Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование Российской Федерации

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ СЫРЬЕ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Сборник методических указаний МУК 4.1.2062—4.1.2074—06

Издание официальное

Москва, 2009

ББК 51.21 037

037 Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник методических указаний.—М: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009 —147с.

L Сборник подготовлен Федеральным научным центром гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана (академик РЛМИ, проф. В. Н. РакитскиЙ, проф. Т. В. Юдина); при участии специалистов Федеральной службы по надзору п сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Разрабо тчики методов указаны в каждом из них.

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

3.    Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМИ Г. Г. Онищенко.

4.    Введены впервые.

ББК 51.21

Формат 60x88/16    Печ.    л.    9,25

Тираж 100 экз.

Тиражировано отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, телефакс 952-50-89

ГОСТ Р 51592-2000 «Вода. Общие требования к отбору проб», ГОСТ Р 51593-2000 «Вода питьевая. Отбор проб».

Пробы почвы и яблок хранят в холодильнике в полиэтиленовых пакетах при температуре 0-4 °С в течение суток. Для длительного хранения пробы почвы и яблок замораживают и хранятся в морозильной камере при температуре -18°С. Пробы воды хранят в холодильнике в стеклянной таре при температуре 0-4 °С в течение не более 10 суток.

9. ВЫПОЛНЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЙ.

9.1.1.    Вода.

100 см³ анализируемой .воды (pH воды доводят до 7,0 щелочью) помещают в делительную воронку объемом 250 см³ и экстрагируют гексаном дважды по 30 см³, встряхивая воронку в течение 5 мин каждый раз. Для лучшего расслаивания водной фазы и растворителя в воронку пипеткой вносят 1 см 3 96 %-ного этилового спирта. Экстракты объединяют, пропускают через слой безводного сульфата натрия и выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 45° С досуха.

Сухой остаток растворяют в 5 см³ и-гексана. В хроматограф вводят аликвотную часть раствора (5 мм³).

9.1.2.    Почва.

Навеску сухой почвы в количестве 10 г, помещают в коническую колбу, добавляют 10 см³ дистиллированной воды и производят экстракцию пестицида дважды 30 см³ ацетона в течение 30 мин. каждый раз на аппарате для встряхивания. Экстракты объединяют, центрифугируют и фильтруют через фильтр (красная лента). Объединенный экстракт упаривают до водного остатка при температуре 30 °С.

Водный остаток переносят в делительную воронку, концентратор последовательно ополаскивают 5 см³ ацетона и 100 см³ воды и помещают в ту же делительную воронку. Пестицид экстрагируют гексаном по 20 см³ три раза. Объединенный экстракт пропускают через безводный сульфат натрия и выпаривают при температуре не выше 45° С. Сухой остаток растворяют в 5 см³ н-гексане. В хроматограф вводят 5 мм³.

9.1.3.    Яблоки.

10 г измельченных яблок помещают в коническую колбу, добавляют 30 см³ ацетонитрила и встряхивают в течение 30 мин. Экстракцию повторяют еще дважды, в тех же условиях. Экстракт объединяют в делительной воронке, фильтруя через бумажный фильтр “красная

//

лента”. Затем добавляют в воронку 50 см³ дистиллированной воды и 5 г хлорида натрия. Встряхивают в течение 3 мин, после разделения нижний водный слой отбрасывают. Ацетонитрил собирают в концентратор, пропуская через безводный сульфат натрия и упаривают при температуре не выше 45° С.

Концентратор последовательно ополасхивают 5 см³ ацетонитрила и 100 см³ воды, которые объединяют в делительной воронке. Экстрагируют Пиридабен гексаном порциями по 20 см³, три раза. Гексановый экстракт объединяют в концентраторе, пропуская через безводный сернокислый натрий. Выпаривают гексановый экстракт при температуре не выше 45° С досуха. Сухой остаток растворяют в 5 см³ н-гексане. В хроматограф вводят 5 мм³.

9.2. Условия хроматографирования.

Хроматограф "Цвет-560" с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов с пределом детектирования по Лшздану не выше 4-10" 14 г/см³.

Носитель Хроматон-супср, размер частиц 0,16 - 0,20 мм, неподвижная фаза 5% OV-17. Колонка стеклянная, спиральная, длина 2 м, внутренний диаметр 3 мм.

Температура: термостата колонки - 260°С

термостата детектора - 340°С термостата испарителя - 300°С Скорость газа-носителя - азота (через колонку) - 40 см³/мин Объем, вводимый в испаритель - 5 мм³ Линейность детектирования - 0,5-5,0 нг Время удерживания - 3 мин. 40 сек.

Рабочая шкала электрометра - 32 х Ю¹⁰А Скорость движения ленты самописца - 5 мм/мин.

Каждую анализируемую пробу вводят в хроматограф 3 раза и вычисляют среднюю высоту пика.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией Пирида-бена 1,0 мкг/см³, разбавляют.

Количественное определение Пиридабена проводят по методу абсолютной калибровки посредством сравнения с хроматограммами стандартных растворов Пиридабена с концентрацией 0,05 -1,0 мкг/см³.

Альтернативная фаза:

а

Носитель Хроматон-N-AW, размер частиц 0,16 - 0,20 мм, неподвижная фаза 5% SE-30. Колонка стеклянная, спиральная, длина 1 м, внутренний диаметр 3,5 мм.

Температура: термостата колонки - 220°С

термостата детектора - 260°С термостата испарителя - 240°С Скорость газа-носителя - азота (через колонку) - 60 см^э/мин Объем, вводимый в испаритель - 5 мм*

Время удерживания - 5 мин.

Скорость движения ленты самописца - 240 мм/час.

10.,ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ.

Содержание Пиридабеиа в пробах воды, почвы и яблоках рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

Hi*A*V

Х=--Р

Н₀‘ т-100

X - содержание Пиридабена в пробе, мг/кг;

Hi - высота пика образца, мм;

Hq - высота пика стандарта, мм;

А - концентрация стандартного раствора, мкг/см^э;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования (см³);

m - масса или объем анализируемого образца, г или см³.

Р - содержание Пиридабена в аналитическом стандарте, %.

11. КОНТРОЛЬ ПОГРЕШНОСТИ ИЗМЕРЕНИЙ.

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-6. 2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

/з

12. РАЗРАБОТЧИКИ.

Калинин В.А., профессор, канд. с-х. наук., Довгилевич Б.В., ст.н.сотр., канд. биол.наук, Калинина Т.С., ст.н. сотр., канд. с-х. наук, Довгилевич А.В., ст.н.сотр., канд.хим.наук, Устименко Н.В., ст.н.сотр., канд. биол. наук.

Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К.А. Тимирязева. Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов». 127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1. Телефон: (095) 976-37-68, факс: (095) 976- 43-26.

ft

Содержание

1.    Методические указания по определению остаточных количеств пиридабена в воде,

почве и яблоках методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2062-06.......... 4

2.    Методические указания по определению остаточных количеств триасульфурона в зерне хлебных злаков методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2063-06.............................................................................................15

3.    Методические указания по определению остаточных количеств хизалофоп-п-этила

в зерне гороха, семенах и масле подсолнечника по основному метаболиту хизалофоп-п кислоте методом капиллярной газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2064-06..........22

4.    Методические указания по определению остаточных количеств Калиевой соли

сульфометурон-метала по сульфометурон-метилу в воде и почве методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2065-06..................................................33

5.    Методические указания по определению остаточных количеств тебуконазола в семенах, масле и зеленой массе рапса методом газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2067-06.............................................................................................45

6.    Методические указания по определению остаточных количеств клетодима и его

основных метаболитов клетодим сульфоиа и клетодим сульфоксида в масле сои методом газожидкостной хроматографии, МУК 4.1.2066-06......................................52

7.    Методические указания по определению остаточных количеств Пендиметалина в зерне зерновых колосовых культур, риса, кукурузы, растительных маслах, зеленой массе кукурузы, рисовой соломке методом газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2068-06............................................................................................63

8.    Методические указания по определению остаточных количеств дитианоиа в

винограде, виноградном соке, персиках методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2069-06........................................................................77

9.    Методические указания по определению остаточных количеств Диквата в клубнях картофеля методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

МУК 4.1.2070-06.............................................................................................88

10.    Методические указания по определению остаточных количеств Трифорина

в яблоках, винограде, яблочном и виноградном соках методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2071-06........................................ 99

11.    Методические указания по определению остаточных количеств бифентрина в

воде, огурцах, томатах и бифентрина и малатиона в зерне пшеницы и риса методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2072-06.................................................109

12.    Методические указания по измерению концентраций дикамбы в атмосферном воздухе населенных мест методом газожидкостной хроматографии. МУК 4.1.2073-06...125

13.    Методические указания по измерению концентраций Бромадиолона в воздухе

рабочей зоны и атмосферном воздухе населенных мест методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. МУК 4.1.2074-06.....................................................136

3

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав погреб!    ~    еловека,

Г. Онищенко

« Ь » мая 200бгГ    /

МУКЪ.Тоа-сь

Дата введения: с I %осч .

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПИРЙДАБЕНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ И ЯБЛОКАХ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Настоящие методические указания устанавливают метод газожидкостной хроматографии для определения в воде, почве и яблоках Пиридабена.

Фирма производитель: Ниссан Кемикал Индастрис Лмд. (Япония).

Торговое название: Санмайт,

Название действующего вещества по ИСО: Пиридабен.

Название действующего вещества по ИЮПАК: 2-трат-бутил-5-(4-щ/?т-бутилбензилтио)-4-хлорпиридазин-3(2#)-он.

Структурная формула:

Эмпирическая формула: C|₉H2jC1N₂OS.

Молекулярная масса: 364,9.

Химически чистое соединение представляет собой белое, кристаллическое вещество. Давление насыщенного пара 0,25 мПа при 20°С.

Температура плавления; 111-112°С.

Коэффициент перераспределения октанол/вода: Kow IogP ^e 6,37.

Растворимость: в воде - 0,012 мг/дм^{1 2 3}; в ацетоне - 460, этаноле - 57, бензоле- ПО, ксилоле -390, циклогексане - 320 г/дм³.

Пиридабен - гидролитически стойкое вещество с сохранностью в водной среде при комнатной температуре и pH 5,0; 7,0; 9,0 - 30 дней. Разрушается под действием УФ-облучения. Период полураспада в почве 21 день, в воде 10 дней.

Краткая токсикологическая характеристика: Пиридабен относится к умеренно опасным веществам по пероральной (ЛДзо крысы - 820-1350 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД50 кролики - 2000 мг/кг) и опасным по ингаляционной токсичности (ЛД50 крысы -620 мг/м³). Побочные отрицательные эффекты не обнаружены.

В России установлены следующие гигиенические нормативы ДСД для человека - 0,008 мг/кг/сут.

ПДК в воде водоема    -    0,1    мг/дм³

ОДК в почве    -    0,3    мг/кг

МДУ (мг/кг) в яблоках    -    0,2    мг/кг

Область применения препарата.

Пиридабен - инсектицид и акарицид контактного действия из группы пиридазино-нов с длительным защитным эффектом. Эффективно подавляет развитое клещей, тлей, бело-крылок и цикадок. Проходит перерегистрацию в России и странах СНГ под торговым названием Санмайт (20% с.п.) для применения в яблоневых садах против клещей с нормой расхода препарата от 0,5 до 0,9 кг/га и сроком ожидания 30 дней до уборки(1 обработка за сезон).

Стандартное отклонение: 1,97 %

Доверительный интервал среднего результата: + 2,0 % Яблоки.

Предел обнаружения: 0,05 мг/кг

Диапазон определяемых концентраций: 0,05- 0,50 мг/кг

Среднее значение извлечения: 82,5 %

Стандартное отклонение: 1,95 %

Доверительный интервал среднего результата: + 2,0 %

Таблица

Полнота извлечения Пиридабена из почвы и яблок. (б повторностей для каждой концентрации, Р = 0,95)

| Анализируе-1 мый объект Добавлено мг/кг Обнаружено мг/кг Доверительный интервал, + полнота определения, % почва 0,05 0,042 0,004 84,4 0,10 0,084 0,003 83,9 0,25 0,197 0,012 78,9 0,50 0,41 0,01 82,0 | яблоки 0,05 0,041 0,003 81,6 0,10 0,082 0,006 81,8 0,25 0,208 0,013 ш _ 0,50 0,42 0,02 87,1 I

2. МЕТОД ИЗМЕРЕНИЙ.

Метод основан на определении Пиридабена методом газожидкостной хроматографии с использованием детектора постоянной скорости рекомбинации ионов после его экстракции из объектов анализа органическим растворителем и очистки экстракта путем перераспределения между двумя несмепшвающимися растворителями.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

6

6 предлагаемых условиях анализа метод специфичен и может применяться для определения остатков Пиридабена в воде, почве и яблоках в присутствии других пестицидов.

3. СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, ВСПОМОГАТЕЛЬНЫЕ УСТРОЙСТВА, РЕАКТИВЫ И МАТЕРИАЛЫ.

3.1.    Средства измерений

Газовый хроматограф с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов ⁶³Ni "Цвет-560" с пределом детектирования по Лин дану не выше 4*10;¹⁴ г/см\ши другой аналогичного типа.

Весы аналитические ВЛА-200, ГОСТ 24104-2001 Весы лабораторные технические В ЛТК-500 ГОСТ 7328;

Колбы мерные вместимостью 10,50 и 100 см³, ГОСТ 1770-74;

Микрошприц вместимостью 10 мм³, Гамильтон;

Пипетки мерные вместимостью 1,2, 5 и 10 см³, ГОСТ 20292-74.

Цилиндры мерные на 50 и 100 см³, ГОСТ 1770-74

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2.    Реактивы

Пиридабек, аналитический стандарт, 98 °/о, фирма Ниссан Кемекал Индастрис Лмд.

Ацетон, о.с.ч., ТУ 6-09-3513-86.

Ацетонитрил, ТУ 6-09-3534-87.

Вода дистиллированная, ГОСТ 7602-72,

Газ-носитель - азот особой чистоты, ГОСТ 9293-74. н-Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.

Калия иодид, х.ч., ГОСТ 4232-74.

Калий марганцовокислый, х.ч., ГОСТ 20490-75.

Кислота уксусная, ледяная, х.ч., ГОСТ 18270-72.

Кислота хлороводородная (соляная), х.ч., ГОСТ 3118-77.

Натрий сернокислый, безводный, х.ч., ГОСТ 4166-76.

Натрий хлористый, х.ч., ГОСТ 4233-77.

Натрия гидроксид, хч, ГОСТ 11078-78,

г

Неподвижные фазы для ГЖХ:

SE-30,5% на Хроматоне N-AW (0,16-0,20 мм)

OV-17,5 % на Хроматоне-супер(0,16-0,20 мм).

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

3.3. Вспомогательные устройства, материалы Аппарат для встряхивания проб АВУ-1, ТУ 64-1-1081-73;

Банки с крышками для экстракции на 250 см³, полипропилен, кат.№3120-0250, NALGENE. Воронки химические для фильтрования, стеклянные, ГОСТ 8613-75;

Баня водяная, ТУ 46-22-603-75.

Бумага универсальная, индикаторная, ТУ 6-09-1181-71.

Вата стеклянная для хроматографии.

Воронки делительные на 250 и 500 см³, ГОСТ 10054-75.

Воронки для фильтрования, стеклянные, ГОСТ 8613-75.

Испаритель ротационный, вакуумный, ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Колбы конические плоскодонные на 100 и 250 см³, КПШ-100, КПШ-250, ГОСТ 10394-72. Колонки газохроматографические, стеклянные дл. 1 и 2 м, диаметр 3-4 мм.

Колонки хроматографические, стеклянпые, дл. 250 мм, диаметр 15 мм.

Концентраторы грушевидные (конические) НШ29 КПМ 00-14/19, ТС, ГОСТ 10394-72.

Насос водоструйный, ГОСТ 10696-75.

Стаканы химические, стеклянные на 100 см³, ГОСТ 6236-72.

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4, ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ.

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно-

z

допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда по ГОСТ 12.0.004.

5. ТРЕБОВАНИЯ К КВАЛИФИКАЦИИ ОПЕРАТОРОВ.

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

б. УСЛОВИЯ ИЗМЕРЕНИЙ.

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

-процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20±5)°С и относительной влажности не более 80%.

-выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. ПОДГОТОВКА К ОПРЕДЕЛЕНИЮ.

7.1.    Подготовка органических растворителей

7.1.1.    Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил очищают путем перегонки.

7.1.2.    Очистка гексана

Гексан встряхивают с концентрированной серной кислотой, промывают бледно-розовым раствором перманганата калия до тех пор, пока раствор не перестанет обесцвечиваться, затем промывают водой, сушат над безводным хлористым кальцием и перегоняют (А.Гордон, Р.Форд Спутник химика, Москва, 1976 г., с.441).

7.2.    Подготовка и кондиционирование колонок.

Готовую насадку OV-17, 5% на Хроматоне-супер (0,16-0,20 мм) или SE-30, 5% на Хроматоне N-AW-DMCS (0,25-0,32 мм) или (0,16-0,20 мм) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом в соответствии с правилами. Колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 280° С 8-10 часов.

s

73 Приготовление рабочих растворов.

733. Приготовление 1Мраствора гидроокиси натрия

20 г гидроксида натрия переносят в мерную колбу на 500 см³, добавляют 200-300 см³ дистиллированной воды, перемешивают до полного растворения и доводят водой объем в колбе до метки.

7.4.    Приготовление стандартных растворов.

Взвешивают 50 мг Пиридабена в мерной колбе на 50 см³, растворяют навеску в н-гексане и доводят объем до метки гексаном (стандартный раствор № 1, концентрация 1 мг/см³).

Стандартный раствор № 1 можно хранить в холодильнике в течение 3 месяцев.

Методом последовательного разбавления из раствора № 1 готовят стандартные растворы Пиридабена в н-гексане с концентрацией 0,05; 0,1; 0,25, 0,5, 1,0 мкг/см³ для построения калибровочного графика и количественной оценки проб, которые могут храниться в холодильнике не более 1 месяца.

7.5.    Установление градуировочной характеристики.

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади (высоты) пика от концентрации Пиридабена в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки с концентрацией 0,05; 0,1; 0,25, 0,5, 1,0 мкг/см³.

Для построения калибровочного графика в испаритель хроматографа вводят по 5 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.2. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений.

Измеряют высоту пиков, рассчитывают среднее значение высоты пика для каждой концентрации и строят график зависимости высоты пика от концентрации Пиридабена (мкг/ см³).

8. ОТБОР ПРОБ И ХРАНЕНИЕ.

Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», N® 2051-79 от 21.08.79 г.

/О

1

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА.

Вода.

Предел обнаружения: 0,01 мг/дм³

Диапазон определяемых концентраций: 0,01- 0,50 мг/дм³

Среднее значение извлечения: 92,2 %

Стандартное отклонение: 3,32 %

Доверительный интервал среднего результата: ± 6,95 %

Почва.

2

Предел обнаружения: 0,05 мг/кг

Диапазон определяемых концентраций: 0,05- 0,50 мг/кг

3

Среднее значение извлечения: 82,2 %