ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
Часть 17-я
Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
Москва
ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ЬРЬЦЦ1ТШШ>Б0ДЕ31Ш1 РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИИ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ ДОГМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
Чаотъ 17-я
Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомнссии по химическим средствам борьбы с вредителями,боле8нями растений и сорняками
Москва -
с легко воспламеняющимися жидкостями и концентрированными кислотами.
ц. Нестоящая методика разработана сотрудниками Институте биоорганн-ческоЯ химии им.Шемякина АН СССР Егоровым И.В. я Граменицкой В.Н.
5. Методические уже занял апробированы во ВНИИХС8Р (Новикова К.Ф.) и в институте органической химии им.Зелинского (Громова Г.П.).
отр.
ФосФопооганические пестишиш
1. ременные методические указания по определению актеллика и базудина в чае с помощью тонкослойной газожидкостной хроматографии
22 мая 1985 г. £3888-85
2. Временные методические указания по определению актеллика в биологическом материале хроматографическими методами (дополнение к £2065-79)
21 ноября 1965 г. JW038-65
3. Методические указания по определению дифоса (абата) в продуктах растениеводства методом тонкослойной хроматографии (дополнение к £1350-75 от 22,09.75 г.)
22 мая 1985 г. £3866-65
4. Методические указания по определению примипида в растительном материале и в почве с помощью тонкослойной и газожидкостной хроматографии
21 ноября 1965 Г. £4028-85
5. Методические указания по определению оульфидофоса
в мясе, молоке и кормах методом тонкослойной хроматографа 3 I965 г> *3136-65
6. Методические указания по определению остаточных количеств хлорофоса в картофеле хроматоэнзимным методом (дополнение к £3165-85 от 03.01.85 г.)
Хлорорганнческие пестициды
362.
стр.
43
51
57
60
64
73
7. Временные методические указания по определению блазера в воде, почве, сое и зеленых листьях методом хроматографии в тонкой слое
27 ноября 1984 Г* №3156-84
8. Временные методические указания по определению
дилора в меде методом тонкослойной хроматографа 22 мая 1985 г. №3884-85
9. Временные методические указания по хроматографическому определению Щ в воде
22 мая 1985 г. №3876-85
10. Временные методические указания по определению
модауна в воде и почве газохидкостной хроматографией 21 ноября 1985 Г. №4030-85
11. Методические указания по определению тиолана и продуктов его превращения в воде хроматографическими методами а ноября 1Э65 г. №4035-85
12. Временные методические указания по определению триалдата методом газожидкостной хроматографии в воде, почве и зерне пшеницы
21 ноября 1985 г. №4032-85
13. Временные методические указания по определению мэтодами ПОС н ТСХ аналога ювенильного гормона п-хлорфенилового вФвпа гераниола в Берне пшеницы, почве,воде в зеленых листьях
12 апреля 1985 г. №3254-85
14. Временные методическиеиу указания по определению остаточных количеств фозилада в свекле методом газожидкостной хроматографии
22 мая 1965 г. £3675-85
15. ременные методические указания по определению регулятора роста растений ЭБ£-5 в воде, растительном материале методом ТСХ
21 ноября 1985 г. £4031-65
16. Методические указания по определению остаточных количеств хлорорганлческлх пестицидов и продуктов их разложения (./«-изомера ПИТ. V-изомера ГХИГ. гептахлора, альдрина. кельтана. ДДЭ. ЛЛД. ЛИТ)
в воде хроматографическими методами при совместном присутствия j 1986 Гв Ш20-86
Азотсодержащие пестициды
17. Временные методические указания по определению ацетала в воде, почве, картофеле, верне и зеленой массе кукурузы и сои методами ГаХ и ТСХ
21 ноября 1985 г. £4029-85
18. Методические указать по определению диФенамяда в в воде методом тонкослойной хроматографии
21 ноября 1985 г. £4033-85
19. Методические указания по определению карахола и его метаболита бензоклпродкислоты в почве методом газожидкостной хроматографии
31 июля 1984 г. £3072-84
20. Временные методические указания по определению лентаграна в растительной продукции, почве и воде ТСХ
364
отр.
136
142
148
156
162
167
171
12.04.85 г. №3253-85
21. Методические указания по определению монуро-на и дкуроиа в чае методом газожидкостной хроматография 3 1Шваря Is85 г> >Ш87-85
22. Временные методические укаэания по определению набу в воде, почве, капусте, сое и зеленых листьях методом хроматографа в тонком слое 22 мая 19й5 г> *3860-85
23. Временные методические указания по определению раукдапа в воде методом ТСХ (дополнение к №2434-81)
21 ноября 1985 Г. №4034-85
24. Временные методические указания по определению сонаяена в воде, почве и зеленой массе сои хроматографическими методами
3 января 1985 г. №3200-85
25. Временные методические укаэания по определению соналена в маслах подсолнечника, репса
и клещевины ISX 22 мая 1985 Г. №3894-85
26. Временные методические указания по определению стомпа методом ПК в табаке
12 апреля 1985 Г. №3252-85
27. Методические укаэания по определению тклта в растениях,почве, воде методом гозоаидкост-
ной хроматографии
стр.
1^9
1Я4
189
196
204
2X1
217
225
3 января 1985 г, $ 3190-86
28. Методические указания по определению триадимо-фона ( байлотона) методом ТСХ в воде
22 мая 1986 г. *• 3692-85
29. Методические указания по определению фонмедл»{Улмп| и
десмедифама в воде природных водоемов ТСХ
21 ноября IQdt> г. > 4036-83
Прочие пестициды
30. бременимо методические указания по определению остаточных количеств арилона по бемзолсульфонамяду в зернах хлопка,почве и воде тонкослойной хроматографией
21 ноября 196эг. '* 4037-85
31. Методические указания по определению гидразида малеиновой кислоты в табаке колориыеярическиы методом
12 апреля I9j5r. $3251-35
32. Методические указания по определению диметилсуль-Фоксида и его метаболита диметнлсульФона методом гаэожидкястной хроматографии в сахарной свекле, картофеле и зеленой массе
28 мая 1986 г. $ 4119-86
33. Временные методические указания по определению
остаточных количеств препарата 320-К в зерне и
воде тонкослойной хроматографией
22 мая 1985 г. $ 3390-85
34. Временные методические указания по определению ДРХ-4189 С ГЛИИ) в воде, почве, растительном материале методом газожидкостной хроматографии 22 мая 1985г. $ 3885-85
Настоящие методпческие указания предназначены для санитарно-эпидемиологических с таили Я и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома . СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве гфшиальнкх Группой экспертов при Госкомиссяи по химическим ерсдствам борьбы с вредителей,болезнями растений и сорняками Гпоагропрома СССР
Методические указания согласовали и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИОДяТО им.Марпиновского В.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
РЩКШОНШ КОЛЛЕГИЯ
Л.Г.Александрова, Д.Б.Гйрешх, А.А.Калинина (за;4.председателя), Ц.А.Клисенко (председзтеть), Г.И.Короткова, М.В.Письменноя, Г.А.Хохолькога, В.Е.Кривейчук.
"УТВЕВДАЮ"
Заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР
А.М.ЗАЙЧЕНКО
"22" мая 1985 г. №3890-85
ЕРШЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПРЕПАРАТА 320-К В ЗЕРНЕ И ВОДЕ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
I. Краткая характеристика препарата
Препарат 320-К - новый отечественный, гаметоцид для стерилизации пыльцы зерновых культур и подсолнечника. Действующее начало препарата - калиевая соль цис-2-метил-З-циклогексенкарбоновой
кислоты.
В чистом виде соль 320-К - твердое вещество, белого цвета, весьма гигроскопичное, хорошо растворимое в воде, практически нерастворимое в органических растворителях.
ЛДзд для белых беспородных мышей I.4I7 г/кг, введение препарата в желудок белых крыс на уровне 1000 ыг/кг массы тела не вызывало гибели животных.
ПДК в зерне и воде еще не установлены.
2. Методика определения препарата 320-К в зерне и воде тонкослойной хроматографией 2.1. Основные положения
2.1 Л. Принцип метода
Метод основан на превращении соли 320-К в кислоту 320 (цис-2-
метил-3-циклогексенкарбоновую) и экстракции последней ацетоном} обработкой
- 38 -
измельчённого зерна смесью 0.1н НС£ н ацетона. После упаривания аце-тона кислоту 320 извлекают из водного слоя бензолом. Конечное определение проводят хроматографией на пластинках ^ 25*».
2.1.2 Метрологическая характеристика метода.
Диапазон измеряемых концентраций 0.1 - 0.5 мг/кг в зерне 0.002 - 0.02 мг/кг в воде Предел обнаружения 2-10 мкг в хроматографируемой пробе.
Предел обнаружения 0.1 мг/кг в зерне в 0.002 мг/кг в воде.
Среднее значение определения стандартных количеств препарата Ъ при *ы15
85.C# в зерне 80.05» в воде Стандартное отклонение i при в»15
- 10.0# для зерна
- 8.0# для воды Относительное стандартное 5^
- 12.9 для зерна
- 10.3 для воды
Доверительный интервал среднего при р-0.95 и и-5
85.0 i 12.9# для зерна
80.0 - 10.3# для воды Размах варьирования R
70 -100# для зерна 70 - 99# для воды
2.1.3 Избирательность метода.
Метод селективен. Хлороргакические я фосфорорганичесхне пестициды
определению не мешают
-a 9 -
2.2 Реактивы и материалы.
Ацетон,ГОСТ 2603-71, осч БензолfrOCT 5955-75, осч
Диоксав(ГОСТ 10**55-63, хч
Хлороформ, Vf 6-09-4 263-76, хч
Спирт этиловый 96^-ныЯ, ТУ 6-О9-Г7Г0-77
Муравьиная кислота,ГОСТ 5848-73. хч
Уксусная кис лота, ГОСТ 18290-7 2, хч
Натрий углекислый кислый, ГОСТ 42*3-79, хч
Натрий фосфорнокислый дву заме ценный, ГОСТ П773-76, хч
Магний сернокислый,ГОСТ 4523-77, хч
Соляная кислота,ГОСТ 3118-77, хч
Цис-2-метил-З-ииклогексенкарбоновая кислота (320)
Индикаторная универсальная бумага,ТУ 6-09-11*1-71
Бром сре половый синий индикатор, ТУ 6-09-1058-76, чдэ
Метиловый красный индикатор, ТУ 6-09-4070-75, чае
Стандартные растворы кислоты 320 в бензоле с содержанием
ICO мкг (раствор А) и 10 мкг (раствор Б)
Спиртовой раствор бромсренолового синего и метилового красного (раствор В)
Водвыь 0.1 М раствор натрия Фосфорнокиса.двуэaweаи(.раствор Г) Пластинки ixyj 254 15x15 см
0.1 н раствор соляной кислоты 5*-ный раствор бикарбоната натрия
2.3 Приборы, аппаратура и посуда.
Гомогенизатор тканей типа РТ-Х
Магнитная мешалка типа ММ 2А (Чехословакия)
Ротационный вакуумный испаритель типа Uniрал-350 (Польша) Весы аналитические типа ВЛА - 2CCU
Микрошприц на 10 мкл типа МШ-10, ТУ 2-ЯЗЗ-106
- 22C -
Колбы мерные ГОСТ 1770-7* ёмкостью 100 мл
Колбы плоскодонные с притёртыии пробками ГОСТ 10394-72 на 100мл Колбы круглодонные с притёртыми пробками ГОСТ 10394-72 ёмкостью 100 мл к 20 мл
Воронки Бюхнера, ГОСТ 9Г47-ЯТ
Пипетки, ГОСТ 1770-74 на 1мл и 10мл
Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74 на 100мл, 50мл и Юмл
Камеры хроматографические , ГОСТ 10565-75
Вороги делительные, ГОСТ 10054-75 на 250 ил и 1500 мл
Пульверизатор стеклянный , ГОСТ I03QI-74
Пробирки калиброванные, ГОСТ 10394-72 на 5 мл
2.4 Подготовка к определению.
2.4.1 Приготовление стандартных растворов кислоты 320 в бензоле.
Для приготовления стандартного раствора А в мерной колбе ёмкостью 100 мл взвешивают 100 ыг кислоты 320 с точностью - 0,0002 г. Содержимое колбы растворяют в 30 мл бензола и затем доводят юбьём раствора до метки тем не растворителем. Для приготовления раствора Б из раствора А пипеткой отбирают 10 мл, переносят в мерную колбу ёмкостью 100 мл и добавлением бензола доводят объём раствора до метки.
Растворы А и Б при хранении при комнатной температуре стабильны в течение года*
2.4.2 Приготовление растворов для проявления хроматограмм.
Для приготовления раствора В в мерной колбе на Х00 мл взвешивают 20 мг бромфенолового синего и 60 мг метилового красного, растго-ряют красители в 50 мл спирта и прибавлениеиспирта доводят объём рш-тзора до метки.
Раствор красителей прз хранении в течение месяца в холодильнике стабилен*
Для Приготовления раствора Г в мерной колбе на 100 мл растворя-
- 221 -
от : rMa^HPO^-I? H^O в 50 мл воды и доводят объем раствора до 100 мл.
Раствор Г стабилен при хранении при комнатной температуре в течение года.
Раствор для проявления хроматограмм опрыскиванием готовят непосредственно перед употреблением смешввакием равных объёмов растворов В и Г.
2.5 Отбор проб.
Отбор проб для анализа проводят в соответствии с утвержденными Министерством здравоохранения СССР "Унифицированными правилами отборе проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов внешней среды для определения микроколичеств пестицидов (* 2051/79 от 2I.7III.79 г).
Из партии зерна, подлежащей анализу, отбирает II г (при необходимости зерно предварительно подсушивает) измельчает с помощью гомогенизатора тканей и отбирает навеску массой 1C г.
2.6 Проведение определения.
Навеску измельчённого зерна (10 г) помещают в коническую плоскодонную колбу ёмкостью ICO мл, добавляет 10 мл 0.1 н HCI и 20 мл ацетона. Кислоту 320 экстрагирует перемешиванием в течение часа ка магнитной мешалке. Экстракт отделяют от зерна фильтрованием на воронке Бюхнера с бумажным фильтром, собирая в круглодонную колбу ёмкостью ICO мл. Экстракцию ацетоном (порциями по 20 мл) повторяют ещё два раза. Из объединенного экстракта с помощью ротационного вакуумного испарителя упаривают ацетон (на поверхности водного остатка появляется жирные пятка). Водный остаток переносят в делительную воронку ёмкостью 250 мл, колбу дважды смывают подкисленной до рК-3 водой (порциями по 5 мд) и дважды бензолом (порциями по 5 мл). Сливы также переносят в делительную воронку. Далее водный слой отделяют и трижды
- 222 -
экстрагирует бензолом (объём бензола каждый раз равен объёму водного слоя). Объединённый бензольный экстракт энергично перемешивают Ю минут на магнитной мешалке с ЗЙ-ным раствором tfaHC03, прибавляя последний в количестве необходимом для того, чтобы pH смеси был 9-10. После обработки водный слой отделяют на делительной воронке, а бензольный слой промывают 3 раза водой (объём воды ра: ен 1Д обьёиа бензольного слоя). Зоду от промывки объединяют с водным слоем. Суммарный водный слой подкисляют C.I н HCI до pH 3 и трёхкратно экстрагируют бензолом (объём бензола каждый раз равен объёму водного слоя). Объединённый бензольный экстракт сушат над прокаленным MoSO^, далее суши-тель отфильтровывают, промывают сухим бензолом, который после промывки объединяют с бензольным экстрактом. Полученный бензольный раствор упаривают сначала с помощью ротационного вакуумного испарителя а затем струёй воздуха до объёма 0.5 мл и с помощью хапилляра количественно наносят на пластинку UV25*.
Для обнаружения препарата 320-К в воде пробу водь - I литр помещают в делительную воронку ёмкостью 1500 мл, воду подкисляют кони.
HCI до pH 3 и экстрагируют киолоту 320 бензолом трижды порциями по 100 мл. Бензольный экстракт сушат над прокалённым сульфатом магния, Фильтруют порциями через бумажный фильтр в круглодониую колбу ёмкостью 20 мл. Далее поступают , как описано выше для яерна Условия хроматографирования.
Сконцентрированный до 0.2-0.5 мл экстракт с помощью стеклянного капилляра количественно с помощью бензола переносят на пластинку
U\J 25* размером 15x15 см. Справа и слева на пластинку наносят серию стандартных растворов кислоты 320 с содержанием последней 1,2,3,* и 5 мкг. Серию стандартных растворов кислоты 320 получают следующим образом: в градуированные пробирки на 5 мл пипеткой последовательно помещают 0.1, 0.2, 0.3, 0.* и 0.5 мл стандартного раствора Б, что (соответствует I, 2, 3, * * 5 мкг кислоты 320. В последних трёх пробирках консентриругт раствор до 0.2-0.Э мл струёй воздуха.
- 223 -
Затем из каждой пробирки капилляром количественно с помощью бензола переносят стандарты на хроматографическую пластинку.
Хроматограмму развивают в системе бензол:диоксан:хлороформ:му-равьинвя кислота (5:1:2:0,02) или в системе бензол:диоксан:хлоро-форыгуксусная кислота (10: 2:5:0*02). Хроматограмму сушат на воздухе. а затем обрабатывают опрыскиванием из пульверизатора проявителем, приготовленным непосредственно перед обработкой смешением равных объемов растворов В и Г. Кислота 320 проявляется на хроматограмме в виде красного пятна на зеленом фоне, 8 в первой системе О»39;»0,I, а во второй 0,64*0,4.
2.7* Обработка результатов анализа.
Количественное определение препврвта Э20-К проводят методом соотношения со стандартами по площади и плотности пятна кислоты
320.
Содержание препарата 3 2Э-К в мг/кг или в мг/л вычисляют по формуле:
А ‘ V * 178,264 Р * Ve- 140,184
А - количество кислоты 320, найденное в пробе путем сравнения со стандартами, мкг Р - навеска зерна в г или объем анализируемой воды в мл 178,264 -мол. вес препарата 3 20-К 140,184 - мол. вес кислоты 320 V - конечный объем раствора, мл
Ve- объем аликвоты, взятой для хроматографирования, мл 3. Требования безопасности.
Необходимо соблюдать правила безопасности, принятые для работы