натрия -5.0 г., калия фосфорнокислого двухзамаценного (К2НРО4) - 0.3 г. бромтимолового синего - 0.03 г, агар-агара -3.0 г дистиллированной воды - 1000 мл. Компоненты смешивают, расплавляют агар, pi I смеси доводят до 7.1-7.2. Среду кипятят, разливают в пробирки по 3 мл и стерилизуют в автоклаве при 1 aim (120°С) 20 мин. После охлаждения смеси до 45-50°С в каждую пробирку стерильно вносит но 0.3 мл 10%-ного стильного раствора глюкозы. Готовая среда ipa-вяиисго-зеленого цвета.

2.    Среда Меллера, Сосгаи: пептона -5.0 г, мясной воды (вода ч мясо берегся в соотношении 1:1) - 300.0 мл, бромкрезолопый красный 1.6%-иый раегвор - 0.625 мл, крезолошлй красный 0.2%-иы1'1 водный раегвор - 2.5 мл, D-глюкозы - 0.5 г, лиридоксаля (можно витамина Вб) - 5.0 г дистиллированной воды - 1000 мл. Компоненты смешивают, pH смеси доводят до 6.0 или 6.5. Затем среду делят на 4 части, в зри из которых добавляют по 1% одной из аминокислот - I-арпшшш, 1-лизина, 1-орнитина, (DL-формы - 2%). Четвертая часть среды (без аминокислоты) -контрольная. В пробирках с орнитниом pH среды устанавливаю'!' после добавления аминокислоты, перед стерилизацией. Среду разливают в пробирки по 2 мд и стерилизуют в автоклаве при 1 азы (120°С) 20 мин.

3.    Среда Биргер-Крушииской. Состав: гидролизата казенна (пептона) -5.0 г, дрожжевого экстракта - 3.0 мл, глюкозы - 1.0 г, индикатора бромтимолового синего - 45.0 мл (0.1%-ного раствора в 20%-ном спирте), дистиллированной воды - 1000 мл. Компонент смешивают, устанавливают pH смеси 6.0-6.2. Среду делят на 4 части, в три из которых добавляют по 1% одной из аминокислот - 1-аргинииа, 1-лизина, 1-орнитина, (DL-формы - 2%). Четвертая часть среды (без аминокислоты) - контрольная. В пробирках с орнитниом pH среды устанавливают после добавления аминокислоты, перед стерилизацией. Среду' разливают в пробирки по 2-4 мл и стерилизуют текучим паром 3 дня или в автоклаве при 0.5 атм 15 мин.

160