Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование ___Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств тиснкарбазон-мстила в зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические ука ниши МУК 4.1.3210—14

Иэдание официальное

Москва • 2015

Федеральная служба но надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств тиенкарбазон-метила в зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3210—14

ББК 51.23 062

062 Определение остаточных количеств тиенкарбазон-метила в зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015.—23 с.

ISBN 978—5—7508—1375—9

1.    Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХЛ им. К. А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов», Минсельхоза России (В. А. Калинин, В. В. Допгилевич, А. В. Довгилсвич, В. Н. Тестова)

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол № 1 от 26 июня 2014 г.).

3.    Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой 30 июля 2014 г.

4.    Введены впервые.

ЬБК 51.23

ISBN 978—5—7508—1375—9

© Роспотребнадзор, 2015 © Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015

МУК 4.1.3210—14

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А. К). Попова

30 июля 2014 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств тиснкарбазон-мстила в зерне и соломе зерновых колосовых культур методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указании МУК 4.1.3210—14

Свидетельство о метрологической аттестации №01.00282-2008/ 0192.19.12.13 от 19.12.2013.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения могола высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств гиенкарбазон-метила в зерне зерновых колосовых культур в диапазоне 0,01—0,1 мг/кг и в соломе зерновых колосовых культур в диапазоне 0,05—0,5 мг/кг. Методические указания носят рекомендательный характер.

Название действующего вещества по ИСО: тиенкарбазон-метил.

Название действующего вещества по ИЮПАК: 3-тиофенкарбоно-вая кислота, 4-[[[(4,5-дигидро-3-метокси-4-метил-5-оксо-1 Н-1,2,4-триа-зол-1 -ил)карбонил]амино]сульфонил]-5-метил, метиловый эфир.

Структурная формула: ¹

Эмпирическая формула: C12H14N4O7S2.

Молекулярная масса: 390,4.

Цвет, запах: химически чистый тиенкарбазон-метил представляет собой белый порошок с легким характерным запахом.

Температура плавления: > 401 °С.

Температура кипения и замерзания: не определена, т. к. разрушается при 140 °С.

Температура вспышки и воспламенения: более 386 °С.

Плотность: 1,51 г/см¹ при 20 °С.

Давление паров в мм. рт. ст.:

8,8 х 10 ¹⁴ Па при 20 °С (экстраполирований);

3,7 х КГ¹³ Па при 25 °С (экстраполированный);

2,3 х ю ¹⁰ Па при 50 °С (экстраполированный).

Коэффициент распределения октанол-вода:

Растворимость в воде: 72 мг/л (при 20 °С, pH 3,9).

Растворимость в органических растворителях (г/дм¹ при 20 °С): ди-хлорметан - 100—120, ацетон - 9,54, этилацетат - 2,19, толуен - 0,91, этанол 0,23, п-гексан-0,15 х 10 .

Краткая токсикологическая характеристика. Тиенкарбазон-метил относится к мало опасным по острой оральной (ЛД₅₀ для крыс более 2 000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛДзд для крыс более

2    000 мг/кг), но к умеренно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК₅₀ для крыс (4 ч) более 2 018 мг/м¹ воздуха). Тиенкарбазон-метил нсфро- и нейротоксичен.

В организме животных тиенкарбазон-метил мстаболизирустся слабо, в растениях разлагается быстро и полностью. Главными метаболитами в растениях являются BYH 18636-ММТ-глюкозид и BYH 18636-N-дссмстил. В полевых условиях ДТ₅о тиенкарбазон-метила составляет от

3    до 44,6 дня, ДТ90 - от 9,9 до 148 дней. Тиенкарбазон-метил фотолити-чески стабилен. ДТ₅₀ в воде составляет от 130 до 148 дней.

Область применения. Тиенкарбазон-метил - гербицид системного действия, быстро поглощается листьями и корневой системой сорняков, свободно перемещается по всему растению с нисходящими и восходящими токами питательных веществ. Благодаря системному действию препарат проникает во все части растения, включая «спящие» почки. На ²

МУК 4.1.3210—14

биохимическом уровне гербицид воздействует на фермент ацетолактат-синтазу (ALS), участвующий в цепи биосинтеза аминокислот, и нарушает процессы синтеза белков, что вызывает прекращение деления клеток в меристемных тканях сорных растений.

Рекомендуется как довсходовый и послевсходовый гербицид для контроля однолетних и многолетних злаковых и двудольных сорняков на посевах кукурузы. Рекомендуемая норма расхода препарата 0,4— 0,5 л/га. Способ применения - наземное опрыскивание почвы до всходов культуры (без заделки) или в фазу 2—3 листьев культуры.

В России установлены следующие гигиенические нормативы:

ДСД - 0,2 мг/кг массы человека;

ОДК в почве - 0,9 мг/кг;

ПДК в воде водоемов - 0,05 мг/дм³;

ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1,0 мг/м³;

ОБУВ в атмосферном воздухе - 0,02 мг/м³;

МДУ в продукции (мг/кг): кукуруза (зерно, масло) - 0,5.

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Д-0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1

Метрологические параметры лля тиенкарбазон-метила

Анали зируе мый объект Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Показатель точности (граница относительной погрешности), ±6, %Р = 0,95 Стандартное отклонение повторяемости, Or, % Предел повторяемости, г, % Предел воспроизводимости, R, % Зерно пшеницы 0,01—0,1 вкл. 50 1,53 4,25 5,96 Солома пшеницы 0,05—0,1 вкл. 50 1,74 4,84 6,77 0,2—0,5 вкл. 25 1,72 4,78 6,69

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (п = 20) приведены в табл. 2.

Таблица 2

Анализи руемый объект Метрологические параметры, Р = 0,95, п- 20 Предел обнару жения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Полнота извлечения вещества, % Стандартное отклонение, 5, % Доверительный интервал среднего результата, ±, % Зерно пшеницы 0,01 0,01—0,1 72,81 2,11 0,72 Солома пшеницы 0,05 0,05—0,5 7238 1,57 0,53

2. Метод измерений

Метод основан на определении тиенкарбазон-метила методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием диодно-матричного детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами, на концентрирующих патронах № 1 и на колонках с окисью алюминия.

Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства измерений Весы аналитические класса точности по I'OCT Р 53228—08 - специальный (I), с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г Весы лабораторные общего назначения класса точности по ГОСТ Р 53228-08 - средний (III) с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности ± 0,038 г Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и 1 000 см³

Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см³

6

МУК 4.1.3210—14

рН-метр/милливольтметр с диапазоном измерения 0... 14 pH; ± 1 999 мВ Хроматографическая система, включающая:

-    хроматограф жидкостный с диодно-матричным детектором, снабженный термостатом для колонок с диапазоном температур от 15 до

80 °С и стандартным автосамплером с дозирующим объемом от 0,1 до 100 мм³ для автоматического ввода пробы в хроматографическую систему;

-    компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хрома-тографичсского анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ

Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 см³    ГОСТ    1770—74

Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Тиенкарбазон-метил, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,6 %

Алюминия окись для хроматографии, ч Ацетон, осч

Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм Вода дистиллированная и (или) бидистиллированная (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости) Гелий, очищенный n-Гсксан, хч

Калий марганцово-кислый, чда

Кальций хлористый, ч

Калий фосфорнокислый дву замещённый,

3-водный, чда

Кислота соляная, хч

Кислота муравьиная, чда

Кислота уксусная, ледяная

7

Концентрирующие патроны для твердофазной

экстракции с гидрофильным нейтральным

сорбентом с размером частиц 63—200 мкм с

привитыми диольными группами (объем -

1 см³, масса сорбента - 0,6 г), (патрон № 1)

Метилен хлористый, хч

Натрий серно-кислый, безводный, хч

Натрий хлористый, хч

Натрий углекислый, кислый, хч

Натрия гидроокись, хч

Этилацетат, чда

Примечание. Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы

Алонж прямой с отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами Аппарат для встряхивания проб с возвратнопоступательным направлением колебаний, с максимальной загрузкой 10 кг, с амплитудой колебаний 30 мм и скоростью от 10 до 300 колебаний в минуту

Банки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см³ Ванна ультразвуковая с потребляемой мощностью 140 Вт, рабочей частотой 50 Гц, рабочим объемом 4,5 дм³

Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная Воронки делительные на 250 см³ Воронки лабораторные, стеклянные Испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3 000 см³, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об./'мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием объемом 5 дм³ и с диапазоном температур от

8

МУК 4.1.3210—14

Колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1 ООО см³    ГОСТ    25336—82

Колбы круглодонные со шлифом (концентра-торы) на 100,250 и 4 000 см³ ТС    ТУ 92-891.029-    91

Колонка хроматографическая стальная, длиной 150 мм, с внутренним диамегром 3,9 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами С18 Насос диафрагменный, химически стойкий на 100 %, с мощностью электропривода 245 Вт, предельным вакуумом 100 мбар/абс., с избыточным давлением 1 бар и скоростью откачки 34 дм³/мин

Предколонка хроматографическая стальная, длиной 12,5 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами С8 Стаканы стеклянные, термостойкие объемом 100—500 см³    ГОСТ    25336—82

Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4 000 см³ и приемной конической колбой объемом 1 000 см³ Фильтры обеззоленные нейтральные, быстро фильтрующие, диаметром 11 см, зольность одного фильтра 0,00072 г    ТУ-6-09-1678—86

Фильтры для очистки растворителей, диаметром 20 мм с отверстиями пор 20 мкм Шприц инъекционный многократного

применения объемом 10 см³    ГОСТ 22967-90

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по

9

1

2