Государетвенпое санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств тиофанат-метила и карбеидазима в зеленой массе, семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3361—16

Издание официальное

Москва • 2017

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств тиофанат-метила и карбенда зима в зеленой массе, семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3361—16

МУК 4.1.3361—16

7.2.2.    0,005 М раствор ортофосфорной кислоты: (0,5 ±0,01) г 98 % ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм³, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.

7.2.3.    2М раствор гидроксида натрия: в мерную колбу объемом 100 см³ помещают 8,0 г гидроксида натрия, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем до метки.

7.2.4.    0,1 М раствор соляной кислоты: 8,1 см³ концентрированной соляной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм³, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем до метки.

7.3. Приготовление основного и градуировочных растворов:

7.3.1. Основной раствор тиофанат-метила с концентрацией 0,5 мг/см³

Точную навеску тиофанат-метила (50 ± 0,5 мг) помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом.

7.3.2. Приготовление градуировочных растворов тиофанат-метила

Градуировочные растворы с концентрациями тиофанат-метила 0,025, 0,05, 0,1, 0,25 и 0,5 мкг/см³ готовят методом последовательного разбавления по объему, используя смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 50 : 50.

7.3.2.1.    Раствор № I с концентрацией 0,5 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят 0,1 см³ основного раствора и доводят до метки смесью ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 50 : 50.

7.3.2.2.    Раствор Ns 2 с концентрацией 0,25 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 5,0 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 50 : 50.

7.3.2.3.    Раствор № 3 с концентрацией 0,1 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 2 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 50 : 50.

7.3.2.4.    Раствор N2 4 с концентрацией 0,05 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 1 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 50 : 50.

7.3.2.5.    Раствор М2 5 с концентрацией 0,025 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 0,5 см³ раствора N° 1 и доводят объем до метки смесью ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 50 : 50.

МУК 4.1.3361—16

7.3.3.    Основной раствор карбендазима с концентрацией 0,5 мг/см^J: точную навеску карбендазима (50 ± 0,5 мг) помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, растворяют в метаноле и доводят объем до метки метанолом.

7.3.4.    Приготовление градуировочных растворов карбендазима

Градуировочные растворы с концентрациями карбендазима 0,05;

0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мкг/см³ готовят методом последовательного разбавления по объему, используя 0,05% трифторуксусную кислоту.

7.3.4.1.    Раствор № 1 с концентрацией 1,0 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят 0,2 см³ основного раствора и доводят до метки 0,05 % трифторуксусной кислотой.

7.3.4.2.    Раствор №2 с концентрацией 0,5 мкг/см⁵: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 5,0 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки 0,05 % трифторуксусной кислотой.

7.3.4.3.    Раствор Ns 3 с концентрацией 0,2 мкг/см⁵: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 2 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки 0,05 % трифторуксусной кислотой.

7.3.3.4.    Раствор Ns 4 с концентрацией 0,1 мкг/см⁵: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 1 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки 0,05 % трифторуксусной кислотой.

7.3.4.5.    Раствор Ns 5 с концентрацией 0,05 мкг/см⁵: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 0,5 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки 0,05 % трифторуксусной кислотой.

Основные растворы тиофанат-метила и карбендазима можно хранить в холодильнике при температуре 0—4 °С в течение 1 месяца, градуировочные растворы - в течение суток.

При изучении полноты определения тиофанат-метила и карбендазима используют ацетонитрильные растворы веществ, приготовленные из основного раствора методом последовательного разбавления по объему ацетонитрилом.

7.4. Построение градуировочного графика

Для установления градуировочной характеристики (площадь пика концентрация тиофанат-метила или карбендазима в растворе) в хроматограф вводят по 10 мм³ градуировочных растворов (не менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4 точек по диапазону измеряемых концентраций). Затем измеряют площади пиков и строят 1рафик зависимости среднего значения площади пика от концентрации тиофанат-метила или карбендазима в градуировочном растворе.

Методом наименьших квадратов рассчитывают градуировочный коэффициент (К) в уравнении линейной регрессии:

11

С - KS, где

S - площадь пика градуировочного раствора.

Градуировку признают удовлетворительной, если значение коэффициента линейной корреляции оказывается не ниже 0,99.

Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматофафической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля градуировочного коэффициента.

Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:

IC-CJ

¹-Ю0 5Я_,₎где

С - аттестованное значение массовой концентрации тиофанат-мстила (или карбендазима) в фадуировочном растворе,

С_к - результат контрольного измерения массовой концентрации тиофанат-мстила (или карбендазима) в фадуировочном растворе,

Контр. ~ норматив контроля фадуировочного коэффициента, %. (Контр. = 1 0% при Р = 0,95).

8. Отбор проб и хранение

Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (№2051-79 от 21.08.79). Отбор проб семян подсолнечника для анализа проводят в соответствии с ГОСТ 0852-86 «Семена масличные. Правила приемки и методы отбора проб».

Семена хранят при комнатной температуре в полотняных мешочках, перед анализом доводят до стандартной влажности и измельчают. Растительное масло хранят в холодильнике при температуре 0-4 °С в герметично закрытой стеклянной таре в течение 6 месяцев.

Для исследовательских целей допускается получение масла в день анализа в лаборатории из проб измельченных семян с помощью лабораторного пресса.

9. Проведение определения

9.1. Экстракция тиофанат-метила и карбендазима

Навеску измельченной матрицы (10 г - семена и масло, 2 г - зеленая масса) помещают в полипропиленовую центрифужную пробирку вместимостью 50 см³, последовательно добавляют 10 см³ ацетонитрила.

МУК 4.1.3361—16

дистиллированную воду (10 см³ для зерна, 3 см³ для масла), 4 г безводного сульфата магния, 1 г хлористого натрия, 1 г цитрата натрия двуводного и 0,5 г динатрия цитрата шестиводного. Пробирку плотно закрывают и помещают в перемешивающее устройство на 10 мин, затем центрифугируют в течение 10 мин при скорости 4 ООО об./мин. От верхнего ацетонитрильною слоя отбирают 5 см³, переносят в центрифужную пробирку вместимостью 15 см³, содержащую 150 мг сорбента (смесь первичных и вторичных аминов), 150 мг С18ЕС и 900 мг безводного сульфата магния. Пробирку плотно закрывают и помещают в перемешивающее устройство на 10 мин, затем центрифугируют в течение 10 мин при скорости 4 000 об./мин.

Для определения тиофанат-метила отбирают аликвоту 0,5 см³, переносят ее в виалу для хроматографирования, добавляют 0,5 см³ 0,005 М ортофосфорной кислоты, выдерживают в холодильнике (+4 °С) в течение 2 часов и 10 мм³ водят в хромато[раф.

Для определения карбендазима отбирают аликвоту 2,0 см³, переносят в круглодонную колбу и быстро упаривают досуха на ротационном испарителе. К сухому остатку добавляют 5 см³ 0,1 М соляной кислоты и переносят в делительную воронку. Кислый раствор промывают двумя порциями по 2 см³ этилацетата, подщелачивают 2М раствором гидроксида натрия до pH 9 и экстрагируют карбендазим двумя порциями по 3 см³ этилацетата. Органические фракции пропускают через слой безводного сульфата натрия, собирая в круглодонную колбу, и упаривают на роторном испарителе. Сухой остаток растворяют в 1,0 см³ 0,05 % трифторуксусной кислоты и 10 мм³ водят в хроматограф.

Примечание. Определение тиофанат-метила необходимо проводить сразу после приготовления пробы, так как он быстро разрушается, частично превращаясь в карбендазим. Пробы для определения карбендазима допускается хранить в холодильнике только после очистки в системе нссмешивающихся растворителей.

9.2. Условия хроматографирования Ультраэффективный жидкостный хроматограф с быстросканирую-щим УФ-детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки. Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С18, (100 х 2,1) мм, 1,7 мкм. Температура колонки (30 ± 1) °С.

Тиофанат-метил: подвижная фаза: смесь ацетонитрила (А) и 0,005 М ортофосфорной кислоты (В) в фадиентном режиме: 0—1 мин -10 % А, 1 —6 мин - увеличение А от 10 до 50 %, 6—15мин - 50 % А, 15—15,1 мин - уменьшение А от 50 до 10%, 15,1—18 мин - 10% А.

Скорость потока элюента: 0,2 см³/мин. Рабочая длина волны УФ-детск-тора 265 нм. Объем вводимой пробы 10мм³. Время удерживания тиофа-нат-метила (6,86 ±0,01) мин.

Карбсндазим: подвижная фаза: смесь ацетонитрила и 0,05 % триф-торуксусной кислоты в соотношении 10 : 90. Скорость потока элюента: 0,2 см³/мин. Рабочая длина волны УФ-детектора 281 нм. Объем вводимой пробы 10 мм³. Время удерживания карбендазима (4,58 ±0,01) мин.

10. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. Содержание тиофанат-метила или карбендазима в пробе (X_t мг/кг) вычисляют по формуле:

Р

S_x - площадь пика тиаофанат-метила или карбендазима на хроматограмме испытуемого образца, мм² (AU);

К - градуировочный коэффициент, найденный на стадии построения соответствующей градуировочной зависимости;

V - объём пробы, подготовленной для хроматофафичсского анализа, см³;

Р - навеска анализируемого образца, г.

Содержание остаточных количеств тиофанат-метила или карбендазима в образце вычисляют как среднее из двух параллельных определений.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор тиофанат-метила с концентрацией 0,5 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор карбендазима с концентрацией 1,0 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

МУК 4.1.3361—16

г - значение предела повторяемости (г = 2,8о_г).

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

(X ± Д) мг/кг при вероятности Р = 0,95, где

X - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

А - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

SX

где

S - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций), %.

В случае если содержание компонента меньше нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание вещества в пробе «менее нижней границы определения» (например: менее 0,1 мг/кг*, где *- 0,1 мг/кг - предел обнаружения тиофанат-метила в масле).

13. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-02 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

13.1.    Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2.    Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.

Величина добавки Q должна удовлетворять условию: ^с* > ^л,* +    .    где

(±Д,    )    -    характеристика    погрешности    (абсолютная    по

родность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг; при этом:

А, - ± 0,84 А, где

15

ББК 51.23 0-62

0-62 Определение остаточных количеств тиофанат-метила и карбендазима в зеленой массе, семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2017.—16 с.

ISBN 978—5—7508—1546—3

1.    Разработаны сотрудниками ФГБНУ «Всероссийский НИИ защиты растений» (В. И. Долженко, С. Е. Маслаков) и ООО «Инновационный центр защиты растений» (И. А. Цибульская. В. Ф. Павлова).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы но надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 20 мая 2016 г. № 1).

3.    Утверждены руководи гелем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. 10. Поповой 1 июля 2016 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.23

Огветственный за выпуск Н. В. Митрохина

Редактор К. В. Шмат Компьютерная верстка Е. В. Ломановой

Подписано в печать 07.02.17 Формат 60x88/16    Печ. л. 1,0

Тираж 125 экз.    Заказ 13

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994. Москва, Вадковский пер., д 18, стр. 5, 7

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован отделением издательского обеспечения отдела научно-методического обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Реализация печатных изданий, тел./факс. 8 (495) 952-50-89

© Роспотребнадзор, 2017 © Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2017

МУК 4.1.3361—16

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А. Ю. Попова

1 июля 2016 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств

тиофанат-метила и карбеидазима в зеленой массе, семенах и масле подсолнечника методом

высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания _МУК    4.1.3361—16_

Свидетельство о метрологической аттестации №01.5.04.226/ 01.00043/2015.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации тиофанат-метила в зеленой массе в диапазоне концентраций 0,5—5,0 мг/кг, в семенах и масле подсолнечника - 0,1—1,0 мг/кг; карбеидазима в зеленой массе в диапазоне концентраций 0,2—2,0 мг/кг, в семенах и масле подсолнечника - 0,025— 0,25 мг/кг.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Т иофанат-метил

Dimethyl 4,4'-(o-phenylene)bis(3-thioallophanate) (1UPAC) ¹

Молекулярная масса: 342,39.

Химически чистое вещество представляет собой белое кристаллическое вещество.

Температура плавления: разлагается до плавления. Давление пара при 25 °С: 8,8 х Ю”¹ МПа.

Растворимость (в мг/дм¹ при 20 °С): вода - 20, гексан - 0,47, ксилол -ПО, метанол - 7 800, этилацетат - 8 400.

Константа диссоциации (рКа) при 25 °С: 7,28 (слабая кислота).

Стабильность к гидролизу при 20 °С: DT50 = 867 дней (pH 5), 36 дней (pH 7), 0,7 дней (pH 9). Период полураспада в почве: DT50 - 0,6 дня.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность LD₅₀ для крыс более 5 000 мг/кг, острая дермальная токсичность LD₅₀ для крыс превышает 2 000 мг/кг. Оказывает раздражающее действие на дыхательные пути, обладает репродуктивной токсичностью и мутагенностью.

Умеренно токсичен для пчел и дождевых червей.

Область применения препарата: контактно-системный фунгицид с защитными и лечебными свойствами.

Механизм действия: в грибах, растениях и других биологических средах вещество превращается в карбендазим, поэтому считается, что по механизму действия тиофанат-мегил аналогичен бензимидазолам.

Гигиенические нормативы для тиофанат-метила, установленные в России: МДУ в сахарной свекле -- 1,0 мг/кг; в зерне хлебных злаков -1,0 мг/кг; в плодовых семечковых - 0,1 мг/кг.

Карбендазим

Метилбензимидазол-2-илкарбамат (IUPAC).

/

C₉H₉N₃02

Молекулярная масса: 191,2.

Химически чистое вещество; представляет собой кристаллический порошок без цвета и запаха.

Температура плавления 302—307 °С (с разложением).

Давление пара 0,09 мРа (20 °С); 0,15 мРа (25 °С); 1,3 мРа (50 °С).

4

МУК 4.1.3361—16

Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода K^lgP -= 1,38 (pH 5); 1,51 (pH 7); 1,49 (pH 9).

Растворимость в воде (мг/дм³, 24 °С): 29 (pH 4); 8 (pH 7); 7 (pH 8).

Растворимость в органических растворителях (г/дм³, 24 °С): диме-тилформамид - 5; ацетон - 0,3, этанол - 0,3; хлороформ - 0,1; этилаце-тат - 0,135; дихлорметан - 0,068; бензол - 0,036; циклогексан и диэти-ловый эфир - < 0,01; н-гексан - 0,0005.

Субстанция карбенлазима стабильна по крайней мере в течение 2 лет при температуре хранения ниже 50 °С, а также после 7 дней интенсивного облучения светом (20 000 люкс). В щелочных растворах медленно разлагается. При 22 °С DT_S0 превышает 350 дней (pH 5 и 7) и равен 124 дням (pH 9). Будучи слабым основанием (рК_а 4.2), в кислых растворах образует стабильные водорастворимые соли.

Краткая токсикологическая характеристика: острая оральная токсичность LD50 для крыс 6 400 мг/кг; для собак - более 2 500 мг/кг; дермальная и3₅оДля кроликов более 10 000 мг/кг; для крыс - более 2 000 мг/кг; не оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку глаз; ингаляционная - при использовании водной суспензии 10 г/л эффект не обнаружен для крыс, кроликов, морских свинок и кошек. Период наблюдения 4 часа.

Область применения: фунгицид системного действия с длительным защитным и целебным эффектом. Эффективно подавляет развитие заболеваний растений, вызываемых грибами из родов Septoria, Fusarium, Erysiphe и Pseudocercosprella на зерновых культурах; Sclerotinia, Alter-naria и Cylindrosporium на семенах рапса.

Гигиенические нормативы для карбендазима, установленные в России: МДУ в сахарной свекле - 0,1 мг/кг; в зерне хлебных злаков -0,5 мг/кг; в плодовых семечковых - 0,2 мг/кг.

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р - 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

5

Метрологические параметры

Таблица 1

Авизи руемый объект Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Показатель точности* (границы относительной погрешности (Р = 0,95), ±5, % Показатель повторяемости (средне-квадратическое отклонение повторяемости), % Показатель воспроизводимости (средне-квадратическое отклонение воспроизводимости), о>, % Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), г, % Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в разных лабораториях), Ру % (Р = 0,95) Тиофанат-метил Зеленая масса 0,5—5,0 23 8 12 22 34 Семена 0,1—1,0 23 8 12 22 34 Масло 0,1—1,0 23 8 12 22 34 Карбендазим Зеленая масса 0,2—2,0 23 8 12 22 34 Семена 0,025— 0,25 22 6 10 17 28 Масло 0,025— 0,25 23 8 12 22 34 * соответствует расширенной неопределенности Uimtf при коэф< к = 2 жциенте охвата

Полнота извлечения тиофанат-метила, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для п = 20, Р— 0,95

Таблица 2

Анализируемый объекг Предел обнару жения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Полнота извлечения, % Стандартное отклонение, S Доверительный интервал среднего результата, ± % Зеленая масса 0,5 0,5—5,0 84,4 2,51 1,17 Семена 0,1 0,1—1,0 89,6 4,51 2,11 Масло 0,1 0,1—1,0 85,8 4,19 1,96

МУК 4.1.3361—16

Полнота извлечения карбендазима, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для п = 20, Р = 0,95

Анализируемый объект Предел обнару жения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Полнота извлечения, % Стандарг-ное отклонение, S Доверительный интервал среднего результата, ± % Зеленая масса 0,2 0,2—2,0 88,4 3,06 1,43 Семена 0,025 0,025—0,25 92,3 4,27 2,00 Масло 0,025 0,025—0,25 90,3 3,01 1,41

2. Метод измерений

Методика основана на определении тиофанат-метила и карбендазима методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового (УФ) детектора после извлечения из образцов ацетонитрилом, последующей очистки на сорбенте и в системе несмешивающихся растворителей.

Идентификация тиофанат-метила и карбендазима проводится но времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.

Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства измерении Весы аналитические с пределом взвешивания до 210 г и пределом допускаемой погрешности 0,1 мг ГОСТ 53228-08 Весы технические с пределом взвешивания до 150 г и пределом допускаемой погрешности 0,1 г ГОСТ 53228-08 Жидкостной хроматограф с быстросканирующим УФ-детектором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки.

Колбы мерные на 10, 100 см³    ГОСТ 23932-90

Микродозаторы одноканальные переменного

объема от 100 до 1 000 мм³ и от 1 до 5 см³

Цилиндры мерные на 10, 50 и 100 см³    ГОСТ    23932—90

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

7

3.2. Реактивы

Ацетонитрил для ВЭЖХ

Вода для лабораторного анализа (бидистилли-

рованная, деионизованная)

Динатрия цитрат шестиводный, 99 % Карбендазим, с содержанием основного вещества 99,0 %

Кислота ортофосфорная, 98 %, хч

Кислота соляная, хч

Кислота трифгоруксусная, 99 %

Магний сернокислый безводный, 99 %

Натрий сернокислый безводный, хч Натрия гидроксид, чда Натрий хлористый, чда Натрия цитрат двуводный, 99 %

Сорбент С18ЕС (с эндкэппингом) Тиофанат-метил, с содержанием основного вещества 99,3 %

Этилацетат, хч

Сорбент (смесь первичных и вторичных аминов)

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, нс требующих дополнительной очистки растворителей.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С18 (100 х 2,1) мм, 1,7 мкм Воронки делительные вместимостью 50 см³    ГОСТ 25336-82

Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 10 и 25 см^}    ГОСТ 9737-93

Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками объемом 15 и 50 см³ Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающим вакуум до 10 мбар Центрифуга с максимальной рабочей частотой вращения 4 000 об./мин Устройство перемешивающее (50- -200 колебаний в минуту)    ТУ 4389-007-44330709—11

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

8

МУК 4.1.3361—16

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2.    Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточновытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и ГН 2.2.5.2308—07.

Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.

5. Требования к квалификации операторов

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

6. Условия измерений

При выполнении измерений выполняют следующие условия:

-    приготовление растворов и подготовку проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

-    измерения на жидкостном хроматофафс проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к определению

7.1. Кондиционирование колонки

Перед началом работы аналитическую колонку кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1—0,2 см³/мин) до стабилизации нулевой линии.

7.2. Приготовление растворов

7.2.1.0,05%-й раствор трифторуксусной кислоты: (0,5 ±0,01) г трифторуксусной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм³, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.

9

1