Генеральный директор ООО «МедЭкоТест» /

Методика

измерении массовой доли подвижных соединении фосфора (в пересчете па Р₂Оц) в почвах спектрофотометрическим методом с использованием тест-системы МЭ Т-Фосфор подвижныи(Р?()<)-PC

Москва - 2015

Разработчик: ООО "МедЭкоТест"

Адрес: 119991, г. Москва, Ленинские Горы, владение 1, Научный Парк МГУ, стр. 75Г

Телефон: 8(495)646-10-56

Методика измерений аттестована Федеральным Государственным унитарным предприятием «Всероссийский научно-исследовательский институт метрологической службы» (ФГУП «ВНИИМС»), Свидетельство об аттестации № 01.00225/205-24-15, порядковый номер регистрации в Федеральном информационном фонде по обеспечению единства измерений ФР. 1.31.2015.20958

РЕЗУЛЬТАТЫ МЕТРОЛОГИЧЕСКОЙ АТТЕСТАЦИИ

Таблица 1 - Диапазоны измерений, значения показателей точности, повторяемости, вое производимое™ и правильности

Диапазон измерений массовой доли подвижных соединений фосфора (в пересчете на Р2О5) в почвах, млн'1 (мг/кг) Показатель точности (границы относительной погрешности) ±5, %, при Р=0,95, Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости), ог, % Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), OR, % Показатель правильности (границы относительной систематической погрешности при Р=0,95), ±5с% От 7 до 50 включ. (От 70 до 500 включ.)* 39 9 16 23 Св. 50 до 150 включ. (Св. 500 до 1500 включ.)* 29 6 11 20

Примечание - * Диапазон измерений массовой доли подвижных соединений фосфора (в пе-ресчете на РгО$) в гумусе и торфе.____

Таблица 2 - Диапазоны измерений, значения пределов повторяемости и воспроизводи мости при доверительной вероятности Р=0,95

Диапазон измерений массовой доли подвижных соединений фосфора (в пересчете на Р2О5) в почвах, млн'1 (мг/кг) Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами параллельных определений), г, %, п=2 Предел воспроизводимости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в разных лабораториях), R, %, т=2 От 7 до 50 включ. (От 70 до 500 включ.)* 25 45 Св. 50 до 150 включ. (Св. 500 до 1500 включ.)* 17 31

Примечание - ‘Диапазон измерений массовой доли подвижных соединений фосфора (в пересчете на Р2О5) в гумусе и торфе.

Начальник отдела, к.х.н.

Ст. научный сотрудник, к.х.н.

1 НАЗНАЧЕНИЕ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Настоящий документ устанавливает методику измерений массовой доли подвижных соединений фосфора в пересчете на Р2О5 в почвах, гумусе, торфе в диапазонах измерений, приведенных в таблице 1, спектрофотометрическим методом с использованием тест-системы МЭТ-Фосфор подвижный(Р205)-РС. Определение может быть проведено во внелабораторных условиях.

2 МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

При соблюдении всех регламентированных условий и проведении анализа в точном соответствии с данной методикой значение характеристики погрешности (и се составляющих) не превышает значений, приведенных в таблице 1.

Таблица 1 - Диапазоны измерений, значения показателей точности, повторяемости, воспроизводимости и правильности ___

Диапазон измерений массовой доли подвижных соединений фосфора (в пересчете на Р2О5) в почвах, млн'1 (мг/кг) Показатель точности (границы относительно й погрешности) ±6, %, при Р=0,95, Показатель повторяемости (относительное среднеквадрати ческое отклонение повторяемости) »Уг» % Показатель воспроизводимо сти (относительное срслнеквадратич еское отклонение воспроизводимо сти), Ук, % Показатель правильности (границы относительной систематической погрешности при Р=0,95). ±6С, % От 7 до 50 включ. (От 70 до 500 включ.)* 39 9 16 23 Св. 50 до 150 включ. (Св. 500 до 1500 ! 29 включ.)* 6 11 20 Примечание- *Диапазон измерений массовой доли подвижных соединений фосфора (в пересчете на Р2О5) в гумусе и торфе.

Таблица 2    -    Диапазоны измерений, значения пределов повторяемости и воспроизводимости при доверительной вероятности 0,95.

Диапазон измерений массовой доли подвижных соединений фосфора (в пересчете на Р2О5) в почвах, млн‘ (мг/кг) Предел повторяемости (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами параллельных определений), г, %, п=2 Предел воспроизводимое! и (относительное значение допускаемого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в разных лабораториях), R, %, т=2 От 7 до 50 включ. (От 70 до 500 включ.)* 25 45 Св. 50 до 150 включ. (Св. 500 до 1500 включ.)* 17 31

3    ТРЕБОВАНИЯ К СРЕДСТВАМ ИЗМЕРЕНИЙ, ВСПОМОГАТЕЛЬНЫМ УСТРОЙСТВАМ, МАТЕРИАЛАМ И РЕАКТИВАМ

3.1    Средства измерений

3.1.1    Фотоколориметр «ЭКОТЕСТ-2020-4» (2020-1, или 2020 PC, номер в Государственном реестре СИ 31761-06). Диапазон измерения пропускания, Т, %: 1 - 100. Диапазон измерения оптической плотности, D. ед.: 0 - 2. Длина оптического пути 10 мм. Абсолютная погрешность при измерении коэффициента пропускания ±2 %.

3.1.2    Пипетки 2-2-2-1,2-2-2-5,2-2-2-10 ГОСТ 29227-91

3.1.3    Колбы мерные 2-50-2,2-250-2 ГОС Т 1770-74.

3.1.4    ГСО состава раствора фосфат-ионов № 7791-2000 с массовой концентрацией 0,5 мг/см³ (ЭАА «Экоаналнтика») и относительной погрешностью, не превышающей ±1 % при Р=0,95.

3.1.5    Весы электронные аналитические по ГОСТ OIML R 76-1-2011 с наибольшим пределом взвешивания 220 г.

Примечание - Допускается использование иных средств измерения с техническими и метрологическими характеристиками, не хуже указанных.

3.2 Реактивы и материалы

3.2.1    Тест-система МОТ-Фосфор подвижный(Р205)-РС (изготовитель ООО «МсдЭкоТест», 119992, г. Москва. Ленинские торы, вл. 1, Научный Парк МГУ, стр. 75Г). включающая экстрагирующий раствор, фильтры синяя лента, герметичный флакон для экстракции соединений фосфора, раствор реагента 1. раствор реагента 2. сухой реагент 3. воронку для фильтрования, колориметрическую пробирку и инструкцию по применению.

3.2.2    Вода для лабораторного анализа по ГОСТ Р 52501-2005.

4    МЕТОД ИЗМЕРЕНИЙ

Метод основан на извлечении подвижных соединений фосфора из почвы, гумуса или торфа экстрагирующим раствором по методу Кирсанова и последующей хромогенной реакции фосфат-ионов с реагентами тест системы МЭТ-Фосфор подвижный(Р205)-РС с образованием окрашенного вещества, поглощающего излучение в видимой области электромагнитного спектра. Оптическая плотность растворов этого вещества при 660 или 850 нм пропорциональна массовой конценграции фосфат-ионов в экстракте. Количественное определение проводят с помощью градуировочной характеристики, установленной по растворам, приготовленным из ГСО состава раствора фосфат-ионов.

5    ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ, ОХРАНЫ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

При выполнении анализов необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами но ГОСТ 12.1.007.

6    УСЛОВИЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ИЗМЕРЕНИЙ

11ри подготовке к выполнению измерений и при выполнении измерений соблюдают следующие условия:

температура окружающею воздуха. °С    5 - 40

атмосферное давление, мм рг. ст.    630 - 800

относительная влажность воздуха при 25°С, % не более 90

4

7 ПОДГОТОВКА К ВЫПОЛНЕНИЮ ИЗМЕРЕНИЙ

Перед выполнением измерений должны быть проведены следующие работы: приготовление градуировочных растворов, содержащих фосфат-ионы; построение градуировочной характеристики.

7.1    Приготовление градуировочных расгворов

7.1.1    Приготовление исходного раствора (А) с массовой концентрацией фосфат-ионов

50 мгУдм³

В мерную колбу вместимостью 50 см³ приливают около 30 см³ экстрагирующего раствора и переносят количественно 5 см³ 5 см³ ГСО состава раствора фосфат-ионов с аттестованным значением (0,5 мг/см³) мерной пипеткой вместимостью 5 см³. Доводят до метки экстрагирующим раствором, перемешивают. Полученный раствор устойчив в течение 1 месяца.

7.1.2    Приготовление градуировочных растворов

Градуировочные растворы готовят из исходного раствора (А) с массовой концентрацией фосфат-ионов 50 мг/дм³, разбавляя его экстрагирующим раствором в мерных колбах вместимостью 50 см³ в соответствии с табл.З.

Таблица 3 - Растворы для установления градуировочной характерист ики

Номер раствора 1 2 3 4 5 6 7 Объем исходного раствора А, с.м3 (С=50,0 мг/дм3) 0,0 0,5 1,0 3,0 5,0 8,0 10,0 Массовая концентрация фосфат-ионов, (Си мг/дм3) 0,0 0,5 1,0 3,0 5,0 8,0 10,0 Массовая концентрация Р2О5, (Са мг/дм3) 0,0 0,373 0,746 2,238 3,73 5,97 7.46

7.2    Установление градуировочной характеристики

По 5,0 см³ каждою градуировочного раствора помещают в колориметрические пробирки мерной пипеткой вместимостью 5 см³, добавляют 5 капель раствора реагента I, 5 капель раствора реагента 2 и сухой реагент. Перемешивают до полного растворения и через 15 мин измеряют оптическую плотность градуировочных растворов при длине волны 660 или 850 нм в порядке возрастания массовой концентрации.

Градуировочный график строят методом наименьших квадратов в координатах: оптическая плотность - массовая концентрация фосфат-ионов (Си, мг/дм³) или Р2О5 (С'о, мг/дм³) в растворе. Градуировочную зависимость выражают уравнением вида:

Y-a + ЬС    (I)

где С= Си, Со.

Со 0,746 С„    (2)

7.3    Контроль стабильности градуировочной харак1ернсгики

Контроль стабильности градуировочной характеристики прово;ип не реже 1 раза в квартал и при смене партии реагентов. Средствами контроля являются не менее 3-х, вновь приготовленных образцов .тля градуировки (таблица 3), в начале, середине и конце диапазона измерений. Градуировочную характеристику считают стабильной при выполнении условия (3) для каждого градуировочного раствора

•100 <0,7 S (3)

где Хи - результат контрольного измерения массовой концентрации фосфат-ионов в градуировочном растворе, мг/дм³;

± д - границы относительной погрешности измерений, % (таблица 1).

Если условие стабильности фадуировочной характеристики не выполняется только для одного образца для градуировки, необходимо выполнить повторное измерение этою образца с целью исключения результата, содержащего фубую погрешность.

Если фадуировочная характеристика нестабильна, выясняют причины и повторяют контроль с использованием других образцов для фадуировки, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности фадуировочной характеристики прибор фадуируют заново.

8    ВЫПОЛНЕНИЕ ИЗМЕРЕНИЙ

8.1    Отбор проб

Отбор проб почвы проводят в соответствии с требованиями к отбору проб почв при общих и локальных зафязнсниях, изложенными в ГОСТ 17.4.3.01-83, ГОСГ 17.4.4.02-84, ГОСТ 28168-89.

8.2    Подготовка проб к анализу.

Образцы почв, поступающие на анализ, доводят до воздушно-сухого состояния, отделяют корни и посторонние включения, измельчают до размеров 1 - 2 мм и хранят в пакетах. Перед проведением анализа почву из пакета высыпают на ровную поверхность, хорошо перемешивают, распределяют слоем толщиной не более 1 см, отбирают пробу не менее чем из 5 мест. Экстракцию соединений фосфора из почвы проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 26207-91.

8.3    Анализ проб

Навеску почвы массой 1,000 г (гумуса или торфа массой 0,100 г) помешают в герметичный флакон для экстракции из комплекта тест-системы, приливают 20 см³ экстрагирующего раствора, закрывают флакон и энергично встряхивают в течение 20 мин. Затем экстракт фильтруют через фильтр “синяя лента” в колориметрическую пробирку, отбирая 5,0 см³ фильтрата*, добавляют 5 капель раствора реагента 1, 5 капель раствора реагента 2, сухой реагент 3 и перемешивают до полного растворения. Через 15 мин измеряют оптическую плотность раствора при А=660 нм или 850 нм.

При м с ч а н и е - *Если фильтрат мутный или окрашенный, то перед добавлением реагентов также измеряют его оптическую плотность при Х=660 нм или 850 им.

9    ОБРАБОТКА И ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ

9.1    По измеренным значениям оптической плотности раствора и 1радуировочной характеристике определяют массовую концентрацию фосфат-ионов (Си, мг/дм³) или Р2О5 (Со, мг/дм³) в фильтрате. В случае если фильтрат окрашен или мутный, то для расчетов использую! разницу значений оптической плотности после и до добавления реагентов

9.2    Массовую долю подвижных соединений фосфора в пересчете на Р2О5 в почве, торфе, гумусе (Хоп, млн' ) вычисляют по формуле

Хо„-К‘Со' (4)

где К - коэффициент пересчета,

^к=£ <⁵>

V - объем экстрагирующего раствора. V = 20 см³, т величина навески, г К = 20 дм³/кг - для почвы; К= 200 дм³/кг - для гумуса и торфа.

9.3    За результат измерений принимают результат единичного определения.

9.4    Результат анализа в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде

Х₀п ± 0,01 -6-Хоп, при Р = 0,95,    (6)

± д - границы относительной погрешности измерений, % (таблица 1).

9.5 В случае, если содержание подвижных соединений фосфора в почве (гумусе, торфе) ниже нижней (выше верхней) границы диапазона измерений, то производят следующие записи в журнале: для почвы - «массовая доля соединений подвижного фосфора в пересчете на P2OJ менее 7 млн'¹ (более 150 млн'¹); для гумуса или торфа - «массовая доля соединений подвижного фосфора в пересчете на Р2О5 менее 70 млн'¹ (более 1500 млн'¹).

10 ОЦЕНКА ПРИЕМЛЕМОСТИ РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ

10.1 При возникновении сомнений в корректности полученного результата измерений (Хон, млн'¹) должен быть получен второй результат в условиях повторяемости (Хоп2* млн'¹). Оба результата измерений считают приемлемыми, если выполняется условие

2-|*o_n,-.Y_Cn.4l00^

(*0.,i**0n:)

где г - значение предела повторяемости. % (таблица 2).

За результат измерений принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений.

Если условие (6) не выполняется, получают еще два результата измерений в полном соответствии с методикой измерений. За результат измерений принимают среднее арифметическое значение результатов четырех параллельных определений, если выполняется условие

(8)

где A'nux, Л'тш - максимальное и минимальное, значение из полученных четырех результатов параллельных определений, млн'¹ (мг/кг);

С7?о95 - значение критического диапазона для уровня доверительной вероятности Р = 0,95 и п результатов определений, рассчитанное по формуле

C/?o.95=/W'O_r 0,01 Х_ср    (9)

где f(n) - коэффициент критического диапазона, для п = 4,/(п) ■ 3,6; у_г - показатель повторяемости, % (таблица 1).

Если условие (8) нс выполняется, выясняют причины превышения критического диапазона, устраняют их и повторяют выполнение измерений, в соответствии с требованиями настоящей методики измерений.

10.2 При получении результатов измерений в двух лабораториях результаты измерений считают приемлемыми при выполнении условия

2 \X_lL-X_:L\100 _<

где: Xu.. X21 - результаты измерения массовой доли подвижных соединений фосфора в пересчете на Р2О5 в почве, торфе, гумусе в первой и второй лабораториях, соответственно, млн'¹;

R - значение предела воспроизводимости, % (таблица 2).

За результат измерений принимаю! среднее арифметическое значение этих результатов измерений.

Если условие (10) не выполняется, каждая лаборатория выполняет процедуры по 10.1 настоящей методики, проверку приемлемости результатов измерений проводят по 5.3 ГОСТ Р ИСО 5725-6.

11 КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА РЕЗУЛЬТАТОВ ИЗМЕРЕНИЙ ПРИ РЕАЛИЗАЦИИ МЕТОДИКИ Н ЛАБОРАТОРИИ

Контроль качества результатов измерений в лаборатории при реализации методики проводят, используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения промежуточной прецизионности рутинного анализа с изменяющимися факторами «время» и «оператор» по 6.2.3 ГОСТ Р ИСО 5725-6 и показателя правильности по

6.2.4 ГОСТ Р ИСО 5725-6. Проверку стабильности выполняют с применением контрольных карг Шухарта.

Периодичность контроля стабильности результатов измерений регламентируют в Руководстве по качеству лаборатории. Рекомендуется устанавливать контролируемый период так, чтобы количество результатов контрольных измерений было от 20 до 30.

При неудовлетворительных результатах контроля, например, при превышении предела действия или регулярном превышении предела предупреждения, выясняют причины этих отклонений, в том числе проводят смену реактивов, проверяют рабо ту оператора.

ПРИЛОЖЕНИЕ А (обязательное)

ОЦЕНКА ПОГРЕШНОСТИ ПРИ РЕАЛИЗАЦИИ ОТДЕЛЬНО ВЗЯТОЙ КОНТРОЛЬНОЙ ПРОЦЕДУРЫ

Контрольную процедуру для оценки погрешности результатов измерений выполняют методом добавок.

Для контроля используют рабочие пробы. Пробу делят на две части. Одну порцию почвы анализируют в точном соответствии с методикой и определяют массовую долю подвижных соединений фосфора в пересчете на Р2О5 в почве, торфе, гумусе (.Хо«, млн'¹), получая результат по формуле 4.

Ко второй порции пробы делают добавку, используя для этой цели ГСО состава раствора фосфат-ионов. Добавка (С, млн'¹) должна составлять 94 % найденного содержания подвижных соединений фосфора в пересчете на Р2О5 дтя диапазона измерений от 7 до 50 млн'¹ и не менее 56 % дтя диапазона измерений свыше 50 до 150 млн ' включительно, но не более 150 % (диапазоны измерений указаны дтя почвы). Далее почву анализируют в точном соответствии с методикой и определяют массовую долю подвижных соединений фосфора в пересчете на Р2О5 в почве с добавкой (Асм * млн'¹).

Результат контрольной процедуры (Кк, млн'¹) рассчитывают по формуле

Кк =    /Хо*'    - Хо* - С /,    (А.1)

Норматив оперативного контроля (Кд. млн’¹) рассчитывают (при проведении внешнего контроля) по формуле (А.2) при Р = 0,95

Кд = yJ(Ax') + (Ах)'    (А.2)

где:    Дх    и Дх' абсолютные значения характеристики погрешности результатов

измерений, соответствующие содержанию подвижных соединений фосфора в пересчете на Р2О5 в пробе почвы и пробе почвы с добавкой соответственно.

Дх = 0,01-6 Хип );

Дх' =0,01 -6 Х_Ия'

Если результат контрольной процедуры удовлетворяет условию

Кк < Кд,    (А.З)

погрешность результата измерений признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (А.З) контрольную процедуру повторяют. При повторном невыполнении условия (А.З) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля и устраняют их.

При смене партий реактивов проведение оперативного контроля процедуры выполнения измерений обязательно.

Периодичность оперативного контроля процедуры выполнения измерений, а также реализуемые процедуры контроля стабильности результатов измерений регламентируют во внутренних документах лаборатории.

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ УНИТАРНОЕ ПРЕДПРИЯТИЕ ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ _МЕТРОЛОГИЧЕСКОЙ    СЛУЖБЫ_

119361 Москва, Озврная ул., д. 46 E-mail: analyt-vm@vniims.ru    Тел.(495)437    9419

Факс: (495) 437 5666

СВИДЕТЕЛЬСТВО № 01.00225/205-24-15

ОБ АТТЕСТАЦИИ МЕТОДИКИ ИЗМЕРЕНИЙ

МЕТОДИКА НАМЕРЕНИЙ МАССОВОЙ ДОЛИ ПОДВИЖНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ФОСФОРА (В ПЕРЕСЧЕТЕ HA P₂O_s) В ПОЧВАХ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ТЕСТ-СИСТЕМЫ МЭТ-ФОСФОР ПОДВИЖНЫЙ (Р₂0₅)-РС

Методика измерений массовой доли подвижных соединений фосфора (в пересчете на Р2О5) в почвах спектрофотомстрическим методом с использованием тест-системы МЭТ-Фосфор подвижный (Р₂С>5)-РС (количество страниц - 9, 2015 г.), разработанная Обществом с ограниченной ответственностью «МедЭкоТест» (ООО «МедЭкоТест») (119991, г. Москва, Ленинские горы, влад.1, Научный Парк МГУ, стр.75Г), арестована в соответствии с ГОСТ Р 8.563-2009, ГОСТ Р ИСО 5725-2002.

Аттестация осуществлена по результатам теоретических и экспериментальных исследований методики измерений.

В результате аттестации установлено, что методика измерений соответствует предъявляемым к ней метрологическим требованиям и обладает основными метрологическими характеристиками, приведенными на обороте настоящего свидетельства.

При реализации методики в лаборатории обеспечивают контроль стабильности результатов анализа на основе контроля стабильности среднеквадратического отклонения промежуточной прецизионности и показателя правильности.