Стр. 1
 

8 страниц

244.00 ₽

Купить официальный бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Официально распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль".

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Устанавливает метод определения с помощью жидкостной хроматографии содержания хлорамфеникола в мышечной ткани мяса, включая мясо птицы, где массовая доля хлорамфеникола составляет не менее 6,5 мкг/кг.

Данный метод неприменим к испорченным образцам

Отменён

Отменен, с 01.01.2016 пользоваться ГОСТ ISO 13493-2014

Действие завершено 01.01.2016

Оглавление

1 Область применения

2 Нормативные ссылки

3 Термины и определения

4 Сущность метода

5 Реактивы

6 Оборудование

7 Отбор образцов

8 Подготовка образца

9 Проведение испытаний

10 Обработка результатов измерений

11 Требования к точности результатов измерений

12 Протокол испытания

Приложение А (справочное) Библиография

Приложение Б (обязательное) Сведения о соответствии национальных стандартов Российской Федерации ссылочным международным стандартам

Показать даты введения Admin

Страница 1

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО

ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ

NV НАЦИОНАЛЬНЫЙ

ГОСТ Р ИСО

( ЙГт 1 СТАНДАРТ

1 1 российской

13493—

федерации

2005

МЯСО И МЯСНЫЕ ПРОДУКТЫ

Метод определения содержания хлорамфеникола (левомицетина) с помощью жидкостной хроматографии

ISO 13493:1998

Meat and meat products — Determination of chloramphenicol content — Method using liquid chromatography (IDT)

Издание официальное

Страница 2

ГОСТ Р ИСО 13493-2005

Предисловие

Цели и принципы стандартизации о Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. № 184-ФЗ «О техническом регулировании», а правила применения национальных стандартов Российской Федерации — ГОСТ Р 1.0-2004 «Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения»

Сведения о стандарте

1    ПОДГОТОВЛЕН Государственным учреждением «Всероссийский научно-исследовательский институт птицеперерабатывающей промышленности» Российской академии сельскохозяйственных наук (ГУ ВНИИПП Россельхозакадемии) на основе собственно аутентичного перевода, указанного в пункте 4

2    ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 116 «Продукты переработки птицы, яиц и сублимационной сушки»

3    УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 16 декабря 2005 г. № 314-ст

4    Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ИСО 13493:1998 «Мясо и мясные продукты. Определение содержания хлорамфеникола. Метод жидкостной хроматографии» (IS0 13493:1998 «Meat and meat products — Determination of chloramphenicol content — Method using liquid chromatography»). Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного стандарта для приведения в соответствие с ГОСТ Р 1.5-2004 (пункт 3.5).

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных (региональных) стандартов соответствующие им национальные стандарты Российской Федерации. сведения о которых приведены в дополнительном приложении Б

5    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячно издаваемых информационных указателях «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведоглление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте национального органа Российской Федерации по стандартизации в сети Интернет

© Стандартинформ. 2006

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

II

Страница 3

ГОСТ Р ИСО 13493-2005

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МЯСО И МЯСНЫЕ ПРОДУКТЫ

Метод определения содержания хлорамфеникола (левомицетина) с помощью жидкостной хроматографии

Meat and meal products.

Method for determination of chloramphenicol content using liquid chromatography

Дата введения — 2007—01—01

1    Область применения

Настоящий стандарт устанавливает метод определения с помощью жидкостной хроматографии содержания хлорамфеникола в мышечной ткани мяса, включая мясо птицы, где массовая доля хлорам-феникола составляет не менее 6.5 мкг/кг.

Данный метод неприменим к испорченным образцам.

Примечание — Настоящий стандарт допускается применять для определения содержания хлорамфеникола во всех видах мяса и мясопродуктов. Однако межлабораторные испытания по установлению точности метода были проведены только на образцах мышечной ткани.

2    Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:

ИСО 3100-1:1991 Мясо и мясные продукты. Методы отбора и подготовки образцов. Часть 1. Отбор образцов

ИСО 3696:1987 Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы испытаний

ИСО 5725-1:1994 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения

ИСО 5725-2:1994 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений

3    Термины и определения

В настоящем стандарте применяют следующий термин с соответствующим определением:

3.1 содержание хлорамфеникола в мясе и мясных продуктах: Массовая доля хлорамфеникола. измеренная с помощью метода, установленного в настоящем стандарте.

Примечание — Содержание хлорамфеникола выражают в микрограммах на килограмм.

4    Сущность метода

Хлорамфеникол из пробы экстрагируют водой. Экстракт фильтруют и полученный водный раствор очищают от липофильных компонентов методом твердофазной экстракции. Хлорамфеникол элюируют с экстракционного патрона дихлорметаном. Органический растворитель выпаривают и остаток очищают с помощью жидко-жидкостной экстракции в системе вода-толуол. Хлорамфеникол определяют методом обращенно-фазной хроматографии с детектированием в ультрафиолетовой (УФ) области спектра.

Издание официальное

1

Страница 4

ГОСТ Р ИСО 13493-2005

5    Реактивы

При отсутствии специальных указаний используют реактивы только признанных аналитических марок.

5.1    Вода должна соответствовать требованиям квалификации не ниже 3-й степени чистоты согласно ИСО 3696. Вода не должна содержать органические примеси.

5.2    Азот, пригодный для выпаривания растворителей.

5.3    Дихлорметан.

5.4    Толуол.

5.5    Ацетатный буфер, с (CH3C02Na) = 0,01 моль/дм3, pH = 4,3.

Растворяют 0,82 г безводного ацетата натрия примерно в 970 см3 воды. С помощью рН-метра (6.1) доводят pH до 4,3 добавлением раствора уксусной кислоты массовой долей 50 %. Переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 см3. Доводят водой до метки и перемешивают.

5.6    Ацетонитрил для УФ спектроскопии.

5.7    Подвижная фаза.

К 250 см3 ацетонитрила (5.6) добавляют 750 см3 ацетатного буфера (5.5) и тщательно перемешивают.

Перед использованием элюент фильтруют через мембранный фильтр 0.22 мкм (6.2) и дегазируют.

5.8    Основной раствор хлорамфеникола массовой концентрации 100 мкг/см3.

Взвешивают 10 мг хлорамфеникола с точностью 0,1 мг и переносят навеску в мерную колбу вместимостью 100 см3. Добавляют метанол до метки и перемешивают.

Приготовленный основной раствор стабилен в течение 1 мес при хранении в темноте.

5.9    Стандартные растворы хлорамфеникола.

Пипеткой вносят 5.0 см3 основного раствора (5.8) в мерную колбу вместимостью 100 см3. Разбавляют водой до метки и перемешивают. Разбавляют 1,0.2,0, 5,0 и 15,0 см3 этого раствора до 100 см3 для получения четырех стандартных растворов с массовой концентрацией хлорамфеникола соответственно 0.05; 0,10: 0,25 и 0,75 мкг/см3.

Эти стандартные растворы стабильны в течение одной недели при хранении в темноте.

6    Оборудование

Используют обычное лабораторное оборудование, в частности:

6.1    рН-метр

6.2    Мембранный фильтр с малым мертвым объемом и размером пор 0.22 мкм.

6.3    Механическое или электрическое устройство, пригодное для измельчения образца.

В качестве такого устройства может быть использован высокоскоростной ротационный куттер ипи мясорубка с решеткой, диаметр отверстий которой не превышает 4 мм.

6.4    Лабораторный гомогенизатор (например гомогенизатор типа Стомахер или Вортекс)1.

6.5    Фильтровальная бумага обеззоленная быстрофильтрующая диаметром примерно 15 см.

Примечание — Например, можно использовать Ватман 411|.

6.6    Экстракционные патроны вместимостью 20 см3 с диатомитовой землей, которая задерживает липофипьные компоненты из водных растворов.

Примечание — Можно использовать, например, картриджи Extrelut© производства фирмы Merck, Дармштадт. Германия (№ 11737)1'.

6.7    Водяная баня или нагревательный блок, позволяющие поддерживать температуру (40 ± 1) °С и имеющие устройство для выпаривания потоком азота (5.2). или ротационный вакуумный испаритель.

6.8    Центрифужные пробирки вместимостью 25 см3.

6.9    Смеситель для пробирок типа Вортекс, обеспечивающий частоту вращения примерно 700 мин '.

6.10    Центрифуга, обеспечивающая радиальное ускорение примерно 1000 д.

6.11    Микропипетки вместимостью 300 мм3.

2

1

Это примеры коммерчески доступной продукции. Данная информация приведена только для удобства пользователей настоящего стандарта и не является поддержкой этой продукции.

Страница 5

ГОСТ Р ИСО 13493-2005

6.12 Жидкостной хроматограф, оборудованный:

-    насосом постоянного потока;

-    инжектором;

-    хроматографической колонкой внутренним диаметром 3 мм. длиной 20 см. запопненную обращенной фазой Св или С с размером частиц 5 мкм, ипи другой копонкой с эквивалентными характеристиками;

-    детектором УФУВИД. обеспечивающим измерение при длине вопны 285 нм. если возможно — диодно-матричный детектором (испопьзуется для подтверждения обнаружения хлорамфеникола);

-    самописцем с регулируемым диапазоном измерения ипи интегратором.

7    Отбор образцов

Отбор образцов не явпяется частью метода, изпоженного в настоящем стандарте. Рекомендуемый метод отбора образцов приведен в ИСО 3100-1.

Очень важно, чтобы в пабораторию поступапи представитепьные образцы, которые в процессе хранения и транспортирования не были испорчены или изменены.

От представительного образца, поступившего в лабораторию, отбирают для анапиза образец массой не менее 200 г. Образец хранят в усповиях. исключающих его порчу и изменение состава.

8    Подготовка образца

Доводят температуру образца до комнатной температуры. Удаляют жировую ткань и несъедобные части образца.

Измепьчают образец с помощью устройства (6.3). При этом необходимо следить за тем. чтобы температура образца не превышала 25 °С. При испопьзовании мясорубки образец пропускают через нее не менее двух раз.

Приготовпенный образец помещают в герметично закрываемую емкость. Закрывают и хранят так. чтобы не допустить порчи и изменения его состава.

В спучае необходимости образец хранят при температуре ниже минус 18 °С.

Анализ образца проводят как можно быстрее, но не позднее 24 ч поспе измепьчения.

9    Проведение испытаний

Примечание — Для контроля повторяемости результатов (см. 11.2) проводят два параллельных определения в соответствии с 9.1—9.6.

9.1    Общая часть

Параллепьно с анализом раствора (или серии растворов), попученного из испытуемого образца, проводят анализ раствора, попученного из образца, заведомо не содержащего хлорамфеникол (образец-бланк), и раствора, попученного из образца, в который добавлен хлорамфеникоп в «отчестве 10 мкг/кг (образец-бпанк с внесенным хлорамфениколом).

9.2    Подготовка пробы

В конической колбе вместимостью 100 см3 взвешивают 10 г (т) измельченного образца (8) с точностью 0,1 г.

9.3    Получение экстракта

Добавляют 40.0 см3 воды и энергично перемешивают в течение 3 мин с помощью пабораторного гомогенизатора (6.4).

Общий объем образующейся водной фазы (У,) равен 40,0 см3 плюс объем воды, содержащейся в пробе (обычно в 10 г пробы содержится примерно 7,5 см3 воды).

Гомогенат фипьтруют через бумажный фипьтр (5).

9.4    Твердофазная экстракция

Переносят 20,0 см3 фильтрата (V2) в экстракционный патрон (6.6).

Через (15 ±2) мин эпюируют хлорамфеникол с помощью 70 см3 дихлорметана (5.3). Выпаривают органическую фазу до объема примерно 1 см3 на водяной бане (6.7) в спабом потоке азота (5.2) ипи с помощью ротационного вакуумного испаритепя (6.7).

С помощью примерно 10 см3 дихлорметана (5.3) переносят остаток в центрифужную пробирку (6.8).

Осторожно выпаривают досуха.

3

Страница 6

ГОСТ Р ИСО 13493-2005

9.5    Жидкоокидкостная экстракция

К остатку добавляют 400 мм3 воды (V3) и 2,0 см3 толуола (5.4) и перемешивают с уморенной интенсивностью в течение 1 мин на смесителе Вортекс (6.9) с частотой вращения примерно 700 мин-Центрифугируют в течение 5 мин на центрифуге (6.10) с радиальным ускорением 1000 д. Пипеткой отбирают как можно больше органической фазы и отбрасывают ее.

Добавляют 1,5 см3 толуола и перемешивают с умеренной интенсивностью в течение 1 мин на смесителе Вортекс (6.9) с частотой вращения примерно 700 мин-1.

Центрифугируют в течение 5 мин на центрифуге (6.10) с радиальным ускорением 1000 д. Пипеткой отбирают как можно больше органической фазы и отбрасывают ее.

Микропипеткой (6.11) переносят 300 мм3 водной фазы в подходящий сосуд.

9.6    Хроматографический анализ

9.6.1    Условия хроматографирования

Параметр    Значение

Длина волны    285 нм

Диапазон шкалы детектора    от 0,005 до 0,010 единиц оптической плотнос

ти. что соответствует попной шкале самописца

Шкапа самописца    10 мВ

Скорость бумаги самописца    1.0 см/мин

Объемная скорость потока подвижной фазы (5.7)    0.6    см3/мин

Объем анализируемого раствора, вводимый (инжектируемый) в хроматограф    100 мм3

Примечание — Инжектируемый объем и объемная скорость потока зависят от размеров колонки.

9.6.2    Хроматографирование

После стабилизации системы жидкостного хроматографа (6.12) инжектируют растворы, попучен-ные из образца-бланка и образца-бланка с внесенным хлорамфениколом. четыре стандартных раствора хлорамфеникола (5.9), раствор, приготовпенный из испытуемого образца по 9.5, и снова стандартные растворы хлорамфеникола (5.9).

На хроматограммах образцов проверяют напичие сигнапа на участке, соответствующем времени удерживания хлорамфеникола.

9.6.3    Измерение

Измеряют высоты или площади хроматографических пиков хлорамфеникола для испытуемого раствора и стандартных растворов хлорамфеникола.

Измеренные для стандартных растворов высоты или площади пиков должны линейно зависеть от содержания хлорамфеникола в этих растворах.

Примечание — С помощью диодно-матричного детектора может быть подтверждено обнаружение хлорамфеникола при его содержании в образце более 10 мкг/кг.

10 Обработка результатов измерений

Содержание хлорамфеникола iv, мкг/кг. в испытуемом образце рассчитывают по формуле

hpV,V,

ft, т '

где ft — высота или площадь пика в единицах дпины или площади, измеренные для испытуемого раствора;

ft, — высота ипи площадь пика, измеренные для одного из стандартных растворов (5.9); р — содержание хлорамфеникола в стандартном растворе, мкг/см3: т — масса испытуемой пробы (9.2), г;

V, — объем водной фазы, попученной после гомогенизации по 9.3. см3 (V, = 40 см3 + объем воды в пробе, взятой на испытание);

Страница 7

ГОСТ Р ИСО 13493-2005

V2 — объем фильтрата (V2 = 20 см3), перенесенного по 9.4 в экстракционный патрон, см3;

V3 — объем воды (V3 = 400 мм3), добавленной по 9.5 к сухому остатку, мм3.

Результат вычислений округляют до 0,1 мкг/кг.

Результат испытаний нельзя корректировать на открываемость. Открываемостъ должна быть указана в протоколе испытаний (12).

11    Требования к точности результатов измерений

11.1    Можлабораторные испытания

Точность метода была установлена с помощью межлабораторных испытаний, проведенных в соответствии с ИСО 5725-1 и ИСО 5725-2.

Результаты этой межлабораторной проверки опубликованы в [1]. Результаты этой проверки не могут быть распространены на области концентраций и на матрицы, отличные от указанных в настоящем стандарте.

Результаты другой межлабораторной проверки, приведенной в соответствии с ИСО 5725-1 и ИСО 5725-2. показывают, что открываемость для мяса, мяса птицы и мясных продуктов воспроизводима и равна примерно 55 %.

11.2    Повторяемость

Абсолютное значение разности результатов двух независимых единичных испытаний, выполненных за короткий промежуток времени одним методом для одного измельченного образца в одной лаборатории одним оператором на одном и том же оборудовании, может превышать 2,1 мкг/кг не более чем в 5 % случаев при содержании хлорамфеникола в образце 10 мкг/кг.

11.3    Воспроизводимость

Абсолютное значение разности результатов двух независимых единичных испытаний, выполненных одним методом для идентичного измельченного образца в разных лабораториях разными операторами с использованием разного оборудования, может превышать 4.9 мкг/кг не более чем в 5 % случаев при содержании хлорамфеникола 10 мкг/кг.

12    Протокол испытания

В протоколе испытания необходимо указать.

-    информацию, необходимую для полной идентификации образца;

-    использованный метод отбора образцов (если известен);

-    использованный метод испытаний с указанием ссылки на настоящий стандарт;

-    условия проведения испытаний, не отраженные в настоящем стандарте или считающиеся неоднозначными. а также все имевшие место случаи, которые могут повлиять на результаты испытаний;

-    полученный результат испытаний или два результата испытаний, если проводилась проверка повторяемости;

-    открываемость.

Приложение А (справочное)

Библиография

(11 Aerts M.L., Keukens H.J.. Werdmuller G.A. Liquid Chromatographic Determination of Chloramphenicol Residues in Meat Interlaboratory Study. J.AOAC, 72. (4). 1989. pp. 570—576

5

Страница 8

ГОСТ Р ИСО 13493-2005

ПРИЛОЖЕНИЕ Б (обязательное)

Сведения о соответствии национальных стандартов Российской Федерации ссылочным международным стандартам

Обозначение ссылочного международного стандарта

Обозначение и наименование соответствующего национального стандарта

ИСО 3100-1:1991

ГОСТ Р 51447-99 (ИСО 3100-1—91

Мясо и мясные продукты. Методы отбора проб

ИСО 5725-1:1994

ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002

Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения

ИСО 5725-2:1994

ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002

Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений

ИСО 3696:1987

л

* Соответствующий национальный стандарт отсутствует. До его утверждения рекомендуется использовать перевод на русский язык данного международного стандарта. Перевод данного международного стандарта находится в Федеральном информационном фонде технических регламентов и стандартов.

УДК 637.544:006.354    ОКС    67.120.10    Н09

Ключевые слова: мясо, мясные продукты, хлорамфеникол. левомицетин. жидкостная хроматография

Редактор В.Н. Копыеол Техничесшй редактор Н С. Гришаноаа Корректор А.С. Чсрмсусоаа Компьютерная верстка И.А. НапеОкимай

Сдано о набор 23.12.2005. Подписано в печать 19.01.2006. Фермат 60 х В4’/а. Бумага офсетная Гарнитура Ариал. Печать офсетная. Уел. 1»еч.л. 0,93. Уч.-мэд.л. 0.65. Тираж 208 экз. Зак. 29. С 2353.

ФГУП «Стандартимформ», 123995 Москва. Гранатный пер.. 4.

M-MW.gostinfo.ru    mfo@posbnfo.ru

Набрано во ФГУП «Стандартинформи на ПЭВМ Отпечатано в филиале ФГУП «Стандартмнформ» — тип. «Московский печатник». 105062 Москва. Лялин пер., 6.