Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств дифлуфензопира в воде, почве, зеленой массе, зерне и масле кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.13235—14

Издание официальное

Москва • 2015

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств дифлуфензопира в воде, почве, зеленой массе, зерне и масле кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3235—14

BEKS 1.23 062

062 Определение остаточных количеств дифлуфензонира в воде, почве, зеленой массе, зерне и масле кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиолог ии Роспотребнадзора, 2015.—16 с.

ISBN 978-5—7508- -1395—7

1.    Разработаны сотрудниками ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт зашиты растений» (В. И. Долженко, И. А. Цибульская, Т. Д. Черменская, А. С. Комарова, В. В. Человечкова).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией но государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы но надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 6 ноября 2014 г. № 2).

3.    Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой 22 декабря 2014 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.23

Ответственный за выпуск Н. В. Митрохина

Редактор Н. В. Кожока Компьютерная вёрстка Е. В. Ломановой

Подписано в печать 8.12.15 Формат 60x88/16    Печ.    л. 1,0

Тираж 125 экз.    Заказ    76

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Валковский пер., д. 18, стр. 5, 7

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован отделением издательского обеспечения отдела научно-методического обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Реализация печатных изданий, тел./факс: 8 (495) 952-50-89

© Роспот ребнадзор, 2015 © Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015

МУК 4.1.3235—14

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А. Ю. Попова

22 декабря 2014 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств дифлуфензопира в воде, почве, зеленой массе, зерне и масле кукурузы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания __МУК    4.1.3235—14_

Свидетельство о метролошческой аттестации №01.5.04.183/ 01.00043/2014.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации дифлуфензопира в диапазоне концентраций в воде 0,001—0,01 мг/дм¹, в почве, зерне и масле кукурузы 0,01—0,1 мг/кг, зеленой массе 0,05—0,5 мг/кг.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Дифлуфензопир

2-{(EZ)-1 -[4-(3,5-difluorophenyI)semicarbazono]ethyl}nicotinic acid (И ЮНАК).

Структурная формула:

Брутто формула: C15H12F2N4O3. Молекулярная масса: 334,28.

МУК 4.1.3235—14

Химически чистое вещество представляет собой белое кристаллическое вещество.

Температура плавления: 135 °С.

Давление пара при 25 °С: 0,01 МПа.

Растворимость в воде: 5 850 мг/дм³ (при 20 °С).

Константа диссоциации (рКа) при 25°С: 3,18 (слабая кислота).

Стабильность к гидролизу при 20 °С: DT₅₀ = 13 дней (pH 5), 24 дня (pH 7), 26 дней (pH 9). Период полураспада в почве: DT50 = 14 дней.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность LD₅₀ для млекопитающих более 5 000 мг/кг, острая дермальная токсичность LD50 для млекопитающих превышает 5 000 мг/кг. Оказывает раздражающее действие на слизистую глаз. Умеренно токсичен для пчел.

Область применения препарата: системный гербицид для борьбы с широким спектром сорняков в послсвсходовый период.

Механизм действия: ингибирование транспорта ауксина.

Гигиенические нормативы для дифлуфензопира в России не установлены.

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р- 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1

Метрологические параметры

Объект анализа Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм3) 1 Указатель повторяемости (относительное средне-квадратичсское отклонение повторяемости) Ог, % Показатель внутрилабо- раторной прецизион ности, % Показа тель воспро изводи мости, Or, % Показатель точности* (границы относительной погрешности), ± 8, % Вода 0,001—0,01 7 8 12 24 Почва 0,01—0,1 8 9 11 22 Зерно 0,01—0,1 8 9 11 22 Масло 0,01—0,1 8 9 11 22 Зеленая масса 0,05—0,5 7 9 12 23 * Соответствует расширенной неопределенности £/<***. при коэффициенте охвата к « 2

МУК 4.1.3235—14

Колбы мерные на 10, 100 и 250 см³    ГОСТ 23932-90

Микродозаторы одноканальные переменного

объема от 200 до 1 000 мм³ и от 1 до 5 см³

Цилиндры мерные на 50 и 100 см³    ГОСТ 23932-90

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Ацетон, осч

Ацетонитрил для ВЭЖХ Вода для лабораторного анализа (бидистилли-рованная. деионизованная)

Дифлуфеизопир с содержанием основного вещества 97,6 %

Кислота ортофосфорная, хч Кислота соляная, хч Кислота трифторуксусиая, хч, 99 %

Метанол, хч Метилен хлористый, хч Натрий серно-кислый безводный, хч Натрий углекислый кислый, хч н-Гексан, хч

Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 30 : 70

Смесь № 1: этилацетат- метанол в соотношении 9 : 1 по объему

Смесь № 2: этилацетат-метанол в соотношении 2 : 1 по объему

Смесь № 3: трифторуксусиая кислота-вода в соотношении 1 : 199 по объему.

Этилацетат, хч    ГОСТ 22300--76

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитой фазой, включающей гидрофильную карбаматную группу в цепи С18, (100 х 2,1) мм,

1,7 мкм ²

МУК 4.1.3235—14

Вакуумный манипулятор для работы с патронами для твердофазной экстракции Воронки делительные вместимостью 250 см* ГОСТ 25336-82 Колбы круглодонныс на шлифе вместимостью 10,25, 100 см³    ГОСТ    9737—93

Патроны для твердофазной экстракции: № 1 -заполненные гидрофильным слабокислотным сорбентом на основе силикагеля и № 2 - гидрофобным сорбентом с привитыми гексаде-

цильными группами, по 0,4 г    ТУ    4215-002-0545-931—-94

Установка для отдувки растворителей током

азота

Устройство перемешивающее (50—200 колебаний в минуту)    ТУ4389-007-44330709—11

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2.    Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных Г'Н 2.2.5.1313—03 и ГН 2.2.5.2308—07.

Организация обучения работников безопасности груда - по ГОСТ 12.0.004-90.

5. Требования к квалификации операторов

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хромаго1рафии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

МУК 4.1.3235—14

6. Условия измерений

При выполнении измерений выполняют следующие условия:

-    процессы приготовления расгворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности нс более 80 %;

-    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к определению

7.7. Кондиционирование колонки

Перед началом анализа аналитическую колонку кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1—0,2 см³/мин) до стабилизации нулевой линии.

7.2. Кондиционирование патрона № 1 с гидрофильным слабокислотным сорбентом с постоянной активностью

Патрон промывают 2 см³ смеси № 2, затем 3 см³ этилацетата.

7.5. Кондиционирование патрона № 2 с гидрофобным сорбентом с привитыми гексадецильными группами

Патрон последовательно промывают 2 см³ этилацетата, 2 см³ метанола, 3 см³ смеси № 3.

7.4. Приготовление растворов

7.4.1.    0,005 М раствор ортофосфорной кислоты: (0,5 ± 0,01) г 98 % ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм³, растворяют в бидистиллированиой воде и доводят объем до метки.

7.4.2.    Для приготовления подвижной фазы смешивают ацетонитрил с 0,005 М раствором ортофосфорной кислоты в соотношении 30 : 70 по объему, используя мерные цилиндры.

7.4.3.    0,1 N раствор соляной кислоты: 1 см³ концентрированной соляной кислоты помещают в мерную колбу объемом 100 см³, растворяют в бидистиллированиой воде и доводят объем до метки.

7.4.4.    0,5 % раствор натрия углекислого кислого: 0,5 г натрия углекислого кислого помещают в мерную колбу объемом 100 см³, растворяют в бидистиллированиой воде и доводят объем до метки.

7.5. Приготовление основного и градуировочных растворов

7.5.1. Основной раствор с концентрацией 0.5 мг/см³: точную навеску дифлуфензопира (50 ± 0,5 мг) помещают в мерную колбу вмести- ³

МУК 4.1.3235—14

мостью 100 см³, растворяют в метаноле и доводят объем до метки метанолом.

7.5.2. Приготовление градуировочных растворов

Градуировочные растворы с концентрациями дифлуфензогшра 0,05, 0,1, 0,2, 0,5 и 1,0 мкг/см³ готовят методом последовательного разбавления по объему, используя раствор подвижной фазы (смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 30 : 70).

7.5.2.1.    Раствор № 1 с концентрацией 1,0 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят 0,2 см³ основного раствора и доводят до метки подвижной фазой.

7.5.2.2.    Раствор № 2 с концентрацией 0,5 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 5,0 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

7.5.2.3.    Раствор № 3 с концентрацией 0,2 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 2 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

7.5.2.4.    Раствор Л£ 4 с концентрацией 0,1 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 1 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

7.5.2.5.    Раствор № 5 с концентрацией 0,05 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 0,5 см³ раствора № 1 и доводят объем до метки подвижной фазой.

Основной раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0—4 °С в течение 5 дней, градуировочные растворы использовать в день приготовления.

При изучении полноты определения дифлуфензопира используют ацетоновые растворы вещества, приготовленные из основного раствора методом последовательного разбавления по объему ацетоном.

7.6. Построение градуировочного графика

Для установления градуировочной характеристики (площадь пика -концентрация дифлуфензопира в растворе) в хроматограф вводят по 10 мм³ градуировочных растворов (не менее 3 параллельных измерений для каждой концентрации, не менее 4 точек по диапазону измеряемых концентраций). Затем измеряют площади пиков и строят график зависимости среднего значения площади пика от концентрации дифлуфензопира в градуировочном растворе.

Методом наименьших квадратов рассчитывают градуировочный коэффициент (К) в уравнении линейной регрессии:

С = KS_t где ⁴

1

2

3

4