Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование __Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств метконазола в воде, почве, зерне, соломе зерновых, семенах, масле рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2407—08

Издание официальное

Москва • 2009

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. Методы контроля. Химические факторы

Определение остаточных количеств метконазола в воде, почве, зерне, соломе зерновых, семенах, масле рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2407-08

МУК 4.1.2407-08

7.2.2. Исходный раствор транс-метконазола для градуировки (концентрация 250 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,025 г транс-метконазола, растворяют в 50 - 60 см³ этилаце-тата, доводят этилацетатом до метки, тщательно перемешивают.

Растворы хранят в морозильной камере при температуре < -15 °С в течение месяца.

7.2.5. Раствор № 1 цис-метконазола для градуировки (концентрация 10 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 4 см³ исходного раствора цис-метконазола с концентрацией 250 мкг/см³ (п. 7.2.1.), разбавляют этилацетатом до метки.

7.2.4.    Раствор Ns 2 транс-метконазола для градуировки (концентрация 10 мкг/см³), В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 4 см³ исходного раствора транс-метконазола с концентрацией 250 мкг/см³ (п. 7.2.2), разбавляют этилацетатом до метки.

Градуировочный раствор № 1 и 2 хранят в морозильной камере при температуре <-15 °С в течение месяца. Эти растворы используют для установления времени удерживания каждого изомера при хроматографировании.

7.2.5.    Раствор Ns 3 цис-метконазола и транс-метконазола для градуировки (концентрация по 25 мкг/см³ каждого изомера). В мерную колбу вместимостью 50 см³ помещают по 5 см³ исходных растворов цис- и транс-метконазола с концентрацией 250 мкг/см³ (п.п. 7.2.1 и 7.2.2), разбавляют этилацетатом до метки.

Раствор .№ 3 хранят в морозильной камере при температуре < -15°С в течение 30-ти дней.

7.2.6.    Рабочие растворы Ns 4 - 7 цис-метконазола и транс-метконазола для градуировки и внесения (концентрация по 2.5 - 0.25 мкг/см³ каждого изомера). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают по 1.0; 2.0; 4.0 и 10.0 см³ градуировочного раствора № 3 с концентрацией 25 мкг/см³ (п. 7.2,5.), доводят до метки этилацетатом, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №№ 4 - 7 с концентрацией цис- и транс-метконазола по 0.25, 0.5, 1.0 и 2.5 мкг/см³ каждого изомера, соответственно.

Растворы хранят в холодильнике при температуре 4-6 °С в течение 14-ти дней.

7.3. Приготовление растворов внесения

7.3.1. Исходные растворы цис- и транс-метконазола для внесения (концентрация 100 мкг/см каждого изомера). В мерную колбу вме-

МУК 4.1.2407-08

стимостью 100 см³ помещают по 0,01 г цис- и транс-метконазола, растворяют в 50 - 60 см³ метанола (этилацетата), доводят метанолом (этилацетатом) до метки, тщательно перемешивают.

Растворы хранят в морозильной камере при температуре < -15 °С в течение месяца.

73.2. Растворы № 1 и 2 цис-метконазола и транс-метконазола для внесения (концентрация 5 мкг/см³ каждого изомера). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 5 см³ исходного раствора цис- и транс- метконазола с концентрацией 100 мкг/см³ каждого изомера (п.п. 7.3.1), разбавляют метанолом (этилацетатом) до метки.

Растворы № 1 и 2 хранят в морозильной камере при температуре <-15 °С в течение месяца.

Раствор в метаноле (№ 1) используют для приготовления проб воды, почвы, зерна и соломы зерновых с внесением при оценке полноты извлечения метконазола методом «внесено-найдено», а также контроле качества результатов измерений методом добавок.

Раствор в этилацетате (№ 2) используют для приготовления проб семян и масла рапса с внесением при оценке полноты извлечения метконазола методом «внесено-найдено», а также контроле качества результатов измерений методом добавок.

7.4. Установление градуировочных характеристик

Градуировочные характеристики, выражающие линейную (с угловым коэффициентом) зависимость площади пика (мВ-сек) от концентраций цис- и транс- изомеров метконазола в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки.

В испаритель хроматографа вводят no 1 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.5. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают, площади пиков двух изомеров метконазола.

Градуировочные графики проверяют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов. Если значения площадей отличаются более, чем на 16% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки.

11

МУК 4.1.2407-08

7.5. Приготовление 7,5 % раствора хлорида натрия

В мерную колбу вместимостью 500 см³ помещают 40,5 г хлористого натрия, растворяют в 250-300 см³ деионизованной воды, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

7,6. Подготовка колонки с силикагелем для очистки экстрактов

Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см, внутренним диаметром 12 мм уплотняют тампоном из стекловаты, выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 4 г силикагеля в 20 см³ гексана. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия массой 1 г. Колонка готова к работе.

7.7. Проверка хроматографического поведения метконазола на колонке с силикагелем

В круглодонную колбу вместимостью 10 см³ помещают 0,5 см³ раствора № 1 метконазола для внесения с концентрацией 5 мкг/см³ каждого изомера (п. 7.3.6 или 7.3.6), упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °С. Сухой остаток растворяют в 0,5 см³ этилацетата, помещают на ультразвуковую баню на 1 мин, добавляют 5 см³ гексана, перемешивают и наносят на колонку, подготовленную по п. 7.6. Колбу обмывают 2,0 см³ смеси гексан-эти л ацетат, которые также наносят на колонку. Промывают колонку последовательно 40 см³ смеси гексан-этилацетат (8:2, по объему), 30 см³смеси гексан - этилацетат (1:1, по объему), элюаты отбрасывают.

Затем колонку промывают 60 см³ этилацетата и 30 см³ смеси этил-ацетат-метанол (3:1, по объему) со скоростью 1-2 капли в сек. Фракци-онно (по 15 см³) отбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 1 см³ этилацетата, анализируют содержание метконазола 9.5.

Фракции, содержащие метконазол, объединяют и вновь анализируют.

Устанавливают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.

ПРИМЕЧАНИЕ: Проверку хроматографического поведения метконазола следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.

МУК 4 Л .2407-08

8. Отбор и хранение проб

Отбор проб проводят в соответствии с требованиями: вода - ГОСТ Р 51592-2000 «Вода. Общие требования к отбору проб», почва - ГОСТ 1743.01-83 «Почва, общие требования к отбору проб», ГОСТ 26950-89 «Почвы. Отбор проб», зерно - ГОСТ 13586.3-83 «Зерно. Правила приемки и методы отбора проб», ГОСТ Р 50436-92 «Зерновые. Отбор проб зерна», солома - ОСТ 27262-87 «Корма растительного происхождения. Методы отбора проб» рапс - ГОСТ 10583-76 «Рапс. Требования при заготовках и поставках», ГОСТ 10852-86 «Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб», ГОСТ 8988-2002 «Масло рапсовое. Технические условия» и Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов (№2051 - 79 от 21.08.79 г).

Отобранные пробы воды, почвы, зерна и соломы зерновых, семян рапса хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более недели. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре -18 °С.

Пробы масла хранят в закрытой стеклянной при температуре 4-6 °С в темноте.

Перед анализом образцы воды фильтруют через неплотный бумажный фильтр, почвы - просеивают через сито с отверстиями диаметром 1 мм, зерно и солому зерновых, семена рапса измельчают на лабораторной мельнице.

9. Выполнение определения

9.1. Вода

9.7.7. Экстракция Образец отфильтрованной воды объемом 250 см³ помещают делительную воронку на 500 см³, добавляют 75 см³ хлористого метилена, интенсивно встряхивают в течение 5 мин. После разделения фаз нижний органический слой отделяют, фильтруют через слой безводного сульфата натрия, помещенный на бумажном фильтре в конусной воронке, в круглодонную колбу вместимостью 500 см³. Операцию экстракции водной фазы повторяют дважды, используя по 75 см³ хлористого метилена.

13

МУК 4.1.2407-08

Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 35 °С и подвергают дополнительной очистке по п. 9.1.2.

9.1.2. Очистка экстракта на колонке с силикагелем Остаток, полученный по п. 9.1.1, 9.2.2 или 9.3.2, находящийся в круглодонной колбе, растворяют в 0,5 см³ этилацетата, помещая на ультразвуковую баню на 1 мин, добавляют 5 см³ гексана, перемешивают. Затем раствор наносят на колонку, подготовленную по п. 7.6. Колбу обмывают дважды гексаном порциями по 2,5 см³, которые также наносят на колонку. Промывают колонку последовательно 50 см³ гексана, 20 см³ смеси гексан-этилацетат (9:1 по объему), элюаты отбрасывают.

Метконазол элюируют с колонки 60 см³ этилацетата и 30 см³ смеси этилацетат-метанол (3:1, по объему) со скоростью 1-2 капли в сек, собирая элюат в круглодонную колбу вместимостью 150-250 см³, раствор упаривают досуха при температуре не выше 35 °С, Сухой остаток растворяют в 1,5 см³ этилацетата (исследование воды), 4 см³ этилацетата (исследование почвы), 2 см³ этилацетата (исследование зерна зерновых), 1 см³ этилацетата (исследование соломы зерновых), 3 см³ этилацетата (исследование семян и масла рапса) и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.5.

9.2, Почва, зерно, солома

9.2. L Экстракция Образецы почвы, измельченного зерна массой 20 г, соломы массой 5 г помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 см³, вносят 50 см³ (для соломы - 75 см³) смеси ацетон-гексан (1:1, по объему), помещают на встряхиватель на 1 час. Полученный экстракт (надосадочная жидкость) осторожно декантируют, фильтруют на воронке Бюхнера через двойной бумажный фильтр «красная лента» под вакуумом. Осадок на фильтре возвращают в колбу и повторяют экстракцию дополнительной порцией смеси объемом 30 см³ (для соломы 50 см³), выдерживая на встряхивателе 20 мин. Экстракт фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через бумажный фильтр «красная лента», осадок на фильтре промывают 10 см³ этой же смеси.

МУК 4.1.2407-08

Объединенный отфильтрованный экстракт переносят в делитель* ную воронку на 500 см³ (для соломы - 1000 см³) и проводят очистку экстракта по п. 9.2*2.

9.2.2. Очистка экстракта перераспределением е системе несмегиивающихся растворителей К экстракту, полученному по п. 9.2*1 и помещенному в делительную воронку, добавляют 120 см³ (солома - 160 см³) 7,5 % раствора хлорида натрия и 50 см³ этилацетата, интенсивно встряхивают в течение 2-3 мин. После разделения фаз верхний органический слой отделяют, фильтруют через слой безводного сульфата натрия, помещенный на бумажном фильтре в конусной воронке, в круглодонную колбу вместимостью 250 см³. Операцию экстракции водной фазы повторяют, используя 50 см³ этилацетата. Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе досуха при температуре не выше 35 °С и подвергают дополнительной очистке по п. 9.1.2.

Очищенную пробу перед хроматографированием растворяют при исследовании проб почвы в 4 см³ этилацетата, зерна - 2 см³, соломы-1 см³ и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.5.

Я.ЗшСемена рапса

9.3J. Экстракция Образец измельченных семян массой 20 г помещают в коническую колбу вместимостью 250 см³, вносят 50 см³ ацетонитрила и помещают на встряхиватель на 1 ч. Полученный экстракт (надосадочная жидкость) фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через двойной бумажный фильтр «красная лента». Осадок возвращают в коническую колбу и повторяют экстракцию дополнительной порцией ацетонитрила объемом 30 см³, выдерживая на встряхивателе 20 мин. Экстракт фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через бумажный фильтр «красная лента», осадок на фильтре промывают 10 см³ ацетонитрила. Объединенный отфильтрованный экстракт подвергают очистке по п. 9.3.2.

9.3.2 Очистка экстракта перераспределением в системе несмегиивающихся растворителей Объединенный отфильтрованный экстракт, полученный по п. 9.3.1 или 9.4.1., переносят в делительную воронку вместимостью 250 см³,

15

МУК 4.1.2407-08

добавляют 25 см³ гексана (насыщенного ацетонитрилом), интенсивно встряхивают делительную воронку в течение 2-х мин. После полного разделения фаз нижний ацетонитрильный слой отделяют, перенося в коническую колбу. Верхний гексановый слой отбрасывают. Ацетонитрильную фазу вновь переносят в делительную воронку и повторяют операцию промывки, используя 25 см³ гексана (насыщенного ацетонитрилом). Ацетонитрильный раствор переносят в круглодонную колбу вместимостью 150 см³, упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 35°С и подвергают очистке на колонке с силикагелем по п. 9.2.1. Очищенную пробу перед хроматографированием растворяют в 3 см³ этилацетата и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.5.

9Л Масло рапса

9А./.Экстракция и очистка экстракта в системе несмешивающихся растворителей

Образец масла массой 10 г растворяют в 70 см³ гексана и помещают в делительную воронку на 500 см³, вносят 30 см³ ацетонитрила (насыщенного гексаном) и интенсивно встряхивают в течение 5 мин. После полного разделения фаз нижний ацетонитрильный слой осторожно декантируют через бумажный фильтр, помещенный в конусную воронку, в коническую колбу вместимостью 150-200 см³. Экстракцию пробы масла повторяют дважды дополнительными порциями ацетонитрила (насыщенного гексаном) объемом 25 см³.

Объединенный отфильтрованный экстракт переносят в делительную воронку на 250 см³, добавляют 25 см³ гексана (насыщенного ацетонитрилом) и подвергают очистке по последовательно п.п. 9.3.2 и

9.1.2. Очищенную пробу перед хроматографированием растворяют в 1,5 см³ этилацетата и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.5.

9.5 Условия хроматографирования

Хроматограф газовый «Кристал Л-2000М» с термо ионным детектором.

Колонка капиллярная ZB-50, длиной 30 м, внутренним диаметром 0,32 мм, толщина пленки сорбента 0,5 мкм

Температура детектора: 350 °С испарителя: 280 °С

МУК 4 Л .2407-08

Температура термостата колонки программированная. Начальная температура - 150 °С, выдержка 1.3 мин, нагрев колонки со скоростью 25 градусов в минуту до температуры 280 °С, выдержка 13.1 мин.

Скорость газа 1 (азот): 22.3 см/сек, давление 80 кПа, поток 0.67 см³/мин.

Газ 2: деление потока 1 :13.4; сброс 8.9 см³/мин.

Водород: 12,5 см³/мин.

Воздух: 200 см³/мин.

Хроматографируемый объем: 1 мм³

Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площади пиков, с помощью градуировочных графиков определяют концентрацию цис- и транс- изомеров метконазола в хроматографируемом растворе.

Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочные растворы цис- транс- метконазола с концентрацией 2,5 мкг/см³, разбавляют этил-ацетатом, но не более чем в 50 раз.

10. Обработка результатов анализа

Содержание метконазола в пробах воды, почвы, зерна, соломы зерновых, семян и масла рапса (X, мг/дм³, мг/кг) рассчитывают по формуле:

(С,+С_а)-У

т

X - содержание метконазола в пробах воды, почвы, зерна, соломы зерновых, семян и масла рапса, мг/дм³ и мг/кг;

Cj и С2 - концентрации цис- и транс- метконазола , найденные по градуировочным графикам в соответствии с величинами площадей хроматографических пиков, мкг/см³;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования,

см³;

т - объем (масса) анализируемого образца, см³ (г).

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

17

МУК 4.1.2407-08

2-рГ,-ЛГ_а|-100

(Х_х+Х₂)

Хь Хг- результаты параллельных определений, мг/дм³, мг/кг; г- значение предела повторяемости (таблица IX при этом г = 2.8а_г. При невыполнении условия выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

(X ± А) мг/дм³ или мг/кг при вероятности Р= 0.95,

где X- среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/дм³ или мг/кг;

А- граница абсолютной погрешности, мг/дм³ или мг/кг;

А = 5*Х/ 100,

д - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица I), %.

Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание метконазола в пробе воды менее 0,003 мг/дм³ почвы_у соломы зерновых - менее 0,1 мг/кг, зерна зерновых - 0,05 мг/кг, семян и масла рапса - менее 0,075 мг/кг» *

* - 0,003 мг/дм³, 0,1 мг/кг, 0,05 мг/кг и 0,075 мг/кг - пределы обнаружения в воде, почве, соломе зерновых, зерне зерновых, семенах и масле рапса, соответственно.

13. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецинзионность) методов и результатов измерений»,

13.1.    Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных раство-ров.

13.2.    Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Величина добавки С„ должна удовлетворять условию:

МУК 4.1.2407-08

где ± Л_лТ(±Д_л?) - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно) мг/дм³ или мг/кг, при этом: А_л = ± 0,84 А, где Д- граница абсолютной погрешности, мг/дм³ или мг/кг;

А = 8Х/ 100,

5- граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %. Результат контроля процедуры К_к рассчитывают по формуле:

К_к= У⁷ - Y- с_0>

где X*, X ,С_д среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п.11) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/дм³ или мг/кг;

Норматив контроля К рассчитывают по формуле

* = л/^д5..-^{+ д}:.г

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К_х) с нормативом контроля (К).

Если результат контрольной процедуры удовлетворяет условию

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (1) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (1) выясняют причины, приво-дящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:

Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R)

Л,где

Х|, Хг - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/дм³ или мг/кг;

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %.

19

МУК 4,1.2407-08

и транс- изомеров, в которой преобладает цис- метконазол (80:20). Плотность 1.4 (при 0 °С). Температура плавления 100-108 °С. Давление паров 1.23* 1 О*² мПа (при 20 °С). Растворимость в воде 30.4 мг/см³ (при 20 °С, pH 7,5). Коэффициент распределения н-октанол - вода K<,_wlogP = 3,85 (при 25 °С). Растворимость в органических растворителях (г/дм³, при 24 °С): этилацетат-260, метанол-403, ацетон-363, дихлорметан-481. Термически и гидролитически стабилен.

Краткая токсикологическая характеристика:

Острая пероральная токсичность (LD₅₀) для крыс - 660 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD50) для крыс - 2000 мг/кг, остарая ингаляционная токсичность (LC₅o) для крыс > 5,6 мг/дм³ (4 ч).

Область применения:

Метконазол - высокоэффективный системный фунгицид, проявляющий активность против фузариума, септорий, альтернарий, церкос-пореллы, мучнистой росы, применяемый на озимом рапсе, озимой пшенице и яровом ячмене путем наземного опрыскивания в период вегетации.

Рекомендуемые гигиенические нормативы:

ПДК в воде водоемов - 0,006 мг/дм³ (общ.)

ОДК в почве - 0,2 мг/кг ВМДУ зерне зерновых - 0,1 мг/кг

в семенах и масле рапса - 0,15 мг/кг

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентируемых условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерения при доверительной вероятности Р=0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1

Метрологические параметры

Анализи руемый объект Диапазон определяемых концентраций, мг/дм3, мг/кг Показатель точности (граница относительной погрешности), ±5, % Р=0,95 Стандартное отклонение повторяемости, а„ % , Предел повторяемости, г, % Предел воспроизводимости, R, % Вода от 0,003 до 0,01 вкл. 100 4.9 13,3 15,9

4

МУК 4.1.2407-08

более 0,01 до 0,03 вкл. 50 4,8 13,2 15,7 Почва более 0,1 до 1,0 вкл. 25 6,1 16,8 20,0 Солома зерновых более 0,1 до 1,0 вкл. 25 7,7 21,2 25,3 Зерно зерновых от 0,05 до 0,1 вкл. 50 8,1 22,4 26,7 более 0,1 до 0,5 вкл. 25 7,0 19,4 23,0 Семена рапса от 0,075 до 0,1 вкл. 50 7,7 21,2 25,4 более 0,1 до 0,75 вкл. 25 9,5 26,3 3U Масло рапса от 0,075 до 0,1 вкл. 50 4,8 13,5 16,1 более 0,1 до 0,75 вкл. 25 7,5 20,9 24,8

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для полного диапазона концентраций (п=20) приведены в таблице 2. Таблица 2

Анализируемый объект Метрологические параметры, Р = 0,95, п = 20 Предел обнаружения, мг/дм3, мг/кг Диапазон определяемых концентраций, мг/дм3, мг/кг Среднее значение определения % Стандартное отклонение, S, % Доверительный интервал среднего результата, +,_% Вода 0,003 0,003-0,03 87,39 3,7 2,0 Почва 0,1 : 0,1 - 1,0 86,29 3,8 2,1 Солома зерновых 0,1 0,1 - 1,0 87,13 5,0 2,7 Зерно зерновых 0,05 0,05 -0,5 90,69 6,1 3,3 Семена рапса 0,075 0,075 -0,75 88,33 6,8 3,9 Масло рапса 0,075 0,075-0,75 90,5 4,8 2,5

5

МУК 4.1.2407-08

2. Метод измерений

Методика основана на определении метконазола с помощью капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с термоионным детектором (ТИД) после экстракции из анализируемых проб семян и масла рапса ацетонитрилом, почвы, зерна и соломы зерновых - смесью ацетон-гексан, воды - дихлорметаном, очистки экстрактов перераспределением в системе несмешивающихся растворителей и на колонке с силикагелем.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерений

Газовый хроматограф «Кристалл-2 ООО М», снабженный термоионным детектором с пределом детектирования по азоту в азобензоле 5- Ю'^п г/с, предназначенный для работы с капиллярной колонкой

Весы аналитические ВЛА-200

Меры массы

Микрошприц типа МШ-1М, вместимостью I мм³

Колбы мерные 2-100-2 и 2-500-2 вместимостью 100 и 500 см³

Пипетки градуированные 2-п> класса точности вместимостью 1,0, 2,0, 5,0, 10 см³

Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 25, 50, 100, 250 и 1000 см³

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

тракс-Метконазол, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества 99,1%, (фирма «BASF»)

цис-Метконаэол, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества 99,3%, (фирма «BASF»)

Азот особой чистоты, из баллона

б

МУК 4.1.2407-08

Ацетонитрил, осч «УФ-210 нм»    ТУ    6-09-14-2167-84

Вода бидистиллированная, деионизованная или перегнан- ГОСТ 6790 ная над КМп04

Метилен хлористый (двхлорметан), хч ГОСТ 12794 Метиловый спирт (метанол), хч ГОСТ 6995 Натрий сернокислый безводный, хч ГОСТ 4166-78 Натрий хлористый, хч ГОСТ 4233

н-Г ексан, хч    ТУ 6-09-4521-77

Силикагель, «Silica gel 60» для колоночной хроматографии (0,2-0,5 мм)

Этиловый эфир уксусной кислоты, ректификованный ГОСТ 22300 Эфир диэтиловый (для наркоза) Фармакопея СССР

Допускается использование реактивов иных производителей с ана* логичной или более высокой квалификацией.

J.3. Вспомогательные устройства, материалы

Аппарат для встряхивания типа АВУ-бс    ТУ 64-1-2851-78

Баня водяная Баня ультразвуковая фирмы Донау (Швейцария) Бумажные фильтры «красная лента», обезволенные или фильтры из хроматографической бумаги Ватман ЗММ	ТУ 6-09-2678-77
Воронка Бюхнера	ГОСТ 0147
Воронки делительные вместимостью 100, 250, 500 и 1000см3	ГОСТ 9737
Воронки конусные диаметром 40-45 мм Генератор водорода Груша резиновая	ГОСТ 25336
Колба Бунзена	ГОСТ 56145
Колбы плоскодонные вместимостью 250 см3	ГОСТ 9737
Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 10, 100, 250 и 500 см Колонка стеклянная для препаративной хроматографии длиной 25 см, внутренним диаметром 10-12 мм Компрессор	ГОСТ 9737
Мельница лабораторная электрическая	ТУ 46-22-236-79
Насос водоструйный вакуумный Ректификационная колонна с числом теоретических таре-	ГОСТ 10696

7

МУК 4.1.2407-08

лок не менее 50

Ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi,

Швейцария

Стаканы химические с носиков вместимостью 100 и 150 ГОСТ 25336 см*

Сито с диаметром отверстий 1 мм

Стекловата

Стеклянные палочки

Установка для перегонки растворителей

Хроматографическая колонка капиллярная ZB-50, длиной 30 м, внутренним диаметром 0,32 мм, толщина пленки сорбента 0,5 мкм

Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.]. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе на должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно-допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

б. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

8

МУК 4.1*2407-08

*    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20±5) °С и относительной влажности не более 80%.

•    выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиям, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление растворов, градуировочных растворов и растворов внесения, установление градуировочных характеристик, подготовка колонки с силикагелем, проверка хроматографического поведения метконазола на колонке.

7.7, Очистка органических растворителей

7.1.L Очистка гексана Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты, до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

7.7.2.    Очистка этилацетата

Этилацетат промывают последовательно 5%-ным водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 50.

7.1.3.    Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.2. Приготовление градуировочных растворов 7.2.1. Исходный раствор цис-метконазола для градуировки (концентрация 250 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,025 г цис-метконазола, растворяют в 50 - 60 см³ этилацетата, доводят этилацетатом до метки, тщательно перемешивают.

9