ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И ССРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ООРЕДШНИЮ МИКРСКОЛИЧЕСТВ ПВСТИШОВ В ПРОДУКТАХ ПИТайИЯ,КСРМАХ и ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Ъсть III

Москва -198?

124

"УТВЕРЖДАЮ

Заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР

А.И.Зайченко

» 30 »» марта_ 1981 _Гв

цо 2360-81

ВРЕМЕННЫЕ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ГЛЗОЖИдКОСТНО-ХРШАТОГРАФИ ЧЕС КОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ КЕРБА (11Р0ПИЗАЦИДА) В ВОДЕ, ПОЧВЕ И РАСТЕНИЯХ

X* Характеристика анализируемого пестицида

Керб (синонимы: пролизамид, пронамид) используется в качестве гербицида для прополки посевов сои, хлопчатника, люцерны. Эффективен против злаковых сорняков, пастушьей сумки, нрути, лютика.

Химическое название: 3,4-дихлор-/^-(1,1-дииетил-2-пропинил)-

бензамид^ Структурная формула:

~ А/— С — С = ОН

дгГ    с^нз

С^₂НцОС1₂. Молекулярная масса 242. Точка плавле

ния 154 - 156°С.

По внешнему виду представляет собой бесцветное кристаллическое вещество. Растворимость: в воде — 15 мг/л, в органических растворителях (аа исключением насыщенных алифатических углеводородов) растворяется хорошо.

ДДзд для крыс 5620 - 8350 мг/кг.

2. Методика определения керба в воде, почве и растениях

125

2.1.    Основные положения.

2.1.1.    Принцип метода.

Методика основана па газохроматографическом определении керба « детектором постоянной скорости рекомбинации на неподвижных Фазах ^Е-50 или ХК-60 после экстракции ия проб органическим растворителем и очистке экстракта на окиси алюминия.

2.1.2.    Метрологическая характеристика метода.

Диапазон определяемых концентраций 0,0005-0,ОС* мкг. Нижний предел о** редсления: вода - 0,02 мг/кг; почва - 0,03-0,05 .'г/кг; растения -- О,05«мг/кг.

Среднее зиачеиио определения „стандартных растворов песттгчло»’: 87% (пода), 70£ (почва;, 67% .(растения). Стандартное отклонение: 8, (года), 1C,2Г- (почва), 5,6% (растения).

Определению кероа не мешают: 2,4-Д, 2Ы-4Х, симазин, атразии, ир пазия, прометр «и, лииурон, арезин, бентазон, диуроп.

2.2.    Реактивы и растворы.

Ацетон (CHjCOCM^), ГОСТ 2603-71, чда.

Хлороформ (СНС1₃), чда. ТУ 6-09-4263-76.

Гексан (С₆Н₆), МР'17 6-С9-3375-78 хч. кислота солппан (HCI), ГОСТ 3118-77, хч.

Аммиак водный, 25:?-ный, ГОСТ 3760-64.    .

Алюминий окись (Д1₂^з). МГТУ 6-09-5296-68, Ч.

Чатрп.1 сернокислый, б^>водный    ГОСТ    4X66-76, хч.

Исподвнгпне *пдп!<? Фаз»: ХЕ-60 (5;;) и ,$£-30 (5£), нблосоннио не гон A/-At/(0,Jf-0,20 4iM), ЧССР.

Аэот гчзооОр'знчЛ, ГОСТ 9293-74, оп

•'т • !д**рг.г'М р^^ор г'рба » хлоре «'рио: 10 иг кристалл»!ч о/ рчта-oaoTKoneiaT в морвон колбе ч ICO >tл хллре opjo ( j >

126

I )•* маточного раствора переносит в мерную колбу и доводит до IOO мл хлороформа (рабочий раствор). В I мл рабочего раствора содержится I икг керба.

2.3.    Посуда и приборы.

Аппарат для встряхивании АВУ-I, ТУ 64-I-I08I-73.

Испаритель ротационный ИР-IU, ТУ 25-11-917-74.

Faaoiftjfl хроматограф "Цвет-106" с детектором постоянной скорости рокомбинации.

Баня пеоочпюн ТУ 46-775-77.

Водоструйный пресс КМ 1230, ТУ 64-1-661-72.

Воронки делительные ВД-3-500, ГОСТ 8613-75.

ВД-3-IOOO, ГОСТ 8613-75.

Колбы КН КШ-500-29/52 ТС, ГОСТ 10394-72.

Колбы остродонные 0КШ-50-14/23 1C/ГОСТ 10394-72.

Стеклянные бюк' ! СН 34/12, ГОСТ 7148/70.

Колбы иерные 1ЮСТ 1770-74, 100 мл.

Микрои рицы ИШ-10.

2.4,    Подготовка к определению.

2.4.1.    Подготовка хроматографических колонок

и их кондиционирование

Стеклянные колонки моют хромоюй смесью, ог.од&скинают водой, промывают ацетоном, а затем смесью ацетона, хлороформа и гексана в равных объемных отнопециях. колонки просушивают, затем заполняют сорбентом, мспольвун водоструйный насое .Заполненную колонку кондиционируют не подключая к детектору) 18 час пр* 250°С (Хд-60) м 2vO^u С (Ьй-Зи).

2.4.2,    Отбор проо производится р соответствии с унифицирован-п^: ии правилами 01боре проб сельскохозяйственной продукции_t лицевых продуктов и объектов окружавшей среды дли определения микроколи-чсс^,:г' /:ести ;идо1», утуерх/епч'^ и Гамесгителги Главного Государствен-

127

ного санитарного врача СССР 21«08.1979 88 N? 2051-79.

2.5. Проведение опрг"°ления. ♦

2.5.1.    Экстракция.

Вода. 100 мл воды подщелачивают 25# -ним амииакои (pH 9-10 но универсальному индикатору) и встряхивают в делительной воронке о хлороформом (3 раза по 20 мл) каждый раз в течение 2 мин. Хлороформные экстракты пропускают через бумажный фильтр с безв./Уа^О^ и упаривают досуха.

Почва. 10 г мелкоизмельченной и просеянной воздушио-оухой почвы заливают в колбе 100 мл ацотона и настаивают в течение ночи (J6-17 час.). Ацетон фильтруют через плотный бумажный фильтр с безводных»

Nа₂А)^, остаток встряхивают с ацетоном (2 раза по 30 мл) в течение 5 мин. Ацетоновые экстракты переносят на тот же фильтр, затем упаривают досуха.

Растения (зеленая tjacca люцерны, ботва и клубни картофеля.

корни свеклы). 10 г мелкоизмельченной растительной массы заливают в колбе Юи мл хлороформа и настаивают в течение ночи. Хлороформ пропускают через слой безв. tJ 82^0^, твердый остаток дважды встряхивают с 30 мл хлороформа каждый раз по 5 мин. Экстракты пепено- . .сят на тот же фильтр и упаривают досуха.

2.5.2.    Очистка экстарктов.

Сухие остатки после экстракции почвы и растений (а при сильной загрязненности и годи) растворяют в 2 мл хлоро'опма и переносят в бюкс, :• лоторий помещают 5 г окиси алюминия. Колбу дважды смывают хлороформом no 1 мл и переносят в тот же бюкс. Бюкс пометеют на песочную баню, нагретую до 50-60°С и выдергивают до полного улету чтения хлороформа (рзботеть под гягой). Затем стеклянной полочкой тщательно перемоапвапт сороент з бюкое. После этого сороент переносят * делительную горенку, в сужениил конец которой помечают тздгпои из

128

стеклоткани. Стеклоткань предварительно выдерживают 5-6 час. в

9

конц. серной’кислоте, отмывают водой и высушивают.

Для элюирования керба через колонку пропускают 400 мл смеои конц. HCI и воды (1:20 по объему), Скорость вытекания (100—120 капель в мин.) регулируют поворотом крана делительной воронки.

Солянокислый раствор подщелачивают 25%-ным раствором аммиака -до pH 9-10 и экстрагируют хлороформом (3 раза по 40 мл), встряхивая каждый раз в течение 2 мин. Объединенные х- роформные экстракты^ Фильтруют через бумажный фильтр с безв. /Уа^О^ и упаривают на ротационном испарителе досуха в колбочке с оттянутым дном. Колбочку дополнительно продувают теплым воздухом из фена.

2.5.3. Условия хроматографирования.

В коническую колбочку с оттянутым дном, в которой упаривали экстракт, вносят 2 мл ацетона, закрывают стеклянной пробкой и энергично встряхивают I мин. В хроматограф вводят 2-5 мкл ацетонового раотво. д.    _и

В колбочку с оттянутым дном вносят 0,5-1,0 мкг хлороформного раствора керба (0,5-1,0 мл рабочего i .створа). Хлороформ упаривают досуха, продувают теплым воздухом, добавляют 2 мл ацетона и встряхивают I мин. В испаритель вводят 2-5 мкл ацетонового раствора.

Хроматограф ^иЦвет-106", детектор постоянной скорости рекомбинации. Шкала ИМТ 10 х 10”*^ а, скорость протяжки диагрампой лен- ' ты I см/мин. Колонка стеклянная, спиральная, 2000x3,5 мм, яап*'411011-НЯИ S% XS-60 или .2Е-30. Температурный режим для колонки ХЕ-60:

, температура колонки 230°С, испарителя 250°С, детектора 260°0; для колонки ^Е-30: температура колонки 200°С, испарителя и детектора

П^сОя СС7У Ч/.

Грэ-носитель - азот особой чистоты (60 мл/мин), газ для под-vyc Д;'?( Ч?0рВ - пзэт (Осч) - 145 мл/мин.

129

Линейность детектора ределах 0,0005-0,006 мкг. Чувствительность 0,0005 мкг. Время удерживания керба равно 9, 25 мин. (Д-60) и 4,25 мин ( SВ-30).

2.6.    Обработка результатов анализа»

Количественное определение проводят путем сравнения площадей пиков проб и стандартных растворов по формуле: ^мдт,*^пр. */к /?ст,*Ух -U где X - содержание керба в пробе (иг/кг)

и_ст - содержание гербицида в стандартном растворе, мкг Лт, - площадь пика стандартного раствора, ми² Sпр. - нлощадб пика пробы, мм²

l/к - объем конечного экстракта, в котором растворен сухой остаток, мкл

Vх - объеи экстракта, введенного в хроматограф, мкл

М - навеска пробы, г.

2.7.    Требования техники безопасности.

При анализе необходимо выполнять требования безопасности, рекомендованные для работы с органическими растворителями, растворами ки<; лот, аммиака и сжатыми газами.

2.8.    Настоящие методические указания составлены по материалам Белорусского НИИ защиты растений (канд.Оиол.наук II. Ы. КИС ЛУШ КО).