Ьромуконазол является смесью двух диастереоизомеров (соотношение изомеров 54/46) и пред-ставляет собой белый порошок без запаха.

Температура плавления: бромуконазол - 84°С, изомер № 1 (LS 850646) - 91°С, изомер № 2 (LS 850647)- 101 °С.

Давление насыщенного пара - 0,04x10'⁵ мПа при 25°С.

Коэффициент перераспределения октанол/вода:    logP=    3,24    (20    °С).

Растворимость при 20°С в мг/л: изомер № 1 (LS 850646)		изомер № 2 (LS 850647)	бромуконазол
вода	72	24	50
циклогексан	8	9	16
толуол	680	210	180
ксилол	460	190	380
этанол	217	89	178
циклогексанон	1460	660	1320
ацетофенон	1270	440	880

Вещество стабильно при хранении в течение года при температуре 15-25 °С, устойчиво в водной среде при любом pH в отсутствие света. Солнечная радиация стимулирует разрушение Бромуконазола в воле в кислой среде с ДТ_<;о= 18 дней.

В почве он хорошо передвигается по профилю и срсднсстоск с периодом полураспада (ДТ50 ) 4 - 12 недель.

Краткая токсикологическая характеристика: Ьромуконазол относится к вещесгвам опасным по острой пероральной (ЛД^₀ крысы -365 мг/кг), малоопасным по дермальной (ЛДзд кролики - более 2000 мг/кг) и умеренно опасным по ингаляционной токсичности (ЛД50 крысы - 4 часа - более 5000 мг/л). Побочные отрицательные эффекты не обнаружены.

В России установлены следующие гигиенические нормативы:

ДСД - 0,01 мг/кг массы человека;

ОДК в почве - 0,1 мг/кг;

ПДК в воде водоемов - 0,002 мг/дм³;

ОБУВ в воздухе рабочей зоны при применении -0,1 мг/м³;

ОБУВ в воздухе атмосферы при применении - 0,005 мг/м³;

МДУ в продукции (мг/кг): зерно хлебных злаков, яблоки, груши, виноград -0,04; черная смородина - 0,08 (ВМДУ).

2И

Область применения препарата: Бромуконазол - системный фунгицид защитного и лечебного действия из группы триазолов, ингибирующих синтез стеринов. Он эффективно подавляет развитие целого ряда патогенных грибов, включая аскомицеты, базидиомицсты и несовершенные грибы.

Зарегистрирован в России в качестве фунгицида под фирменными названиями:

Вектра, СК, 100 г/л, - против парши и мучнистой росы яблони, оидиума винограда, сеп-ториоза, антракноза, американской мучнистой росы смородины с нормой расхода 0,2 - 0,3 л/га, до 4-х обработок за сезон;

Гранит, к.с., 200 г/л., - против мучнистой росы, ржавчины, септориоза, фузариоза колоса зерновых культурах (пшеница яровая, озимая, ячмень яровой, рожь) с нормой расхода 1 л/га. До 2-х обработок за сезон.

2. Методика определения Бромукоиазола в воде, почве, зерне и зеленой массе зерновых колосовых культур, ягодах черной смородины и винограда методом газожидкостной

хроматографии

2.1.    Основные положения

2.1.1.    Принцип метода

Методика основана на определении Бромукоиазола с помощью газожидкостной хроматографии (капиллярные и набивные колонки) с детектором электронного захвата после экстракции органическим растворителем и очистки экстракта перераспределением в хлороформ. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

2.1.2.    Избирательность метода.

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых при интенсивной технологии выращивания сахарной свеклы. Избирательность метода в значительной степени увеличивается при использовании капиллярной колонки с программированием температуры термостаза колонок.

2.1.3.    Метрологаческая характеристика метода.

Метрологические характеристики метода приведены в таблицах 1 - 2.

2W

Таблица 1.

Метрологическая характеристика метода.

Метрологические параметры, р=0,95, п=20 Анализируемый объект Предел обнаружения, мг/кг (л) Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Среднее значение определения, % Стандартное отклонение S, % Доверительный интервал среднего результата, % ИЗОМЕР № 1 (LS 850646) вода 0,001 0,001-0,1 107,2 3,4 4,2 почва 0,02 0,02-0,2 79,7 4,1 5,1 зерно 0,04 0,04-0,4 83,6 4,4 5,5 зеленая масса растений 0,04 0,04-0,4 79,8 5,2 6,4 ягоды черной смородины 0,04 0,04-0,4 82,2 2,8 2,36 ягоды винограда 0,04 0,04-0,4 85,4 2,7 2,64 ИЗОМЕР № 2 (LS 850647) вода 0,001 0,001-0,1 103,7 3,4 4,8 почва 0,02 0,02-0,2 78,5 4,2 5,6 зерно 0,04 0,04-0,4 76,4 4,8 5,9 зеленая масса растений 0,04 0,04-0,4 72,1 5,1 6,7 ягоды черной смородины 0,04 0.04-0,4 83,4 2,4 2,56 ягоды винограда 0,04 0,04-0,4 85,1 2,8 2,81

Таблица 2.

Полнота определения Бромуконазола в воде, почве, зерне и растениях

Среда	Добавлено Бромуконазола, мг/кг	Обнаружено, мг/кг	Полнота определения, %
1	2	3	4
ИЗОМЕР N 1 (LS 850646)
вода	0,01	0,0106 ± 0,0006	106,2
	0,02	0,0214 ±0,0014	107,4
	0,05	0,0540 ± 0,0040	108,1
почва	0,02	0,0155 ± 0,0044	77,6
	0,04	0,031510,0083	78,8
	0,08	0,0655 ± 0,0145	81,9
	0,20	0,161010,0390	80,5

Продолжение таблицы 2.

1 2 3 4 зерно 0,04 0,031610,0082 79,0 0,08 0,0660 ± 0,0094 82,6 0,16 0,139510,0205 87,2 0,40 0,342410,0574 85,6 растения 0,04 0,031210,0086 79,0 0,08 0,064010,0160 82,6 0,16 0,130010,0290 87.2 0,40 0,320810,0790 85,6 ИЗОМЕР N 2 (LS 850647) вода 0,01 0,0101 10,0001 101,1 0,02 0,0209 ± 0,0009 104,5 0,05 0,0527 ± 0,0027 105,5 почва 0,02 0,0153 10,0046 76,5 0,04 0,031710,0083 79,3 0,08 0.0651 10,0149 81,4 0,20 0,153810,0460 76,9 зерно 0,04 0,0295 10,0103 73,8 0,08 0.0602 10,0197 75,3 0,16 0,1280 1 0,0320 80,0 0,40 0,3072 10,0927 76,8 растения 0,04 0,028410,0114 71,0 0,08 0,057610,0223 72,0 0,16 0,1171 10,0428 73,2 0,40 0,2888 10,1110 72,2

2.2. Реактивы, материалы, приборы, оборудование.

2.2.1. Реактивы и материалы.

Азот газообразный особой чистоты. ГОСТ 9293-74 Ацетон ч.д.а., ГОСТ 2603-79 Ацетонитрил, ч.,ТУ 6-09-3534-87.

Ьромуконазол, стандартный раствор в ацетоне с содержанием д.в. 100 мкг/мл (раствор № 1) и 10 мкг/мл (раствор № 2).

Вода дистиллированная, ГОСТ 7602-72.

Кислота хлороводородная (соляная), концентрированная, х.ч., ГОСТ 3118-77.

Кислота соляная, 0,1 н р-р

Насадка для хроматографической колонки: Хроматон - N-cynep с 5% OV-17 (0,16-0,20), Хема-пол ЧССР и Хроматон - N-cynep с 3% ХЕ-60 (0,125-0,160), Хемалол ЧССР Натрия гидроокись, х.ч. ГОСТ 4328-77,

Натрия гидроокись, 4 н р-р

гм

Сульфат натрия безводный, ГОСТ 4166-76 Хлороформ х.ч. ТУ-6-09-4263-76

2.2.2. Приборы, аппаратура, посуда

Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ-64-1-1091-73

Весы аналитические по ТУ 64-1-1065

Воронки делительные на 250, 500 мл, ГОСТ 25336-82

Воронки химические, ГОСТ 25336-82

Колбы грушевидные на 50 мл, ГОСТ 25336-82

Колбы круглодонные на 500 мл, ГОСТ 25336-82

Колбы мерные на 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74

Колбы плоскодонные конические на 100,250, 500 мл, ГОСТ 25336-82

Мельница для размола образцов, ТУ-46-22-23-79

Микрошприц МШ-10А но ТУ 64-1-2850

Пипетки мерные на 0,1; 1,0 мл, Г ОСТ 20292-74

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ-25-11-917-74

Сито металлическое с диаметром отверстий 1-2 мм

Универсальная индикаторная бумага

Фильтры бумажные "синяя лента”, ТУ-6-09-1678-77

Хроматсираф "ЦВЕТ-106", с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов или "Цвет 550" Хроматографическая коленка стеклянная, спиральная 1500 х 3 мм, содержащая 5% OV-17 на хроматоне-N-супер (0,16-0,20) или 3% ХЕ-60 на хроматонс N-cyiiep (0,125-0,160);

Хроматограф "Кристалл 2000м" с детектором по захвату электронов

Хроматографическая колонка капиллярная кварцевая HP - 5 (Crosslinked 5% PII ME Siloxane), длина 15 м, внутренний Д1амстр 0,32 мм, толщина пленки 0,25 мкм.

Цилиндры мерные на 30, 100, 250 мл ГОСТ 1770-74

2.4. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения .микроколичеств пестицидов" (N 2051-79 от 21.08.79).

Отобранные пробы хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике при температуре не выше +4°С.

Пробы почвы подсушивают при комнатной темпера!уре в отсутствии прямого солнечно-

2Я>

го света. Растительные образцы для длительного хранения замораживаются и хранятся в холодильнике при -18°С, предварительно определяется содержание влаги. Образцы ягод замораживают и хранят в холодильнике при -18°С нс более 1 месяца.

Перед анализом я юлы черной смородины и винограда гомогенизируют (растирают в ступке). Образцы воды фильтруют.

2.5. Проведение определения

2.5.1. Вода. 500 мл воды помещают в делительную воронку объемом 500 мл и экстрагируют Бромуконазол хлороформом трижды по 150 мл. Объединенный экстракт осушают, пропуская через слой натрия сернокислого безводного и упаривают на ротационном испарителе при температуре не выше 40*С. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона и вводят в хроматограф 1 мкл.

2.5.2. Почва. Навеску почвы 50 г, предварительно просеянной через сито, помещают в колбу объемом 250 мл, увлажняют 10-15 мл воды, заливают 100 мл водно-ацетоновой смеси (1:7) и вегрмхиваюг в течение 30 минут. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр в коническую колбу на 500 мл. Экстракцию повторяют еще дважды. Экстракты объединяют, упаривают на испарителе при t=40*C, до водной фазы. Водную фазу количественно переносят в делительную воронку, пропуская через бумажный фильтр, и Бромуконазол экстрагируют трижды по 30 мл хлороформом, встряхивая делительную воронку в течение 1 минуты. Водную фазу отбрасывают. Объединенный хлороформный экстракт фильтруют, пропуская через безводный сернокислый натрий, упаривают экстракт на ротационном испарителе досуха при t=40 С. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона и хроматографируют. При необходимости экстракт очищают как указано для зерна и растений в разделе 2.5.3.

2.5.3. Зерно, растения. Навеску зерна 25 г, измельченную на элекгромельнице, а также навеску растений 25 г, измельченную ножницами, помещают в коническую колбу на 500 мл, заливают 100 мл ацетона и встряхивают на встряхивателс в течение 30 минут. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр в коническую колбу на 500 мл. Экстракцию повторяют еще дважды. Экстракты объединяют, объединенный экстракт упаривают досуха при Г=40°С. Остаток в колбе смывают 3 раза по 20 мл 0,1 н раствором соляной кислоты и количесгвенно переносят в делительную воронку, пропуская раствор через бумажный фильтр. Подщелачивают раствор 4 п раствором гидроокиси натрия до pH среды 8-9. по индикаторной бумше. Из щелочной среды Бромуконазол экстрагируют 3 раза хлороформом по 30 мл, встряхивая делительную воронку в течение 1 минуты. Водную фазу отбрасывают. Объединенный хлороформный экстракт фильтруют, пропуская через безводный сернокислый натрий, упаривают экстракт на ротационном испарителе досуха при t=40 С.

2Я

Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона и хроматографируют.

2.5.4. Ягоды мерной смородины и винограла

Навеску ягод 25 г, измельченную в ступке, помещают в коническую колбу на 500 мл, заливают 50 мл ацетонитрила и встряхивают на встряхивайте в течение 30 минут. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр в коническую колбу на 500 мл. Экстракцию повторяют еще трижды. Экстракты объединяют, объединенный экстракт упаривают досуха при t=40°C. Остаток в колбе разводят в 50 мл 0,1 н раствором соляной кислоты, подщелачивают 4 и раствором гидроокиси нафия до pH среды 8. Из щелочной среды Бромуконазол переэкстрагируют 3 раза хлороформом по 25 м встряхивая делительную воронку в течение 1 минуты. Водную фазу отбрасывают. Объединенный хлороформный экстракт фильтруют, упаривают экстракт на ротационном испарителе досуха при t^40°C.

Сухой остаток растворяют в 10 мл ацетона и хроматографируют.

2.6. Условия хроматографирования и обработка результатов.

2.6.1. Условия хро.мато1рафирования

2.6.1.1. Почва, зерно и зеленая масса зерновых колосовых культур Хро.чато1-раф газовый с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов ⁶³Ni “Цвет - 106” с пределом детектирования по Линдану не выше 4 10'¹⁴ или другой аналогичного типа.

Неподвижная фаза -5% OV-17 на Хроматоне-N-cyiiep (0,16-0,20).

Колонка стеклянная, спиральная, 1500 х 3 мм Температура: термостата колонки - 250°С

термостата испарителя - 280°С термостата детектора - 290°С Скорость газа-носителя - азота -50 мл/мин Объем, вводимый в испаритель - 1 мкл.

Линейность детектирования - 1-10 нг

Время удерживания - изомера № 1 (LS 850646) - 6 мин.45 сек.;

изомера № 2 (LS 850647) - 5 мин. 15 сек.

Рабочая шкала электрометра - 10‘^,2А.

Скоросгь протяжки ленты самописца - 200 мм/час.

Хромато1*раф газовый с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов ⁶³Ni “Цвет - 550” с пределом детектирования по Линдану не выше 4 10*¹⁴

Неподвижная фаза 3% ХЕ-60 на Хроматоне N-cynep (0,125-0,160)

Колонка стеклянная, спиральная, 1500 х 3 мм Температура: термостата колонки - 230°С

термостата испарителя - 280°С термостата детектора - 290°С Скорость газа-носителя - азота -30 мл/мин Объем, вводимый в испаритель - 1 мкл.

Линейность детектирования - 1-10 иг

Время удерживания - изомера № 1 (LS 850646) - 6 мин.45 сек.;

изомера № 2 (LS 850647) - 5 мин. 15 сек.

Рабочая шкала электрометра - 10"¹²А.

Скорость протяжки ленты самописца - 200 мм/час.

Каждую анализируемую пробу вводят в колонку хроматографа 3 раза. Образцы, дающие пики выше стандартного пика, разбавляют.

2.6.1.2. Вода, ягоды черной смородины, винограда Хроматограф "Кристалл 2000м" с детектором по захвату электронов с пределом детектирования по Линдану не выше 410'^ г/смЗ.

Неподвижная фаза - Crosslinkcd 5% PH ME Siloxanc

Колонка капиллярная кварцевая HP — 5, длина 15 м, внутренний диаметр 0,32 мм, толщина пленки 0,25 мкм.

Температура: термостата колонки - 260°С

термостата испарителя - 280°С термостата детектора - 340°С Газ 1: тип регулятора расхода газа РРГ 11, давление 82,58 кПа Газ 2 (гелий) - 50 мл/мин: режим нормальный, расход 0,5 мл/мин, сброс 1:100 Газ 3 (азот, поддув дстекгора) - 30 мл/мин.

Объем, вводимый в испаритель - 1 мкл.

Время удерживания - изомера N 1 (LS 850646) - 8 мин.28 сек.;

изомера N 2 (LS 850647) - 9 мин. 19 сек.

Каждую анализируемую пробу вводят в хроматограф 3 раза и вьпшеляют среднюю площадь пика. Образцы, дающие пики больше, чем стандартный раствор с концентрацией 0,1 мкг/мл, разбавляют.

2.6.2. Обработка результатов анализа

15$

Количественный расчет двух изомеров Бромуконазола в анализируемой пробе проводят по следующей формуле:

CxH₂xV₂

X =-,    где

Н, xV, хР

X - содержание изомера Бромуконазола в пробе, мг/кг

С - количество изомера Бромуконазола в стандартном растворе, введенном в хроматограф, мкг

Hi - высота пика стандартного раствора, введенного в хроматограф, мм

Н₂ - высота пика изомера Бромуконазола в анализируемой пробе, мм

V| - объем экстракта, введенного в хроматограф, мкл

V₂- объем экстракта анализируемой пробы, мкл

Р - масеа анализируемой пробы, г или мл

3.    Требования техники безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с орфическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.

4.    Разрабогчики:

Кивачицкая М.М., Скурьят А.Ф., Карчсня Г.К., БслНИИЗР, п.Прилуки, Минский р-он. Калинин В.А., профессор, канд. с-х. наук; Калинина Т.С., ст.н.сотр., канд. с-х. наук; Рыбакова О.И., .н.согр.

Московская сельскохозяйственная академия имени К.А. Тимирязева.

127550, Москва, Тимирязевский нр., 2, Кафедра химических средств защиты растений. Телефон: 976-43-26.

2S¥