Федеральная сдужба по напору к сфере защиты нрав потреби!еден и G.iaiонодучня чедовека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Методические указания по методам контроля

Сборник

МУК 4.1.2593—10; 4.1.2595—10; 4.1.2673—10; 4.1.2674—10; 4.1.2680—2682—10; 4.1.2685—10; 4.1.2686—10; 4.1.2688—10; 4.1.2689—10; 4.1.2691—10

1

ББК51.21

M54

M54 Методические указания по методам контроля: Сборник.— М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2010.—179 с.

ББК 51.21

© Росно ipeona.i юр, 2010 © Федеральный цен ip гигиены н

эпидемиологии Росно ipeon ад юра, 2010

2

МУК 4.1.2682—10

7. Отбор проб и хранение

Отбор образцов свеклы для анализа проводят в соответствии с ГОСТ 1722-85 «Свекла столовая свежая, заготовляемая и поставляемая». Для длительного хранения образцы свеклы (ботва и корнеплоды) помещают в герметично закрытый двойной полиэтиленовый пакет и хранят в морозильной камере с температурой -18 °С.

8. Подготовка к определению

8. I. Кондиционирование колонки

Готовую насадку (5% ХЕ-60 на хроматонс N-Supcr) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, нс подсоединяя к детектору, и кондиционируют в токе азота при температуре 250 °С в течение 8—10 часов.

Капиллярную колонку перед анализом кондиционируют в токе азота при температуре 250 °С до установления нулевой линии.

8.2. Приготовление растворов

8.2.1. Приготовление насыщенного раствора хлористого натрия

В коническую колбу на 250 см³ наливают 150 см³ дистиллированной воды и насыпают в нес хлористый натрий при постоянном помешивании до тех пор. пока нс образу ется нерастворимый остаток хлористого натрия. Колбу выдерживают в течение 30 мин. периодически помешивая раствор. Если осадок растворился, добавляют еще хлористого натрия до образования нерастворимого остатка.

8.2.2. Приготовление градуировочных растворов

8.2.2.1.    Основной раствор с концентрацией 0,5 мг/ач³

Точную навеску тетраконазола (50 ± 0.5 мг) помещают в мерную колбу объемом 100 см³. растворяют в ацетоне и доводят до метки. Основной раствор можно хранить в холодильнике при температуре 0—t °С в течение 6 месяцев.

Градуировочные растворы с концентрациями 0.5. 0.25.0.1 и 0.05 мкг/см³ готовят из основного раствора методом последовательного разбавления гексаном по объему.

8.2.2.2.    Раствор № 1 с концентрацией 0,5 мкг/см³: в мерну ю колбу на 100 см³ пипеткой вносят 1 см³ основного раствора и доводят до метки гексаном. Затем 10 см³ полученного раствора пипеткой переносят в мерную колбу на 100 см³ и вновь доводят до метки гексаном.

94

МУК 4.1.2682—10

8.2.2.3.    Раствор № 2 с концентрацией 0,25 мкг/см³: в мерную колбу на 100 см³ вносят пипеткой 50 см³ раствора № I и доводят до метки гексаном.

8.2.2.4.    Раствор № 3 с концентрацией 0,1 мкг/см³: в мерную колбу на 100 см³ вносят пипеткой 20 см³ раствора № 1 и доводят до метки гексаном.

8.2.2.5.    Раствор № 4 с концентрацией 0,05 мкг/см³: в мерную колбу на 100 см³ вносят пипеткой 10 см³ раствора № 1 и доводят до метки гексаном.

Градуировочные растворы хранятся в холодильнике в течение 1 месяца.

При определении полноты извлечения для внесения в образец корнеплодов используют растворы тстраконазола в ацетоне.

8.3. Построение градуировочной характеристики

Для построения градуировочного графика в хроматограф вводят по 1 мм³ каждого из градуировочных растворов (3 параллельных определения для каждой концентрации, не менее 4-х точек по диапазону измеряемых концентраций), измеряют высоты или площади пиков и строят график зависимости среднего значения высоты или площади пика от концентрации тстраконаюла в градуировочном растворе (мкг/см³).

Градуировочную характеристику необходимо проверять при замене реактивов, хроматографической колонки или элементов хроматографической системы, а также при отрицательном результате контроля граду-ировочного коэффициента.

Градуировочную зависимость признают стабильной при выполнении следующего условия:

|С-С_К|

_с ЮО^иф.гдс

С - аттестованное значение массовой концентрации тстраконаюла в градуировочном растворе:

С_к - результат контрольного измерения массовой концентрации тстраконаюла в градуировочном растворе;

^контр - норматив контроля граду ировочного коэффициента. %. Ожситр = ю % при Р = 0.95).

95

9. Отбор проб и хранение

Отбор образцов свеклы для анализа проводят в соответствии с ГОСТ 1722-85 «Свекла столовая свежая, заготовляемая и поставляемая». Для длительного хранения (до 12 мсс.) образцы свеклы (ботва и корнеплоды) упаковывают в двойной полиэтиленовый пакет, герметично заклеивают и помещают в морозильную камеру с температу рой -18 °С.

10. Проведение определения

10.1. Определение тетра кон июли в ботве и корнеплодах свеклы

Навеску ботвы 10 ±0.1 г или корнеплодов 20 ± 0.1 г измельчают, помещают в коническую колбу и заливают 50—100 см³ ацетона, таким образом, чтобы проба была полностью покрыта раствором, и экстрагируют тетраконазол в ультразвуковой ванне в течение 15 мин. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр «красная лента». Остаток на фильтре промывают дважды ацетоном порциями по 25 см³. Объединённый фильтрат упаривают на ротационном испарителе до водного остатка при температуре не выше 40 °С. Остаток переносят в делительную воронку, добавляют 80 см³ дистиллированной воды и 25 см³ насыщенного раствора хлористого натрия. Тетраконазол псрсэкстрагируют в 1.2-дихлорэтан.

Для этого в воронку добавляют 100 см³ 1.2-дихлорэтана и встряхивают воронку в течение 1—2 мин. После разделения фаз органическую фазу отбирают в круглодонную колбу через слой безводного сульфата натрия (20 г). 1.2-дихлорэтан выпаривают на ротационном испарителе при температу ре нс выше 40 °С. Сухой остаток растворяют в 10 см³ гексана (на УЗ-бане в течение 2 мин) и хроматографируют.

При обнаружении на хроматограмме мешающих определению тет-раконазола примесей проводят дополнительную очистку на патронах с силикагелем 60 (п. 10.2).

10.2. Очистка проб на патронах с силикагелем 60

Твердофазную экстракцию проводят на концентрирующем патроне, заполненном 0.5 г силикагеля 60 с размером частиц 0.040—0.063 мм. Патрон промывают 1 см³ ацетона и 2.5 см³ гексана.

Сухой остаток, полученный при упаривании очищенных по п. 10.1 экстрактов, количественно переносят двумя порциями по 1 см³ гексана в патрон. Промывают патрон последовательно двумя порциями по 2.5 см³ гексана и 4 см³ элюента 1 (гексан - ацетон 80 : 20). Фильтрат и промыв-

МУК 4.1.2682—10

ки отбрасывают. Тетраконазол элюируют 3 см³ элюента 2 (гексан - ацетон 60 : 40). Элюат собирают в грушевидную колбу и упаривают на ротационном испарителе при температуре не выше 40 °С. Сухой остаток растворяют в 10 см³ гексана и 1 мм³ вводят в испаритель хроматографа.

10.3. Условия хроматографирования

Газовый хроматограф Цвет-550 М или аналогичный с детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР или ДЭЗ) и стеклянной насадочной колонкой, длиной 1 или 2 м и внутренним диаметром 3 мм, заполненной хроматоном N-Super с 5% ХЕ-60. Температура колонки 210 °С, испарителя 230 °С, детектора 310 °С. Шкала электрометра 8 х Ю¹⁰. Скорость потока газа-носителя 40 см/мин. Дозируемый объем 1 мм³.

Альтернативные условия хроматографирования: газовый хроматограф «Кристалл 2000М» с ДЭЗ и капиллярной кварцевой колонкой длиной 30 м. внутренним диаметром 0.32 мм с неподвижной фазой НР-35. толщина слоя 0.25 мкм. Температура колонки программируется от 150 °С (1.5 мин) до 200 °С со скоростью 25 °С/мин. далее со скоростью 5 °С/мин до 250 °С (5 мин). Температу ра испарителя 250 °С. детектора 320 °С. Расход газа-носителя (азот) через колонку 1.08 см³/мин. Г_: -30 см³/мин. Г₃ - 30 см³/мин. Дозируемый объем 1 мм³.

Время удерживания тстраконазола 11 мин 17 сек ± 5 сек.

11. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки. содержание тстраконазола в образце ботвы или корнеплодов свеклы (X. мг/кг) вычисляют по формуле:

//₂-С-Г Н_ГР

//] - высота (площадь) пика тстраконазола в стандартном растворе, мм (мв-сек);

/А - высота (площадь) пика тстраконазола в анализируемой пробе, мм (мв сск):

Г-объем пробы, подготовленной для хроматографического анализа. см³:

Р - навеска анализируемого образца, г:

С - концентрация стандартного раствора тстраконазола. мкг/см³.

97

Содержание остаточных количеств тетраконазола в анализируемом образце вычисляют как среднее из 2-х параллельных определений.

При получении зашкаленных пиков анализируемый экстракт разбавляют гексаном.

12. Проверка приемлемости результатов параллельных определении

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми нс превышает предела повторяемости( 1):

Х\,Х₂ - результаты параллельных определений, мг/кг: г - значение предела повторяемости (г = 2.8о_г).

При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

13. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

(X ± А) мг/кг при вероятности Р = 0.95. где

X - среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг;

Д - граница абсолютной погрешности, мг/кг;

Д = о-Х/100.

6 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций). %.

В слу чае, если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде;

«содержание вещества в пробе «менее нижней границы определения» (например: менее 0.025 или 0.05 мг/кг*. где *-0.025 и 0.05 мг/кг -пределы обнаружения в корнеплодах и ботве свеклы, соответственно).

14. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точ-98

МУК 4.1.2682—10

ность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

14.1.    Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

14.2.    Плановый внутрнлабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится с применением метода добавок.

Величина добавки С? должна удовлетворять условию:

Сд = А_л.х ⁺ Д-1, х'. где

± Д_л х (± Ад. х') - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой, соответственно), мг/кг; при этом:

А_л = ± 0.84 А. где

А - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

А = 6 • X /100,

5 - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций). %.

Результат контроля процедуры К_к рассчитывают по формуле:

Кк = X* - X - Сэ, где

X*. X, Сг - среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 4) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

К = 7^ДлЛ" + ^ДлД

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К_к) с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

|К_к|<К.    (2)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры к их устранению.

99

МУК 4.1.2593—10; 4.1.2595—10; 4.1.2673—10; 4.1.2674—10, 4.1.2680—2682—10; 4.1.2685—10; 4.1.2686—10; 4.1.2688—10; 4.1.2689—10; 4.1.2691—10

Содержание

Определение остаточных количеств Флурохлоридона в почве, семенах и масле подсолнечника методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.2593—10........................................................4

Определение остаточных количеств имидаклоприда в томатном соке методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2595—10.......................................................21

Определение остаточных количеств дитнанона в ботве и клубнях карто(|юля методом высокоэффективной жидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2673—10.......................................................35

Определение остаточных количеств бифентрнна в семенах и масле рапса методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2674—К).......................................................47

Определение остаточных количеств метаза хлора в капусте методом капиллярной газожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2680—10...................................................................................59

Определение остаточных количеств пиклорама в семенах и масле рапса методом капиллярной газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2681—10.......................................................71

Определение остаточных количеств тстраконазола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом газожидкостной

хроматографии: МУК 4.1.2682—10.......................................................87

Измерение концентраций топрамезона в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2685—10.................................................................................101

Определение остаточных количеств Бста-цифлутрина в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом капиллярной

газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.2686—10.........................115

Определение остаточных количеств азоксистробина в зеленой массе, семенах и масле рапса методом высокоэффективной

жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2688—10................................135

Определение остаточных количеств димстоморфа в ягодах винограда и виноградном соке методом высокоэффективной

жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2689—10................................149

Определение остаточных количеств ацетамиприда в семенах и масле рапса методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.2691—10.....................................................163

3

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств тетраконазола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом газожидкостной хроматографии

МУК 4.1.2682—10

ББК 51.21 060

060 Определение остаточных количеств тстраконазола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом газожидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2010.—14 с.

1.    Разработаны сотрудниками ГНУ Всероссийскою НИИ защиты растений. Санкт-Петербург (В. И. Должен ко. И. Л. Цибульская. Т. Ф. Блинова. Л. М. Карпова. Н. В. Лутовкина).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы но надзору в сфере защиты нрав потребителей и благополучия человека (протокол от 10.06.2010 г. № 1).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г. Г. Онищенко 2 августа 2010 г.

4.    Введены в действие с 1 окгября 2010 г.

5.    Введены впервые.

МУК 4.1.2682—10

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в с(|>срс защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

02 августа 2010 г.

Дата введения: 1 октября 2010 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств тетраконазола в ботве и корнеплодах сахарной свеклы методом газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2682—10

Настоящие методические указания устанавливают метод газожидкостной хроматографии для определения в корнеплодах сахарной свеклы массовой концентрации тетраконазола в диапазоне концентраций

0.025—0.25 мг/кг, в ботве свеклы - 0.05—0.5 мг/кг.

Название действующего вещества по ICO: Тетраконазол.

Название по IUPAC: (ЯБ)-2-(2.4-дихлорфенил)-3-{ 1 Н-1.2.4-триазол-1 -ил) пропил-1.1.2.2-тстрафторэтиловый эфир.

Структу рная формула:

=х ch₂ocf₂chf₂

сн—сн_2%

N

Мол. масса: 372.1 Брутто формула: С13Н nCbF., N₃0 Химически чистый тетраконазол представляет собой бесцветную вязкую жидкость, разлагается при 240 °С до кипения, давление паров 0.18 мРа. показатель преломления 1.432 (20 °С).

89

Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода К^. lgP = 3/56 (20 °С).

Растворимость: в воде 156 мг/л (pH 7, 20 °С): хорошо растворим в 1.2-дихлорэтане, ацетоне, метаноле.

Стабилен в разбавленных водных растворах с pH 5—9.

ЛД$оДЛя крыс 1248 мг/кг. Класс токсичности по ВОЗ - II.

Область применения: фунгицид широкого спектра действия, применяется для борьбы против септориоза. разного вида ржавчины, пирс-носпороза, мучнистой росы, окаймленной пятнистости листьев в виде 12.5 % водной эмульсии.

Гигиенические нормативы для тетраконазола в сахарной свекле нс установлены.

1. Метрологическая характеристика метода

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и се составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0.95 нс превышает значений, приведенных в таблице 1. для соответствующих диапазонов концентраций.

Метрологическая характеристика метода представлена в табл. 1 и 2.

Таблица 1

Объект анализа	Диапазон определяемых кон-nei г граций, мг/кг	Показатель точности (граница относительной погрешностях ± 6, %	Стандартное отклонение повторяемости, ог, %	Предел повторяемости. г. %	Предел воспроизводимости. R, %
корнеплоды	0,025—0.1	50	5,4	15,1	16,6
корнеплоды	0,1—0,25	25	4,8	13,4	14,8
ботва	0,05—0,1	50	5,3	14,8	16,3
бота	0,1—0,5	25	5,2	14,6	16,0

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для полного диапазона концентраций (п = 20) приведены в таблице 2.

МУК 4.1.2682—10

Таблица 2 Полнота извлечении тел раконазола, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для п = 20, Р = 0,95

Анализируе-мый объект Предел обнару жения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Среднее значение определения. % Стандартное отклонение, S,% Доверительным интервал среднего результата, ±,% корнеплоды свеклы 0,025 0,025—0,25 82,4 4,8 4,4 бота свеклы 0,05 0,05—0,5 81,5 5,2 4,7

2. Метод измерения

Методика основана на определении тстраконаюла методом газожидкостной хроматографии с использованием электронозахватного детектора (ДЭЗ или ДПР) после его извлечения из образцов органическим растворителем, очистке путем перераспределения между двумя жидкими фазами и при необходимости на патронах с Силикагелем 60. Идентификация тстраконаюла проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.

Избирательность метода обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства и змерения

Весы аналитические ВЛА-200. или аналогичные

Весы технические ВЛКТ-500 Газовый хроматограф Цвет-550 М или аналогичный с детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР или ДЭЗ) и стеклянной насадочной колонкой, длиной 1 или 2 м; внутренним диаметром 3 мм или хроматограф «Кристалл 2000М» с ДЭЗ.

Колбы мерные на 25. 50. 100 см³ Мнкрошприц МШ-10. МШ- ЮМ Пипетки градуированные Цилиндры мерные на 50 и 100 см³

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

91

МУК 4.1.2682—10

3.2. Реактивы

ТУ 6-09-3513—82 ГОСТ 6709-72 ТУ 6-09-3375-78 ТУ 6-09-3716—80

Насадка для аналитической колонки:

5 % ХЕ-60 на хроматонс N-Supcr (0.16—0.20 мм), ими.

Натрий сернокислый безводный, чда.

с веже про кале н н ы й    ГОСТ 4166-76

Натрий хлористый, хч    ГОСТ    4233—77

Силикагель для колоночной хроматографии 60 (0.040—0.063 mm) (Merck. Германия)

Тетраконазол с содержанием основного компонента 99.38 %

Элюент№ 1- гсксан:ацстон (80 : 20 по объему)

Элюент № 2 - гексан:ацстон (60 : 40 по объему)

Допускается использование реактивов квалификацией не ниже указанных.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы Ванна ультразвуковая УЗВ/100 ТН

Воронки лабораторные В-75-110    ГОСТ 25 336—82

Воронки делительные В Д-3-500    ГОСТ 8613-75

Насос водоструйный    ГОСТ 10696-75

Капиллярная кварцевая колонка длиной 30 м. внутренним диаметром 0.32 мм с неподвижной фазой НР-35. толщина слоя 0.25 мкм Колбы плоскодонные на шлифах КШ500 29/32 ТС Колбы круглодонные на шлифах КШ50 29-32 ТС

Концентрирующие патроны, заполненные силикагелем 60 (0.040—0.063 mm). Merck Насос водоструйный Пробирки с притертыми пробками на

10. 20 см³

Ротационный вакуумный испаритель Biichi R-200/205 (Швейцария)

Фильтры бумажные «красная лента»

МУК 4.1.2682—10

Допускается использование другого вспомогательного оборудования с техническими характеристиками нс ниже указанных.

4. Требования безопасности

4.1.    При проведении работы необходимо соблюдать требования техники безопасности, установленные хзя работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами (ГОСТ 12.1.005, ГОСТ 12.1.007). Организация обучения работников безопасности труда по ГОСТ 12.0.004.

При выполнении измерений с использованием газового хроматографа и работе с электроустановками соблюдать правила элсктробсз-опасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкциями по эксплуатации приборов.

4.2.    Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточновытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожароту шения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313—03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны».

5. Требования к квалификации операторов

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом газожидкостной хроматографии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматографа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 14.

6. Условия измерений

При выполнении измерений выполняют следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха 20 ± 5 °С и относительной влажности нс более 80 %:

•    выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

93