ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯпо определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде
Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии, болезнями растений и сорняками
Г0СУЛАРСТНЕШШ1 КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ВРЕДИТЕЛЯМИ БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИИ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ „ КОЖАХ И ВЫШНЕЙ СРЕДЕ
Данные методшш апробированы в рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при 1Ъскомяссиы„болезнями растений и сорняками
Москва- 1987 г,
Настоящее методичеокпе указания предиаэвачеиы для оанзтар-но- ei?пдемяологическая станций п научко-сдтдедовагедьоаак учреа-девпй Минздрава ОССРс а такие ветеринарныя0огрохомпчеокп20иоа-тродьно-токсцкодоглчеокия дзбораяорпИ Гооогропрона СССР а лабораторий другая Министерств п ведомств0зашшавдякол определением оояаточпых подачеств пестицидов и биопрепаратов о продуктов питания,, порток а виеипеП 0редео
Срои деЙотвпя временник методичбошн указаний уотоиш~ дпваетбя до утверпдеаия гнгпеничеокик нормашвов.
Методичеокае указания есробпровонн п рекомгвдог>оцы в качестве официальных ГруппоП экспертов при Госкомпссаи «о ишп-чеокпы сргдотааа борьбы о вредителям „болезнями раотопиО в оор-аяяшп.
Методические указания согдасовосн с одобреиы Лобо разорены оовотои при Гдеовом еапитарко-спсдемиологочеоиои увровдепап Минздрава ССС?с
РШК1Ш0ННЛЯ КОЛЛЕГИЯ
Л.Г.Дяексацдрово0 JLBornpenKO„ ЛЖКедиппне ( эам.иредоедотвая), Мвй.Кдисэпго ( председатель) о Г. во Коротко во 0 В.ВоК^ао0ачуао ГвЛ«ХоКольцова рА.МсВьсгадвсое
25$
"УТВВРНД&Г Зоиоотатоль Гдаввого
ГосуДОрОТБОПВОГО 0$В13-
торпого врача СССР
А.И.ЗАЙЧЕНКО ° 27 » апреля 19® Го ft 2996-84
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
по определенно карбофурава d биодогочесдих орался /ирОБЬ0 иоча/ методой товкоодойноа хромотогрофш
I. Кроткоя хора гг ориставо прзпарото
1.2. /Н12-Диметил-2(3-ДЕгадробоп91бУр112-7/-М -аотаняарбог^э?
С12Н15^0з
Ы.м. 221,26
1*^. бурадои-, карбофураи.дайафуроа
1.5. Болос ириоталдичоовоо docjqotdo, тагшеротурз пдоилошш 150-152°С. Давление паро ара 33°С 0,0026Пэ С2ДОГ^аа ps.ov.), яра 50^ - 0,01ч6 По UJ.XO^hm pi?.о?.)о Роотворвеооть вуз 23^С i.s7I00r):b вода 0,07, оцоуоно-15, хлористом метилене «* 12, ото-модо - *4, оетродекмом зф*рэ - иенеа I. Карбофуран устойчив в наП?-рольноо и кислой средах, рездагеетса в аедочноа среде, о тоаво яра ушлеритуре свысо Х30°С.
Вмпускаотс* в веде 755^-иого с.п. □ гранул о оодарпаниом доО-отоуеаего вещества 2. 3. 5 и Щ.
для крио 6 - Х$ мг/яго дяа ообак 19 «г/гг. Деряэдышс товвичэоеть 75%-ъого о. п. для вролшюо ЗЫ)0 мг/иг.
Варбофурви - ооормшад. ыекатоццд.гастэмниЗ aucorraisu..
257
2. Методика определения карбофурана в биооредах:крови, моче.
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Определение основано не извлечении карбофурана из исследуемой пробы омеоьв диэтидового эфире и хлороформе в соотношении 1:2 (по объему) о последующим хроматографированием в тонком олое. Проявление ооновано не реакции авосочетения продуктов щелочного гидролизе о п-нитрофенилдиазониаи.
2.1.2. Метрологическая характеристика метода
Нижний предел обнаружения - 0,2 мкг/мл для крови, 0,2 мг/л дла мочи.
Среднее значение определения стандартных количеств кербофу-раие, % - 90 - 95.
Стандартное отклонение, % - 6,5
Доверительный интервал среднего при Р с 0,95 и и.» 6, ♦ -8,2 Диапазон определяемых концентраций на пластинках "Силуфол" 0,2-10 мкг
Чиоло параллельных определений п. вб Доверительная вероятность Р * 0,95
2.1.3. Избиретельнооть методе
Метод специфичен. Другие пестициды, применяемые не пооевах сахарной свеклы, картофеле, определению не мешают.
2.2. Реактивы и растворы Карбофурвм. х.ч. н-Гексвн. ч.. ТУ 6-09-3375-78 Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-79 Зфмр для наркоза. Зермвкосая СССР.
Кислоте соляная. ГОСТ 3118-77, 0,1н и 0,25н растворы
Спирт этиловый, 962-ниа, ТУ 6-09-I7-I0-77
Натрий сернокислый безводный, ч.д.а., ГОСТ 4166-76
Коли едкое, х.ч.. ОСТ 9285-78, 15!<-ный раотвор в спиртово-
водной рос?воре(Х5г КОН растворяя? в смосп 60шз ©таподо п 40ид веД» п-Ннтроенилнн, ч.д.е., ТУ 6-09-258-77, 0,02^-ний рэотвор яо 0,1н соляной кислоте (20 мг п-нмтроенпяына раотворяот в 100 мл 0,1н соляной кислоты). Раствор ярвият в лододильняке в течение нести меояцев.
Натрий азотистокмслый, я.ч., ТУ 38-10274-79, 0,8£-амП роот-вор. Роствор яраият в яолодмлътт® в таченве азота неоянов. Зтилецвтат, я.ч., ГОСТ 22300-76
ЛимоинокмолыЯ нотрмй, ч.» ГОСТ 22280-76, 5£-ныЙ раствор Хлороформ, х.ч., ТУ 6-09-4263-76 Бепзод, я ,ч., ГОСТ 5955-75
Проявляйся: А реагент. Непосредственно перед онаяпзем омопива^ 0,02£-ннП раотвор п-нмтроекилино в 0,1н соляной кислоте и 0,8^-ны реотвор азотистокислого натрия в ооотаовении 10:1.
Подвиииый растворитель: омеоь бояэола п эткдапетет в соотнесении 13:7.
Бете медицинская, обезниреннея, обработонкос дваадм втидо-вь.« эфиром е выоуиенная
Бумаге фтяътровальная
Пдостпшш мСялуфол-и\/ 254“ рао»эром 150 я 150 мм (*ЮСР) Приготовление отондвртного ростворе сарбофуреио. 10 кг япкп-чаокв чистого оорбофуране в 100 кв ефярз корщеятрецтаз 100мвг/ия. Хромат в нолодильнвко в течение квошдв.
2.3. Приборы и посуда
Деяптешьнво воронки емкоотьв 250 мд, ГОСТ 8613-75
Пробирки о притертммп пробками выкоотьв 20 мл, ГОСТ 8613-75
Воронка япмичеокие диаметром 5-10 ом, ГОСТ 86X3-75
Камере для яроизгографзроБЭнва, ГОСТ Х0565-75
Пульверазотор степлевивЕ, ГОСТ 10392-74
Бевя оодянод, ТУ 46-22-603-73
Дппорэт дла острогою гая, ТУ 642I-I08I-73
259
потери wik ротационный, HP-IM, ТУ 25-II-9I7-78
Груюевидиыо колбы для отгонки растворителя, ГОСТ 13394-72
Пос/да парная, ГОСТ 1770-74: колбы мерные емкостью 100 мл. пипетка емкостью I, 5. Ю мл, ммкропапеткм емкостью 0,1 мл, стаканы химические емкостью 100 мл.
2.4. Подготовка к опредаделошю
2.4.1. Отбор проб
Кровь. Цельную кровь помеадат в пробирку, предварительно смоченную 5^-ным раствором лимоннокислого натрия.
Моча. Для проведения анализа на карбофуран собирают суточную пробу мочи.
2.3. Проведение анализа
2.3.1. Экотракция
Кровь. В пробирку о I мл цитратноя кров^риливают дважды по 3 мл дистиллированной воды, тщательно перемешивают. Содержимое из пробирки переливают в делительную воронку емкостью 230 мд. При переливании крови из пробирки в делительную воронку, оставшую на стенках пробирки кровь, необходимо смыть водей. Экстрагируют пробу дважды смесью этилового эфира и хлороформа (I : 2) по в мл в течение 10 минут. Посла разделения жидкостей никнии
органический слой сливают о круглодонную колбу, емкоотью 50 мл со шлифом. Экстракт высувивают, пропуская жидкость через слой сер-яокмелоге натрия высотой слоя I см, помеленного в воронку. Колбу с объединенным экстрактом подсоединяют к холодильнику и под вакуумом при температуре 50°С отгоняют растворитель до объема 0,2 -0.3 ил.
Моча. 5 мл из суточного количество мочи берут для анализа. Дважды экстрагируют смесью диэтилового эфира и хлороформа (I : 2) по 8 мл в течение 10 минут. Экстракт объединяют, высушивают сернокислым натрием и отгоняют под вакуумом при температуре не вы-
□е 50°С до объема 0,2 - 0,3 мд.
2.5.2. Хроматографирование. Сконцентрированный экстракт величественно наносят на хроматографическую плвотинду. Колбу, где находился экстракт тщательно промывает небольшими порциями ацетона (до I мл) и наносят в центр пятна. Рядом с пробой нокооят стандартный раствор карбофурана от 0,2 до 10 икг. Пластинку с понесенными пробами и стандартным раствором хроматографнруст в каморе, куда предварительно иодивевт подешшшй растлитель. После роагок-кы, пластинку вынимаю? из камеры и высушиваю? не воздухе до полного испарения подвипного растлителя.
2.5.3. Проявление пластинок
Пластинку обрабатывают 15#-нын раствором едкого калл. Чорео 2-3 минуты иораоетмвевт проявлявшим реагентом.
Цпрбофурвн ио адастинпо прошзлпоА^^ятнс оиреневого цвета со значением ^ 0,7 ♦ 0,05.
2.6. Обработка результатов анализа.
Оценку содержания карбофурана проводят вутем визуального сравнения размера пятен пробы и пятен стандартов, а такке путем фотометра рова нм я хроматограммы карбофурана
Расчет количество кербофурано в пробе(мкг/мл,мр/л) проводят по формула;
v . А • Б _____
X - оодерБйнве карбофурана в пробе; мкг/мл или мг/я;
А - количество преперете, нвОденноо а пробе; мкг;
В - объем экстракте, ненесекныП но плестанпу; мл;
$ - общий объем пробы, ил.
Р - объем пробы0 аоптыО для опадшю, сад.
2.7. Требование бзвопасиоста
Собдодоть DC© необходимые требовенвя беэопоаноотз прз работо о шзкачеекпа двбороторзях, о текла правмдо устройства, тохвппг безопосмосга, производственное соиоторзп. протпвоопцдокэчоспого
261
ренама sa яичной гигиани при работе в лабораториях, отделениях оа-нитарно-опйдеялааогичеоких управлений оиотемн ЙВ СССР &2Ц55-81 от 20.10.81 г.
8. Настоящая методика разработано в лаборатории аналитической химии пеотицидов Киевского научно-иоследоватальокого института гигиены труда и профэоболаваний ст.ннявнерои-хмыиком Оськиной В.Н.