ГОСКОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ВРЕДИТЕЛЯМ. БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МИНСЕЛЬХОЗЕ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКРОКОДЕ ЧЕС ТЗ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ * КОРМАХ И ВНЕ&-НЕЙ СРЕДЕ

ЧАСТЬ ХЕ-я

Москва - 1983

ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР

МБТОДИЧВСКИВ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕС1В ПЕС1ИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

ЧАСТЬ ХШ

Данные методики апробированы и рекомендованы в качвотва официальных группой экспертов при Гоокомиосии ло химическим оредотвам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками

при МСХ СССР

Москва-1983

-259-

ССДБРЖАНИЕ

ХЛОРОРГАНлЧЕСКИБ ПЕСТИЦИДЫ

I.Временные методические указания указания по

определению ХОП (ДДТ,ДДЗ,ДДД, -ГХЦГ) в рыбе и рыбной продукции методом газожидкостной хроматографии.

2. Методические указали® по определению ХОП и сим-триазиновых пестицидов при их совместном присутствии в почве с помощью Г1Х*

3* Временные методические указания по определению остаточных количеств митрана в воде,сливах и

^яблоках методом ТСХ.

ШЙОРОРГАНИЧВСКИВ ПЕСТИЦИДУ

1.    Мотодические указания по определению афоса в воздухе рабочей зоны методами ГЬХ и ТСХ.

2,    Временные методические указания по определению боя-стара в ботве и клубняах картофеля,листьях и стеблях хлопчатника,капусте,почве к водэ ТСХ и ГЗЕХ.

3* Методические указания по определению глифосата и его метаболита- аминометилфосфоновой кислоты методом хроматографии в воде,почве,растительном материале,

4.    Мотодические указания по определению остаточных количеств дурсбана в воде,почве,лесной растительности

и биосредах методом ТСХ.

5.    Временные методические указания по определению каун-тора в растениях сахарной свеклы и почве методом ТСХ,

260-

6* Методические указания по определению метилмеркалто-фоса в воде,почве,винограде и зеленой массе хмеля ГЖХ и ТСХ.    67

7.    Временные методические указания по определению о<$у-

нака методами ГЖХ и ТСХ в почЕе,растениях,воде водоемов.    76

8.    Зременные методические указания по определению протио-фоса в растительном материале,почве и воде методами

ГКХ и ТСХ.    82

9.    Временные методические указания по определению се-лекрона в растительной продукции,почве и воде ТСХ

и ГЖХ.    91

10.    временны» методические указания по определению хлоро

фоса энзимно-хроматографическим методом в листьях болладоны и траве мяты перечной.    90

11.    Методические указания по определению в зерне и про

дуктах его переработки ФОП.применяемых для обеззараживания зерна и зернохранилищ,хроматографическими методами.    ₁₀₅

АЗОТСОДЕРЖАЩИЕ ПЕСТИЦИД]

1.    Методические указания по определению остаточных количеств пкрекса,диносеба,каратака,ДНОКа в воде,почве.

и растительном материале    хроматографическими методами. цу

2.    Временные методические указания по определению байгой*

методом ГЗКХ в молоке.    138

3.    Временные методические указания по определению барнона в воде,почве,растениях методом ГЖХ.

- 261 -

4.    Методические указания по определению кронетона

в воде,почве,корнеклубнеплодах и растительном материале ТСХ,    *54

5.    Временные методические указания по определению ридо-

кила методой хроматограмм в воде,почве,растительном материале,    *50

6.    Временные методические указания по определению ров-

роля методом ТСХ в поде,почве,томатах,картофеле,винограде, виноградном соке и ринэ.    I6S

7.    Временные методические указания ронилана в растительной продукции,почве и воде ТСХ и    ГЖХ.    175

8.    Временные методические указания по определению эвисех-

та в растительной продукции,почве и в воде ТСХ,    182

9.    Временные методические указания по определению эти-

римала в растительной продукции,почве и воде ТСХ,    188

ПРОЧИЕ ПЕСТИЦИДЫ

I* Времонние методические указания по определению гора-нилбутирата методом ГИХ и ТСХ в почве,воде,корнеплодах и листьях сахарной свеклы.    *^5

2.    Временные методические указания по определению бром-

пропилата(неорона) в яблоках и цитрусовых методом газовой хроматографии.    206

3.    Временные методические указания по определению иллокса-на в воде и печво методом ГП.

4.    Временные методические указания по хроматографическому определению иэатрина в печво    и    воде.    217

5.    Временные методические указания по определению омаЯта методами Г££Х и ТСХ в почве,в воде и растениях.

6.    Методические указания по определению хлората магния в почве,воде,растениях(подсолнечнике,луке) и в воздухе полярографическим и хроматографическим (ТСХ) методами.

7.    Временные методические указания по определению оста точных количеств некоторых аналогов ювенильного гор иона (алтосида.алтозара и п-<5ром*енилового эфира гераниола) в растениях картофеля и почве методами ТСХ и Ш.

Дополнения

Л- 71938 от 20Л«СЗгТирах 2000 экз. .заказ Н» шз Типография ВАСИ:ИЛ

Настоящие методические указания предназначены для

санитарно-эпидемиологических станций и научно-исслодова-телъских учреждений Минздрава СССР,а также ветеринарных_вагрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания,кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качество официальных группой экспертов при Госкомиссни по химическим средствам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками при ИЛ СССР.(Председатель группы экспертов - М.Д.Клисенко).

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования саяэпидслу^бы ИМПиТМ им.Мар-нпновского Е.Я. и лабораторным советом при Главней санитарно-эпидемиологическом управления Кик здрава СССР.

УТВЕРЖДАГ)

заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР

А.И,Зайченко

22 октября 1981 г. К 2467-81

ВРЕМЕННОЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ 1Ю ОПРЕДЕЛЕНИЮ СЕЛЕКРОНА В РАСТИТЕЛЬНОЙ ПРОДУШИ, ПОЧВЕ И ВОДЕ ТОНКОСЛОЙНОЙ И ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ.

I. Краткая характеристика препарата Селекрон - О-этил-О-^-хлор-Д-бромфенил)-^-пропмлфосфат (поликроя, куракрон).

Мол. масса 373,6

Химически чистое соединение - светло-желтая жидкость, о температурой кипения ЮО°С. Растворимость в воде 20 мг/л. Хорошо раотьо-ряется в метаноле, метиленхлорядс, бензоле, гексане, хлороформе.

Препарат среднетоксичен для теплокровных животных. ЛДзд при оральном введении составляет 300 мг/кг.

Выпускается в форме 50^-ного концентрата эмульсии и 3^-ных гранул.

2. МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ СЕЛЕКРОНА

2.1. Основные положения.

2.1Л. Принцип метода.

Метод основан на извлечении селекрона из растительных лроб, почвы и воды органическим растворителем (ацетон, метанол, н-гексан), очистке экстракта путем вымораживания вооков или* колоночной хроматографией. Количественное определение проводят хроматографическими в тонком слое или газожидкостным методами.

2.1.2. Метрологическая характеристика метода.

тех па Минимальное детектируемое количество 1-2 мкг 1-2 нг Нижний предел определения 0,02 мг/кг 0,001 мг/кг Р - размах варьирования, % в растениях 86,0-91,5 86,0-91,5 d почве •2,5-97,5 92,5-97,5 С - среднее значение определения, % з растениях 85,6 85,5 в почве 95.0 95,0 С - стандартное отклонение, % а растениях 05,5 85,5 в почве 95,0 95,0 С - стандартное отклонение, Z з растениях 2,5 2.5 в почве 2,5 2,5 .Цоверительный интервал среднего при Р=Э5 /> чпя растений 85,5-2, 5 для почв 95,5-2, 5

2.1.3. Избирательность метода

Метод специфичен, другие фосфорорганичеокие соединения в дачных условиях хроматографирования определению не мешают.

2.2. Реактины и раотчори.

Натрий хлористый х.ч., ГОСТ 4233-77

Ацетон х.ч., ШОТ 2303-79

Окись алюминия, ч 17 6-00-0916-81

ннГексаи, х.ч., 17 6-09-3375-78

Хлороформ, х.ч., ТУ 6-09-4263-81

Серебро азотнокислое, х.ч., ГОСТ 1277-81

Метанол, х.ч., ТУ 3-09-1709-77

Натрий сернокислый, безводный, х.ч., ГОСТ 4166-76

ОД'ЗОЛ ч.д.а., ГОСТ 595о-81

Аммиак, ТУ 6-09-1709-77

biJ¹22-30 на хроматоне VA iS-    (чС'СР)

Кислота о рта {ос }\э риал, ч._# Г ЮТ 35о2-о0 Хлористый метилен, ч.л.а,, i7 6-09-3716-74 А»*.М01*ий Х.ЮГПСТЫЙ, X . Ч. . Рх' j Г 3773-7 I

-93-

Уголь активированный

Кислота соляная, х.ч., ГОСТ 3118-77

Азот особой чистоты в баллонах с редуктором ШСТ 9293-59 ОУ-225, нанесенный в количестве 0# на газ-хромQ (0,15-0,18 мм) Водород з баллонах с редуктором ГОСТ 3022-70 Силикагель для хроматографии 4 100/160 (ЧССР)

Стандартный раствор селекрона с содержанием 10 и 100 мкг препарата в н-гексане или ацетоне

Метилсиликон ХЕ-С0, нанесенный з количестве Ь% на силанизированный лроматонУ- A U/(0,2-25 мм) (чССР)

проявляющий реактив 0,5 г азотнокислого серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 7 мл аммиака и доводят до 100 мл ацетоном.

Осаждающий раствор. 5 г хлористого аммония растворяют в 1GQ мл дистиллированной веды, смешивают с 1C мл 85%-Кой ортофосфорной кислоты и доводят водой до одного литра.

2.3. Посуда и приборы.

Аппарат для встряхивания А8У-1, ТУ-64-1-1081-73 Испаритель ротационный ИР-IM, ТУ 25-II-9I7-74 Воронка делительная ЗД-З-250, ШОТ 8613-75 Сушильный шкаф

Стаканы химические на 100 и 250 мл ГОСТ 10394-74 Хроматографическая камера Камера для опрыскивания Опрыскиватель отеклянный

Колбы конические нормального шлифа ГОСТ 10394-72 Колбы остродонные UHT-50-I4/32 ТО, ШСТ 10394-72 Колбы мерные 100 мл ШСТ 1770-74 Пластинки

Воронки химические ГОСТ 8613-75

Микропипетки 0,1 мл, 0,2 мл ШСТ 20292-74

Прибор для облучения УФ-светом с лампой ПРК-4, любого типа

Газовый хроматограф ’’цвет 106^й с термоионкым детектором

Микрошприц на 10 мкл MUJ-I0

Колонки хроматографические, отеклянные длиной 100 мм внутренним диаметром в мм

Колонка для адсорбционной хроаатогра&ии ЬО х i5 мм Секундомер

_Oi| -

Стекловата Бумажные фильтры

Холодильник "ЗИЛ" или другой марки

2.4.    подготовка к определению

2.4.1.    Подготовка колонки для адсорбционной хроматографии №1. Ь адсорбционную колонку помещают небольшой тампон из отекло-

ваты, затем 7 г силикагеля и сверху 7 г безводного сернокислого натрия. Колонку предварительно промывают 50 мл бензола. Л 2. можно использовать и другую колонку, которую заполняют следующим образом. Снизу помещают кусочек стеклоткани, затем слой безводного сернокислого натрия (2 см), далее окись алюминия второй степени активности (2 см), слой активироранного угля i.1,0 - 1,5 см) и с*.ова безводный сернокислый натрий. Через подготовленную колонку пропускают 30 мл н-гексана. Подготовка хроматографической колонки для FJtX.

Колонка заполняете), общепринятым хроматографии способом, предварительно в течение 48 часов продувается азотом при температуре 250°С

2.4.2.    Отбор и подготовка проб.

Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб для определения микроколичеств пестицидов в оельокохозяйствонной продукции, продуктах питания и объектах окружающей среды", утвержденными заместителем главного Государственного оанигарногсг грача СССР 21.08.1979 г. № 2051-79.

2.5.    проведение определения.

2.5.1. Экотракция и очистка Экстрактов.

Рода, 200 мл воды помещают в делительную воронку, прибавляв АО г хлористого натрия. Экотракцию селекрона провопят хлороформом (н-гексаном) трижды по три минуты, порциями по t>0 мл.

Экотрат объединяют, сушат над безводным сернокислым натрием и отгоняют досуха на ротш ионной испарителе при температуре 40°С. flesaa. растительный материал. Из 50 г воздушнооухой почвы, подкисленной 10 мл 0,1 ооляно.¹. кислоты или измельченного растительного материала vкапуста; яблоки, зерно, сахарная овеклД, томаты, виноград) оелекрон экстрагируют тремя порциями ацетона, метанола пи» гексана по 50 мл в течение 30 минут.

-55-

Объединенний гексановый экстракт сушат безводным сернокислым натрием и концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,2-и,з ши Остаток удаляют в токе воздуха.

метанольный или ацетоновый экстракты объединяют и концентрируют до 200 мл при температуре воды 35-40°С. К сконцентрированному раствору прибавляют 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия и 50 мл дистиллированной воды. Из водно-ацетоновой или водно-метанольной смеси препарат экстрагируют тремя порциями хлороформа или хлористого метилена по ЬО мл. Экстракты объединяют, сушат над оезводным сернокислым натрием и отгоняют досуха при температуре воды 35-40°С.

2.5.2. Очистка экстракта. Сухой остаток из зерна, капусты, корней сахарной овеклы растворяют в Ь мл охлажденного ацетона.

В колбу приливают о мл дистиллированной воды и 25-30 мл осаждающего раствора. Колбу на 40 минут помещают в холодильник, иооле охлаждения содержимое колбы отфильтровывают через плотный бумажный фильтр. Из водно-ацетонового раствора селекрон экстрагируют тремя порциями н-гексана по 4U мл, в течение 3-х минут. Объединенный гексановый экстракт сушат над безводным сернокислым натрием и концетрпруют на ротационном испарителе до и,2-и_#3 мл. Остаток удаляют в токе воздуха.

Пробы из почвы, томатов, вонограда, яблок очищают на хроматографической колонке #1. Остаток переносят с помощью 25 рал бензола (5x5 мл). Коэкстрактивные вещеотва вымывают из колонки 50 .мл бензола, препарат элюируют 100 мл смеси бензол:ацетон (9:1). Растворитель упаривают дооуха. Очистку из зеленой массы проводят на хроматографической колонке #2. Сухой остаток растворяют в 5 мл гексана и иереносят на колонку после чего иоиливают 20 мл н-гексана. Гексан отбрасывают. Затем через колонку пропускают 7Ь мл хлороформа, который концентрируют затем на ротационном «с-парителе до объема и,2-и,3 мл, остаток удаляют и токе воздуха.

2.5.4. .Условия определения тонкослойной хроматографией. Сухой остатик растворяют ъ 0,2-и,3 т н-гекоана, которой с помоацю микропипетки наносят на пластинку "Suujcl'* на расстоянии 2 см от нижнего края. Стенки колбы тщательно смывают несколькими каплями того же растворителя, который наносят " центр пятна.Параллельно наносят ряд стандартных растпорез пестицида. Пятна должны быть диаметром не более 0,5 см. Хроматеграфические пластинки ста-

-96-

вят в камеру для хроматографирования с ситемой подвижных растворителей гексан:ацетон, в соотношении 2:1, по объему. После подъема фронта подвижного растворителя на высоту 10 см, плаотинку вынимают из камеры, сушат на воздухе и помещают на 5 минут под источник /Ф-света. После этого ее опрыскивают проявляющим реактивом и снова облучают Уф-светом до четкого прояаления пятен пре-паоата, которые имеют темно-серую окраску. Величина/^/ селекрона в данных условиях хроматографирования равна 0,53-0,57.

Содержание препарата в исследуемой пробе вычисляют по форму

v _ А

л—р ,

X - содержание препарата в пробе мг/кг; мг/мл А - количество препарата, найденное в пробе, мкг Р - навеска исследуемой пробы, г; мл.

2.5.3. Условия определения газо-жидкостной хроматографии. Сухой остаток растверяит в 5-10 мл ацетона или н-гексана:и хроматографируют аликвоту (2-5 мкл).

Уело вия хромато графиро вания:

Хроматограф "Цвет-106^й или аналогичный прибор с термоионным детектором.

Температурный режим колонки 190°С, испарителя 225°С,

Скорость газа-носителя (азот^ - 45 мл/мин, воздуха 500 мл/мин, 30 мл/мин.

—'2

Рабочая шкала электрометра 50 я 10 ^J а.

Скорость диаграммой ленты 240 мм/час.

Стеклянная хроматографическая колонка размером 1000 х 3 мм о 0У-225, нанесенной в количестве 2г% на газ-хром & . В качестве альтернативной колонки - ХЕ-60, нанесенный в количестве Ъ% на с иланизированный хроматон.

Линейность делектирования на ОУ-225 1-100 нг, на ХЕ-60 -2-130 нг.

Время удержания селекрона на ОУ-225 7ⁱ47^; ХЕ-60 - 4¹56^;

Можно использовать также хрома^г ^графическую колонку с й~30 на хроматоне ^-Л |/-ДО!С J*.

Температура колонки 185°С; детектора - 200°С; испарителя -220°С.

Расход газов: азота - 25 мл/мин; водорода - 17-20 мл/мин; воздуха - 300 мл/мин. Шкала электрометра IX 10“¹⁰. Скорость движения лечты самописца - 2С0 мл/час.

-97-

Время удержания селекрона - 7*45П_#

2.6.    Обработка результатов анализа.

Содержание препарата в пробе определяют методом соотношения со стандартом по площади пика по формуле:

х - e№S*- iZ'

где X - количество препарата в пробе, мг/л или мг/кг;

С - концентрация стандартного раствора д.в. препарата, мкг/мл;

jj - площадь пика стандартного раствора препарата, введенного в хроматограф, мм?;

^ - площадь пика д.в. препарата в пробе, мм^; у - объем стандартного раствора, введенного в хроматограф, мкл;

12 - объем экстракта, введенного в хроматограф, мкл; l_s - общий объем экстракта после упаривания, мкл;

Р - навеска анализируемой растительной пробы и почвы, г или объем анализируемой воды, мл;

1000 - коэффициент для перехода от мкг к мг.

2.7,    Требования безопасности

При проведении исследований по вышеприведенной методике соблюдать правила предосторожности, необходимые при работе с ядовитыми, взрывоопасными и легковоспламеняющимися веществами.

3. Методические указания подготовлены:

1,    Бунят^и Юрий Андреевич, Петросян Маргарита Суреновна -Армянский филиал вНИИГИНТОКСа

2.    Красных Александр Алексеевич, Павлова Людмила Григорьевна, Логачев Владимир Федорович - Всероссийский НИИ защиты растений, Гамонь Воронежской области.