Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств имазамокса и имазапира в семенах подсолнечника, сои и растительных маслах при совместном присутствии методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2214—07

Издание официальное

Москва«2009

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств имазамокса и имазапира в семенах подсолнечника, сои и растительных маслах при совместном присутствии методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2214-07

новление градуировочной характеристики, подготовка концентрирующих патронов С18 Sep Рак и Sep Рак Silica,

7.1. Очистка органических растворителей

7.1.1. Ацетонитрил

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентокси-дом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.1.2. Гексан

Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты, до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

7,1.3. Хлористый метилен и этилацетат

Каждый растворитель промывают последовательно 5%-ным водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 50.

7.2. Приготовление растворов соляной кислоты

Для приготовления 1 N раствора в мерную колбу вместимостью 1000 см³, содержащую 300-400 см³ деионизованной воды, помещают 83 см³ концентрированной соляной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

Для приготовления 0.05, 0.025 и 0.01 N растворов в мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают соответственно 50, 25 и 10 см³ 1 N раствора соляной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

10

МУК 4.1.2214-07

7*5. Приготовление смеси для экстракции проб семян

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 600 см³ метанола, вносят 400 см³ 0.025 N раствора соляной кислоты, перемешивают.

7,4. Приготовление смеси для экстракции проб растительного масла

В колбу вместимостью 1000 -1500 см³ помещают 500 см³ ацетонитрила, вносят 500 см³ деионизованной воды и 20 см³ ледяной уксусной кислоты, перемешивают,

7.5. Приготовление 0,05 М раствора ацетата аммония

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 3,85 г уксуснокислого аммония, доводят водой до метки, вносят 1 см³ ледяной уксусной кислоты, перемешивают.

7.6. Приготовление 25%раствора метанола в 0,05 М растворе ацетата аммония

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 25 см³ метанола, доводят до метки 0,05 М раствором уксуснокислого аммония, перемешивают.

7.7. Приготовление 2% раствора уксусной кислоты вэтилацетате

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 2 см³ ледяной уксусной кислоты, доводят до метки этилацетатом, перемешивают.

7.8. Подготовка концентрирующих патронов С18 Sep Рак

7ЯЛ. Первая ступень очистки. Концентрирующий патрон промывают с помощью медицинского шприца 5 см³ метанола со скоростью прохождения растворителя через патрон 1-2 капли в сек., затем 5 см³ 0,01 N раствора соляной кислоты.

7.8.2. Вторая ступень очистки. Концентрирующий патрон промывают с помощью медицинского шприца последовательно гексаном.

11

хлористым метиленом, метанолом, водой, 0.05 N раствором соляной кислоты порциями по 3 см³.

Патроны готовят непосредственно перед использованием.

7.9.    Подготовка концентрирующих патронов Sep Рак Silica

Концентрирующий патрон промывают с помощью медицинского шприца последовательно метанолом, этилацетатом, хлористым метиленом порциями по 5 см³,

Патроны готовят непосредственно перед использованием. Нельзя допускать высыхания верхнего слоя сорбента.

7.10, Подготовка подвижных фаз для ВЭЖХ

7.10.    L Для определения имазамокса и имазапира в семенах сои,

растительных маслах, имазамокса — семенах подсолнечника

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 220 см³ ацетонитрила, 780 см³ деионизованной воды, 1 см³ орто-фосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр.

7.10.2. Для определения имазапира в семенах подсолнечника

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 160 см³ ацетонитрила, 20 см³ метанола 820 см³ деионизованной воды, 1 см³ орто-фосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр.

7.11. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.10.1 или 7.10.2.) при скорости подачи растворителя 1 см³/мий не менее 2-х часов до установления стабильной базовой линии.

7.12. Приготовление градуировочных растворов

7,12.1. Исходные растворы имазамокса и имазапира для градуировки (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,01 г имазамокса (имазапира), растворяют в 50-70 см³ метанола, доводят до метки этим же растворителем, тщатель-

МУК 4Л .2214-07

но перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3-х месяцев.

Градуировочные растворы № 2-5 действующих веществ готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходных растворов.

7.12.2.    Растворы 7V? 1 имазамокса и имазапира для градуировки (концентрация 10 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 1,0 см³ исходного раствора имазамокса или имазапира с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 7.12.1.), доводят до метки метанолом, тщательно перемешивают.

Растворы хранится в холодильнике не более месяца.

7.12.3.    Рабочие растворы №№ 2-5 имазамокса и имазапира для градуировки (концентрация 0.1-1 мкг/см³). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают по 1.0, 2.5, 5.0 и 10 см³ растворов № 1 имазамокса и имазапира с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.12.2.), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по п. 7.10.1, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №№ 2 - 5 с концентрацией имазамокса и имазапира 0.1, 0.25, 0.5 и 1.0 мкг/см³, соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике не более 5-ти дней.

7ЛЗ. Приготовление растворов внесения для оценки полноты извлечения имазамокса и имазапира из образцов

7.13.1.    Исходные растворы (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,01 г имазамокса (имазапира), растворяют в 50-70 см³ изопропилового спирта, доводят им же до метки, тщательно перемешивают.

7.13.2.    Основной раствор имазамокса и имазапира для внесения (концентрация каждого действующего вещества 10 мкг/см³).

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают по 10,0 см³ исходных растворов имазапира и имазамокса с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 7.13.1.), доводят до метки изопропанолом, тщательно перемешивают.

Раствор хранится в холодильнике не более месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внесено-найдено».

13

МУК 4.1.2214-07

7.14Установление градуировочных характеристик

Градуировочные характеристики, выражающие зависимость площадей пиков (отн. единицы) от концентрации имазамокса и имазапира в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки №№ 2-5.

В инжектор хроматографа вводят 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.3.1, или 9.3.2. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.

8, Отбор и хранение проб

Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТами 10852-86 «Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб», 17109-88 «Соя. Требования при заготовках и поставках», 22391-89 «Подсолнечник. Требования при заготовках и поставках», «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов (№ 2051-79 от 21.08,79).

Семена подсушивают в темноте до постоянного веса и хранят в тканевых мешочках в сухом, защищенном от света месте при комнатной температуре не более 6-ти месяцев. Измельченные пробы зерна (аналитические образцы массой 20 г) замораживают и хранят при температуре -18°С,

Пробы масла (помещенные в стеклянные флаконы) хранят в холодильнике в течение 3-х месяцев.

Перед анализом образцы подсушенных семян измельчают.

9. Выполнение определения

9.1. Семена сои и подсолнечника

9.1.1. Экстракция

Образец измельченных семян массой 20 г помещают в плоскодонную колбу вместимостью 400 см³ на шлифе, добавляют 200 см³ смеси для экстракции (метанол-0,025 N раствор соляной кислоты, 60:40, по объему), приготовленной по п. 7.3, интенсивно перемешивают в течение 5 мин.

МУК 4.1.2214-07

Пробам дают отстояться, затем надосадочную жидкость фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через двойной фильтр «красная лента», осадок на фильтре промывают 25 см³ метанола. Отфильтрованный экстракт переносят в мерный цилиндр вместимостью 250 см³ с пришлифованной пробкой, перемешивают, измеряют объем раствора, 1/5 его часть, эквивалентную 4 г семян (около 40 см³), переносят в круглодонную колбу вместимостью 100 см³, упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40°С до объема 8-10 см³. Очищают на концентрирующих патронах С18 Sep Рак по п.9 Л .2.1,

9.1.2. Очистка экстракта

9.1.2.1. Очистка экстракта на концентрирующих патронах С18 Sep Рак

Раствор в колбе, полученный по п. 9.1 Л., вносят с помощью медицинского шприца на концентрирующий патрон С18 Sep Рак, подготовленный по п. 7.8Л., со скоростью пропускания раствора 1-2 капли в сек. После нанесения пробы патрон промывают 5 см³ 0,01 N раствора соляной кислоты, элюат отбрасьюают. Вещества элюируют с патрона 9 см³ 25%-ного раствора метанола в 0,05 М растворе ацетата аммония (приготовленного по п. 7.6), собирая элюат в круглодонную колбу, упаривают его при температуре не выше 40°С до объема около 3 см³.

Полученный раствор, вносят с помощью медицинского шприца на концентрирующий патрон С18 Sep Рак, подготовленный, по п. 7.8.2. Колбу ополаскивают дважды по 1 см³ деионизованной воды, растворы также вносят на патрон. Скорость прохождения раствора через патрон не должна превышать 1-2 капли в сек.

Промывают патрон 3 см³ деионизованной воды, затем 3 см³ гексана. Гексан продавливают до нижнего края сорбента. Элюаты отбрасывают. Имазапир и имазамокс элюируют с патрона 15 см³ хлористого метилена, собирая элюат непосредственно в круглодонную колбу. При анализе проб семян сои и растительных масел раствор упаривают досуха при температуре не выше 35°С. Сухой остаток растворяют в 4 см³ подвижной фазы для ВЭЖХ (приготовленной по п. 7.10.1), центрифугируют (фильтруют через слой стекловаты, помещенный в конусную химическую воронку) и анализируют содержание имазамокса и имазапира по п. 9.3.1.

15

При анализе семян подсолнечника пробу дополнительно очищают на концентрирующем патроне Sep Рак Silica по п. 9 Л .2*2.

9А.2.2. Очистка экстракта семян подсолнечника на концентрирующих патронах Sep Рак Silica

Полученный по п. 9Л .2.1 раствор вносят с помощью медицинского шприца на сухой концентрирующий патрон Sep Рак Silica (подготовленный по п. 7.9) со скоростью пропускания раствора 1-2 капли в сек. Колбу ополаскивают 2 см³ хлористого метилена, который также наносят на патрон. После нанесения пробы патрон промывают 5 см³ смеси хлористый метилен-этилацетат (1:1, по объему), затем 5 см³ этилацета-та, элюат отбрасывают. Вещества элюируют с патрона 15 см³ 2%-ного раствора уксусной кислоты в этилацетате, собирая элюат в круглодонную колбу, упаривают при температуре не выше 40°С досуха. Остаток растворяют в 4 см³ подвижной фазы, подготовленной по п. 7.10.1, и анализируют содержание имазамокса по п. 9.3.1, имаза-пира- 9.3.2.

9,2. Масло

9.2.1. Экстракция

Образец масла массой 20 г помещают в коническую колбу вместимостью 200 - 250 см³, растворяют в 100 см³ гексана, переносят в делительную воронку вместимостью 500, добавляют 100 см³ смеси для экстракции (смесь ацетонитрил-вода, 1:1, с добавлением 2% ледяной уксусной кислоты), приготовленной по п. 7.4. Воронку интенсивно встряхивают 2 мин. После полного разделения фаз нижний слой осторожно декантируют через бумажный фильтр, помещенный в конусную воронку, в мерный цилиндр вместимостью 250 см³ с пришлифованной пробкой, доливают водой до 200 см³. Раствор перемешивают и помещают в холодильник (4-6°С) на 20-30 мин (раствор при этом мутнеет). Измеряют объем раствора, 1/5 его часть, эквивалентную 4 г масла (около 40 см³), переносят в круглодонную колбу вместимостью 100 см³, упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40°С до объема 8-10 см³. Очищают на концентрирующих патронах С18 Sep Рак по п.9.1.2.1.

9.3. Условия хроматографирования

МУК 4.1.2214-07

Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором (фирмы Perkin-Elmer, США)

Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4 мм, содержащая Кромасил 100 С18, зернением 7 мкм.

Температура колонки: комнатная Скорость потока элюента: 1 см³/мин Рабочая длина волны: 240 нм Объем вводимой пробы: 20 мм³ Чувствительность: 0,01 ед. абсорбции на шкалу

93.1. Определение имазамокса и имазапира е семенах сои, растительных маслах, имазамокса — семенах подсолнечника

Подвижная фаза:    ацетонитрил-вода-орто-фосфорная    кислота

(22:78:0.1, по объему)

Ориентировочное время выхода имазапира: 4,5-4,8 мин

имазамокса: 7,4-7,6 мин

93.2. Определение имазапира в семенах подсолнечника

Подвижная фаза: ацетонитрил-метанол-вода-орто-фосфорная кислота (16:2:82:0.1, по объему)

Ориентировочное время выхода имазапира: около 8 мин Линейный диапазон детектирования 2 - 20 нг Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 1,0 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой, приготовленной по п. 7.10.1., не более чем в 50 раз.

10. Обработка результатов анализа

Содержание имазамокса и имазапира в пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

C*K*V

X-------------- ,    где

ш

17

С - концентрация имазамокса (имазапира), найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования,

см³;

ш - масса анализируемого образца, г.

К = 5, с учетом объема экстракта, взятого для анализа.

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):

(о

где Хь Хг- результаты параллельных определений, мг/кг; г- значение предела повторяемости (таблица 1), при этом г = 2.8а_г.

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

(X ± А) мг/кг при вероятности Р= 0.95,

где X- среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

Д- граница абсолютной погрешности, мг/кг;

Д =8*Х/100,

где 5 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %.

Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде: «содержание имазамокса (имазапира) в пробе менее 0,1 мг/кг»*

* - 0,1 мг/кг - предел обнаружения.

МУК 4.1.2214-07

13. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецинзионность) методов и результатов измерений»,

13. L Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Величина добавки С_А должна удовлетворять условию:

где ± Д^(± Д^—) — характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой), мг/кг, при этом:

Д_л = ± 0,84 Д, где Д- граница абсолютной погрешности, мг/кг;

Д = 5 *Х/ 100,

где 6- граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном определяемых концентраций, таблица 1), %.

Контрольный параметр процедуры (К_к) рассчитывают по формуле:

к,= г-1-с,,

где X*, Х,С_д среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п.11) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг;

Норматив контроля К рассчитывают по формуле

19

ББК 51.21

0 60

О 60 Определение остаточных количеств имазамокса и имазапира в семенах подсолнечника, сои и растительных маслах при совместном присутствии методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. - М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Рос потребиадзора, 2009. - 20 с.

1.    Разработаны Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эри-смаяа (авторы Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Волкова В.Н., Ларькина М.В.)

2.    Рекомендованы к утверждению комиссией по санитар но- эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол № i

от 29.03.2007).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 25 мая 2007 г.

4, Введены впервые.

ББК 51.21

Формат 60x88/16    Печ.    л.    1,25

Тираж 200 экз.

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., д. 18/20

Тиражировано отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора И 7105, Москва, Варшавское ill, 19а Отделение реализации, телефакс 952-50-89

© Роспотребнадзор, 2009 © Федеральный центр гигиены н эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009

МУК 4Л. 2214-07

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г.Г, Онищенко

25 мая 2007 г.

Дата введения: 15 августа 2007 г.

Определение остаточных количеств имазамокса и имазапира в семенах подсолнечника, сои и растительных маслах при совместном присутствии методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания

МУК 4.1. 2214 - 07

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовых концентраций имазамокса и имазапира в семенах подсолнечника и сои, а также растительных маслах в диапазоне 0,1 -1 мг/кг.

Имазамокс и имазапир - действующие вещества препарата ЕВРОЛАЙТНИНГ, ВРК (33 г/л имазамокса + 15 г/л имазапира), фирма-производитель «БАСФ».

Имазамокс

(К5)-2-(4-изопропил-4-метил-5-оксо-2-ймидазолин-2-ил)-5-метоксиметилнико-тиновая кислота (IUPAC)

C15H19N3O4 Мол. масса 305,3

3

Кристаллическое вещество белого цвета, без запаха. Температура плавления: 166,0-166,7°С. Давление паров при 20°С < 1,3 ^х! О'² мПа. Растворимость в органических растворителях при 20°С (г/дм³): ацетон -29,3; ацетонитрил - 19,0; гексан - 0,007; дихлорметан - 218,0; метанол - 67,5. Растворимость в воде при 20°С - 4,16 г/дм³. Вещество стабильно к гидролизу при pH 5, 7 и 9. Быстро подвергается фотолитиче-скому разложению в воде: DT50 - 6,8 ч.

Краткая токсикологическая характеристика:

Острая пероральная токсичность (LD ₅₀) для крыс - более 5000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD ₅₀) для кроликов

>    4000 мг/кг, острая ингаляционная токсичность (LK50) для крыс

>    6300 мг/м\

Имазапир

2-(4-изопропил-4-метил-5-оксо-2-имидазолон-2-ил)никотиновая

<°W»ch.

О

кислота (IUPAC)

c₁₃h₁₅n₃o₃

Мол. масса 261,3

Порошок от белого до желто-коричневого цвета со слабым запахом уксусной кислоты. Температура плавления 169-173°С. Давление паров при 60°С: менее 0,013 мПа. Растворимость в органических растворителях при 25°С (г/100 см³): дихлорметан — 8,72; ацетон - 3,39; метанол - 10,5; толуол - 0,18; гексан - 0,00095. Растворимость в воде (г/дм³): 9,74 (15°С); 11,3 (25°С).

Стабилен в водной среде при pH 5 - 9 в темноте. Разрушается в растворе в кислой среде на солнечном свету. DT50 6 дней при pH 5-9.

Константа диссоциации: рК\ - 1,9; рК₂ - 3,6; рК₃ -11.

4

МУК 4.1.2214-07

Краткая токсикологическая характеристика:

Острая пероральная токсичность (LD 50) для крыс > 5000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD ₅₀) для кроликов > 2000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LK₅₀) для крыс - 1,3 мг/дм³.

Область применения препарата

Препарат Евролайтнинг, ВРК рекомендуется в качестве гербицида для борьбы с однолетними двудольными и злаковыми сорняками в посевах подсолнечника и сои (опрыскивание в период вегетации).

ВМДУ имазамокса в семенах и масле сои — 1 мг/кг. Рекомендуемые ВМДУ имазамокса и имазапира в семенах и масле подсолнечника, имазапира в семенах и масле сои - 1 мг/кг.

1. Метрологические характеристики

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и её составляющие) результатов измерений при доверительной вероятйости Р=0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1

Метрологические параметры

Анализи руемый объект	Диапазон определяемых концентраций, мг/кг	Показатель точности (граница относительной погрешности), ±5, % Р-0,95	Стандартное откло- , нение повторяемости, ог, %	Предел повторяемости, г, %	Предел воспроизводимости, R, %
имазамоке
Семена сои	от 0,1 до 1	25	5,5	15	18
Семена подсол нечника	от 0,1 до 1	25	5,7	16	19
Расти тельное масло	от 0,1 до 1	25	3,7	10	12

МУК 4.1.2214-07

нмазапир Семена сои от 0,1 до 1 25 5,8 16 19 Семена подсол нечника от 0,1 до 1 25 6,4 18 21 Расти тельное масло от 0,1 до 1 25 5,8 16 19

Полнота извлечения веществ, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для полного диапазона концентраций (п = 20) приведены в таблице 2.

Таблица 2

Анализируемый объект Метрологические параметры, Р = 0,95, п - 20 Предел обнару жения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций мг/кг Среднее значение определения % Стандартное отклонение, S,% Доверительный интервал среднего результата, ____ нмазамокс Семена сои 0,1 0,1-1 88,3 4,° 5,0 Семена подсолнечника 0,1 0,1-1 86,9 3,9 4,8 Растительное масло 0,1 0,1 - 1 94,1 2,6 3,2 нмазапир Семена сои 0,1 0,1-1 81,2 4,2 5,2 Семена подсолнечника 0,1 0,1-1 79,9 4,5 5,8 Растительное масло 0,1 0,1-1 92,3 4,3 5,3

2. Метод измерений

Методика основана на определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором после экстракции анализируемых проб семян под-

6

МУК 4.1.2214-07

солнечника и сои смесью метанол-соляная кислота, растительного масла - ацетонитрил-вода-уксусная кислота, последовательной 2-х стадийной очистки на концентрирующих патронах С18 Sep Рак. Экстракт семян подсолнечника дополнительно очищают на патронах Sep Рак Silica.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях определения метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

ЗЛ. Средства измерений

Жидкостной хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны (фирмы Perkin-Elmer, США)

Весы аналитические ВЛА-200

Весы лабораторные общего назначения, с наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г

Колбы мерные вместимостью 2-100-2,2-500-2, 2-1000-2 Меры массы

Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 см³

Пробирки градуированные с пришлифованной пробкой вместимостью 5 и 10 см³

Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 25, 50, 100,250, 500 и 1000 см³

Номер Госреесгра 15945-97

ГОСТ 24104 ГОСТ 7328

ГОСТ 1770 ГОСТ 7328 ГОСТ 29227

ГОСТ 1770

ГОСТ 1770

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2, Реактивы

Имазамокс, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества 98,0% (ф. БАСФ, Германия)

Имазапир, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества 99,4% (ф. БАСФ, Германия)

Аммоний уксуснокислый, хч Ацетонитрил для хроматографии, хч Вода деионизованная н-Гексан, для ВЭЖХ

ГОСТ 3117 ТУ 6-09-4326-76

ТУ 6-09-4521-77

Кислота орто-фосфорная, хм, 85%    ГОСТ    6552

Кислота соляная, хч    ГОСТ    3118

Кислота уксусная ледяная, хч    ГОСТ 61

Метилен хлористый (дихлорметан), хч    ГОСТ    12794

Метиловый спирт (метанол), хч    ГОСТ    6995

Этиловый эфир уксусной кислоты (этилацетат), хч    ГОСТ    22300

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

3.3. Вспомогательные устройства, материалы

Аппарат для встряхивания типа АВУ-бс Бумажные фильтры «красная лента», обеззоленные или фильтры из хроматографической бумаги Ватман ЗММ Воронка Бюхнера

Воронка делительная вместимостью 500 см³ Воронки конусные диаметром 30-37 и 60 мм Г руша резиновая

Индикаторная бумага, универсальная Колба Бунзена

Колбы плоскодонные вместимостью 100,250,400-500 см³ Колбы грушевидные на шлифе вместимостью 100-150 см³ Мембранные фильтры капроновые, диаметром 47 мм Набор для фильтрации растворителей через мембрану Насос водоструйный вакуумный Стаканы химические, вместимостью 100, 500 см³ Стекловата Стеклянные палочки

Патроны для твердофазной экстракции С18 Sep Рак, Classik

(Waters, США), масса сорбента 360 мг

Патроны для твердофазной экстракции Sep Рак Silica,

(Waters, США), объем сорбента 2 см³

Ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi,

Швейцария

Установка для перегонки растворителей Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Кромасил 100 С18, зернением 7 мкм

Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50-100 мм³

Шприцы медицинские с разъемом Льюера вместимостью

5 и 10 см³

Центрифуга

Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

8

МУК 4.1.2214-07

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5 Л 313-03 «Предельнодопустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20±5)°С и относительной влажности не более 80%.

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, градуировочных растворов, растворов внесения, подвижных фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, уста-

9