ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР
КОЖЕВЕННОЕ СЫРЬЕ
МЕТОД ГИСТОЛОГО-БАКТЕРИОСКОПИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ
ГОСТ 13106-67
Издание официальное
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО СТАНДАРТАМ Москва
УДК 675.031.001.4 : 006.354 Группа С79
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР
КОЖЕВЕННОЕ СЫРЬЕ
Метод гистолого-бактериоскопического контроля
Raw hide.
Histological and bacteriological control method ОКСТУ 9800
Утвержден Комитетом стандартов, мер и измерительных приборов при Совете Министров СССР 1 августа 1967 г. Срок введения установлен
с 01.01.68
Проверен в 1986 г. Постановлением Госстандарта от 27.06.86 № 1916
‘„рок действия продлен до 01.01.92
Несоблюдение стандарта преследуется по закону
Настоящий стандарт распространяется на кожевенное сырье и устанавливает метод гистолого-бактериоскопического контроля кожевенного сырья мокросоленого и сухого консервирования.
Сущность метода гистолого-бактерископического контроля состоит в исследовании специально приготовленных срезов сырья под микроскопом и применяется при разногласиях в оценке качества кожевенного сырья.
Применение метода предусматривает в стандартах и технических условиях, устанавливающих технические требования на кожевенное сырье.
(Измененная редакция, Изм. № 1).
1. ОТБОР ПРОБЫ
1.1. Предъявленную партию кожевенного сырья для установления бактериальности разбивают на три группы: нормальные,
подозрительные на пораженность и бактериальные шкуры, пораженные пороком, прелина.
Для установления степени бактериальности сырья с однородным поражением отбирают по две шкуры от каждой группы.
Пробу из отобранных шкур берут так, чтобы захватить участок пораженной ткани и прилегающий к нему нормальный участок.
(Измененная редакция, Изм. № 1)._
Издание официальное Перепечатка воспрещена
* Переиздание (август 1988 г ) с Изменением А2 1, утвержденным в июне 1986 г. (ИУС 10—86).
© Издательство стандартов, 1988
С. 2 ГОСТ 13106-67
2. АППАРАТУРА, РЕАКТИВЫ И МАТЕРИАЛЫ
2.1. Для проведения испытания должны применяться следующие аппаратура, материалы и реактивы:
микротом;
водяная баня или электрическая плитка; формалин 10 и 20%-ный по ГОСТ 1625-75; бура по ГОСТ 8429-77; соляная кислота по ГОСТ 3118-77; уксусная кислота по ГОСТ 61-75; полуторахлористое железо 30%-ное; ацетон по ГОСТ 2603-79; ксилол по ГОСТ 9949-76; карболксилол;
этиловый спирт по ГОСТ 5962-67; резорцин;
канадский бальзам;
фуксин;
эозин;
метиленовый голубой спиртовой раствор 1%-ный; вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72. 1
ГОСТ 13106—67 С. 3
рованной водой и добавляют четыре капли «синьки Мансона», т. е. созревшего раствора метиленового голубого с бурой (100 см1 дистиллированной воды нагревают до 80°С, вносят 2 г буры, затем прибавляют 1 г метиленового голубого; один раз раствор должен вскипеть). Из чашек срезы переносят в свежеприготовленную смесь красок на 5—10 мин.
После окраски срезы промывают дистиллированной водой, дифференцируют быстрым погружением в подкисленной воде (1—2 капли уксусной кислоты на 10 см1), ополаскивают и последовательно переносят в следующие смеси ацетоно-ксилола на 2—5 мин в каждую:
а) смесь — 95 частей ацетона и 5 частей ксилола;
б) смесь — 70 частей ацетона и 30 частей ксилола;
в) смесь — 30 частей ацетона и 70 частей ксилола.
Затем срезы переносят в чистый ксилол на 1—2 мин (срезы должны упасть на дно). Окрашенные и обезвоженные срезы заключают в канадский бальзам под покровное стекло.
3.3.2. Окраску срезов эластиновых волокон производят орсеи-ном (кристаллическим) или по Вайгерту.
Для приготовления раствора орсеина 1 г вещества растворяют в 100 см1 96%-ного этилового спирта и к раствору приливают 1 см1 химически чистой соляной кислоты.
Для окраски срезов по Вайгерту 2 г основного фуксина растворяют в 200 см1 дистиллированной воды, прибавляют 4 г резорцина и кипятят в фарфоровой чашечке, помешивая стеклянной палочкой несколько минут, затем прибавляют 25 см1 30%-ного раствора полуторахлористого железа и кипятят еще 5—10 мин, помешивая палочкой. Затем раствору дают остыть и отфильтровывают его через влажный бумажный фильтр. Фильтрат выливают, а фильтр с осадком помещают в ту же фарфоровую чашку, в которой производилось кипячение краски, и заливают 200 см1 96 %-ного этилового спирта. Чашку помещают па водяную баню или лучше на электрическую плитку и кипятят 5—10 мин, помешивая стеклянной палочкой, пока весь осадок не сойдет с фильтра. Фильтр вынимают, спирт выпаривают в течение 5—10 мин, чашку с раствором покрывают стеклянной пластинкой и охлаждают. После охлаждения раствор фильтруют в измерительный цилиндр, доливают до 200 см1 96%-ным спиртом и прибавляют 4 см1 25%-ного раствора химически чистой соляной кислоты.
Микросрезы опускают в фуксин Вайгерта на 15—20 мин (в случае орсеина 30 мин) проводят через специальную батарею спиртов возрастающей крепости (80%-ный, 96%-ный, абсолютный спирт), карболксилол и ксилол, после чего срезы переносят на предметное стекло и заключают в канадский бальзам под покровное стекло.
4. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЙ
4.1. Приготовленные срезы помещают на предметный столик микроскопа. Просмотр препарата вначале проводится при слабом увеличении (об.Х5Х&). Получив четкое изображение, препарат просматривают при большем увеличении (об.Х20Х40Х60), включая иммерсионную систему. При использовании иммерсионной системы просмотр проводят с искусственным освещением (осветитель ОИ-7 или ОИ-12).
4.2. К бактериальным относят шкуры, имеющие в сосочковом или сетчатом слоях разрушение большинства волосяных сумок, которому сопутствует базофилия или разволокненность коллагеновых волокон (при наличии количества микробов 30—40 и больше в поле зрения).
Одним из показателей сильного разрушения ткани является также фрагментация и полное растворение эластиновых волокон.
4.3. Шкуру с нарушенной структурой ткани, при отсутствии микробов, не считают бактериальной, а нарушение относят к прижизненным (чума свиней, чесоточный клещ, микрофиллярий и т. д.). В этом случае имеются признаки воспалительного процесса — значительное скопление клеточных элементов в участке воспаления, наполнение кровеносных сосудов кровью и расширение их. Если нарушения небактериального и неприжизненного характера, то они могут явиться результатом автолиза, сварен-ности или воздействия химических веществ.
Редактор Т И. Василенко Технический редактор Э. В Митяй Корректор Л В. Сницарчук
Сдано в наб. 03 10 88 Подп в печ 07 12 88 0,5 уел п л 0,5 уст кр отт 0,26 уч изд л
Тираж 5000 Цена 3 коп.
Ордена «Знак Почета» Издательство стандартов* 123840, Москва, ГСП, Новопресненский пер , д 3 Вильнюсская типография Издательства стандартов, ул Даряус и Гирено, 39 Зак 2723
Цена 3 коп. |
Величина |
Единица |
Наименование |
Обозначение |
международное |
русское |
ОСНОВНЫ |
Е ЕДИНИ1 |
1Ы СИ |
|
[Длина |
метр |
ш |
М |
Масса |
килограмм |
|
КГ |
Время |
секунда |
S |
С |
Сила электрического тока |
ампер |
А |
А |
Термодинамическая температура |
кельвин |
К |
К |
Количество вещества |
моль |
mol |
моль |
Сила света |
кандела |
cd |
КД |
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ЕЛ |
[ИНИЦЫ СИ |
Плоский угол |
радиан |
rad |
рад |
Телесный угол |
стерадиан |
sr |
ср |
|
ПРОИЗВОДНЫЕ ЕДИНИЦЫ СИ, ИМЕЮЩИЕ СПЕЦИАЛЬНЫЕ НАИМЕНОВАНИЯ |
Величина |
Единица |
Выражение через основные и до-полнительные единицы СИ |
Наименова-
ние |
Обозначение |
междуна
родное |
русское |
Частота |
герц |
Hz |
Гц |
|
Сила |
ньютон |
N |
Н |
M КГ - С-2 |
Давление |
паскаль |
Ра |
Па |
М”1 ■ КГС*2 |
Энергия |
джоуль |
J |
Дж |
М 2 • К Г С-2 |
Мощность |
ватт |
W |
Вт |
м2 КГ-С“3 |
Количество электричества |
кулон |
С |
Кл |
с А |
Электрическое напряжение |
вольт |
V |
В |
м2 кг С-3-А-1 |
Электрическая емкость |
фарад |
F |
Ф |
м_2кг~' - с4 А2 |
Электрическое сопротивление |
ом |
и |
Ом |
м2 кг с~3 • А”2 |
Электрическая проводимость |
сименс |
S |
См |
м-Якг-'-с3 А2 |
Поток магнитной индукции |
себер |
Wb |
Вб |
м2 • кг - с-2 А~‘ |
Магнитная индукция |
тесла |
т |
Тл |
кг с--2 А-1 |
Индуктивность |
генри |
н |
Гн |
м2 кг с~2 * А'2 |
Световой поток |
люмен |
1т |
лм |
КД • ср |
Освещенность |
люкс |
1х |
лк |
м-2 • кд • ср |
Активность радионуклида |
беккерель |
Bq |
Бк |
С-' |
Поглощенная доза ионизирую |
грэй |
Gy |
Гр |
м2 - с-2 |
щего излучения |
|
|
|
|
Эквивалентная доза излучения |
зиверт |
Sv |
Зв |
м2 • с"2 |
|
1
ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ
3.1. Фиксация материала
Из отобранной пробы вырезают не менее четырех кусочков размером 1X1 см* Кусочки освобождают от грязи и шерсти, фиксируют в растворе формалина, для чего подогревают в течение 5 мин в 10%-ном растворе формалина при 50°С, а затем переносят в 20%-ный раствор формалина и снова подогревают в течение 5 мин.
3.2. Приготовление срезов
Перед приготовлением микросрезов кусочки промывают в проточной воде в течение 30 мин и режут на замораживающем микротоме на срезы толщиной 25—30 мк. Срезы делают в вертикальном и тангенциальном направлении. Тангенциальные срезы производят из трех слоев: сосочкового, сетчатого и подкожно-жировой клетчатки.
Срезы каждого слоя помещают в отдельную чашечку с дистиллированной водой.
3.3. Окраска срезов
3.3.1. Для выявления состояния ткани и наличия микробов срезы окрашивают сначала метиленовым голубым с эозином.
Приготовляют свежую смесь равных частей 1%-ного спиртового раствора метиленового голубого и 1%-ного спиртового раствора эозина. Полученную смесь разбавляют в два раза дистилли-