Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1
 

8 страниц

244.00 ₽

Купить ГОСТ Р ИСО 13493-2005 — официальный бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Официально распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль".

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Устанавливает метод определения с помощью жидкостной хроматографии содержания хлорамфеникола в мышечной ткани мяса, включая мясо птицы, где массовая доля хлорамфеникола составляет не менее 6,5 мкг/кг.

  Скачать PDF

Действие завершено 01.01.2016

Оглавление

1 Область применения

2 Нормативные ссылки

3 Термины и определения

4 Сущность метода

5 Реактивы

6 Оборудование

7 Отбор образцов

8 Подготовка образца

9 Проведение испытаний

10 Обработка результатов измерений

11 Требования к точности результатов измерений

12 Протокол испытания

Приложение А (справочное) Библиография

Приложение Б (обязательное) Сведения о соответствии национальных стандартов Российской Федерации ссылочным международным стандартам

Показать даты введения Admin

ГОСТ Р исо 13493—

2005

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ

НАЦИОНАЛЬНЫЙ

СТАНДАРТ

РОССИЙСКОЙ

ФЕДЕРАЦИИ

МЯСО И МЯСНЫЕ ПРОДУКТЫ

Метод определения содержания хлорамфеникола (левомицетина) с помощью жидкостной хроматографии

ISO 13493:1998

Meat and meat products — Determination of chloramphenicol content — Method using liquid chromatography (IDT)

Издание официальное

Москва

Стандартинформ

2006

Предисловие

Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. № 184-ФЗ «О техническом регулировании», а правила применения национальных стандартов Российской Федерации — ГОСТ Р 1.0-2004 «Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения»

Сведения о стандарте

1    ПОДГОТОВЛЕН Государственным учреждением «Всероссийский научно-исследовательский институт птицеперерабатывающей промышленности» Российской академии сельскохозяйственных наук (ГУ ВНИИПП Россельхозакадемии) на основе собственно аутентичного перевода, указанного в пункте 4

2    ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 116 «Продукты переработки птицы, яиц и сублимационной сушки»

3    УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 16 декабря 2005 г. № 314-ст

4    Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ИСО 13493:1998 «Мясо и мясные продукты. Определение содержания хлорамфеникола. Метод жидкостной хроматографии» (ISO 13493:1998 «Meat and meat products — Determination of chloramphenicol content — Method using liquid chromatography»). Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного стандарта для приведения в соответствие с ГОСТ Р 1.5-2004 (пункт 3.5).

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных (региональных) стандартов соответствующие им национальные стандарты Российской Федерации, сведения о которых приведены в дополнительном приложении Б

5    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячно издаваемых информационных указателях «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте национального органа Российской Федерации по стандартизации в сети Интернет

© Стандартинформ. 2006

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МЯСО И МЯСНЫЕ ПРОДУКТЫ

Метод определения содержания хлорамфеникола (левомицетина) с помощью жидкостной хроматографии

Meat and meat products.

Method for determination of chloramphenicol content using liquid chromatography

Дата введения — 2007—01—01

1    Область применения

Настоящий стандарт устанавливает метод определения с помощью жидкостной хроматографии содержания хлорамфеникола в мышечной ткани мяса, включая мясо птицы, где массовая доля хлорамфеникола составляет не менее 6.5 мкг/кг.

Данный метод неприменим к испорченным образцам.

Примечание — Настоящий стандарт допускается применять для определения содержания хлорамфеникола во всех видах мяса и мясопродуктов Однако межлабораторные испытания по установлению точности метода были проведены только на образцах мышечной ткани.

2    Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:

ИСО 3100-1:1991 Мясо и мясные продукты. Методы отбора и подготовки образцов. Часть 1. Отбор образцов

ИСО 3696:1987 Вода для лабораторного анализа. Технические требования и методы испытаний

ИСО 5725-1:1994 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения

ИСО 5725-2:1994 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений

3    Термины и определения

В настоящем стандарте применяют следующий термин с соответствующим определением:

3.1 содержание хлорамфеникола в мясе и мясных продуктах: Массовая доля хлорамфеникола, измеренная с помощью метода, установленного в настоящем стандарте.

Примечание — Содержание хлорамфеникола выражают в микрограммах на килограмм

4    Сущность метода

Хлорамфеникол из пробы экстрагируют водой. Экстракт фильтруют и полученный водный раствор очищают от липофильных компонентов методом твердофазной экстракции. Хлорамфеникол элюируют с экстракционного патрона дихлорметаном. Органический растворитель выпаривают и остаток очищают с помощью жидко-жидкостной экстракции в системе вода-толуол. Хлорамфеникол определяют методом обращенно-фазной хроматографии с детектированием в ультрафиолетовой (УФ) области спектра.

Издание официальное

5    Реактивы

При отсутствии специальных указаний используют реактивы только признанных аналитических марок.

5.1    Вода должна соответствовать требованиям квалификации не ниже 3-й степени чистоты согласно ИСО 3696. Вода не должна содержать органические примеси.

5.2    Азот, пригодный для выпаривания растворителей.

5.3    Дихлорметан.

5.4    Толуол.

5.5    Ацетатный буфер, с (CH3C02Na) = 0,01 моль/дм3, pH = 4,3.

Растворяют 0,82 г безводного ацетата натрия примерно в 970 см3 воды. С помощью рН-метра (6.1) доводят pH до 4,3 добавлением раствора уксусной кислоты массовой долей 50 %. Переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 см3. Доводят водой до метки и перемешивают.

5.6    Ацетонитрил для УФ спектроскопии.

5.7    Подвижная фаза.

К 250 см3 ацетонитрила (5.6) добавляют 750 см3 ацетатного буфера (5.5) и тщательно перемешивают.

Перед использованием элюент фильтруют через мембранный фильтр 0,22 мкм (6.2) и дегазируют,

5.8    Основной раствор хлорамфеникола массовой концентрации 100 мкг/см3.

Взвешивают 10 мг хлорамфеникола с точностью 0,1 мг и переносят навеску в мерную колбу вместимостью 100 см3. Добавляют метанол до метки и перемешивают.

Приготовленный основной раствор стабилен в течение 1 мес при хранении в темноте.

5.9    Стандартные растворы хлорамфеникола.

Пипеткой вносят 5,0 см3 основного раствора (5.8) в мерную колбу вместимостью 100 см3. Разбавляют водой до метки и перемешивают. Разбавляют 1,0,2,0, 5,0 и 15,0 см3 этого раствора до 100 см3 для получения четырех стандартных растворов с массовой концентрацией хлорамфеникола соответственно 0,05; 0,10; 0,25 и 0,75 мкг/см3.

Эти стандартные растворы стабильны в течение одной недели при хранении в темноте.

6    Оборудование

Используют обычное лабораторное оборудование, в частности:

6.1    рН-метр

6.2    Мембранный фильтр с малым мертвым объемом и размером пор 0,22 мкм.

6.3    Механическое или электрическое устройство, пригодное для измельчения образца.

В качестве такого устройства может быть использован высокоскоростной ротационный куттер или мясорубка с решеткой, диаметр отверстий которой не превышает 4 мм.

6.4    Лабораторный гомогенизатор (например гомогенизатор типа Стомахер или Вортекс)Ч

6.5    Фильтровальная бумага обеззоленная быстрофильтрующая диаметром примерно 15 см.

Примечание — Например, можно использовать Ватман 41Ч

6.6    Экстракционные патроны вместимостью 20 см3 с диатомитовой землей, которая задерживает липофильные компоненты из водных растворов.

Примечание — Можно использовать, например, картриджи Extrolut® производства фирмы Merck, Дармштадт, Германия (N® 11737)1*.

6.7    Водяная баня или нагревательный блок, позволяющие поддерживать температуру (40 ± 1) °С и имеющие устройство для выпаривания потоком азота (5.2), или ротационный вакуумный испаритель.

6.8    Центрифужные пробирки вместимостью 25 см3.

6.9    Смеситель для пробирок типа Вортекс, обеспечивающий частоту вращения примерно 700 мин-1.

6.10    Центрифуга, обеспечивающая радиальное ускорение примерно 1000 д.

6.11    Микропипетки вместимостью 300 мм3.

11 Это примеры коммерчески доступной продукции. Данная информация приведена только для удобства пользователей настоящего стандарта и не является поддержкой этой продукции.

ГОСТ Р ИСО 13493-2005

6.12 Жидкостной хроматограф, оборудованный:

-    насосом постоянного потока;

• инжектором;

-    хроматографической колонкой внутренним диаметром 3 мм, длиной 20 см, заполненную обращенной фазой С* или С с размером частиц 5 мкм, или другой колонкой с эквивалентными характеристиками;

-    детектором УФ/ВИД, обеспечивающим измерение при длине волны 285 нм, если возможно — диодно-матричный детектором (используется для подтверждения обнаружения хлорамфеникола);

-    самописцем с регулируемым диапазоном измерения или интегратором.

7    Отбор образцов

Отбор образцов не является частью метода, изложенного в настоящем стандарте. Рекомендуемый метод отбора образцов приведен в ИСО 3100-1.

Очень важно, чтобы в лабораторию поступали представительные образцы, которые в процессе хранения и транспортирования не были испорчены или изменены.

От представительного образца, поступившего в лабораторию, отбирают для анализа образец массой не менее 200 г. Образец хранят в условиях, исключающих его порчу и изменение состава.

8    Подготовка образца

Доводят температуру образца до комнатной температуры. Удаляют жировую ткань и несъедобные части образца.

Измельчают образец с помощью устройства (6.3). При этом необходимо следить за тем, чтобы температура образца не превышала 25 вС. При использовании мясорубки образец пропускают через нее не менее двух раз.

Приготовленный образец помещают в герметично закрываемую емкость. Закрывают и хранят так, чтобы не допустить порчи и изменения его состава.

В случае необходимости образец хранят при температуре ниже минус 18 вС.

Анализ образца проводят как можно быстрее, но не позднее 24 ч после измельчения.

9    Проведение испытаний

Примечание — Для контроля повторяемости результатов (см 11.2) проводят два параллельных определения в соответствии с 9.1—9.6.

9.1    Общая часть

Параллельно с анализом раствора (или серии растворов), полученного из испытуемого образца, проводят анализ раствора, полученного из образца, заведомо не содержащего хлорамфеникол (образец-бланк), и раствора, полученного из образца, в который добавлен хлорамфеникол в количестве 10 мкг/кг (образец-бланк с внесенным хлорамфениколом).

9.2    Подготовка пробы

В конической колбе вместимостью 100 см3 взвешивают 10 г (т) измельченного образца (8) с точностью 0,1 г.

9.3    Получение экстракта

Добавляют 40.0 см3 воды и энергично перемешивают в течение 3 мин с помощью лабораторного гомогенизатора (6.4).

Общий объем образующейся водной фазы (У,) равен 40,0 см3 плюс объем воды, содержащейся в пробе (обычно в 10 г пробы содержится примерно 7,5 см3 воды).

Гомогенат фильтруют через бумажный фильтр (5).

9.4    Твердофазная экстракция

Переносят 20,0 см3 фильтрата (У2)в экстракционный патрон (6.6).

Через (15 ± 2) мин элюируют хлорамфеникол с помощью 70 см3 дихлорметана (5.3). Выпаривают органическую фазу до объема примерно 1 см3 на водяной бане (6.7) в слабом потоке азота (5.2) или с помощью ротационного вакуумного испарителя (6.7).

С помощью примерно 10 см3 дихлорметана (5.3) переносят остаток в центрифужную пробирку (6.8).

Осторожно выпаривают досуха.

9.5    Жидко-жидкостная экстракция

К остатку добавляют 400 мм3 воды (V3) и 2,0 см3 толуола (5.4) и перемешивают с умеренной интенсивностью в течение 1 мин на смесителе Вортекс (6.9) с частотой вращения примерно 700 мин-1. Центрифугируют в течение 5 мин на центрифуге (6.10) с радиальным ускорением 1000 д. Пипеткой отбирают как можно больше органической фазы и отбрасывают ее.

Добавляют 1,5 см3 толуола и перемешивают с умеренной интенсивностью в течение 1 мин на смесителе Вортекс (6.9) с частотой вращения примерно 700 мин-1.

Центрифугируют в течение 5 мин на центрифуге (6.10) с радиальным ускорением 1000 д. Пипеткой отбирают как можно больше органической фазы и отбрасывают ее.

Микролипеткой (6.11) переносят 300 мм^ водной фазы в подходящий сосуд.

9.6    Хроматографический анализ

9.6.1 Условия хроматографирования

Параметр

Длина волны

Диапазон шкалы детектора

Шкала самописца

Скорость бумаги самописца

Объемная скорость потока подвижной фазы (5.7)

Объем анализируемого раствора, вводимый (инжектируемый) в хроматограф


Значение

285 нм

от 0,005 до 0,010 единиц оптической плотности, что соответствует полной шкале самописца

10 мВ

1,0 см/мин

0.6 см3/мин

100 мм3


Примечание — Инжектируемый объем и объемная скорость потока зависят от размеров колонки.

9.6.2    Хроматографирование

После стабилизации системы жидкостного хроматографа (6.12) инжектируют растворы, полученные из образца-бланка и образца-бланка с внесенным хлорамфениколом, четыре стандартных раствора хлорамфеникола (5.9), раствор, приготовленный из испытуемого образца по 9.5, и снова стандартные растворы хлорамфеникола (5.9).

На хроматограммах образцов проверяют наличие сигнала на участке, соответствующем времени удерживания хлорамфеникола.

9.6.3    Измерение

Измеряют высоты или площади хроматографических пиков хлорамфеникола для испытуемого раствора и стандартных растворов хлорамфеникола.

Измеренные для стандартных растворов высоты или площади пиков должны линейно зависеть от содержания хлорамфеникола в этих растворах.

Примечание — С помощью диодно-матричного детектора может быть подтверждено обнаружение хлорамфеникола при его содержании в образце более 10 мкг/кг

10 Обработка результатов измерений

Содержание хлорамфеникола w, мкг/кг, в испытуемом образце рассчитывают по формуле

где h — высота или площадь пика в единицах длины или площади, измеренные для испытуемого раствора;

hs — высота или площадь пика, измеренные для одного из стандартных растворов (5.9); р — содержание хлорамфеникола в стандартном растворе, мкг/см3; т — масса испытуемой пробы (9.2), г,

V, — объем водной фазы, полученной после гомогенизации по 9.3, см3 (V, = 40 см3 + объем воды в пробе, взятой на испытание);

4

ГОСТ Р ИСО 13493-2005

V2 — объем фильтрата (V2 - 20 см3), перенесенного по 9.4 в экстракционный патрон, см3;

У3 — объем воды (V3 = 400 мм3), добавленной по 9.5 к сухому остатку, мм3.

Результат вычислений округляют до 0,1 мкг/кг.

Результат испытаний нельзя корректировать на открываемость Открывземость должна быть указана в протоколе испытаний (12).

11    Требования к точности результатов измерений

11.1    Межлабораторные испытания

Точность метода была установлена с помощью межлабораторных испытаний, проведенных в соответствии с ИСО 5725-1 и ИСО 5725-2.

Результаты этой межлабораторной проверки опубликованы в (1). Результаты этой проверки не могут быть распространены на области концентраций и на матрицы, отличные от указанных в настоящем стандарте.

Результаты другой межлабораторной проверки, приведенной в соответствии с ИСО 5725-1 и ИСО 5725-2, показывают, что открываемость для мяса, мяса птицы и мясных продуктов воспроизводима и равна примерно 55 %.

11.2    Повторяемость

Абсолютное значение разности результатов двух независимых единичных испытаний, выполненных за короткий промежуток времени одним методом для одного измельченного образца в одной лаборатории одним оператором на одном и том же оборудовании, может превышать 2,1 мкг/кг не более чем в 5 % случаев при содержании хлорамфеникола в образце 10 мкг/кг.

11.3    Воспроизводимость

Абсолютное значение разности результатов двух независимых единичных испытаний, выполненных одним методом для идентичного измельченного образца в разных лабораториях разными операторами с использованием разного оборудования, может превышать 4,9 мкг/кг не более чем в 5 % случаев при содержании хлорамфеникола 10 мкг/кг.

12    Протокол испытания

В протоколе испытания необходимо указать:

-    информацию, необходимую для полной идентификации образца;

-    использованный метод отбора образцов (если известен);

-    использованный метод испытаний с указанием ссылки на настоящий стандарт;

-    условия проведения испытаний, не отраженные в настоящем стандарте или считающиеся неоднозначными, а также все имевшие место случаи, которые могут повлиять на результаты испытаний;

-    полученный результат испытаний или два результата испытаний, если проводилась проверка повторяемости;

-    открываемость.

Приложение А (справочное)

Библиография

[1J Aerts M.L, Keukens H.J., Werdmuller GA Liquid Chromatographic Determination of Chloramphenicol Residues in Meat: Interiaboratory Study J AOAC. 72, (4), 1989, pp. 570—576

5

ПРИЛОЖЕНИЕ Б (обязательное)

Сведения о соответствии национальных стандартов Российской Федерации ссылочным международным стандартам

Обозначение ссылочного международного стандарта

Обозначение и наименование соответствующего национального стандарта

ИСО 3100-1:1991

ГОСТ Р 51447-99 (ИСО 3100-1—91

Мясо и мясные продукты. Методы отбора проб

ИСО 5725-1:1994

ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002

Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений Часть 1. Основные положения и определения

ИСО 5725-2:1994

ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002

Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений Часть 2 Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений

ИСО 3696:1987

* Соответствующий национальный стандарт отсутствует. До его утверждения рекомендуется использовать перевод на русский язык данного международного стандарта Перевод данного международного стандарта находится в Федеральном информационном фонде технических регламентов и стандартов.

УДК 637.544:006.354    ОКС    67.120.10    Н09

Ключевые слова: мясо, мясные продукты, хлорамфеникол. левомицетин, жидкостная хроматография

Редактор В.Н. Копысов Технический редактор НС. Гришанова Корректор АС Чорноусова Компьютерная верстка ИА. Напвйкиной

Сдано в набор 23.12.2005. Подписано в печать 19.01.2006 Формат 60 * 84%. Бумага офсетная Гарнитура Ариал Печать офсетная Уел. печ.л. 0.93. УЧ.-иадл. 0,65. Тираж 208 экз. Зак. 29. С 2353.

ФГУП «Стамдартинформ», 123995 Москва. Гранатный пер.. 4. www.gostinfo.ru ln'o@gostinfo ги Набрано во ФГУП «Стэндартинформ» на ПЭВМ.

Отпечатано в филиале ФГУП «Стандартинформ» — тип. «Московский печатник», 105062 Москва, Лялин пер ., 6.